基于HPLC-DAD特征图谱分析莱菔子饮片酶解过程中化学成分的变化

目的:分析莱菔子饮片酶解过程中化学成分的动态变化。方法:采用HPLC分析莱菔子不同酶解时间的特征图谱,色谱条件为流动相乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~15 min,5%~10%A; 15~17 min,10%~12.5%A; 17~27 min,12.5%~14%A; 27~55 min,14%~25%A; 55~57 min,25%~70%A; 57~70 min,70%~100%A),检测波长225 nm。标定其特征峰,同时提取各特征峰的UV光谱,比较不同特征峰UV光谱的异同和HPLC特征图谱特征峰峰面积的变化,分析莱菔子中特征成分的动态变化规律。结果:莱菔子不同酶解时间的特征图谱中共标定11个特征峰,归属了萝卜苷和芥子碱硫氰酸盐2个色谱峰,同时发现莱菔子中萝卜苷会快速被黑芥子酶酶解,先被酶解为一中间体,继而被分解为其他成分。芥子碱硫氰酸盐随着酶解时间没发生明显的变化。芥子酸苷类成分也会被酶解。结论:莱菔子的酶解不单是萝卜苷的酶解,还包括芥子酸苷类成分的酶解,可为莱菔子"生熟异治,生升熟降"的药性变化提供参考。     

芥子及莱菔子饮片炮制前后物质基础变化规律分析

目的:建立芥子、莱菔子炒制前后以及芥子不同品种饮片的UPLC图谱,分析3种中药饮片炒制前后化学成分的变化规律。方法:采用UPLC,ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×50 mm,1.8μm),流动相乙腈(A)-含0.08 mol·L-1甲酸铵的0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~5 min,5%~20%A;5~7 min,20%A;7~25 min,20%~25%A;25~30 min,25%~90%A),柱温35℃,进样量10μL,流速0.3 m L·min-1,检测波长254 nm。结果:白芥子与炒白芥子饮片共检出7个共有峰,白芥子炒制后主要色谱峰的峰面积发生显著变化,新生成1个色谱峰a,但其原有色谱峰8~10均消失。黄芥子生品与炒制品有10个共有峰,黄芥子炒制后部分色谱峰的峰面积显著降低,色谱峰11几乎消失。莱菔子与炒莱菔子有6个共有峰,莱菔子炒制后主要色谱峰的峰面积变化显著,色谱峰a消失,新生成2个色谱峰。通过比较白芥子、黄芥子和莱菔子的UPLC图谱,发现3种中药饮片中均归属出其共性成分芥子碱硫氰酸盐,但在主要色谱峰峰面积及数量方面存在显著差异。结论:UPLC建立芥子不同品种及莱菔子生、炒饮片的图谱能全面反映出饮片的物质基础内涵以及炮制前后物质基础的变化规律,为揭示这3种中药饮片炮制原理和进一步诠释含硫代葡萄糖苷类中药饮片炒制共性原理的科学内涵提供实验依据。     

不同益生菌对莱菔子水提取液的发酵研究

目的 比较莱菔子水提取液经不同益生菌及发酵条件发酵前后的变化。方法 采用反相HPLC法,比较莱菔子水提取液经短双歧杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、混合菌和是否加营养发酵前后芥子碱硫氰酸盐和芥子酸的含量变化及指纹图谱。结果 发酵可使芥子碱硫氰酸盐的含量降低,使芥子酸的含量增加,并建立了有15个共有峰的指纹图谱,且相对峰面积变化较大。结论 莱菔子水提取液经发酵后,在含量上会有较大的变化,但并未出现新的化学成分。     

高效液相色谱测定莱菔子总碱中芥子碱硫氰酸盐含量

目的:建立莱菔子总碱中芥子碱硫氰酸盐的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,以乙腈-0.08 mol·L-1KH2P04溶液(12:88)为流动相,流速1.0 mL·min-1进行检测.结果:芥子碱硫氰酸盐线性范围为0.482 ～2.892 μg,平均加样回收率103.63％.结论:该法快速、简便,结果准确、可靠,可用于莱菔子总碱中芥子碱硫氰酸盐的测定.     

莱菔子炮制前后HPLC指纹图谱及主要成分含量变化研究

目的建立莱菔子炮制前后的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,测定萝卜苷和芥子碱硫氰酸盐含量的变化。方法采用Inertsil ODS-3色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水进行梯度洗脱,检测波长225 nm,流速为1.0 mL·min~(-1),柱温30℃,进样量20μL,建立莱菔子生品和炒品的HPLC指纹图谱。通过相似度评价、聚类分析对莱菔子炮制前后指纹图谱进行分析。同时测定萝卜苷和芥子碱硫氰酸盐的含量。结果建立了莱菔子炮制前后甲醇超声提取和水浸回流提取样品的指纹图谱,以芥子碱硫氰酸盐为参照峰,生、炒莱菔子甲醇超声提取样品中标定了9个共有峰,生莱菔子水浸回流样品中标定了12个共有峰,炒莱菔子水浸回流样品中标定11个色谱峰,除莱菔子生品水浸回流样品外,其他几组样品HPLC指纹图谱基本相同,共有峰的相似度均0.95。在生莱菔子水浸回流提取样品中萝卜苷含量显著下降。结论建立的HPLC指纹图谱及含量测定方法具有较好的重现性,两者结合能直观反映莱菔子炮制前后成分的变化,可用于控制莱菔子饮片的质量。     

炮制对黄芥子中芥子碱硫氰酸盐含量的影响

目的:研究不同炮制条件下黄芥子中芥子碱硫氰酸盐含量的变化.方法:采用高效液相色谱法,Kromasil C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.08mol/L磷酸二氢钾溶液(12∶ 88),检测波长326nm.结果:芥子碱硫氰酸盐在0.8 ～4μg范围内具有良好的线性关系,相关系数r=0.9997,平均加样回收率99.23％,RSD为3.12％(n=5).结论:随着炮制温度的提高和炮制时间的延长,黄芥予中芥子碱硫氰酸盐的含量不断降低,其最佳炮制条件为140℃、5～ 10min.     

怀山药炮制前后TLC,UV及HPLC图谱的变化

目前,在我国中药材市场上流通的山药主要为2 0 0 0年版《中国药典》一部所收载的品种薯蓣科植物薯蓣DioscoreaoppositaThunb .的干燥根茎[1] 。山药饮片在历史上曾经有过多种炮制品:土炒、清炒、麸炒、米炒、蜜麸炒等[3 ] ,但现版《中国药典》只收载了生山药及麸炒山药2个品种[1] 。为了探求山药在炮制前后(生山药和麸炒及清炒山药)的成分变化,本实验用薄层色谱、紫外光谱及反相高效液相色谱等方法,对其进行了考察。1　实验材料....     

山茱萸炮制前后的HPLC指纹图谱研究

 目的建立山茱萸炮制前后的高效液相(HPLC)指纹图谱。方法选择山茱萸生、制品各12批,以体积分数80%甲醇溶液超声提取制备溶液,应用Agilent Zorbax C₁₈(4.6mm×250mm,5μm)柱,二极管阵列检测器(DAD),以0.1%磷酸溶液和乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1mL·min^-1,柱温30℃,检测波长240nm。结果山茱萸生品样品中共检测到19个共有色谱峰,可以指认5个共有峰;山茱萸制品样品中共检测到23个共有色谱峰,可以指认6个共有峰。结论从整体上显示生、制品的特征,为山茱萸生、制品的质量控制提供有效手段。     

基于指纹图谱考察不同型号大孔树脂对莱菔子水提液的纯化效果

目的： 考察不同型号大孔吸附树脂对莱菔子水提液的纯化效果。方法： 采用HPLC测定芥子碱硫氰酸盐含量,流动相乙腈（A）-0.1%磷酸（B）进行梯度洗脱（0~15 min,5%~10% A;15~17 min,10%~12.5% A;17~27 min,12.5%~14% A;27~55 min,14%~25% A;55~57 min,25%~70% A;57~70 min,70%~100% A）,检测波长225 nm。以芥子碱硫氰酸盐洗脱率和HPLC指纹图谱共有峰的总有效成分洗脱率为指标,比较各型号树脂纯化效果,筛选最佳型号大孔树脂。结果： 各树脂对芥子碱硫氰酸盐洗脱率的影响顺序为AB-8>NKA-9>HPD100C>HPD400>X-5>HPD750>HPD722>D101>DM130,对总有效成分洗脱率的影响顺序则为HPD400>HPD100C>HPD722>AB-8>NKA-9>HPD750>DM-130>D101>X-5。AB-8型树脂对芥子碱硫氰酸盐的洗脱率达96.39%,对总有效成分的洗脱率70.03%。结论： 采用AB-8型大孔吸附树脂纯化莱菔子水提取液有效成分是可行的。     

煎药器皿对白芥子煎液中芥子碱含量及其特征图谱的影响

目的:比较4种煎药器皿对白芥子煎液中芥子碱含量及煎液特征图谱的影响,为经典名方的开发优选最佳的煎煮容器。方法:选择传统砂锅、陶瓷锅、圆底烧瓶、不锈钢锅4种煎煮器皿,以白芥子煎液中芥子碱含量及煎液的特征图谱为指标,探究不同煎煮器皿对白芥子指标性成分的含量和煎液特征图谱的影响。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004A版)对特征图谱进行相似度评价。结果:传统砂锅、陶瓷锅、圆底烧瓶、不锈钢锅提取的芥子碱质量分数分别为0. 04%,0. 07%,0. 84%,0. 97%。传统砂锅与陶瓷锅、圆底烧瓶、不锈钢锅所制煎液的特征图谱相似度分别为0. 98,0. 82,0. 68;陶瓷锅与圆底烧瓶、不锈钢锅所制煎液的特征图谱的相似度分别为0. 79,0. 62;圆底烧瓶与不锈钢锅所制煎液的特征图谱的相似度0. 97。结论:不同煎煮容器所得白芥子煎液中芥子碱的含量有较大差异,传统砂锅与圆底烧瓶、不锈钢锅所得煎液的特征图谱的相似度较低。     

肝宝胶囊HPLC指纹图谱建立及5种成分同时测定

目的建立肝宝胶囊(青果、虎杖、谷芽等)HPLC指纹图谱,并同时测定5种成分的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Platisil-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温30℃;检测波长305 nm。结果 13批样品指纹图谱中有19个共有峰,相似度大于0.9。没食子酸、芥子碱硫氰酸盐、虎杖苷、白藜芦醇、大黄素分别在45.19～497.05 ng (r=0.999 4)、23.89～262.81 ng (r=0.999 6)、194.26～2 136.81 ng (r=0.999 5)、4.45～48.95 ng (r=0.999 6)、8.82～97.05 ng (r=0.999 6)范围内线性关系良好,平均加样回收率(RSD)分别为99.85%(1.56%)、99.46%(1.98%)、99.97%(1.42%)、98.95%(2.13%)、99.67%(2.01%)。结论该方法简便、稳定、可靠,可用于肝宝胶囊的质量控制。     

炮制抑制莱菔子中萝卜苷酶解转化的初步研究

目的:探索莱菔子炒制前后量变与质变特征成分A209,B221的生成机制.方法:提取、分离、鉴定A209与B221的前体物质C3,C3,并证明它们之间的转化关系.结果:莱菔子中的萝卜苷可在内源性酶作用下生成莱菔子素,莱菔子在不同的煎煮条件下可生成含硫化合物A209,B221.结论:为探讨莱菔子炮制机制提供了一定的实验依据.     

炮制与用法对莱菔子-苦杏仁药对中总成分及芥子碱溶出的影响

目的: 探讨炮制、粉碎、分煎与合煎对莱菔子、苦杏仁及其药对中水、醇溶性总成分,芥子碱,脂肪油溶出的影响. 方法: 采用HPLC测定芥子碱溶出量,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液(15:85),检测波长326 nm;重量法测定水、醇溶性浸出物及脂肪油溶出量.利用GC-MS技术鉴定苦杏仁脂肪酸组成及含量,DB-5石英毛细管色谱柱(0.25 mm×30 m),进样口温度230℃,气化室温度270℃,分流比50:1,程序升温(100~180℃,10℃ ·min^-1;180~200℃,4℃ ·min^-1;200~220℃,1℃ ·min^-1;220~270℃,5℃ ·min^-1),MS条件为EI离子源,70 eV,扫描范围m/z 30~500. 结果: 炮制有利于样品总成分及芥子碱的溶出,其中水溶性成分溶出最高增加9.61%,醇溶性成分141.03%,芥子碱20.00%;粉碎后样品中水、醇溶性成分与芥子碱的溶出量分别增加了0.36~1.85,38.41~62.06,1.40~2.60倍;分煎与合煎对样品中水、醇溶性成分溶出无明显影响,芥子碱溶出量合煎后降低45.16%~68.75%. 结论: 种子类中药如不粉碎不宜采用醇提取或入酒剂,粉碎能显著增加所测成分的溶出量,莱菔子和苦杏仁合煎不利于莱菔子中芥子碱的溶出.依法炮制与合理使用相结合才能确保中药疗效.     

HPLC测定葶苈子炮制前后5个成分的含量变化

目的:建立葶苈子中5个指标成分的HPLC含量测定方法,研究炮制前后葶苈子中5个成分的含量变化规律。方法:采用HPLC同时测定槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷(QGG),芥子酸,槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(QG),异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(IG)和1,2-O-二-芥子酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷(SG)共5个成分的含量,分析炮制前后的含量变化规律及其原因。色谱条件为Waters Symmetry~ C_(18)色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-1%乙酸水溶液(B)梯度洗脱(0～5 min,5%～10%A; 5～15 min,10%～13%A; 15～23 min,13%～20%A; 23～43 min,20%～25%A; 43～46 min,25%A; 46～55 min,25%～40%A; 55～60 min,40%A),流速1 m L·min~(-1),检测波长265 nm,进样量10μL,柱温30℃。结果:上述5个成分炮制前的质量分数分别为0. 114 3%,0. 041 6%,0. 036 2%,0. 022 6%,0. 097 6%;炮制后的质量分数分别为0. 107 4%,0. 011 3%,0. 034 2%,0. 021 9%,0. 058 9%; 5个成分的质量分数分别下降了6. 04%,72. 84%,5. 52%,3. 10%,39. 65%。结论:葶苈子中所含的这5个成分含量经炮制后均有不同程度的降低,其中苯丙素类成分炮制后含量明显下降,而黄酮苷类成分的含量变化则不明显。     

UPLC法分析藤黄炮制前后4种成分的变化

目的建立UPLC法分析藤黄Garcinia hanburyi Hook.f.及其炮制品(高压制、豆腐制、清水制)中藤黄烯酸、表藤黄烯酸、藤黄酸、新藤黄酸含有量的变化。方法该植物乙腈提取液的分析采用UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%甲酸(80∶20);体积流量0.3 m L/min;检测波长360 nm。结果 4种成分在各自范围内均呈良好的线性关系(r0.999 3),平均加样回收率100.9%~103.0%(RSD3.0%)。炮制后,藤黄酸和新藤黄酸的含有量均有所下降,分别在清水、豆腐制品中最低。同时,新生成了藤黄烯酸和表藤黄烯酸,两者含有量在清水制品中最高,高压制品中最低。结论清水制法有利于藤黄烯酸和表藤黄烯酸的生成。     

牡丹皮炮制前后HPLC指纹图谱比较

目的:建立牡丹皮、酒牡丹皮HPLC指纹图谱,并进行比较研究。方法:采用高效液相色谱法,Luna C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.2%磷酸水梯度洗脱,流速0.8 m L·min~(-1),柱温25℃,检测波长230 nm,进样量10μL。结果:牡丹皮、酒牡丹皮HPLC指纹图谱均含有相同的12个共有峰,与其相应的对照图谱的相似度均0.90。炮制前后牡丹皮指纹图谱差异不大,但酒牡丹皮3号和6号峰的峰面积明显增加。结论:该方法准确可靠,为酒牡丹皮进一步研究提供试验依据。     

白术4种炮制品HPLC指纹图谱比较

目的 建立并比较4种白术炮制品高效液相指纹图谱。方法 采用外标法。Dikma Kromasil C18(250 mm × 4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-水梯度洗脱(45 ％~100 ％乙腈),体积流量为1.0 mL/min,柱温25 ℃,检测波长为242 nm。通过中药指纹图谱计算机辅助相似度软件,计算相似度等相关参数。结果 通过对白术4种炮制品指纹图谱的比较分析,各种炮制品共有指纹明显不同。结论 本研究所建立的方法可靠,简便易行,为更好地控制不同白术炮制品质量提供科学依据。     

不同产地牛蒡子药材炮制前后HPLC指纹图谱研究

目的:应用HPLC对不同产地牛蒡子药材炮制前后进行指纹图谱研究。方法:采用Agilent EclipseXDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL.min,检测波长254 nm。结果:炮制对牛蒡子的HPLC指纹图谱模式有影响:生品共有峰有12个,指认了3个峰,炮制品共有峰有19个,指认了3个峰,本实验建立了牛蒡子药材及其制品的HPLC指纹图谱。结论:各产地牛蒡子药材HPLC色谱图中各成分得到了很好的分离,本实验建立的HPLC指纹图谱分析方法可用于区分牛蒡子药材生品及制品,可作为牛蒡子药材的专属性指纹。     

莱菔子水提液中芥子碱硫氰酸盐在大鼠小肠的吸收特性研究

目的 研究莱菔子水提液中芥子碱硫氰酸盐在大鼠小肠的吸收特性。方法 采用大鼠在体单向肠灌流模型,用HPLC法对芥子碱硫氰酸盐质量浓度 进行分析,计算其吸收速率常数和表观吸收系数,分别研究药物质量浓度和P-糖蛋白（P-gp）抑制剂对芥子碱硫氰酸盐吸收的影响。结果 芥子碱硫氰酸盐在大鼠小肠的吸收 速率常数（Ka）和表观吸收系数（Papp）随浓度增加先增加后减小,且芥子碱硫氰酸盐的表观吸收速率小于1.8×10-4 cm·min-1,P-gp抑制剂对芥子碱硫氰酸盐的吸收具有 显著影响（P＜ 0.01）。结论 芥子碱硫氰酸盐在大鼠小肠中的吸收机制可能为主动转运或易化扩散,且其在小肠中的吸收较差,芥子碱硫氰酸盐为P-gp底物。     

丹参炮制前后特征图谱比较研究

目的 采用HPLC法研究山东产丹参炮制前后指纹图谱变化,为科学评价及有效控制其质量提供可靠依据.方法 以80％甲醇为提取溶剂,采用超声方法提取制备供试样品.以Hanbon C18色谱柱为固定相,乙腈:0.1％甲酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长为280 nm,进样量20 μL,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进...