应用SP免疫组化染色法的体会

应用ＳＰ免疫组化染色法的体会任占平，郑绍光，陈尉麟（柳州市人民医院病理科广西５４５００１２地区人民医院病理科）链菌素亲生物素－过氧化酶连接法（ＳｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎＰｅｒｏｘｉｄａｓｅＣｏｎｊｕｇａｔｅｄＭｅｔｈｏｄ，ＳＰ法）是近年推广应用的一种新...     

网状纤维Gomori传统与改良染色法的比较及应用体会

在日常的病理诊断工作中,网状纤维染色法是最常用于辅助HE染色的特殊染色方法之一,在临床病理学诊断及鉴别诊断中具有广泛的应用.网状纤维的染色方法有很多种,如Perdrau染色法、Gorden-Sweets染色法、Wilder染色法、Foot染色法、Gomori染色法等方法,其中最常用的网状纤维染色法是Gomori染色法[...     

网状纤维Gomori银氨染色法的改良及应用体会

正在日常的病理诊断中,经常使用特殊染色方法来辅助HE染色。其中网状纤维染色最为常用,它可以显示病变组织网状支架的破坏情况,对于判断病变的破坏程度以及发展转归等具有指导作用,尤其在鉴别间叶组织和上皮组织来源的恶性肿瘤具有重要意义。网状纤维的染色方法较多,传统的Gomori银氨染色法,由于是嗜银染色,容易受各种因素干扰,经常导致染色效果不理想。对此我们进行了改良,用过碘酸代替高锰酸钾氧化和草酸漂白~([1]),同时省略了氯化金调色和硫代硫酸钠固定,其染色方法更为简便,易于掌握,染色结果对比更加鲜明。同时对染色原理及染色过程中容易出现的问题进行分析,并提出具体的解决办法,使Gomori银氨染色法的染色质量得到明显改善。     

免疫组化SP法与PicTureTM两步法的比较

目前，病理科常用的免疫组化方法有SP法、ABC法、PAP法、金银法、两步法等，我们采用SP法、PicTure^TM两步法同时检测肾组织HSP-70和c-Jun的表达，并对这两种方法进行了比较，以探讨其特异性和敏感性，及其在动物实验中的应用价值。     

bFGF与ki-67双重免疫组化染色法

双重免疫组化染色是同在一张切片上显示两种不同抗原的免疫组化法 ,能同时观察细胞及组织中两种不同抗原的分布情况 ,对于研究它们之间的关系具有重要意义。本实验成功地在一张切片上显示卵巢肿瘤组织中碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)与增殖细胞核抗原 (Ｋｉ 6 7) ,用以观察ｂＦＧＦ表达的细胞是否为增殖细胞 ,介绍如下。1　材料与方法1 1　标本　 45例卵巢肿瘤组织 ,常规 10 %福尔马林固定 ,石蜡包埋 ,5ｍｍ厚切片。1 2　试剂　ｂＦＧＦ多克隆抗体 (ＳａｎｔａＣｒｕｓ公司产品 ) ,Ｋｉ 6 7单克隆抗体 (ＭａｘｉｎＢｉｏ公司产品 ) ,双…     

EMA与p53免疫组化双重染色法

免疫组化双重染色法是在同一切片上显示两种不同抗原成分的免疫组化方法。为了在同一张切片上显示胃癌中EMA和D53，用以观察它们之间的相互关系，我们经实验成功地在同一张切片上完成了胃癌EMA和p53这两种抗原的双向表达，为研究同一细胞内它们之间的相互关系提供了可靠方法。     

应用PCR和免疫组化SP法对宫颈糜烂相关病毒感染的调查

目的 测定宫颈糜烂患者中人乳头瘤病毒（HPV）、单纯疱疹病毒（HSV-Ⅱ）和人巨细胞病毒（HCMV）,探讨其感染与宫颈糜烂发生的关系。方法 运用聚合酶链反应（PCR）和免疫组化SP法测定北京,江苏,山东,西安四个地区同一宫颈糜烂患者病毒感染情况,正常宫颈设为对照组。结果 1）PCR检测四个地区323例宫颈糜烂患者中HPV6.11、HPV16.18,HSV-Ⅱ及HCMV阳性率分别为17.6%、34.7%、26.6%、19.2%,50例对照组分别为2.0%、6.0%、4.0%、2.0%;免疫组化SP检测HPV,HSV-Ⅱ及HCMV阳性率分别为38.1%、18.6%、15.5%,50例对照组分别为6.0%、4.0%、2.0%。2）PCR检测中HPV6.11合并HSV-Ⅱ及HCMV的感染阳性率为4.9%、3.7%,HPV16.18合并HSV-Ⅱ及HCMV的感染阳性率为8.1%、6.8%;免疫组化SP检测HPV合并HSV-Ⅱ及HCMV的感染阳性率为6.2%、4.0%。各对照组中各病毒混合感染率为0%。结论 1）宫颈糜烂患者中HPV、HSV-Ⅱ及HCMV阳性率高于对照组（P〈0.05）。2）宫颈糜烂患者中的病毒感染以HPV为主（P〈0.01）。3）宫颈糜烂患者中可出现几种病毒混合阳性,临床中有必要加强宫颈糜烂患者HSV-Ⅱ及HCMV的检测,避免HSV-Ⅱ及HCMV与HPV协同致癌的作用。4）PCR和免疫组化SP二种检测方法测得的阳性率经统计学处理差异无显著意义（P〉0.05）,故临床可根据具体情况选用任一方法对病变组织作出病毒病因诊断。     

p53与CK双重免疫组化染色法

双重染色法是指在一张切片上做两种不同染色的方法，如免疫组化和免疫组化、免疫组化和原位杂交、免疫组化和特殊染色及DNA染色和免疫组化等。其中双重免疫组化染色是在同一张切片上显示两种不同的抗原，这种方法可以了解不同细胞、组织之间与相关抗原的相互关系，甚至可以了解同一种细胞内抗原之间的相互关系，以及有关抗原在细胞的合成、转运及代谢途径，将形态观察与功能分析结合起来。     

肝穿组织标本的HBsAg检测

乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)作为HBV感染的血清学标志之一,已被广泛的应用在血液、唾液、精液中的检查,由于血样采集方便,尤以血液中的检测应用最为广泛。肝组织切片或涂片多用地依红等组织化学染色或ELISA、IF等技术检查HBsAg。由于方法繁琐,应用受到限制,且阳性率低,为了观察乙型肝炎病人血清与肝组织HBV     

应用免疫组化SP和原位杂交技术检测非妊娠期及妊娠期尖锐湿疣组织中HPV DNA

目的：检测非妊娠期、妊娠期尖锐湿疣组织中的HPV DNA的表达，探讨原位杂交技术检测尖锐湿疣组织中HPV DNA的敏感性。方法：收集非妊娠期、妊娠期尖税湿疣标本各30例，采用免疫组化SP及原位杂交法检测HPV6／11型DNA。结果：原位杂交法检测优于免疫组化法。结论：（1）人乳头瘤病毒感染广泛存在于外阴尖锐湿疣；（2）原位杂交法检测HPV DNA特异性强，敏感性高，有助于尖锐湿疣的诊断与治疗。     

免疫组化在前列腺穿刺小标本活检中的应用价值

探究免疫组化在前列腺穿刺小标本活检中的应用价值。选取采集的40例男性前列腺穿刺活检小标本,分析免疫组化在前列腺穿刺小标本活检中的应用价值。P504S、P63前列腺癌的阳性检出率分别为86.67%、46.67%,P504S在各种疾病类型中的阳性表达具有显著差异;CK5/6、高分子量CK(34βE12)前列腺癌的阳性检出率分别为26.67%、20.0%,CK5/6在前列腺癌、上皮内瘤、增生与前列腺转移性癌之间的阳性表达具有显著差异,均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化前列腺穿刺小标本活检在前列腺疾病诊断中具有较好的应用价值,能够提高前列腺病变的检出率。     

免疫组化法检测非甲-非庚型肝炎患者肝组织中输血传播病毒

目的　检测非甲-非庚型肝炎患者肝组织输血传播病毒(TTV)感染状况,TTV感染与肝组织炎症程度 及与血液学指标的相关性。方法　应用免疫组织化学法检测52例非甲-非庚型肝炎患者肝组织中TTV,并经原位 杂交证实;对TTV阳性和阴性组的血液学生化指标,诸如血清丙氨酸转氨酶(ALT)、血清天冬氨酸转氨酶(AST)、血 清总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、γ 球蛋白(γ G)、凝血酶原活动度(PTA)及组织学活动指数(HAI)进行了比较。 结果　非甲-非庚型肝炎患者肝组织中TTV抗原(TTVAg)阳性15例,检出率为28.8%;阳性物质主要定位于肝细 胞浆内,呈棕黄色细小颗粒,偶见肝细胞核内有表达;TTV阳性表达细胞呈单个、散在或片簇状分布;TTVAg阳性的 组织切片经苏木素-伊红(HE)染色后,可观察到病毒性肝炎的一些病理变化,如肝细胞胞浆疏松化、气球样变、嗜酸 样变、灶性坏死、凋亡、小叶内及汇管区炎细胞浸润;从15例TTVAg阳性病例中任选10例进行TTV DNA原位杂交 检测,结果8例阳性,二者符合率80.0%;同时对5例免疫组化TTVAg阴性肝组织进行TTV DNA原位杂交检测,结 果5例均为阴性,二者符合率100%;TTVAg阳性组ALT、AST、TBIL、γ G均值均高于TTVAg阴性组,ALB、PTA 均值均低于TTVAg阴性组,但两组比较差异无统计学意义(P>0.0     

单底物显色法在免疫组化和原位杂交联合技术中的应用

<正>免疫组化是用各种特异性抗体检测细胞内各种抗原物质,原位杂交是用一段已知序列的核苷酸片段来检测细胞内是否存在欲检测物质的DNA或RNA。这两种技术分别在蛋白水平和分子水平达到检测目的,是病理科日常技术工作中相对较成熟而常用的方法。虽然将这两项实验操作结合起来应用的双标记技术能够极大提高工作效率~[1,2],但是需要不同的显色试剂,本文以鼻咽活检组织病理诊断为例,用一     

不同肝病肝组织中丁型肝炎免疫组化初步分析

不同肝病肝组织中丁型肝炎免疫组化初步分析娄底地区人民医院陈梅桂丁型肝炎病毒（ＨｅｐａｔｉｔｉｓＤｖｉｒｕｓ，ＨＤＶ）是一种缺损的单链环状ＲＮＡ病毒，在乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）辅助下引起人丁型肝炎，我国为ＨＢＶ高发区。兹将我院１组不同肝病肝组织中ＨＤＡｇ...     

Gomori氨银-微波法染色显示真菌在临床的应用

目的应用Gomori氨银-微波法染色显示真菌,缩短染色时间,提高染色质量。方法对已确诊的80例真菌感染者进行切片,分别采用改良的Gomori氨银-微波法染色显示真菌。结果应用Gomori氨银-微波法染色,80例标本均阳性,背景清晰,且原来的染色常规时间由90～140min缩短为6min。结论应用改良Gomori氨银-微波法染色显示真菌不仅可以大大加快染色速度,而且试剂使用方便,染色质量更加稳定可靠,是氨银液染真菌的一种改良的快速染色方法。     

甘草酸对CCl4肝纤维化大鼠肝组织smad7免疫组化表达的影响

目的：利用CCl4诱导肝纤维化动物实验模型，研究甘草酸治疗前后smad7的变化，揭示甘草酸抗肝纤维化的分子生物学机制。方法：将89只雄性大鼠随机分成3组：正常对照组24只；ccl4组33只；甘草酸治疗组32只。其中甘草酸治疗组腹腔注射o．2％的甘草酸氨水溶液，每周3次。应用免疫组织化学法检测不同时期（1、2、4．8周）3组大鼠Smad7的表达。结果；研究发现甘草酸在肝纤维化发生的各个阶段均能改善肝脏的病理变化，且其作用在肝纤雏化的后期更为明显。在甘草酸治疗组中Smad7的表达在第4周明显超过CCl4组。结论：甘草酸能改善CCl4诱导肝纤维化大鼠的病理变化。甘草酸抑制肝纤维化的作用机制之一是通过增强Smad7的表达实现的。     

用细针穿刺活体组织的电镜标本的一种简易制备法

细针穿刺活俭,就是从病变组织穿刺极少量的组织液和细胞进行细胞学检查。这一技术用于表浅淋巴结病变及乳腺肿块的活检已有多年。该方法也常用于前列腺、肺和腹腔脏器的检查。如病例选择恰当,则穿刺活检是一种快速、痛苦少、而且简便易行的诊断方法。以电镜观察来辅助光学显微镜检查,则可进一     

改良PASM染色法在肾穿刺活检组织中的应用

<正>肾穿刺活检组织诊断中,PASM(六胺银染色法)染色是重要的检查方法,能清晰地显示基底膜增厚"叮突"、"双轨"等病理变化,通过浸银染色,还可以观察肾小球毛细血管或球囊壁基底膜在炎性损伤(如断裂、增生、折叠等)中的形态学改变。为提高染色质量,我们对传统的方法进行了改良,在实际应用中取得了较好的效果,现将具体方法介绍如下。