辅助性T细胞及其细胞因子在重症肌无力中的作用

目的探讨辅助性T细胞及其相关细胞因子在全身型MG患者急性期发病中的作用。方法采用流式细胞术检测33例全身型MG患者和34例健康对照组外周血中Tfh细胞亚群CXCR5~+CD4~+T、CD45RO~+CXCR5~+CD4~+T、CD45RA~+CXCR5~+CD4~+T、ICOS~+CXCR5~+CD4~+T和PD-1~+CXCR5~+CD4~+T细胞占CD4~+T细胞的比例。采用流式液相多重蛋白定量(cell based assay,CBA)技术检测MG组及对照组血清中IL-17A、IFN-γ、IL-4、IL-21的含量。应用ELISA技术检测MG组及对照组血清中IL-22的含量。根据QMGs(the quantitative myasthenia gravis score,QMGs)对纳入研究的MG患者进行评分,QMGs反映了MG患者的病情严重程度。结果 MG组外周血中的循环Tfh细胞(ICOS~+CXCR5~+CD4~+T和PD-1~+CXCR5~+CD4~+T)较对照组增高(P=0.016,P0.001),且PD-1~+CXCR5~+CD4~+T细胞与MG患者病情严重程度正相关(r=0.405,P=0.019)。MG组血清IL-21、IL-17A、IFN-γ的含量较对照组升高,有统计学意义(P=0.007,P=0.016,P=0.007);MG组血清IL-4的含量较对照组略有增多,IL-22含量较对照组略有减少,但均无统计学意义。MG组IL-4含量QMGs呈负相关,差异具有显著性(r=-0.393,P=0.024)。结论 MG急性期ICOS~+和PD-1~+的循环Tfh细胞可能促进MG发病;IL-21、IFN-γ、IL-17A同样可能促进MG发病;IL-4可能对MG有保护作用。     

滤泡辅助性T细胞在重症肌无力发病机制中的研究进展

重症肌无力是自身抗体介导的免疫性疾病,其发病机制与滤泡辅助性T细胞(Tfh)及其分泌的相关细胞因子密不可分。胸腺生发中心(GC)的发现对重症肌无力的研究意义重大,源于GC的Tfh细胞是辅助B细胞迁移、增殖、分化为浆细胞并产生高亲和力抗体的主要效应T细胞,在免疫调节过程中发挥核心作用。近年来,越来越多研究报道Tfh细胞参与重症肌无力发生的病理过程;同时,靶向或被动转移Tfh细胞的治疗策略及临床试验已成为相关研究热点。本综述围绕Tfh细胞的表型、分化与调节及其与重症肌无力发病机制研究的最新进展进行阐述。     

Th22细胞及相关因子在重症肌无力患者外周血中的表达

目的研究重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者外周血辅助性T细胞22(T helper 22cells,Th22)和白细胞介素-22(interleukin-22,IL-22)的表达以及两者间的相关性。方法收集25例MG患者和24例健康对照者,其中眼肌型重症肌无力(ocular myasthenia gravis,OMG)患者14例,全身型重症肌无力(general myasthenia gravis,GMG)患者11例。采用流式细胞仪检测MG患者和健康对照者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中Th22细胞的比例,采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血浆IL-22的表达。比较各组间Th22细胞比例和IL-22表达水平差异,以及Th22细胞比例和IL-22表达间的相关性。结果 MG患者PBMC中Th22细胞比例、血浆IL-22表达水平均显著低于健康对照组[(0.60±0.07)%比(0.92±0.09)%,P0.01;(18.65±1.38)pg/mL比(24.54±1.85)pg/mL,P0.05];OMG与GMG患者间Th22细胞比例、IL-22表达水平均无统计学差异(均P0.05);MG患者PBMC中Th22细胞比例与IL-22表达水平间呈中度正相关(r=0.59,P0.01)。结论 MG患者体内Th22细胞比例及血浆IL-22表达水平减低可能导致免疫功能紊乱进而影响MG的发病。     

天然调节性T细胞特性及以其为靶点治疗重症肌无力的研究进展

重症肌无力(MG)是一种细胞依赖性自身免疫性疾病,胸腺起源的CD4+T细胞的大量激活是MG发生的一个重要原因。天然调节性T细胞(nTreg)是一个具有独特免疫调节功能的CD4+调节性T细胞亚群,在自身免疫中发挥着重要作用。最近的研究发现nTreg与MG关系密切,针对nTreg来治疗MG是一种新的手段。本文就nTreg的特性及针对其治疗MG取得的成果做一综述。     

重症肌无力患者外周血Th17和调节性T细胞分析

目的 观察重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者Th17细胞和调节性T细胞的水平,并研究甲强龙冲击治疗对其影响.方法 应用四色流式细胞仪检测66例MG患者及35名健康对照者外周血Th17细胞和CD4+CD25highT细胞百分率;分析其中18例患者外周血Th17细胞与美国MG协会(MGFA)评分相关性;观察8例MG患者甲强龙冲击治疗2周后上述细胞的变化.结果 MG患者与健康对照者外周血Th17细胞百分率分别为2.61%±0.28%与0.94%±0.12%(Z=4.059,P=0.0001);甲强龙治疗前后8例MG患者Th17细胞百分率分别为4.72%±1.21%与1.81%±0.69%,差异有统计学意义(Z=1.995,P=0.0460);患者外周血Th17细胞水平与MGFA评分呈正相关(r=0.5359,P=0.0219).结论 MG患者外周血中Th17细胞升高,甲强龙冲击治疗可降低其水平,这可能是改善MG患者病情的有效机制.     

NKT细胞活化对实验性自身免疫性重症肌无力的影响

目的选取NKT细胞刺激物α-GalCer,经不同时间点腹腔注射小鼠,使其激活NKT细胞,观察对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)临床表现及其相关免疫指标的影响,从而为治疗EAMG提供新的途径。方法建立C57BL/6小鼠EAMG的动物模型,选取刺激物α-GalCer腹腔注射,通过CD1d递呈引起Vα14+NKT细胞的激活,观察小鼠体重、临床表现及相关免疫指标的变化,探讨不同时间点NKT细胞激活对EAMG产生的效应。结果在C57BL/6小鼠,Vehicle组EAMG的发生率为90%,平均发病天数37±6;α-GalCer预防组疾病的发生率为30%,平均发病天数为51±9。结论a-GalCer提前免疫能激活NKT保护C57BL/6小鼠发生EAMG,该结果为EAMG和其他自身免疫病的防治提供了依据。     

重症肌无力患者血液T细胞亚群和T细胞功能

本文对一组重症肌无力病人血液T细胞亚群及外周血单个核细胞产生白细胞介素2的能力进行了测定。结果发现病人的OKT_8~+细胞减少,OKT_4~+/OKT_8~+比值增高,产生白细胞介素2能力降低,这些变化在全身型病人较眼肌型明显。本文结合文献讨论细胞免疫的变化在本病发病机理中的作用,并提出IL—2对本病进行免疫调节治疗的前景。     

重症肌无力患者外周血单个核细胞IFN-γ及IL-4的研究

目的　探讨重症肌无力 ( MG)患者乙酰胆碱受体 ( ACh R)特异性 T细胞免疫应答及其与乙酰胆碱受体抗体 ( ACh RAb)间的关系。方法　应用体外细胞培养和 ELISA方法检测 MG患者外周血单个核细胞 ( PBMNC)经 ACh R刺激后产生 IFN-γ和 IL-4的水平。结果　 MG患者 IFN-γ和 IL-4的诱生水平均比对照组明显升高( P<0 .0 1 ) ;ACh RAb阳性组 MG患者 IFN-γ和 IL-4的诱生水平明显高于 ACh RAb阴性组 ( P<0 .0 1和 P<0 .0 5 )。结论　MG患者无论为 ACh RAb阳性或阴性 ,均存在 ACh R特异性 T细胞激活 ,IFN-γ和 IL-4均与自身抗体的产生有关。     

重症肌无力患者外周血调节性T细胞及B细胞激活因子受体的分析

目的 研究重症肌无力(MG)患者外周血多群调节性T细胞的水平及其B细胞表达B细胞激活因子受体(B cell-activating factor receptor,BAFF-R)的情况.方法 应用四色流式细胞仪检测61例MG患者与23名健康对照外周血调节性T细胞(CD4+ CD25 high Foxp3+、CD8+ CD28-、CD8+ CD122+)以及CD19+ BAFF-R+细胞的百分率.结果 MG组与健康对照组外周血CD4+ CD25 high Foxp3+ T细胞的百分率分别为32.12%±16.12%与65.15%±14.72%,MG组该群调节性T细胞的水平明显低于健康对照组(P＜0.01);两组CD8+ CD28-及CD8+ CD122+ T细胞的水平差异无统计学意义.此外,MG组外周血CD19+ BAFF-R+细胞的水平(10.57%±5.59%)显著高于健康对照组(5.38%±3.87%,P＜0.01).大剂量激素或大剂量激素加丙种球蛋白治疗后短期内可使MG组外周血CD4+ CD25 high Foxp3+调节性T细胞的百分率增加(P＜0.05).结论 MG患者Foxp3+的CD4+ CD25 high调节性T细胞的减少提示MG患者存在免疫和耐受的失衡,显示了T细胞的自身免疫性.在B细胞方面,MG患者外周血CD19+ B细胞上BAFF-R表达增高,提示其体内B细胞已处于易激活状态.     

重症肌无力与补体调节因子CD55和CD59

重症肌无力(MG)是一种由乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)介导并有补体参与的自身免疫性疾病。此文结合近年研究进展,围绕补体调节因子功能和补体之间的关系、骨骼肌-乙酰胆碱受体(AChR)、骨骼肌神经-肌肉接头处“特异分子”可能是靶向锚定重组CD55和CD59的理想位点、补体调节因子和MG等方面着重阐述了补体调节因子对补体系统的调节作用。     

眼肌型及全身型重症肌无力患者外周血T淋巴细胞Fas的表达

目的 探讨Fas介导的细胞凋亡与眼肌型(ocular myasthenia gravis,OMG)及全身型重症肌无力(generalized myasthenia gravis,GMG)发病的关系.方法 采用流式细胞技术检测4例OMG、13例GMG患者及13例健康对照组外周血淋巴细胞中CD4、CD8及Fas的表达.结果 OMG、GMG组与对照组外周血T淋巴细胞表面CD4、CD8分子表达的差异无统计学意义(P>0.05).GMG组与对照组外周血T淋巴细胞中Fas+细胞比例的差异有统计学意义(41.72%±8.73%、31.22%±13.00%,P:0.017).GMG组与对照组Fas表达增高者比例的差异有统计学意义(61.5%、15,4%,P=0.041).Fas表达增高的GMG患者病情较重.病程较长.胸腺瘤发生率较高.OMG与GMG组外周血T淋巴细胞中Fa8+、CD4+Fas+、CD8+Fas+细胞比例差异无统计学意义(P>0.05).结论 GMG患者外周血T淋巴细胞中Fas的表达升高,OMG与GMG患者外周血T淋巴细胞中Fas的表达无显著差异,二者可能同属一种系统性疾病.     

重症肌无力患者血清可溶性Fas水平变化及其临床意义

目的探讨重症肌无力(MG)患者血清可溶性Fas(sFas)水平变化及其临床意义。方法采用流式细胞术及酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定45例MG患者(MG组)及40例对照者(对照组)外周血T细胞亚群分布和血清sFas水平,并对其中24例MG患者应用糖皮质激素(GC)治疗前后的血清sFas水平进行比较。结果(1)MG组外周血中CD8 T细胞百分率为(21.50±2.21)%,明显低于对照组[(27.75±3.00)%](P<0.01);CD4 /CD8 比值(1.92±0.26)明显高于对照组(1.48±0.16)(P<0.01);血清sFas水平[(3542.06±706.23)pg/m l]显著高于对照组[(2568.18±562.48)pg/m l](P<0.01)。(2)MG组全身型血清sFas水平为(3914.23±804.81)pg/m l,极明显高于眼肌型[(2797.72±592.83)pg/m l](P<0.001);病情中、重度患者明显高于病情轻度者(均P<0.005);预后良好者[(3254.69±661.73)pg/m l]显著低于预后不良者[(4178.38±841.65)pg/m l](P<0.001)。(3)24例MG患者经GC治疗后sFas水平[(2864.59±617.43)pg/m l]较治疗前[(3539.67±705.92)pg/m l]极显著降低(P<0.001)。结论MG患者血清凋亡抑制因素sFas水平增高,并与MG类型、病情及预后相关;GC治疗可以改善MG患者的免疫功能。     

重症肌无力患者血清连接素抗体与临床的关系

目的 探讨重症肌无力（MG）患者血清连接素抗体（Titin—Ab）水平与病情及胸腺异常的关系,以及其对诊断和预后判断的价值。方法 应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测MG患者（MG组）52例、非MG（其他神经系统疾病）患者（NMG组）18例、健康对照者（NC组）50名血清中Titin—Ab水平,并对其中10例进行胸腺手术的MG患者随访。结果 MG组Titin—Ab阳性率为36．5％,NMG组和NC组均为阴性,MG组显著高于NC组和NMG组（均P〈0．01）;以MG伴胸腺瘤（MGT）组阳性率最高（83．3％）,MG伴胸腺萎缩（MGA）次之（37．5％）,胸腺正常的MG组为23．0％,MG伴胸腺增生组为阴性;Titin．Ab诊断MGT特异性高于胸腺CT（P〈0．05）。Titin—Ab阳性MG患者抗体水平与肌无力程度呈显著正相关（r=0．562,P〈0．01）;对10例不同胸腺病理类型的MG患者手术前后Titin—Ab测定显示差异具有显著性（P〈0．05）。结论 Titin—Ab阳性多见于MGT和MGA者,诊断MGT的特异性高于CT;Titin—Ab对MG的诊断、病情及预后判断均有帮助。     

青少年起病的重症肌无力患者临床特点分析

目的分析青少年起病的重症肌无力(MG)患者的临床特点。方法回顾性分析2006-2013年作者医院神经内科住院的351例起病年龄≤18岁MG患者的临床资料,包括人口统计学(性别、年龄),临床特点(临床分型、起病症状、疾病转归、胸腺情况)和合并疾病(自身免疫性疾病)。结果青少年起病的MG患者发病年龄小于5岁者占45.9%,女性多见占53.6%。根据美国重症肌无力协会(myasthenia gravis foundation of America,MGFA)分型,Ⅰ型占80.3%,Ⅱa型占8.5%,Ⅱb型占9.1%,Ⅲa型占0.3%,Ⅲb型占1.4%,Ⅳb型占0.3%。由眼肌型MG(OMG)转化为全身型MG(GMG)患者39例(13.8%),主要诱发转化的因素为不规律用药或停药。诱发病情复发或加重的因素中以受凉多见,占63.6%。合并胸腺异常患者有60例,其中28例行胸腺切除术,术后病理分型:胸腺增生20例,胸腺瘤4例。合并有其他自身免疫性疾病共20例,其中甲状腺功能亢进占4.6%,甲状腺功能减低占0.6%,甲状腺囊肿占0.6%。共有6例患者发生过危象,其中5例发生肌无力危象者为由OMG转化为GMG患者。结论青少年MG患者有自己独特的临床特点:5岁之前发病更多见;诱发病情复发或加重的因素中以受凉多见;合并胸腺增生者多于合并胸腺瘤者;最常见的甲状腺功能异常为甲状腺功能亢进。     

白细胞介素-6与重症肌无力患者临床特点的关系

目的　探讨白细胞介素 6(IL 6)与重症肌无力(MG)患者临床特点的关系。方法　采用双抗体 夹心ELISA法检测36例MG患者及20名健康对照者的血清IL 6和乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)水平,并分 析其与MG临床特点的关系。结果　MG患者血清IL 6水平高于健康对照者(P<0.01);AchRAb阳性患者 高于阴性患者(P<0.05);全身型患者高于眼肌型患者(P<0.05);病情重者高于病情轻者(P<0.05);急性 期高于非急性期(P<0.01);预后差者高于预后好者(P<0.05);伴胸腺异常者高于胸腺正常者(P<0.05)。 结论　IL 6与MG临床特点相关,在MG发病机制中起重要作用。血清IL 6水平可间接反映体内免疫功能紊 乱的程度,对判断MG患者病情、预后和指导治疗有重要的参考价值。     

MG患者外周血Th17细胞与AChR抗体产生的关系研究

目的探讨重症肌无力(MG)患者外周血中Th17细胞及相关细胞因子白细胞介素17(IL-17)在MG发病中的作用。方法收集40例MG患者和10名健康人(对照组)外周血标本,采用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMCs)中Th17细胞比例,反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)检测PBMCs中维甲酸受体相关孤儿受体γt(RORγt)mRNA水平,ELISA检测血清中IL-17水平,放射免疫沉淀法检测血清中抗乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)滴度;分离PBMCs中CD4~+T细胞和CD19~+B细胞与金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)进行共培养,培养系统中加入人IL-17和(或)IL-21中和抗体,放射免疫测定法检测培养液中AChR-Ab滴度。采用MG评分(quantitative MG scoring system,QMGs)对MG的严重程度进行评估,并对MG患者的Th17细胞比例、RORγt mRNA和IL-17水平与病情QMGs的相关性,以及MG患者抗AChR-Ab滴度与PBMCs中Th17细胞比例的相关性进行分析。结果 MG患者PBMCs中Th17细胞比例[1.11%(0.90%,1.34%)]高于健康对照组Th17细胞比例[0.26%(0.08%,0.36%)](z=5.494,P0.001),且与疾病严重程度呈正相关(r=0.4394,P=0.0046);血清中IL-17水平和PBMCs中RORγt mRNA相对表达[分别71.46(53.91,104.76)pg/mL、2.63(1.94,3.12)]均较健康对照组[分别18.82(12.73,29.80)pg/mL、1.13(0.98,1.28)]显著增高(均P0.001);MG患者血清中抗AChR-Ab滴度[2.34(1.19,3.60)nmol/L]较健康对照组[-0.08(-0.24,-0.03)nmol/L]显著增高(z=4.662,P0.001),且与Th17细胞比例呈正相关(r=0.7066,P=0.0001)。MG患者外周血T、B细胞与SEB共培养后抗AChR-Ab水平高于未加入SEB时及健康对照(均P0.01);加入抗人IL-21或IL-17中和抗体后,两者AChR-Ab滴度与未加入抗体时AChR-Ab滴度比较均降低(均P0.05),且均仍高于MG患者未加入SEB时及健康对照(P0.01);在培养上清中同时加入抗人IL-21和IL-17中和抗体时AChR-Ab滴度明显低于加入单种抗体时,而与未加入SEB时及健康对照差异无统计学意义(均P0.05)。结论 MG患者外周血中Th17细胞可能通过IL-17促进AChR-Ab产生,参与疾病的病理过程。     

重症肌无力患者血脂异常与糖皮质激素敏感的相关性分析

目的探讨无自身免疫性疾病的重症肌无力(MG)患者血脂异常与糖皮质激素治疗的反应性及其临床意义。方法回顾性分析使用糖皮质激素治疗的63例MG患者的临床资料,根据糖皮质激素治疗后患者临床症状改善状况,将患者分为激素治疗敏感组与不敏感组,并比较两组间的临床及生化特征。根据是否伴有血脂升高分为血脂正常组与血脂异常组,并比较两组间糖皮质激素治疗的反应性。结果激素敏感组与不敏感组之间患者性别、年龄、起病方式、累及肌群、WBC、C反应蛋白、血沉、血糖指数、甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白A1、载脂蛋白B、脂蛋白A比较无统计学差异(均P0.05),两组间胸腺异常、血脂异常、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇比较有统计学差异(均P0.05);血脂正常组与血脂异常组之间糖皮质激素治疗敏感性比较有统计学差异(χ~2=9.307,P0.01);血脂异常与糖皮质激素治疗不敏感发生率呈正相关(r=0.384,P0.01)。结论 MG不伴其他自身免疫性疾病患者血脂升高可能降低糖皮质激素治疗疗效,二者之间的关系有助于MG患者的临床治疗评估及预后判断。     

Studying the relationship between clinical features and mental health among late-onset myasthenia gravis patients

BACKGROUNDMental disorders are common comorbidities among individuals with neurological diseases, and the prevalence of depressive and anxiety-related symptoms in newly referred patients at neurology outpatient clinics is high. There have been few studies on the mental health of patients with late-onset myasthenia gravis (MG).AIMTo examine the relationship between clinical features and the mental health symptoms within late-onset MG patients.METHODSA total of 105 patients diagnosed with MG were recruited consecutively from a neuromuscular outpatient clinic between December 2020 and February 2021. Patients were classified into two groups: early-onset MG (age at onset < 50 years, n = 63) and late-onset MG (age at onset ≥ 50 years, n = 42). Social demographic data and information about marital status, education level, clinical symptoms, serum antibody levels, and therapies used were collected for all participants. Participants were also evaluated using the Myasthenia Gravis Composite scale, the Myasthenia Gravis Activities of Daily Living scale, the Myasthenia Gravis Quality of Life 15 (MG-QOL-15) questionnaire, the 17-item version of the Hamilton Depression Rating Scale (HAM-D) and the Hamilton Anxiety Rating Scale (HAM-A). The relationship between clinical features and mental health in late-onset MG patients was examined using multivariate logistic regression analyses. RESULTSLate-onset MG patients were more prone to dyspnea, had higher levels of serum anti-acetylcholine receptor antibodies, and higher total scores on the MG-QOL-15, HAM-D, and HAM-A questionnaires, than early-onset MG patients had (P < 0.05). Among those with late-onset MG, female patients had higher total HAM-D and HAM-A scores than male patients had (P < 0.05). High scores on the QOL-15 questionnaire were associated with higher incidences of anxiety and depression, and the association was found to be independent after adjusting for confounding risk factors. In the late-onset subgroup, the areas under the receiver operating characteristic curves for the MG-QOL-15 score-based diagnostic accuracy for anxiety and depression state were 0.816 (P = 0.001) and 0.983 (P < 0.001), respectively.CONCLUSIONHigher MG-QOL-15 scores were a risk factor for anxiety and depression in late-onset MG, and women with late-onset MG were more likely to have anxiety and depression than men were.     

自身免疫调节因子在重症肌无力患者胸腺内的表达及作用分析

目的比较自身免疫调节因子(AIRE)在重症肌无力(MG)患者及正常人胸腺内的含量,分析AIRE在MG发病中的作用。方法收集濮阳市人民医院胸外科MG胸腺切除患者的胸腺组织及心脏外科手术患者的胸腺组织,将其分为MG合并胸腺异常组(A)、MG胸腺正常组(B)、对照组(C)。采用蛋白免疫印迹法及荧光定量PCR法比较3组胸腺内AIRE基因及蛋白含量。结果 C组(0.75±0.04)AIRE基因含量明显高于A(0.42±0.08)、B(0.45±0.08)两组,差异有统计学意义(P0.05);A、B两组之间AIRE基因含量差异无统计学意义(P0.05)。C组(0.72±0.05)AIRE蛋白含量较A(0.40±0.08)、B(0.50±0.05)两组高,差异有统计学意义(P0.05);A、B两组之间蛋白含量差异无统计学意义(P0.05)。结论 MG患者胸腺内AIRE基因及蛋白含量较对照组偏低,而与胸腺病理类型无关,AIRE在MG发病过程中有重要作用。