微泡增强的超声空化对荷瘤兔乳腺癌作用效果的研究

目的 探讨微泡增强的超声空化对荷瘤兔乳腺癌的治疗效果.方法 建立兔VX2乳腺癌模型,肿瘤兔随机分成两组,超声微泡组及单纯超声组,各组于治疗前及治疗后分别行超声造影,分析造影前后肿瘤灌注情况.结果 超声微泡组治疗前后造影灰阶值改变明显,造影灰阶值从治疗前的(20.26±2.59)降至(3.71±1.61)(P<0.01);而单纯超声组肿瘤造影灰阶值无明显统计学差异(P>0.05).结论 微泡增强的超声空化对荷瘤兔乳腺癌有一定的治疗效果.     

微泡增强的超声空化增加兔睾丸组织伊文思蓝浓度的研究

目的：探讨微泡增强的超声空化增加睾丸组织的药物浓度的可行性。方法18只雄性8月龄性成熟新西兰兔随机分为空白对照组（C）、单纯微泡组（MB）、治疗超声组（TUS）、超声联合微泡辐照组（MEUS）4组,每组各9个。MB组给予静注微泡造影剂0.1 mL／kg ;TUS组给予超声辐照5 min;MEUS组给予静注微泡造影剂0.1 mL／kg的同时超声辐照5min;每组在治疗前5min均经耳缘静脉注射2％伊文思蓝（EB）2.5 mL／kg;治疗后1 h取各组睾丸组织制备组织匀浆测量 EB 浓度。结果 MEUS组兔睾丸组织内 EB 浓度高于其他各组（P＜0.05）,差异有统计学意义。结论微泡增强的超声空化可以明显提高睾丸组织内EB浓度。     

微泡超声空化在增强微波消融对肝脏肿瘤的热消融效应中的价值

目的 通过研究微泡超声空化增强微波消融对兔VX2肿瘤的热消融效应来探究其在肿瘤治疗中的价值.方法 24只肝脏移植瘤兔随机分为空白对照组、 单纯超声空化治疗组、 单纯微波消融治疗组、 超声空化联合微波消融治疗组4组.利用增强超声显示每组治疗前后肿瘤的大小、形状和轮廓并通过温度针来检测治疗区域的局部温度.结果 联合治疗组血...     

超声空化效应破坏兔胶原诱导性关节炎滑膜血管翳的实验研究

目的 探讨超声空化效应破坏兔胶原诱导关节炎滑膜血管翳的最适超声辐照及微泡条件.方法 建立双侧兔膝关节胶原诱导关节炎模型(AIA模型),将85只造模成功兔随机分入不同超声峰值负压、不同脉冲宽度、不同脉冲重复频率、不同超声辐照时间、不同微泡浓度、不同辐照次数组,经兔耳缘静脉推注微泡Sonovue,同时超声辐照右侧膝关节...     

超声介导微泡空化增加鼠肺内皮细胞基因转染及其作用机制

目的 初步探讨超声介导声学微泡"空化效应"对鼠肺微血管内皮细胞基因转染的影响及其作用机制.方法 6孔板培养鼠肺微血管内皮细胞,加20μg报告基因质粒EGFP及10%白蛋白微泡(全氟显),连续波超声照射进行微泡"空化",观察不同照射时间相同机械指数(MI=1.0)(A组:30 s;B组:60 s;C组:90 s;D组:120 s;E组:180 s)及不同MI相同照射时间(60 s)(B1组:MI 0.5;B2组:MI 0.75;B3组:MI 1.0;B4组:MI 1.5;B5组:MI 1.8)报告基因转染情况.以激光共聚焦观察细胞膜膜流动性、免疫荧光观察细胞微管蛋白及微丝蛋白.结果 反应细胞膜流动性的荧光恢复强度分别为A组0.173±0.013、B组0.250±0.037、C组0.364±0.022、D组0.381±0.019、E组0.395±0.009(与A组相比,P＜0.01);B1组0.171±0.017、B2组0.255±0.026、B3组0.378±0.007、B4组0.382±0.009、B5组0.397±0.008(与Bl组相比,P＜0.01).反应细胞微管蛋白变化的荧光强度分别为A组159.15±4.79、B组188.23±6.20、C组205.80±4.48、D组208.99±8.34、E组213.70±5.09(与A组相比,P＜0.01);B1组176.84±3.10、B2组187.57±14.52、B3组206.41±11.66、B4组220.12±13.39、B5组221.16±12.78(与B1组相比,P＜0.01);各组微丝蛋白结构完整,无断裂及紊乱,荧光强度差别无统计学差异.结论 超声介导微泡空化能增加基因转染率,对细胞骨架无明显损伤;当MI为1.0时,随照时延长细胞膜流动性及细胞骨架微管蛋白荧光强度增强;当照射时间为60 s,随MI增高细胞膜流动性及细胞骨架微管蛋白荧光增强,但两种条件下均存在一定阈值;微丝蛋白荧光强度不随超声照射模式而改变.     

微泡空化效应对大鼠骨骼肌微循环的影响

目的观察治疗剂量超声介导的微泡造影剂破坏产生的空化效应对大鼠骨骼肌微循环的影响。方法将30只SD大鼠随机均分为对照组、微泡组、超声组(超声能量为1.5W·cm-2)、高能量超声加微泡组(超声能量为1.5W·cm-2)及低能量超声加微泡组(超声能量为0.75W·cm-2),每组6只,按Gray法制备大鼠脊斜肌活体微循环观察标本,分别在处理前、处理后不同时间测量平均动脉压,用红细胞跟踪相关仪和电视测微仪测量微动静脉口径和血流流速,并用电镜观察大鼠脊斜肌组织结构的变化。结果微泡空化效应对大鼠平均动脉血压和微血管口径无显著变化(P>0.05);微血管血流速度减慢,血流量降低(P<0.05)。微循环血流速度和血流量下降和恢复的程度与超声能量有关,低能量组静脉血流速度及血流量15min左右可明显恢复,动脉血流速度及血流量1h左右可明显恢复,而高能量组2h微动静脉血流速度及血流量均未完全恢复。微泡空化效应能使毛细血管内皮细胞破裂,内皮间隙增宽,红细胞溢出于毛细血管外;2h后未发现内皮破口。结论微泡空化效应对局部微循环及微血管产生损伤跟超声的能量有关,能量越小产生损伤越轻,局部微循环修复的速度越快。     

TURP前后前列腺超声形态学变化及意义探讨

目的 观察前列腺增生患者在经尿道前列腺电切术(TURP)前后前列腺各径线和截面积的改变 ,研究手术前后前列腺的形态学变化 ,用以指导TURP的手术操作。方法 手术前后用经直肠纵向超声断层法测定前列腺各径线长度和截面积并进行比较 ,同时观察和记录前列腺形态的变化。结果 术后前列腺截面积缩小、前后径缩短、上下径延长(均P<0.01)。前列腺截面积缩小与前后径缩短呈显著正相关(P<0.01) ,上下径延长幅度与前后径缩短幅度之比为(1.0±0.3)∶(0.7±0.2)。结论 经直肠纵向超声断层法能直接观察前列腺在TURP前后形态学的变化 ,对开展TURP有一定的帮助。     

超声微泡对大鼠前列腺中药物浓度的影响

目的:利用超声白蛋白微泡造影剂经一定声压超声辐照后产生的"声孔效应"(Sonoporation),以及其靶向性来提高前列腺内的药物浓度.方法:选取已建立慢性前列腺炎模型大鼠30只,随机分为对照组,给药组和给药加微泡组.将EA-10原料药以溶媒溶解后注射给药.对照组给予生理盐水,给药组以15 mg/kg剂量给药,微泡组以15 mg/kg剂量给药,给药后微泡尾静脉注射并用超声基因转染仪前列腺局部间歇辐照2 min.照射后取前列腺组织,匀浆后测量组织中EA-10的浓度变化.结果:对照组前列腺组织中没有药物,给药组和给药加微泡组前列腺组织中药物浓度较对照组高(P<0.01),给药加微泡组前列腺组织中药物浓度较给药组高(P<0.05).结论:超声白蛋白微泡造影剂的"声孔效应"对于前列腺组织药物浓度的提高有明显的促进作用.     

高强度超声对犬前列腺组织损伤的实验研究

目的　探讨经尿道高强度超声 (transurethralhighintensityultrasound ,TUHIU)治疗良性前列腺增生症 (benignprostatichyperplasia ,BPH)的有效性和可行性。方法　对犬前列腺进行TUHIU辐照处理 ,辐照后不同时期处死动物以观察其急性、亚急性和慢性期大体及组织病理变化。同时观察辐照前后影像学变化。结果　TUHIU辐照前前列腺部尿道平均最大宽度为 0 66± 0 12 ( x±s)cm ,辐照 3周后前列腺部尿道平均最大宽度为 2 11± 1 0 7cm ,较辐照前显著增宽。辐照后可见靶区内尿道周围腺体发生凝固性坏死 ,3 0～ 60天后坏死组织脱落尿道呈囊腔状。光、电镜下均可见腺上皮及基质细胞发生均匀性凝固性坏死。辐照后经腹B超示前列腺内部出现液性暗区 ,前列腺呈囊性改变。辐照后即刻各犬均出现短暂性尿潴留、尿频、尿线变细 ,1月后恢复正常。结论　TUHIU可破坏前列腺组织 ,明显增加前列腺部尿道宽度。     

Impact of microbubble enhanced, pulsed, focused ultrasound on tumor circulation of subcutaneous VX2 cancer

Background Intravascular microbubble-enhanced acoustic cavitation is capable of disrupting the vascular walls of capillaries and small vessels. This study was designed to investigate the impact of microbubble-enhanced, pulsed and focused ultrasound （MEUS） on the blood perfusion of subcutaneous VX2 tumors in rabbits. Methods Subcutaneous VX2 cancers in twenty New Zealand rabbits were treated by combining high-pressure amplitude, pulsed and focused therapeutic ultrasound （TUS） and intravenous microbubble injections. The TUS transducer was operated with a peak negative pressure of 4.6 MPa and a duty cycle of 0.41%. Controls were subcutaneous VX2 cancers treated with TUS or microbubbles only. Contrast-enhanced ultrasound （CEUS） and intravenous Evans Blue （EB） perfusion were performed to assess the tumor circulation. The tumor microvascular disruption was assessed by histological examination. Results CEUS showed that the tumor circulation almost vanished after MEUS treatment. The average peak grayscale value （GSV） of tumor CEUS dropped significantly from 84.1±22.4 to 15.8±10.8 in the MEUS-treated tumors but no significant GSV changes were found in tumors in the two control groups. The mean tumor EB content of the MEUS-treated tumors was significantly lower than that of the controls. Histological examination found scattered tumor microvascular disruption with intercellular edema after MEUS treatment. Conclusion The tumor circulation of VX2 cancers can be arrested or significantly reduced by MEUS due to microvascular disruption. Chin M~.cl ,I 2014：127 （14）： 2605-2611     

两种不同开放血脑屏障方法的比较

目的 比较超声波诱导微泡破坏和甘露醇渗透性开放两种方法对大鼠血脑屏障通透性的影响.方法 大鼠分为2个实验组和1个对照组,1个实验组大鼠经股静脉注入微泡造影剂后,采用频率43 kHz、声强1.2 W/cm2的超声波经大鼠颅骨照射3 min;另1个实验组大鼠经颈内动脉注入20%甘露醇.干湿重法测定脑水含量,荧光显微镜观察伊文思蓝的渗出.结果 两种方法都可以可逆开放血脑屏障,利用超声波诱导微泡破坏法开放血脑屏障较甘露醇渗透性开放法局限且持久.结论 超声波诱导微泡造影剂破坏是一种无创和具靶向性开放血脑屏障的新方法.     

血小板受体特异性微泡造影剂靶向粘附血栓的实验研究

目的 构建能够靶向血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体的特异性脂质微泡,观察其对微血栓、体外人工血栓的粘附效应。方法 用RGDS(Arg-Gly-Asp-Ser)耦联的方法构建靶向微泡,观察其对血小板聚集形成的微血栓的粘附效应。另在体外制作人工血栓模型,在二维超声下观察微泡造影剂对声学信号的影响。结果 血小板聚集后加入经构建的靶向微泡,最后粘附在血小板微血栓周围;而加入普通微泡的对照孔则未见这种粘附效应。体外血栓模型中,未加微泡的血栓超声图像周围边界模糊,加入靶向微泡后血栓图像边界明显增强。结论 血小板受体特异性靶向微泡对血栓有明显的趋附作用,并且能够增强血栓的超声信噪比。对血栓的临床诊断和治疗有潜在的意义。     

超声介导自制白蛋白微泡和声诺维对体外报告基因转染效率的比较研究

目的:探讨超声介导微泡破裂法促进外源基因的安全转移的方法,为临床上肿瘤等疾病的基因治疗研究提供新的思路。方法:以绿色荧光蛋白基因为标记基因,以人大肠癌细胞株SW480为靶细胞,分别以自制白蛋白微泡和声诺维(SonoVue)微泡作为载体,通过超声介导微泡破裂法促进绿色荧光蛋白GFP基因在人大肠癌细胞株的定向转染,以激光共聚焦显微镜来定性和半定量观察GFP在靶细胞的表达情况,以椎虫蓝染色法检测超声作用于细胞的安全性。结果:当超声的强度为0.75W/cm2,作用时间为40s时,对细胞比较安全;自制白蛋白微泡和声诺维微泡的浓度为10%时,分别达到最佳的基因转染效率,两者无显著性差异,但后者的相对表达强度较高。结论:超声介导微泡破裂法促进外源基因的转移是一种比较安全而有效的基因转染方法。     

N-羧甲基壳聚糖微泡超声造影剂的制备与性能评价

目的制备N-羧甲基壳聚糖微泡超声造影剂,观察其基本特征及对动物肝脏超声显影效果。方法采用(油/水)/油复合乳液-溶剂蒸发法制备微泡超声造影剂,通过光学显微镜和扫描电镜观察微泡的大小、形态及粒径分布,通过股动脉注射0·5ml该超声造影剂到动物体内,观察动物肝脏超声显影效果。结果N-羧甲基壳聚糖微泡为空心球形结构,分散均匀,形状规则,粒径在2~3μm,壁厚为250~300nm。该造影剂对动物肝脏超声显影效果明显增强。结论N-羧甲基壳聚糖微泡可作为一种性能较好的超声造影剂。     

超声微泡造影剂对大鼠骨骼肌毛细血管通透性的影响

目的 研究治疗剂量超声破坏微泡造影剂对大鼠骨骼肌毛细血管通透性的影响.方法 以伊文思蓝(EB)为指示剂,18只清清级SD大鼠,随机均分为EB组(E)、EB 超声组(E U)和EB 超声 微泡组(E U M)共3组进行实验.给予相同参数条件的超声进行照射,经颈动脉输/不输入微泡造影剂,在体荧光显微镜下观察EB外溢情况并行视觉评分;使用标准曲线和分光光度法测量各组大鼠脊斜肌中EB的含量.结果 E U M组镜下可见微血管周嗣EB外溢,视觉评分等级为2级.显著高于E组(0级)及E U组(0-1级)(P<0.05).E组及E U组两者相比无显著性差异(P>0.05).E U M组脊斜肌中EB含量为(51.57±3.89)μg/g,比E组[(28.99±4.67)vg/g]及E U组[(30.99±4.11)μg/g]明显增加(P<0.05).E组及E U组两者相比无显著性差异(P>0.05).结论 超声介导微泡造影剂破坏可使脊斜肌组织毛细血管通透性增加.可能是超声微泡造影剂增强基因转染的主要机制之一.     

Ultrasound-triggered microbubble destruction in combination with cationic lipid microbubbles enhances gene delivery

This study aimed to examine the preparation of cationic lipid microbubble(CLM),and evaluate its physical and chemical properties and toxicity,measure the gene transfection efficiency by ultrasound triggered microbobble destruction(UTMD) in combination with CLM.The CLM was prepared by the method of the thin film hydration,and its morphology was observed under the electron microscopy at 1st,3rd,7th,10th,and 14th day after preparation,respectively.The size,Zeta potential and stability of CLM were tested.The acute toxicity of CLM was assessed.The green fluorescent protein gene(EGFP) transfection efficiency was evaluated.The experiment grouping was as follows:naked plasmid group(P group),ultrasonic irradiation plus naked plasmid group(P-US group),naked plasmid plus CLM group(P-CLM group),naked plasmid plus ultrasound and CLM group(UTMD group).The expression of EGFP was detected by fluorescent microscopy and flow cytometry.The results showed that CLMs were spherical in shape,with the similar size and good distribution degree under the light and electron microscopies.The size of CLMs was varied from 250.4±88.3 to 399.0±99.8 nm and the Zeta potential of CLMs from 18.80±4.97 to 20.1±3.1 mV.The EGFP expression was the strongest in the UTMD group,followed by the P-CLM group,P-US group and P group.Flow cytometry results were consistent with those of fluorescent microscopy.The transfection efficiency was substantially increased in the P-US group,P-CLM group and UTMD group as compared with that in the P group,almost 7 times,10 times and 30 times higher than that in the P group respectively.It is suggested that CLMs prepared by the method of thin film hydration are uniform in diameter,and proved non-toxic.UTMD combined with CLM can significantly increase the transfection efficiency of EGFP to targeted cells.     

多层聚电解质膜包覆的微泡超声造影剂的制备

目的制备多层聚电解质膜包覆的微泡超声造影剂,观察其对正常兔肝脏超声显影效果。方法采用声空化方法制备表面活性剂(Span60和Tween80)包裹全氟丙烷气体的超声造影剂微泡(ST68-PFC)。然后以微泡为模板粒子,用带相反电荷的聚赖氨酸(PLL)和海藻酸钠(Alg)为包膜材料,通过静电吸引层层自组装技术对微泡进行包覆和表面修饰,观察其对正常兔肝实质的造影效果。结果声空化法能够制备出粒径分布均匀的超声造影剂微泡,聚电解质有效地组装到ST68-PFC微泡表面。动物肝脏造影实验证明经过多层聚电解质膜包覆的微泡造影剂能够有效增强兔肝实质显像效果。结论经过层层自组装修饰的微泡造影剂在赋予更多功能的同时,并没有减弱其造影效果。通过选择含有氨基、羧基等基团的高分子材料作为微泡的最外层,可以方便地将特异性配体连接到微泡表面上,实现靶向目的。     

超声微泡介导肝细胞生长因子促进大鼠梗死心肌血管新生

目的探讨超声靶向破坏微泡介导肝细胞生长因子(HGF)促进大鼠梗死心肌血管新生的可行性。方法将40只Wistar大鼠制备成心肌梗死模型后随机分为4组:(1)HGF 超声 微泡组(HGF US/MB);(2)HGF 超声组(HGF US);(3)HGF 微泡组(HGF MB);(4)单纯手术组(SA)。于基因转染后14d处死各组大鼠,采用免疫组织化学法(IHC)检测缺血心肌周围CD34表达,并在显微镜下计数心肌内新生微血管密度(MVD)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测心肌组织内HGF蛋白表达情况,并对心肌内HGF含量与MVD进行相关性分析。结果IHC结果显示,CD34定位于血管内皮细胞胞膜和胞浆,显示为棕黄色或棕褐色颗粒,新生的微血管被染成棕黄色,显微镜下计数每高倍镜视野下的MVD,结果表明在HGF US/MB组心肌中MVD最高,为(266.9±39.8)个/高倍镜视野,与其他各组比较差异均有显著性(P<0.01)。ELISA结果显示HGF在HGF US/MB组心肌中表达最高,为(5.54±0.81)ng/g,且前壁表达高于后壁(P<0.05),与其他各组心肌HGF含量相比差异也均有显著性(P<0.01)。相关分析表明,心肌HGF含量与MVD呈明显正相关。结论超声靶向破坏微泡可介导HGF基因在缺血心肌内的高效转移并促进血管新生,为心肌梗死的基因治疗提供了一个新途径。