槲皮素对矽肺大鼠转化生长因子β1 信号转导通路的调节作用

［目的］ 观察槲皮素（Quercetin）对矽肺大鼠转化生长因子β1（transforming growth factor,TGF-β1）信号转导通路的调节作用。 ［方法］ 将75 只SPF 级Wistar 雄性大鼠随机分为对照组、模型组、槲皮素治疗组,每组25 只。模型组与槲皮素治疗组大鼠采用非暴露法气管内一次性注入二氧化硅（SiO2）悬液（250 mg/kg）复制动物矽肺模型。槲皮素治疗组自注射SiO2 后每天腹腔注射槲皮素50 mg/kg/1.0 mL生理盐水,对照组以同样方法注入等量生理盐水,共连续处理14 d。动物分别在注射SiO2 后第3、7、14、21、28 天处死。应用羟脯氨酸试剂盒检测肺组织中总胶原蛋白含量,免疫组织化学 法检测肺组织TGF-β1 表达,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测TGF-β1 直接底物p-Smad3/7 蛋白表达情况。 ［结果］模型组肺组织中总胶原蛋白含量与同期对照组比较明显增加,分别是对照组的6.28、13.11、11.59 倍（P 〈 0.01）。槲皮素治疗组与模型组相比,总胶原蛋白含量明显下降,分别是同期模型组的43.05%、38.92%、37.40%（P 〈 0.01）。槲皮素治疗组的TGF-β1 阳性表达低于模型组,而明显高于对照组,各时间点与对照组比较,差异有统计学意义（P 〈 0.01,P 〈 0.05）。模型组大鼠肺组织中p-Smad3 表达量高于对照组及槲皮素治疗组,各时间点比较,差异均有统计学意义（P 〈 0.01）。槲皮素治疗组各时间点与相应模型组相比,p-Smad3 表达减少,但仍高于相应对照组（P 〈 0.01）。模型组大鼠肺组织中p-Smad7表达量低于对照组及槲皮素治疗组,各时间点比较,差异均有统计学意义（P 〈 0.01）。槲皮素治疗组各时间点与对照组、模型组相比,p-Smad7 表达量升高（P 〈 0.01）。 ［结论］ 槲皮素通过减少Smad3 蛋白,增加Smad7 蛋白表达,抑制矽肺过程中胶原蛋白的产生。     

染矽尘大鼠肺组织纤维化及自噬相关蛋白的变化

目的 探讨游离二氧化硅(SiO2)粉尘暴露大鼠肺组织不同时间点自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(Microtubules associated protein 1 light chain 3,LC3)和酵母自噬相关基因6(Beclin1)的变化。 方法 将72只无特定病原体级(SPF)Wistar雄性大鼠随机分为溶剂对照组和SiO2模型组,模型组大鼠采用非暴露式气管滴注法一次性给予SiO2悬浮液建立矽肺模型,溶剂对照组大鼠给予等量生理盐水。造模后两组分别于1、7、14、21、28、60 d处死6只大鼠,用苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察两组大鼠不同时间点肺组织常规病理变化和纤维化程度;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测肺组织匀浆中转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-1和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平;用Western blot法检测肺组织中自噬相关蛋白LC3和Beclin1的相对表达水平。 结果 HE染色结果显示,模型组大鼠肺组织在第1天至第60天持续存在炎性反应,炎性评分均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Masson染色观察结果显示,模型组大鼠肺组织从第14天开始出现少量胶原纤维增生,至第60天可见大量胶原纤维,纤维化评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组大鼠肺组织未见胶原纤维增生。ELISA法测定结果显示,模型组大鼠在染尘后各时间点肺组织匀浆中IL-1、TNF-α和TGF-β的含量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,模型组大鼠肺组织Beclin1蛋白表达水平在第7、14、21、28和60天时呈下降趋势,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠肺组织LC3II/LC3I的比值在第1、7、14、21、28和60天时呈下降趋势,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 游离SiO2粉尘致大鼠矽肺发病过程中,自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达水平与矽肺的不同发展阶段有关。在大鼠染矽尘早期,肺组织以炎性变化为主;随着染矽尘大鼠纤维化程度的加重。     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对TGF-β1介导Smad通路调节在大鼠矽肺纤维化形成中的作用

[目的]观察N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠矽肺纤维化肺组织中胶原含量、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2/3和Smad 7表达的调节,探讨AcSDKP拮抗矽肺纤维化的作用机制. [方法]选用非暴露式气管灌注法制作大鼠矽肺模型,并给予AcSDKP,采用羟脯氨酸测量法和Western-blot法定量分析肺组织中胶原蛋白的含量.Western-blot法检测肺组织内TGF-31、phospho-Smad2/3及Smad7蛋白的表达. [结果]AcSDKP治疗组胶原含量和Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达低于相对应的矽肺模型组.与相应的对照组相比,矽肺模型组大鼠肺组织内TGF-β1、phospho-Smad2/3蛋白表达均增加,而Smad7蛋白表达减弱.与相应矽肺模型组相比,给予AcSDKP后,大鼠肺组织内TGF-β1、phospho-Smad2/3蛋白表达表达均明显降低.而Smad7蛋白表达增强. [结论]AcSDKP可能是通过对TGF-β1介导Smad通路调节而发挥抗矽肺纤维化的作用.     

大剂量N-乙酰半胱氨酸对染尘大鼠模型的抗氧化作用

目的观察大剂量N-乙酰半胱氨酸(NAC)在矽肺形成过程中的抗氧化作用。方法 选取Wistar健康大鼠96只,随机分为模型组、预防治疗组、对照组3组,每组32只。模型组和预防治疗组均以气管滴注二氧化硅混悬液建立染尘大鼠模型,预防治疗组以大剂量N-乙酰半胱氨酸灌胃进行干预治疗,对照组给予等量的生理盐水。分别在染尘后的第3、7、14、28天分批处死大鼠取材。切取肺组织样本作病理切片,分别行苏木精-伊红(HE)染色,Masson染色,观察肺组织病理变化,并对病理切片(14d、28d)肺纤维化进行半定量评分。测定肺组织匀浆羟脯氨酸(Hyp)含量(样本碱水解法)和微量丙二醛(MDA)的含量(TBA法)。结果与模型组比较,大剂量NAC预防治疗组病理显示肺泡炎症和纤维化程度减轻,肺纤维化得分明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。模型组丙二醛的含量各时间点与对照组相比,均明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),高峰位于第7天,预防治疗组丙二醛的含量均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。肺匀浆羟脯氨酸的含量比较,模型组在第7天明显升高,高峰位于第28天,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),预防治疗组低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 早期应用大剂量NAC可增强肺组织的抗氧化作用,减轻二氧化硅对大鼠肺组织的损伤,部分抑制肺间质纤维化。     

抗纤维化短肽对大鼠矽肺纤维化MCP-1、ED-1表达的影响

目的探讨抗纤维化短肽N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠肺内单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、ED-1表达的影响在拮抗矽肺纤维化形成过程中的作用。方法气管内灌尘法制作大鼠矽肺纤维化动物模型,实验大鼠随机分为6组,包括:对照1组,对照2组和矽肺模型1组,矽肺模型2组,矽肺抗纤维化治疗组,矽肺预防治疗组。采用HE染色对矽肺纤维化病变及其变化特点进行形态学观察;采用羟脯氨酸法对矽肺大鼠肺内胶原含量进行检测;采用免疫组织化学方法检测各组大鼠肺组织中MCP-1的表达与巨噬细胞(ED-1阳性)的数量。结果抗纤维化治疗组与矽肺模型1组与2组相比,矽结节面积下降到84.28%和67.93%,羟脯氨酸含量下降到70.89%和58.18%,MCP-1蛋白表达下降到82.3%和84.1%,MCP-1阳性细胞数下降到67.4%和72.5%,ED-1蛋白表达下降到78.7%和79.3%,ED-1阳性细胞数下降到54.4%和66.8%;预防治疗组与矽肺模型2组相比,矽结节面积下降到61.13%,羟脯氨酸含量下降到60.27%,MCP-1蛋白表达和阳性细胞数分别下降到85.2%和86.3%,ED-1蛋白表达和阳性细胞数分别下降到87.2%和74.9%。结论AcSDKP具有拮抗矽肺纤维化的作用,这可能与其抑制巨噬细胞在肺内的浸润、聚集,减轻了尘性肺泡炎的程度相关。     

骨化三醇对大鼠矽肺纤维化的干预作用及其机制

[目的]观察骨化三醇对大鼠矽肺纤维化的干预作用及其可能机制。[方法]将48只SD大鼠随机分为4组:对照组、模型组、溶媒组和骨化三醇组,每组12只。模型组、溶媒组、骨化三醇组采用非气管切开暴露法一次性支气管灌注二氧化硅悬液(50 mg/m L)1m L构建大鼠矽肺模型,对照组大鼠同法注入等体积生理盐水。于造模当天开始每天给药,骨化三醇组给予蓖麻油稀释的骨化三醇(0.5μg/kg)灌胃,溶媒组给予等体积蓖麻油灌胃,对照组及模型组给予等体积生理盐水灌胃。每组分别于造模后第14、28天随机处死6只大鼠。用HE染色、Masson染色法观察大鼠肺组织病理变化,碱水解法检测羟脯氨酸含量,免疫组化法检测大鼠肺组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、SMA-和MAD-相关蛋白(SMA-and MAD-related protein,SMAD)3、SMAD7蛋白表达。[结果]骨化三醇组大鼠肺泡炎症细胞浸润、肺间质纤维化的程度较模型组明显减轻。与同期模型组大鼠相比,骨化三醇组大鼠肺系数、羟脯氨酸含量降低,差异均有统计学意义(P0.05),骨化三醇组TGF-β1(0.021 9±0.003 1)、SMAD3(0.036 9±0.001 6)蛋白表达量低于模型组[(0.036 1±0.002 2)、(0.042 0±0.002 0)](P0.05),SMAD7(0.033 3±0.002 1)蛋白表达明显高于模型组(0.014 4±0.002 4)(P0.05);模型组和溶媒组以上结果差异无统计学意义(P0.05)。[结论]骨化三醇能减轻矽肺纤维化,这与其调控TGF-β1/SMAD通路中蛋白表达有关。     

安可临对二氧化硅粉尘所致大鼠肺损伤的保护作用

目的探讨安可临对二氧化硅(SiO2)粉尘所致大鼠肺氧化损伤的保护作用。方法将30只雄性大鼠(体质量约为200g)随机分为阴性对照组、矽肺模型组和安可临治疗组(简称"治疗组"),每组10只。采用非暴露式气管内注入法染尘,矽肺模型组和治疗组每只大鼠注入1ml 50mg/ml SiO2混悬液,治疗组于染尘第2天开始每天灌胃给予Oncolyn进行干预。饲养28d后测定大鼠肺泡巨噬细胞凋亡率,肺泡灌洗液(BALF)和肺组织中的总蛋白含量、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、羟脯氨酸(HYP)含量;观察肺脏病理形态学改变。结果治疗组肺巨噬细胞凋亡率高于对照组但低于模型组;BALF和肺组织匀浆中,模型组和治疗组MDA含量和HYP含量均高于阴性对照组,而T-AOC含量低于对照组,且模型组HYP含量高于治疗组,T-AOC含量低于治疗组(P<0.05);BALF中模型组和治疗组MDA含量比较,差异无统计学意义(P>0.05);而在肺组织匀浆中MDA含量模型组高于治疗组(P<0.05);病理形态学显示,治疗组比模型组肺脏纤维化程度较轻。结论安可临对于SiO2粉尘所致肺氧化损伤有一定的保护作用。     

银杏叶提取物改善肺内淋巴转运对大鼠矽肺病程的影响

[目的]通过银杏叶提取物改善矽肺大鼠肺内淋巴转运,探讨其对矽肺病程的影响。[方法]Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、处理对照组、染尘组及处理组,每组按不同采样时间又分为第7天、第14天、第28天、第42天、第56天5个亚组,每组6只。染尘组及处理组大鼠以非气管暴露法气管内注入1 mL二氧化硅混悬液(50 mg/mL);处理组每日经食道灌注银杏叶提取物混悬液(100 mg/kg);正常对照组灌入等剂量生理盐水,处理对照组灌入等剂量银杏叶提取物混悬液。分别检测肺组织中羟脯氨酸、血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)及淋巴液中硅元素水平。[结果]染尘组和处理组与对照组相比,大鼠染尘后VEGFR-3及淋巴液硅元素水平均在时间上呈先增高后降低趋势,于第14天达高峰;羟脯氨酸含量持续增加。与染尘组比较,处理组第28~56天VEGFR-3水平升高(P0.05),淋巴液硅元素水平在第7~28天亦升高(P0.05);各时间点处理组羟脯氨酸含量均低于染尘组(P0.05)。Pearson相关性分析显示,染尘组及处理组淋巴液硅元素与肺组织VEGFR-3均呈正相关(r=0.651,P0.01;r=0.613,P0.01);硅元素与肺组织羟脯氨酸均呈负相关(r=-0.786,P0.01;r=-0.899,P0.01)。[结论]银杏叶提取物可能通过促进淋巴循环,加快肺内二氧化硅的排除。     

熊果酸对矽肺大鼠TNF-α和胶原合成的调节作用

目的观察熊果酸对矽肺大鼠TNF-α含量和胶原合成的调节作用。方法75只Wistar雄性大鼠,SPF级,随机分为对照组、模型组、熊果酸组,每组25只。模型组与熊果酸组大鼠采用非暴露法气管内一次性注入SiO2悬液(250 mg/kg)复制动物矽肺模型。熊果酸组自注射SiO2第二天灌胃熊果酸40mg/kg,对照组以同样方法灌注等量生理盐水,共连续28天。动物分别在注射SiO2后第7、14、28天处死。ELISA法检测大鼠血清中TNF-α的含量,应用羟脯氨酸试剂盒检测肺组织中总胶原蛋白含量,Western blot法检测Ⅰ/Ⅲ型胶原表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠血清中的TNF-α含量各时间点明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。熊果酸组TNF-α含量与模型组相比均显著降低(P0.05)。模型组肺组织中总胶原蛋白含量与同期对照组比较明显增加(P0.05)。熊果酸组与模型组相比,总胶原含量明显下降(P0.05)。熊果酸组与模型组大鼠肺组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原表达与总胶原蛋白含量变化一致。结论熊果酸可以减少矽肺纤维化过程中TNF-α和胶原蛋白的产生。     

熊果酸对矽肺大鼠TNF-α和胶原合成的调节作用北大核心CSCD

目的观察熊果酸对矽肺大鼠TNF-α含量和胶原合成的调节作用。方法75只Wistar雄性大鼠,SPF级,随机分为对照组、模型组、熊果酸组,每组25只。模型组与熊果酸组大鼠采用非暴露法气管内一次性注入SiO2悬液(250 mg/kg)复制动物矽肺模型。熊果酸组自注射SiO2第二天灌胃熊果酸40mg/kg,对照组以同样方法灌注等量生理盐水,共连续28天。动物分别在注射SiO2后第7、14、28天处死。ELISA法检测大鼠血清中TNF-α的含量,应用羟脯氨酸试剂盒检测肺组织中总胶原蛋白含量,Western blot法检测Ⅰ/Ⅲ型胶原表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠血清中的TNF-α含量各时间点明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。熊果酸组TNF-α含量与模型组相比均显著降低(P<0.05)。模型组肺组织中总胶原蛋白含量与同期对照组比较明显增加(P<0.05)。熊果酸组与模型组相比,总胶原含量明显下降(P<0.05)。熊果酸组与模型组大鼠肺组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原表达与总胶原蛋白含量变化一致。结论熊果酸可以减少矽肺纤维化过程中TNF-α和胶原蛋白的产生。     

气管插管法建立矽肺大鼠模型方法的改进

目的介绍一种经济实用、成功率高的气管插管方法来制备矽肺大鼠模型。方法将20只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为对照组和矽肺模型组,2组均使用自制实验器具通过直视下行插管法给药,经检验插管成功后向对照组气管注入1 ml生理盐水,模型组气管注入1 ml Si O2悬浊液。染毒后28 d取出肺组织行HE和Masson染色,应用碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸含量。结果 2组大鼠造模过程中无死亡;造模后对照组大鼠生长状况良好,模型组大鼠生长缓慢并伴有毛枯、喘息等症状;肺组织病理学检查发现,对照组大鼠肺组织结构正常,无明显纤维化;模型组大鼠肺组织出现典型的肺泡炎和纤维化改变。模型组大鼠羟脯氨酸含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。结论组织病理学检查及羟脯氨酸测定结果提示经改良的气管插管注药方法成功复制了矽肺模型,操作简便,死亡率低,可加以推广。     

纤溶酶原激活物在大鼠矽肺纤维化中的作用机制

建立大鼠矽肺模型及对照,分别取不同时间点处死大鼠,免疫组化检测肺组织中uPA、PAI-1蛋白表达。与对照组比较,矽肺模型组uPA表达随时间延长呈增强趋势,第1周达高峰,此后逐渐减弱,但仍较对照组明显。PAI-1第1天起即可见阳性表达,且随染尘时间延长强度逐渐增强,持续至第4周。模型组肺内多种细胞uPA、PAI-1表达增加,矽肺纤维化中可能存在uPA/PAI-1比例的失衡,导致细胞外基质(ECM)积聚而影响矽肺纤维化的发生发展。     

实验性肺纤维化肺组织胶原形成与核因子κB活性变化

目的 观察实验性肺纤维化大鼠肺组织胶原形成与NF-κB活性变化,初步探讨NF-κB活性变化与肺组织胶原合成的关系.方法 用SD雄性大鼠一次性气管内注入博来霉素(BLM)(5 mg/kg体重)复制肺纤维化模型,对照组气管内注入生理盐水,于第1、7、14、21、28天处死,用羟脯氨酸含量测定法评估肺纤维化胶原形成程度.用HE染色结合NF-κB p65免疫组织化学方法观察肺组织NF-κB活性变化.结果 模型组大鼠肺组织自第1天开始即出现炎症细胞浸润,肺泡间隔增厚,自第7天开始肺组织出现胶原沉积,羟脯氨酸含量逐渐增高,于28 d达高峰.NF-κB p65蛋白表达自第1天增高,第7天达峰值,第14天回落,随着肺纤维化加重,第21天以后接近对照组水平.结论 肺组织NF-κB活化是肺纤维化过程中早期事件,可能在肺组织胶原沉积的形成中起重要作用.     

血红素加氧酶-1在大鼠矽肺纤维化中的作用

目的观察血红素加氧酶-1在大鼠矽肺纤维化中的作用。方法 Wistar大鼠60只,随机分为4组,分别为对照组(A组)和染尘模型组(B组)、B组+HO-1抑制剂(锌原卟啉)组(C组)、B组+HO-1诱导剂(钴原卟啉)组(D组)。采用气管暴露法滴注二氧化硅悬液制造大鼠矽肺模型。C、D组分别腹腔注射锌原卟啉12.5 mg/kg、钴原卟啉5 mg/kg,隔日一次,连续4周后,取肺,HE染色观察各组肺组织病理结构,Western blot检测各组肺组织HO-1蛋白含量,荧光定量PCR检测各组肺组织HO-1mRNA的表达。结果与对照组比较,B组出现典型的矽肺纤维化的病理改变,C组较B组加重,D组较B组改善;对照组中HO-1蛋白表达明显低于其他各组(P0.05),抑制剂C组较B组HO-1蛋白表达明显降低,而诱导剂D组较B组HO-1蛋白表达量明显升高(P0.05)。RT-PCR检测A、B、C、D组HO-1 mRNA相对表达量分别为1、2.25±0.38、1.81±0.74、7.75±0.56,抑制剂C组较B组表达明显降低,而诱导剂D组较B组表达显著升高(P0.05)。结论 HO-1参与了大鼠矽肺纤维化的形成过程,通过对其干预可以改变大鼠矽肺纤维化的程度,可为矽肺纤维化的诊断与治疗提供新途径。     

中草药与汉防己甲素对大鼠矽肺转化生长因子-β1信号传导通路的影响

目的探讨芪丹颗粒剂与汉防己甲素治疗大鼠矽肺纤维化的疗效及其对转化生长因子β1（TGF-β1）信号传导通路的影响。方法将40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、芪丹颗粒剂治疗组（芪丹组）、汉防己甲素治疗组（汉甲组），每组各10只。对照组给予生理盐水（1ml）气管注入，其余各组采用气管注入染尘（50mg／只）造模。芪丹组和汉甲组分别从造模后第30天灌注芪丹颗粒剂（3125mg／kg）和汉防己甲素（22mg／kg），其余各组灌注等体积生理盐水，汉甲组每周给药6d，共给药3个月，其余各组每周给药7d，给药4个月；5个月后处死全部大鼠，计算大鼠肺系数；用碱水解法测定羟脯氨酸含量，用酶联免疫吸附测定法（ELISA）N定肺泡灌洗液中TGF—β1蛋白的表达，用免疫组化（SABC法）方法测定肺组织中TGF—β1、转录因子Smad3、转录因子Smad7蛋白表达；观察肺组织及肾脏病理改变。结果模型组肺组织主要以Ⅲ～Ⅳ级矽结节为主，芪丹组及汉甲组肺组织主要以Ⅱ级矽结节为主；芪丹组、汉甲组的肺系数、羟脯氨酸含量、支气管肺泡灌洗液及肺组织中TGF—β1和肺组织中转录因子Smad3的蛋白表达均低于模型组，差异有统计学意义（P〈0．05）；芪丹组、汉甲组肺组织中转录因子Smad7的蛋白表达（169．5±4．88）、（169．55±4．73）均高于模型组，差异有统计学意义（P〈O．05）；汉甲组大鼠出现肾损伤的病理改变。结论芪丹颗粒剂与汉防己甲素均可促进转录因子Smad7蛋白表达，抑制转录因子Smad3蛋白和TGF—β1蛋白表达，抑制矽肺纤维化的进展，芪丹颗粒剂无肾毒性。     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸抗大鼠矽肺纤维化的实验研究

目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠矽肺纤维化的拈抗作用.方法 实验大鼠随机分为6组,每组10只.矽肺模型对照1组:支气管内灌注生理盐水1ml/只,4周后处死;矽肺模型对照2组:支气管内灌注生理盐水1ml/只,8周后处死;矽肺模型1组:支气管内灌注二氧化硅混悬液1ml/只(每ml含SiO250mg),4周后处死;矽肺模型2组:支气管内灌注二氧化硅混悬液1ml/只,8周后处死;矽肺抗纤维化治疗组:支气管内灌注二氧化硅混悬液1ml/只,4周后给予AcSDKP 800μg/(kg·d),并持续至第8周处死;矽肺纤维化防治组:给予AcSDKP 800 μg/(kg·d)48h后,支气管内灌注二氧化硅混悬液1ml/只,8周后处死.采用HE和VG染色对矽肺纤维化病变及其变化特点进行形态学观察.采用羟脯氨酸测定法和Western blot法对矽肺大鼠肺内胶原含量及其I型与Ⅲ型胶原的表达进行检测.结果 抗纤维化治疗组与矽肺模型1组及模型2组相比,矽结节面积下降到84.28%和67.93%,羟脯氨酸含量下降到70.89%和58.18%,Ⅰ型胶原表达量下降到71.08%和58.13%,Ⅲ型胶原表达量下降到80.13%和70.70%,差异均有统计学意义(P＜0.05);预防治疗组与矽肺模型2组相比,矽结节面积下降到61.13%,羟脯氨酸含量下降到60.27%,Ⅰ型与Ⅲ型胶原表达量分别下降到40.13%和65.77%,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 AcSDKP对二氧化硅刺激的大鼠矽肺纤维化有一定的拮抗作用.     

血清硅元素水平对矽肺早期诊断意义的探讨

目的探讨血清硅元素水平对矽肺早期诊断的意义。方法采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测矽肺模型大鼠血清中硅元素含量,同时采用免疫组织化学-链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法观察转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α在大鼠矽肺模型肺组织的表达。结果与对照组比较,大鼠染尘后血清硅元素水平在染尘第一天即见增高,峰值在16 h;其后的7 d、14 d、21 d和28 d,其含量水平亦显著高于对照组,差异有统计学意义。大鼠染尘后肺组织TGF-β1表达与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),表达高峰是染尘后的第7天;TNF-α表达也显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论矽肺模型大鼠血清硅元素水平在染尘早期即见明显升高,且早于TGF-β1、TNF-α的表达,提示此一指标在矽肺的早期诊断中具有一定的价值和意义。 更多还原     

双氢青蒿素对染矽尘大鼠肺纤维化的干预作用

目的研究双氢青蒿素对染矽尘大鼠肺纤维化的干预作用,比较双氢青蒿素和汉防己甲素对染矽尘大鼠肺纤维化的干预效果。方法将80只SD大鼠随机分成对照组、模型组、双氢青蒿素组、汉防己甲素组,每组20只。对照组大鼠气管内注入生理盐水1 ml,其余3组大鼠气管内注入浓度为50 mg/ml的二氧化硅混悬液1 ml染尘,染尘后第2天开始灌胃给药。双氢青蒿素组给予双氢青蒿素75 mg/kg,汉防己甲素组给予汉防己甲素22 mg/kg,模型组和对照组给予生理盐水1 ml/100 g,每周给药6 d,连续给药3个月,并于染尘后的第7、14、28、90天分批处死大鼠,取大鼠肺组织,检测肺组织羟脯氨酸含量,观察肺组织病理学改变,酶联免疫法(Elisa)检测大鼠血清中转化生长因子-#1 (TGF-#1)和Smad2/3含量。结果双氢青蒿素、汉防己甲素和模型组羟脯氨酸含量均高于对照组(P0. 05),双氢青蒿素、汉防己甲素组羟脯氨酸含量低于模型组(P0. 05);双氢青蒿素和汉防己甲素组之间羟脯氨酸含量差异无统计学意义(P0. 05)。双氢青蒿素和汉防己甲素组大鼠血清中TGF-#1、Smad2/3表达水平均低于模型组(P0. 05),双氢青蒿素和汉防己甲素组之间大鼠血清TGF-#1与Smad2/3表达水平比较差异无统计学意义(P0. 05)。结论双氢青蒿素对染矽尘大鼠肺纤维化有抑制作用,双氢青蒿素和汉防己甲素对染矽尘大鼠肺纤维化的干预效果无明显差异。     

CTGF和TGF-β1在实验性矽肺肺组织中的表达及其意义

[目的]研究结缔组织生长因子(CTGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)在二氧化硅所致矽肺大鼠肺组织中的表达.[方法]矽肺组大鼠20只气管灌注石英粉尘制作模型,对照组大鼠20只以灭菌生理盐水代替,45d后观察大鼠肺组织的病理改变,免疫组化方法观察肺组织中CTGF和TGF-β1的蛋白表达情况.[结果]CTGF和TGF-β1在矽肺组肺组织中的表达量均高于对照组大鼠,且差异有统计学意义(P<0.05);CTGF和TGF-β1表达量间无直线相关关系(P>0.05).[结论]CTGF和TGF-β1可能参与了矽肺的发生发展.     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对矽肺大鼠蛋白激酶B通路调节与作用

目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)能否通过血小板源性生长因子(PDGF)及其受体介导的蛋白激酶B(AKT)通路的调节进而发挥其抗矽肺纤维化的作用。方法选用气管内灌注法制作大鼠矽肺模型,将其分为对照组(4周组和8周组)、矽肺模型组(4周组和8周组)、AcSDKP治疗组(抗纤维化治疗组和预防治疗组)。采用羟脯氨酸法分析肺组织中总胶原蛋白水平。免疫组织化学法、免疫印迹法检测肺组织内PDGF及其受体、AKT、磷酸化AKT、c-myc蛋白、磷酸化-糖原合成酶激酶3β(GSK3β)的表达。结果 AcSDKP治疗组胶原水平低于相对应的矽肺模型组。与相应的对照组相比,矽肺模型组大鼠肺组织内PDGF及其受体、磷酸化AKT、c-myc蛋白表达均增加(P<0.05);而磷酸化GSK3β的表达无明显变化。与相应矽肺模型组相比,给予AcSDKP后,大鼠肺组织内PDGF及其受体、磷酸化AKT、c-myc蛋白表达均明显降低(P<0.05)。而各组间比较AKT蛋白表达无明显改变。结论 AcSDKP可能通过阻断PDGF及其受体介导的AKT和c-myc途径,抑制矽肺组织间质细胞的增生,减少其胶原的合成,发挥抗矽...