微波辐射后大鼠脑内连接黏附分子-1表达与血脑屏障通透性的相关性研究

目的探讨微波辐射后大鼠海马组织中连接黏附分子-1（JAM-1）表达及其与血脑屏障完整性的关系。 方法将160只雄性Wistar大鼠分为假辐射组及辐射组,辐射组又根据微波辐射功率密度不同细分为3个亚组,各辐射亚组分别接受10,30,100 mW/cm2微波辐射,假辐射组微波辐射强度为0 mW/cm2。各组大鼠分别于微波辐射后6 h,1 d,3 d,7 d及14 d时活杀取脑,分别采用伊文思蓝染色、激光共聚焦显微镜、Western blot、RT-PCR及图像分析等手段检测大鼠血脑屏障通透性、脑皮质和海马中JAM-1表达的变化情况。 结果10、100 mW/cm2微波辐射后3~14 d期间,发现各辐射组大鼠海马组织中伊文思蓝含量均明显高于假辐射组,其中10,30 mW/cm2辐射组伊文思蓝含量于微波辐射后7 d内进行性增加（P<0.01）,于微波辐射后14 d时开始恢复;100 mW/cm2辐射组伊文思蓝含量于微波辐射后14 d期间进行性增加;假辐射组伊文思蓝局限于海马组织血管腔内,各辐射组伊文思蓝于微波辐射后3 d时即弥散至血管腔外;10,30 mW/cm2辐射组大鼠脑皮质及海马中JAM-1蛋白于微波辐射后7 d内均显著降低（P<0.05）,14 d时开始恢复;100 mW/cm2辐射组JAM-1蛋白在微波辐射后14 d期间进行性下降（P<0.01）;10,30及100 mW/cm2微波辐射后6 h时,发现大鼠海马中JAM-1 mRNA表达均显著下降（P<0.01）,其中10和30 mW/cm2辐射组于微波辐射后7 d时开始恢复,100 mW/cm2辐射组则在微波辐射后7 d期间进行性下降（P<0.01）。 结论微波辐射可导致大鼠脑组织JAM-1表达减少,此改变与微波辐射剂量具有相关性,提示JAM-1有可能参与了微波辐射致血脑屏障通透性增高的病理过程。     

低强度脉冲超声对人皮肤成纤维细胞增殖及胶原蛋白合成的影响

目的探讨低强度脉冲超声波（LIPUS）对体外分离培养的人皮肤成纤维细胞增殖及胶原蛋白合成的影响，为其临床应用提供实验依据。 方法采用频率为1 MHz、声强为0.1 W/cm2的LIPUS处理体外培养的人皮肤成纤维细胞，根据处理时间分为超声处理0 min组（假处理组）、超声处理5 min组（5 min组）、超声处理10 min组（10 min组）及超声处理20 min组（20 min组）。超声处理结束24 h后用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定各组细胞增殖情况，采用H3-胸腺嘧啶核苷及H3-脯氨酸掺入试验分别检测超声作用对细胞DNA合成及胶原蛋白合成的影响，应用流式细胞仪检测超声作用对细胞周期的影响。 结果⑴频率为1 MHz、声强为0.1 W/cm2的LIPUS处理成纤维细胞5 min后，吸光度值增加，细胞H3-胸腺嘧啶核苷及H3-脯氨酸掺入量也明显增加，与假处理组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；作用10 min后，掺入量达最高，与假处理组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；作用时间增加至20 min，掺入量反而下降，与假处理组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。⑵LIPUS作用5 min或10 min可使细胞周期改变，S期细胞数增多，G2/M期细胞数减少。 结论LIPUS作用一定时间能够促进人皮肤成纤维细胞增殖及胶原蛋白合成。     

模拟移动电话微波辐射对大鼠离体皮质神经细胞的过氧化损伤

目的探讨模拟移动电话微波辐射对大鼠离体皮质神经细胞的脂质过氧化损伤作用。 方法在对新生大鼠（出生0~1 d）大脑皮质神经细胞进行原代培养的基础上，采用频率900 MHz、功率密度0.05 mW/cm2的模拟移动电话微波对其辐射4，8，12，16，20及24 h，然后继续培养24 h，在微波辐射结束后即刻和再培养24 h时分别测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量，选用四唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖活性。 结果皮质神经细胞经模拟移动电话微波辐射12 h后，其MDA含量［(2.32±0.29)μmol/g］明显增高，与对照组［（1.84±0.28）μmol/g］比较，差异具有统计学意义（P<0.05）；且随着微波辐射时间的延长，皮质神经细胞MDA含量也逐渐升高，SOD活性降低较缓慢，在微波辐射20 h后为［（1.60±0.24）×103U/g］，较对照组［（1.91±0.40）×103U/g］明显下降，差异具有统计学意义（P<0.01）。皮质神经细胞增殖活性在微波辐射12 h后为（0.45±0.02），较相应对照组（0.51±0.03）明显降低，差异具有统计学意义（P<0.01），并且随着微波辐射时间的延长而呈现一定的剂量依赖关系。微波辐射后细胞经再培养24 h后，发现微波辐射8 h组SOD活性明显增高，同相应对照组比较，差异具有统计学意义（P<0.05）；微波辐射20 h组SOD活性最强，MDA含量有所下降，仅微波辐射24 h组MDA含量较对照组有所增高，差异具有统计学意义（P<0.01）。皮质神经细胞增殖活性于微波辐射12 h后有所恢复，与相应对照组比较，差异无统计学意义(P&rt;0．05)；而微波辐射16 h、20 h及24 h时，细胞增殖活性仍然偏低，同相应对照组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论急性短期模拟移动电话微波辐射可抑制大鼠离体皮质神经细胞的增殖活性，这种损伤可能与神经细胞脂质过氧化反应有关，并且在一定时间范围内具有可逆性。     

超声波对盐酸青藤碱凝胶经皮渗透的促进作用

目的研究超声波对盐酸青藤碱经皮渗透的影响。 方法取离体Sprague-Dawley大鼠皮肤,置于改良Franz扩散池,皮肤角质层朝上,并均匀涂抹盐酸青藤碱凝胶,保持扩散体系温度为（32±0.5）℃,接受介质采用20%聚乙二醇400生理盐水溶液。实验分为药物被动经皮渗透组（对照组）和药物超声波透入组（超声波组）。对照组不加超声波作用,超声波组按超声波作用参数不同分为Ta组（频率800 kHz,强度0.75 W/cm2,作用时间10 min）、Tb组（频率1 MHz,强度0.70 W/cm2,作用时间10 min）、Tc组（频率1 MHz,强度0.35 W/cm2,作用时间10 min）、Td组（频率800 kHz,强度1.50 W/cm2,作用时间10 min）和Te组（频率800 kHz,强度1.50 W/cm2,作用时间5 min）。每组均同时进行6个平行实验,每个平行实验持续时间为8 h,每隔1 h分别吸取接受室溶液,并加入空白接受介质,测定接受液药物浓度,计算平均累积单位面积渗透量Q（μg/cm2）和平均稳态透皮速率Js（μg/cm2/h）,并进行比较。 结果对照组Q8h值为（20.65±10.23）μg/cm2,Js值为（3.02±0.11）μg/cm2/h;Ta、Tb组的Q8h和Js值均明显高于对照组（P<0.05）;Tb组Q8h和Js值明显高于Tc组（P<0.05）;Td组Q8h和Js值明显高于Ta组和Te组（P<0.05）。超声波透入后,皮肤组织切片经光学显微镜观察没有明显改变,扫描电子显微镜下可见角质层表面呈现粗糙、多孔状。 结论超声波透入对盐酸青藤碱的经皮吸收有明显促进作用,渗透效果与超声波强度、作用时间有关,超声波作用的强度在0~1.5 W/cm2范围内,对皮肤组织比较安全     

低强度脉冲超声对兔膝骨性关节炎软骨细胞整合素-局部粘着斑激酶-促分裂原活化蛋白激酶力化学转导通路相关蛋白表达的影响

目的观察低强度脉冲超声（LIPUS）对兔膝骨性关节炎（OA）软骨细胞中整合素-局部粘着斑激酶（FAK）-促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）力化学信号转导通路相关蛋白表达的影响。 方法共选取18只新西兰大白兔,其中12只进行膝OA造模,其余6只作为正常对照。于制模后第4周处死实验兔,提取软骨细胞进行体外培养并鉴定。将所培养细胞分为正常对照组、OA模型组及OA超声组。待细胞传至第2代时,正常对照组及OA模型组细胞不给予任何处理,OA超声组细胞则给予LIPUS辐射。于LIPUS持续作用1周后收集各组细胞,应用Western blot技术检测各组细胞中Ⅱ型胶原、蛋白多糖、基质金属蛋白酶(MMPs)-13、整合素β1、FAK、MAPK（如p38、ERK1/2、JNK）蛋白表达以及磷酸化蛋白表达情况。 结果①OA模型组及OA超声组Ⅱ型胶原、蛋白多糖含量均较正常对照组明显降低（P<0.05）,并以OA模型组下降幅度较显著,与OA超声组间差异具有统计学意义（P<0.05）。②OA模型组及OA超声组MMP-13含量均较正常对照组明显增高（P<0.05）,并以OA模型组增高幅度较显著,与OA超声组间差异具有统计学意义（P<0.05）。③OA模型组及OA超声组整合素β1、磷酸化FAK含量均较正常对照组明显增高,且以OA超声组增高幅度较显著,与OA模型组间差异具有统计学意义（P<0.05）。④OA模型组磷酸化p38、ERK1/2及JNK含量均较正常对照组明显增加（P<0.05）,OA超声组上述指标则较OA模型组显著降低（P<0.05）。 结论LIPUS体外辐射可抑制OA软骨细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖降解及MMP-13表达,同时还能促进整合素β1表达以及FAK磷酸化,抑制p38、ERK1/2、JNK磷酸化,提示LIPUS辐射可能通过启动整合素-FAK-MAPK力学信号转导通路诱导软骨细胞外基质发生改变。     

微波辐射减轻瘢痕形成的疗效及其作用机制研究

目的探讨微波辐射对原代培养的人瘢痕疙瘩来源的成纤维细胞增殖活性的影响,进而分析微波辐射后成纤维细胞的胶原蛋白合成的变化及相关信号的激活情况。 方法将瘢痕成纤维细胞分为对照组（自然生长无任何处理）、10mW/cm2微波辐射组和20mW/cm2微波辐射组,然后再根据辐射时间,将10mW/cm2微波辐射组和20mW/cm2微波辐射组分为辐射5min、15min、30min各3个亚组。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法（MTT）测定成纤维细胞的生长情况。采用Western blot方法分析微波辐射后对细胞Ⅰ型胶原蛋白表达水平的影响。采用抗磷酸化形式的c-Jun氨基末端激酶（JNK）抗体,通过Western blot方法观察微波辐射后瘢痕来源的成纤维细胞JNK磷酸化(pJNK)的情况。 结果辐射后,10mW/cm2微波辐射组3个亚组的瘢痕成纤维细胞增殖率与对照组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;20mW/cm2微波辐射组3个亚组的瘢痕成纤维细胞增殖率明显受到抑制,与对照组和10mW/cm2微波辐射组相同时间点比较,差异均有统计学意义（P<0.05）,且20mW/cm2微波辐射组各时间点间两两比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。辐射后,20mW/cm2微波辐射组的瘢痕成纤维细胞中Ⅰ型胶原的表达量显著降低,其降低程度随着微波辐射时间的延长而增加。辐射后,20mW/cm2微波辐射组各时间点的瘢痕成纤维细胞内JNK信号通路的激活水平均显著上调,且分别与对照组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论20mW/cm2强度的微波辐射可显著抑制瘢痕成纤维细胞的增殖,且辐射时间越长抑制效果越明显;20mW/cm2强度的微波辐射可显著抑制胶原的表达,并通过激活JNK信号转导通路而起到减轻瘢痕形成的作用。     

不同微波辐射功率和时间对原代培养小鼠成纤维细胞细胞外调节激酶-1/2活化的影响

目的 探讨不同功率2450MHz微波辐射不同时间对原代培养的小鼠成纤维细胞细胞外调节激酶-1/2(ERK-1/2)活化的影响.方法 分离纯化培养小鼠成纤维细胞,经细胞形态学观察及鉴定后,采用2450 MHz微波直接辐射小鼠成纤维细胞,输出功率分别为0.3 W/cm2、0.5 W/cm2、1 W/cm2,每组功率辐射时间分别为15 min和30 min.采用Western-blot方法分析微波辐射后成纤维细胞内丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路激活状态.结果 输出功率0.3 W/cm2、0.5 W/cm2和1 W/cm2辐射15 min时ERK-1/2磷酸化程度明显增强;随着辐射时间延长.ERK-1/2磷酸化程度有下降趋势.结论 体外不同功率微波短时间辐射能激活小鼠成纤维细胞的MAPK信号传导通路,长时间辐射能抑制MAPK信号传导通路,提示不同的微波辐射功率及时间对小鼠成纤维细胞信号传导有着不同的影响.     

电磁场激活细胞外信号调节激酶通络在骨髓间充质干细胞增殖与分化成骨中的作用

目的探讨电磁场作用于大鼠骨髓间充质干细胞对细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路的影响，并进一步研究电磁场诱导所致ERK信号通路变化在骨髓间充质干细胞增殖与分化成骨中的作用。 方法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞，取第3代细胞，分为对照组、暴磁组、PD98059组和PD98059+暴磁组。采用Western blotting法检测ERK通路的活性变化，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组细胞的增殖活性，按照碱性磷酸酶（ALP）试剂盒说明书步骤检测各组细胞ALP活性。 结果①暴磁后5 min，ERK1/2磷酸化水平即明显高于对照组，1 h后仍处于较高水平（P<0.01）；PD98059作用可明显抑制ERK1/2磷酸化水平的升高，提示PD98059可有效阻断ERK通路的激活。②MTT法检测结果提示，暴磁后细胞的增殖活性明显升高，PD98059可明显抑制这种效应。③暴磁组ALP活性明显高于对照组，PD98059+暴磁组ALP活性较暴磁组高（P<0.01），差异有统计学意义。 结论在15 Hz、1 mT的正弦波电磁场作用下，骨髓间充质干细胞ERK信号通路很快被激活，引起细胞增殖活性和ALP活性的改变，这为进一步研究磁场对骨髓间充质干细胞的促增殖和分化成骨机制提供了指导意义。     

不同微波辐射功率和时间对原代培养小鼠成纤维细胞细胞外调节激酶-1/2活化的影响

目的 探讨不同功率2450MHz微波辐射不同时间对原代培养的小鼠成纤维细胞细胞外调节激酶-1/2(ERK-1/2)活化的影响.方法 分离纯化培养小鼠成纤维细胞,经细胞形态学观察及鉴定后,采用2450 MHz微波直接辐射小鼠成纤维细胞,输出功率分别为0.3 W/cm2、0.5 W/cm2、1 W/cm2,每组功率辐射时间分别为15 min和30 min.采用Western-blot方法分析微波辐射后成纤维细胞内丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路激活状态.结果 输出功率0.3 W/cm2、0.5 W/cm2和1 W/cm2辐射15 min时ERK-1/2磷酸化程度明显增强;随着辐射时间延长.ERK-1/2磷酸化程度有下降趋势.结论 体外不同功率微波短时间辐射能激活小鼠成纤维细胞的MAPK信号传导通路,长时间辐射能抑制MAPK信号传导通路,提示不同的微波辐射功率及时间对小鼠成纤维细胞信号传导有着不同的影响.     

不同功率密度氦氖激光照射对培养瘢痕成纤维细胞

目的探讨氦氖激光功率密度与培养瘢痕成纤维细胞生长的关系。方法以632.8nm波长氦氖激光,50、100和150mW/cm2功率密度,分别照射培养的人增生性瘢痕成纤维细胞1、3和5次,1次/d,每次照射10min,然后进行细胞计数和细胞周期分析。结果50mW/cm2照射1次后细胞总数大于对照组（P<0.01）,100mW/cm2照射5次和150mW/cm2照射3、5次,细胞总数都明显少于同期对照组（P<0.05）;细胞周期分析结果与细胞计数结果相一致。结论氦氖激光对细胞生长的双重效应与功率密度密切相关。     

不同脉冲超声参数及培养方式对细胞活力和细胞声孔作用的影响

目的探寻不同脉冲超声（PUS）辐射策略及细胞培养方式对宫颈癌细胞（Hela）活力和细胞膜声孔作用的影响。 方法以2种不同的方式（悬浮培养或贴壁培养）培养Hela细胞，改变声强（0.4 W/cm2、1.0 W/cm2、1.6 W/cm2和2.2 W/cm2）、占空比（10％、20％、50％）以及辐射时间（1 min、3 min）等参数，对Hela细胞进行辐射，运用流式细胞术行细胞活力分析，应用显微镜和扫描电镜观察细胞形态变化及细胞膜表面的超微结构，比较不同参数组合方案的影响。 结果低声强和低占空比辐射未造成明显细胞死亡，高声强（1.6 W/cm2和2.2 W/cm2）和高占空比（50％）辐射显著降低细胞存活率（P＜0.01），导致细胞脱离。析因设计分析可知，细胞培养方式和3种超声参数均有显著的交互作用（P＜0.01），对细胞活力有很大的影响。电镜结果显示，适当条件的超声辐射能导致细胞表面出现可逆性孔道。通过优化可获得合理的平衡，细胞存活率大于80％。悬液培养的细胞经1.0 W/cm2、20％占空比的PUS辐射3 min后，声孔作用最强，出现的孔洞最多。 结论对培养方式和超声参数进行优化后可减少细胞损伤，产生较强的声孔作用，增加细胞膜通透性，有利于大分子物质的胞内输送。     

低频电刺激诱导外周血干细胞增殖并向施万细胞分化的实验研究

目的探讨体外培养下低频电刺激诱导外周血干细胞增殖并向施万细胞（SC）分化的可能机制。 方法原代培养SD大鼠外周血干细胞,将传至第3代的SD大鼠外周血干细胞分为低频电刺激组、细胞外信号调节激酶（ERK）组、联合应用组、对照组。4组细胞均采用含2%胎牛血清的达尔伯改良伊格尔培养基（DMEM）进行培养,加入SC上清液后,低频电刺激组给予1 h持续低频电刺激,ERK组在DMEM中加入浓度为50 mmol/L的抑制剂PD98059,联合应用组在ERK组基础上给予1 h持续低频电刺激,对照组不行特殊干预处理。诱导前、后,利用噻唑蓝比色法检测4组细胞在570 nm处的吸光度A值,并采用Western blot法对诱导后各组细胞的增殖周期蛋白D1（cyclin D1）及细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK4）含量进行测定。 结果干预前,各组外周血干细胞的A750值无明显差异（P&rt;0.05）;干预后,低频电刺激组、ERK组、联合应用组、对照组A750值分别为（1.051±0.058）、（0.363±0.343）、（0.894±0.343）、（0.758±0.047）,除ERK组外,其它各组A750值均较干预前升高（P<0.05）;各组A750值组间比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。诱导后,低频电刺激组S-100、神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）及P75的表达率均高于其它各组（P<0.05）,ERK组各蛋白表达率则均低于其它各组（P<0.05）,联合应用组S-100、GFAP及P75的蛋白表达率介于低频电刺激组与ERK组之间,高于ERK组,低于低频电刺激组,差异有统计学意义（P<0.05）。 各组组间ERK表达量比较,差异无统计学意义（P&rt;0.05）;与对照组比较,低频电刺激组和联合应用组磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（p-ERK1/2）、cyclin D1及CDK4蛋白表达水平均较高（P<0.05）,ERK组则较低（P<0.05）;与联合应用组比较,低频电刺激组p-ERK1/2、cyclin D1及CDK4蛋白表达水平较高（P<0.05）,ERK组较低（P<0.05）。 结论体外培养条件下,低频电刺激可促进SD大鼠外周血干细胞增殖并诱导其向SC分化,且ERK信号传导通路是促进SC增殖分化的途径之一。     

860 MHz微波电磁辐射对豚鼠双任务眨眼条件反射行为的影响

目的观察860 MHz微波电磁辐射对痕迹性和延迟性眨眼条件反射双任务豚鼠模型的影响。 方法采用抽签法将24只已建立双任务模型的豚鼠随机分为辐射1 h组、辐射20 min组、假辐射组和正常对照组,每组6只。辐射1 h组和辐射20 min组豚鼠头部接受频率为860 MHz、功率密度为1.0 mW/cm2的电磁辐射,每日1次,每次分别辐射1 h和20 min,连续3 d,假辐射组和正常对照组豚鼠不进行辐射,辐射结束后各组均进行眨眼条件反射训练。 结果与正常对照组豚鼠相比,辐射1h组豚鼠的痕迹性和延迟性眨眼条件反射的习得率、峰幅度有明显下降（P＜0.05）,潜伏期无明显变化（P＞0.05）,辐射20 min组、假辐射组和正常对照组的行为学参数均无明显变化（P＞0.05）。 结论860 MHz、1.0 mW/cm2、持续1 h的微波电磁辐射可以使豚鼠眨眼条件反射两种任务的习得率和峰幅度均有显著下降,对豚鼠的学习记忆能力有影响。     

不同微波辐射功率和时间对原代培养小鼠成纤维细胞细胞外调节激酶-1/2活化的影响

目的 探讨不同功率2450MHz微波辐射不同时间对原代培养的小鼠成纤维细胞细胞外调节激酶-1/2(ERK-1/2)活化的影响.方法 分离纯化培养小鼠成纤维细胞,经细胞形态学观察及鉴定后,采用2450 MHz微波直接辐射小鼠成纤维细胞,输出功率分别为0.3 W/cm2、0.5 W/cm2、1 W/cm2,每组功率辐射时间分别为15 min和30 min.采用Western-blot方法分析微波辐射后成纤维细胞内丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路激活状态.结果 输出功率0.3 W/cm2、0.5 W/cm2和1 W/cm2辐射15 min时ERK-1/2磷酸化程度明显增强;随着辐射时间延长.ERK-1/2磷酸化程度有下降趋势.结论 体外不同功率微波短时间辐射能激活小鼠成纤维细胞的MAPK信号传导通路,长时间辐射能抑制MAPK信号传导通路,提示不同的微波辐射功率及时间对小鼠成纤维细胞信号传导有着不同的影响.

Abstract：

Objective To investigate the effects of different intensities and different radiation durations of 2450MHz microwaves on activation of extracellular-regulated kinase (ERK)-1/2 in cultured mouse fibroblast in vitro.Methods The fibroblasts isolated from mouse skin and cultured were directly radiated with different intensities and different durations of microwave.After direct radiation with 2450MHz microwave (0.3 W/cm2, 0.5W/cm2, 1W/cm2 ) for 15min or 30min, anti-phosphorylation extracellular-regulated kinase( ERK-1/2 ) antibody was analyzed by Western blot technique to observe phosphorylation changes of fibroblasts protein ERK-1/2.and activation of mitogen-activated progein kinase(MAPK) signal conductive pathways.Results After microwave radiation with 0.3W/cm2, 0.5W/cm2, 1W/cm2for 15min, activation of ERK-1/2 increased significantly (P < 0.05 ) ; but after 30min radiation with 0.3 W/cm2,0.5W/cm2, 1W/cm2, activation of ERK-1/2 decreased significantly(P<0.05).Conclusion It is concluded that different intensities microwave may activate different signals of fibroblasts in dose-dependent manner in vitro.Different microwave radiations can induce different activations in MAPK signal conductive pathways.     

超声辐射与微泡瞬时转染血管内皮细胞及其促血管生成的研究

目的探讨超声辐射微泡技术将血管生成素-1（Ang-1）基因瞬时转染血管内皮细胞系CRL-1730后,Ang-1的表达情况及迁移效应。 方法取对数生长期的血管内皮细胞CRL-1730,接种于6孔板,分为空白对照组、Ang-1组（10 μg/ ml）、微泡组（微泡浓度10％）、超声微泡组（Ang-1 10 μg/ ml,微泡浓度10%,超声辐射30 s）,各组培养6 h换10%胎牛血清培养基,培养至24 h收集细胞。采用RT-PCR法检测各组细胞Ang-1 mRNA表达水平,采用Western blot法检测Ang-1蛋白表达水平,选用Transwell法检测细胞迁移能力。 结果空白对照组、Ang-1组、微泡组Ang-1mRNA及蛋白表达比较,差异均无统计学意义（P&rt;0.05）,超声微泡组Ang-1mRNA及蛋白表达均明显高于其余各组（P<0.05）,且超声微泡组细胞迁移能力较其余组有明显提高（P<0.05）。 结论超声辐射微泡技术可将Ang-1基因瞬时转染入血管内皮细胞系CRL-1730,使表达Ang-1的血管内皮细胞具有更强的迁移能力。     

脉冲超声波治疗对大鼠膝关节内侧副韧带损伤愈合的影响

目的通过检测转化生长因子-β1（TGF-β1）在大鼠膝关节内侧副韧带（MCL）损伤模型中的表达以及观察局部瘢痕愈合的情况,探讨脉冲超声波治疗对韧带损伤愈合的作用。 方法选择18只Sprague-Dawley大鼠,行内侧副韧带切断术,造模成功后随机分为对照组、0.5 W/cm2超声组和1.0 W/cm2超声组。对照组不予以治疗,0.5 W/cm2超声组和1.0 W/cm2超声组依次予以每天10 min相应强度的脉冲超声波治疗,治疗8 d后处死各组大鼠。大体观察各组大鼠局部韧带愈合的情况后,取内侧副韧带进行苏木素-伊红（HE）染色、Van Gieson(VG)染色及免疫组织化学染色,观察并比较各组大鼠炎症细胞浸润、胶原纤维排列情况及TGF-β1表达强度。 结果①肉眼观察：断裂的内侧副韧带均以瘢痕组织形式愈合,与对照组比较,2个超声组的瘢痕组织明显增大。②HE染色以及VG染色后光镜下观察：对照组中炎症细胞以及新生血管数较2个超声组少,并且对照组胶原纤维排列较0.5 W/cm2超声组、1.0 W/cm2超声组紊乱。③0.5 W/cm2超声组、1.0 W/cm2超声组的TGF-β1表达较对照组强,差异有统计学意义（P<0.05）;1.0 W/cm2超声组的TGF-β1表达较0.5 W/cm2超声组强,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论①脉冲超声波治疗韧带损伤,可使局部瘢痕组织增生,炎症反应增强,胶原纤维排列规则,从而改善近期软组织愈合,远期效果尚待进一步研究。②软组织损伤后,脉冲超声波治疗可以促进TGF-β1表达增加;并且治疗强度增大,TGF-β1表达增强。③脉冲超声波治疗可能通过促进TGF-β1表达而促进软组织愈合。     

脉冲电磁场治疗骨质疏松症的临床研究

目的观察脉冲电磁场(PEMFs)对老年妇女骨质疏松症的作用。 方法对36例原发性骨质疏松症老年女性患者进行脉冲电磁场治疗，20 min/次，1次/d，连续30 d，同时每日补充元素钙500 mg和维生素D 800 U以上。于治疗前、治疗结束时及治疗后3个月用疼痛数字评价量表（NRS）测定疼痛值；用放射免疫法（RIA）检测血清骨钙素（OC）；用酶联免疫法（ELISA）检测血清I型胶原C末端肽（CTX-1）浓度；并于治疗前和治疗后3个月用双能X射线骨密度仪(DXA)检测骨密度(BMD)。 结果治疗后NRS评分较治疗前降低，差异有统计学意义(P<0.05)。OC浓度治疗前、后没有明显变化（P&rt;0．05)；CTX-1浓度治疗结束时较治疗前降低(P<0.05)，治疗后3个月较治疗结束时亦明显降低(P<0.05)。治疗后3个月，Wards三角区骨密度平均提高0.021 g/cm2，差异有统计学意义(P<0.05)；股骨颈骨密度和大转子骨密度有所提高，但差异无统计学意义(P&rt;0．05)。 结论PEMFs能改善老年女性原发性骨质疏松症患者疼痛症状，使骨密度增加，其机制主要为抑制骨吸收，且在治疗结束后仍能维持其作用。      

鼻咽癌颈部淋巴结转移综合治疗疗效分析

观察鼻咽癌放、化疗配合颈部淋巴结微波热疗的近期及远期疗效。154例初治N2～N3期鼻咽癌患者分为2组：对照组78例,5-氟脲嘧啶+顺铂联合化疗,21 d为1周期,化疗1～2周期后行常规放疗,原发灶放疗剂量DT70～78 Gy/35～39 f,47～51 d,颈淋巴结转移灶DT68～72 Gy/34～36 f,46～50 d;热疗组76例,放、化疗方法同对照组,颈淋巴结于放疗第1天开始配合局部微波热疗,每次有效加温时间45 min,每周2次,共8～14次。 结果热疗组和对照组的颈淋巴结完全消退率分别为80.3%和61.5%,差异有统计学意义（P<0.05）,总有效率分别为100%和96.2%。热疗组与对照组的颈淋巴结完全消退时的放疗剂量分别为（45.8±5.46）Gy和（58.8±5.03）Gy,差异有统计学意义（P<0.01）。热疗组与对照组的5年颈淋巴结局控率分别为97.4%和76.9%,差异有统计学意义（P<0.05）。热疗组与对照组1,3,5年生存率分别为97.4％和93.6%(P&rt;0.05)、76.3%和52.6%（P<0.01）、59.2%和41.0%（P<0.05）。对N2﹑N3期鼻咽癌放、化疗配合颈淋巴结微波热疗,能显著提高颈淋巴结的完全消退率,减少淋巴结的局部放疗剂量,且5年颈淋巴结局控率明显优于单纯放化疗,并能明显提高患者的长期生存率。     

高压氧对缺血再灌注小鼠脑组织MMP-9﹑MMP-2mRNA的表达及血脑屏障通透性的影响

目的探讨高压氧（HBO）对缺血再灌注小鼠脑组织中基质金属蛋白酶（MMPs）MMP-9、MMP-2 mRNA的表达及血脑屏障通透性的影响。 方法复制清醒小鼠脑缺血再灌注模型，并于再灌注期间行0.25 MPa HBO治疗5次，在处死动物前1h经尾静脉注射2%伊文蓝（EB）,采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）方法及比色法分别检测脑组织中MMP-9、MMP-2 mRNA的表达及EB的含量。 结果脑缺血再灌注组MMP-9、MMP-2 mRNA的表达及EB的含量明显高于假手术组，差异有统计学意义（P<0.01），高压氧组与假手术组比较，脑组织中MMP-9、MMP-2 mRNA的表达及EB的含量相近（P&rt;0.05），HBO+脑缺血再灌注组脑组织中基质金属蛋白酶MMP-9、MMP-2 mRNA的表达及EB的含量明显低于脑缺血再灌注组，差异有统计学意义（P<0.01）。 结论高压氧可明显减少脑缺血再灌注脑组织中基质金属白蛋酶MMP-9、MMP-2的表达，具有降低血脑屏障通透性的作用。