FOXA1基因介导AR在前列腺癌去势抵抗转化中的研究进展

前列腺癌是全球男性继肺癌之后的第二大常见恶性肿瘤,严重威胁着男性健康。随着前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)筛查技术的日益成熟,前列腺癌患者越趋年轻化。前列腺癌是一种雄激素依赖型的恶性肿瘤,雄激素受体（androgen receptor,AR）的异常改变在其去势抵抗转化过程中起重要作用。FOXA1作为FOXA家族基因中的一种转录因子,与前列腺癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤的发生、发展及转移密切相关,研究表明FOXA1基因可通过介导AR通路调控前列腺癌去势抵抗转化。现就FOXA1基因介导AR通路在前列腺癌去势抵抗转化中的作用机制研究进展作一综述。     

去势抵抗性前列腺癌发生、发展及治疗的现状及展望

许多晚期前列腺癌患者通过雄激素剥夺治疗之后发展为去势抵抗性前列腺癌。去势抵抗性前列腺癌发生、发展可能与雄激素受体的表达增加、雄激素受体突变体、雄激素受体磷酸化、雄激素受体剪接变体以及糖皮质激素和糖皮质激素受体、DNA修复途径的损害、microRNA的表达等途径有关。本文介绍了去势抵抗性前列腺癌的雄激素抑制剂、化学治疗剂,免疫疗法、放射治疗及雄激素受体靶向治疗。展望未来,通过对去势抵抗性前列腺癌不断研究,不久将来可以实现“精确”治疗方法。     

雄激素受体在雄激素非依赖性前列腺癌中的作用

前列腺癌是常见的男性恶性肿瘤之一,绝大多数前列腺癌依赖雄激素的刺激,雄激素的作用通过雄激素受体(androgen receptor,AR)介导[1].晚期前列腺癌的治疗通常是通过手术或药物去势去除睾丸产生的雄激素,并使用AR拮抗剂(称为最大雄激素阻断疗法).雄激素去势治疗后复发的前列腺癌(被称为雄激素非依赖性前列腺癌)只有一小部分对再次激素治疗有反应,且这种反应通常很微弱,持续时间短.尽管如此,绝大多数雄激素非依赖性前列腺癌表达AR,AR呈现出转录活性且可能是肿瘤细胞生长所必需的[2].因此,尽管这些肿瘤在临床上表现为雄激素非依赖性,但是它们似乎保留了雄激素受体依赖性.现将对雄激素非依赖性前列腺癌中雄激素受体的作用及其机制进行综述.     

前列腺癌的去势抵抗机制

前列腺癌是男性最常见的泌尿生殖系统的恶性肿瘤,去势治疗后肿瘤细胞常呈现去势抵抗特性。雄激素 受体变异、再活化及肿瘤微环境改变等是前列腺癌进展成为去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate carcinoma, CRPC)的主要病理因素。系统性分析和理解前列腺癌的去势抵抗机制是构建CRPC的精准治疗策略的基础。     

去势抵抗性前列腺癌形成机制的研究进展

前列腺癌是男性最常见的恶性实体肿瘤之一,去势治疗是其主要的初期治疗手段,但其中大部分患者仍会复发、转移及进展为去势抵抗性前列腺癌。机体通过多种途径再激活雄激素受体(AR),如AR基因扩增及过度表达、AR的突变、AR共抑制因子及共激活因子的相互作用、生长因子及细胞因子介导的信号通路的加强、AR剪接变异体的作用等确保了AR在持续低水平雄激素的环境下仍能发挥重要功能。肿瘤干细胞可能是前列腺癌耐药、转移、复发及出现放射性耐受的主要原因。前列腺癌细胞发生神经内分泌分化可能是肿瘤细胞对药物抵抗的一种自身反应,而神经内分泌化分细胞的过度增殖导致神经内分泌前列腺癌的发生。     

雄激素受体参与去势抵抗性前列腺癌发生机制的研究进展

前列腺癌是老年男性多发的恶性肿瘤之一,去势治疗即雄激素剥夺疗法(ADT)成为目前治疗晚期前列腺癌的常用手段。然而随着疗程的推进,治疗效果越来越差,肿瘤会进一步发展为去势抵抗性前列腺癌(CRPC)。雄激素受体(AR)是雄激素与前列腺癌细胞结合、发挥激素生物活性、促进前列腺癌组织生长的必要物质,其在ADT治疗前列腺癌过程中起至关重要的作用。目前研究认为,AR及其介导的相关通路参与了CRPC的发生,但其具体表现及相关机制尚未完全研究清楚。本文将结合最新研究,对AR参与CRPC发生的途径及机制进行综述。     

应用基因芯片技术筛选前列腺癌雄激素去势抵抗相关的基因

目的利用基因芯片技术高通量筛选前列腺癌雄激素去势抵抗相关的基因,为研究雄激素去势抵抗进展及前列腺癌的分子机制奠定基础。方法提取并纯化LNCaP及C4-2细胞的总mRNA,反转录合成荧光分子标记的cDNA,与基因芯片杂交;采用Genepix Pro6.0图像分析软件分析,筛选表达差异的基因;KEGG富集分析每个pathway中差异基因富集的显著性。结果在表达谱芯片中筛选出417个差异表达的基因,包括301个C4-2细胞中表达上调的基因,116个表达下调的基因;KEGG富集分析显示与前列腺癌相关表达差异的基因有GF、EGFR、HSP、BAD、P21、E2F、Raf、CyclinE、PSA、PI3K等,其中EGFR、Raf、PSA表达差异最明显。结论 EGFR、Raf、PSA基因的表达异常可能在雄激素去势抵抗型前列腺癌的形成过程中发挥着重要的作用,本研究为前列腺癌去势抵抗进展的分子机制的探索提供了理论依据。     

基因芯片技术筛选前列腺癌雄激素去势抵抗相关基因

目的利用基因芯片技术高通量筛选前列腺癌雄激素去势抵抗相关基因,为研究雄激素去势抵抗进展前列腺癌的分子机制奠定基础。方法提取并纯化LNCaP及C4～2细胞的总mRNA,反转录合成荧光分子标记的cDNA,与基因芯片杂交;采用Genepix Pr06．0图像分析软件分析,筛选表达差异的基因;KEGG富集分析每个pathway中差异基因富集的显著性。结果在表达谱芯片中筛选出417个差异表达基因,包括301个C4～2细胞中表达上调基因,116个表达下调基因;KEGG富集分析显示,与前列腺癌相关的表达差异的基因有GF、EGFR、HSP、BAD、P21、E2F、Raf、CyclinE、PSA和Pj3K等,其中EGFR、Raf表达差异最明显。结论EGFR、Raf基因表达异常可能在雄激素去势抵抗型前列腺癌的形成过程中发挥着重要作用,本研究为前列腺癌去势抵抗进展分子机制的探索提供了理论依据。     

自噬与前列腺癌发生发展及治疗关系的研究进展

前列腺癌的发生、发展与不同的生物学机制密切相关,其中包括自噬。自噬是一种进化上保守的动态分解代谢过程,其形成包括引发、成核、伸长以及密封,过度或缺乏自噬都可能有助于疾病的发生,自噬可作为前列腺癌的启动子或抑制剂发挥作用,雄激素通过雄激素受体,利用自噬可促进前列腺癌细胞生长。自噬在前列腺癌的治疗中也具有重要作用,参与雄激素去势、化疗、放疗以及天然化合物等治疗过程。通过研究这些过程的分子机制,可为前列腺癌得治疗提供新的思路。     

前列腺癌新型内分泌治疗药物开发的价值与展望

雄激素受体(androgen receptor, AR)信号通路的激活在前列腺癌的发生、发展中起着重要作用,阻断雄激素信号通路是前列腺癌内分泌治疗的关键。以阿比特龙和恩杂鲁胺为代表的新型内分泌治疗药物,具有靶向抑制雄激素-AR信号轴的功能,是去势抵抗性前列腺癌的一线治疗药物。然而,随着治疗时间的延长,药物耐受不可避免,其中雄激素-AR信号轴在不同疾病阶段的功能变化是药物耐受的主要原因之一。明晰前列腺癌不同疾病阶段雄激素的合成途径,关注药物耐受后雄激素-AR信号轴的相关变化,寻找耐药后进一步治疗的潜在靶点,将为疾病的治疗提供方向。     

PCa患者前列腺与睾丸组织中AR表达相关性

目的探讨雄激素受体（AR）在前列腺癌（PCa）患者前列腺组织与睾丸组织中的表达情况。方法16例PCa患者,于前列腺切除术（或前列腺穿刺活检）后行双侧睾丸切除,按临床分期、病理分级、年龄分组,采用免疫组化方法分析各组织AR表达情况。结果前列腺组织AR表达：早期组表达低于晚期组（P〈0.05）;低分化组表达高于其它病理分级组间（P〈0.01）;AR表达与临床分期及病理分级正相关（P〈0.05）。睾丸组织中早期组AR表达高于晚期（P〈0.05）,AR表达与临床分期负相关（P〈0.05）;前列腺与睾丸组织AR表达间无相关性（P〉0.05）。结论 PCa患者前列腺与睾丸组织间AR表达彼此独立;前列腺AR阳性表达程度与PCa分级、分期有关,其睾丸AR阳性表达程度PCa分期有关,对判断PCa生物学行为有参考价值。     

VCL在诊断前列腺癌及判断恶性程中的作用

目的 探讨黏着斑蛋白( vinculin,VCL)在诊断前列腺癌及判断恶性程度的作用.方法 应用基因芯片筛选出在前列腺癌与前列腺增生组织特异性表达的基因VCL,免疫组化技术检测VCL蛋白在前列腺癌与癌旁组织中的表达,结合VCL免疫组化评分和前列腺癌患者的临床病理参数进行分析.结果 通过免疫组化染色,我们发现VCL在癌旁组织中的表达明显强于前列腺癌组织(P=0.002),在前列腺癌并转移组织中的表达亦明显强于原位前列腺癌组织(P =0.003).VCL表达与前列腺癌患者血清PSA水平(P=0.011)、Gleason score(P =0.003)和肿瘤TNM分期(P=0.014)负相关,与前列腺癌转移(P=0.000)正相关,而与患者年龄(P=0.685)无明显相关.结论 VCL低表达与肿瘤的恶性程度相关,VCL缺失可能导致恶性肿瘤细胞迅速生长,可结合血清PSA水平对前列腺癌疑似患者进行早期诊断及初步判断肿瘤恶性程度.     

前列腺体积和前列腺特异性抗原密度与前列腺癌检出率的关系

【目的】 探讨经直肠超声引导的前列腺穿刺中前列腺体积(PV)、前列腺特异性抗原密度(PSAD)与前列腺癌(Pca)检出率之间的关系。 【方法】 分析2008年7月至2011年5月间在我院行前列腺穿刺262例患者的临床资料,了解PSAD、PV与Pca检出率之间的关系。所有穿刺病例在行穿刺术前均行前列腺特异性抗原(PSA)、直肠指诊(DRE)及经直肠超声(TRUS)扫描测量PV水平并计算得出前列腺特异性抗原密度(PSAD)。 【结果】在总计262例前列腺穿刺的病例中,有101例经病理确诊为Pca,检出率为38.55%。PV分段检出率:PV小于20 mL的Pca检出率为53.33%(8/15);PV在20 mL至30 mL之间检出率为72.73%(24/33);PV在30 mL至50 mL之间的检出率为36.26%(33/91);PV超过50 mL的检出率为29.27%(36/123)。以PSAD = 0.15 ng/mL2为界点,诊断Pca的敏感度47%,特异度90%。【结论】随着PV的增大, Pca的检出率会逐渐下降,所以根据PV大小合理确定穿刺针数,可以提高Pca的检出率,减少漏诊的可能。     

miR-221通过作用DVL2影响前列腺癌细胞系的侵袭功能

目的 评价miR-221在前列腺癌细胞系中表达的变化对其神经内分泌样转化及其侵袭功能的影响.方法 以Northern blot检测LNCaP和LNCaP-AI两种前列腺癌细胞系中7种microRNA的表达变化;细胞转染法检测在雄激素剥夺环境中LNCaP和LNCaP-AI细胞系中miR-221的作用;CCK-8法检测细胞在不同阶段的生长增殖水平;Transwell法检测转染细胞的侵袭能力;qRT-PCR和Western blot检测转染的细胞中神经元特异性烯醇化酶(NSE)及dishevelled-2(DVL2)表达的变化.结果 与雄激素依赖性前列腺癌(AD-PC)的细胞系LNCaP相比,miR-221在雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC)的细胞系LNCaP-AI中明显高表达.通过转染使miR-221在LNCaP细胞系中高表达可促进细胞的NSE表达,加速其神经内分泌样分化.而在LNCaP-AI细胞系中下调miR-221水平则会升高靶基因DVL2的表达水平,并增强LNCaP-AI细胞的迁移和侵袭能力.结论 该实验证实在AIPC和ADPC细胞系中miR-221存在表达差异.miR-221可促进前列腺癌细胞的神经内分泌样转化,这可能是导致前列腺癌雄激素非依赖转化的重要原因.MiR-221可通过作用DVL2调节晚期前列腺癌细胞的转移和侵袭.     

CD133和CD44在前列腺癌中的表达及意义

目的 探讨CD133和CD44在前列腺癌中的表达及意义.方法 72例前列腺癌组织标本作为病例组,以33例正常前列腺组织作为观察组,应用免疫组织化学技术检测二组CD133和CD44的表达,并分析其不同临床病理特征中表达的差异.结果 观察组中CD133和CD44的表达阳性率均明显高于对照组,差异均有显著的统计学意义(P＜0.01),CD133和CD44的表达与前列腺癌病理分级分级,临床分期,远处转移等指标密切相关(P＜0 05).结论 前列腺癌中CD133和CD44异常表达,二者在前列腺癌中发挥重要作用.     

超声弹性成像与磁共振弥散成像引导穿刺活检前列腺癌诊断的对比研究

【目的】对比分析经直肠超声实时弹性成像（TRTE）和磁共振弥散成像（DWI）对前列腺癌的诊断效能,探讨两者靶向引导前列腺穿刺活检的价值及与Gleason评分之间的关系。【方法】选取126例疑诊为前列腺癌的患者,穿刺活检前均行TRTE和DWI检查,结合病理结果比较TRTE和DWI对前列腺癌的诊断效能,评估两者引导前列腺穿刺活检的准确性,分析超声弹性评分和ADC值与Gleason评分之间的相关性。【结果】TRTE诊断前列腺癌的敏感度、特异度和准确性为78.8%、78.3%和78.6%,DWI诊断前列腺癌的敏感度、特异度和准确性为87.9%、90%和88.9%,两两比较敏感度与特异度均无统计学差异（P>0.05）,准确性比较差异有统计学意义（P<0.05）;超声弹性评分和ADC值判断前列腺癌的ROC曲线下面积分别为0.859、0.906,ADC值具有更高的诊断价值,但差异无统计学意义（P＞0.05）;前列腺癌患者Gleason评分与超声弹性评分呈正相关,与ADC值呈负相关。【结论】TRTE及DWI对前列腺癌均有较好的诊断能力,有助于提高前列腺癌的穿刺检出率,并能为肿瘤恶性程度的判定提供依据。     

瘦素与前列腺癌激素依赖性关系的研究

目的观察瘦素对前列腺癌细胞增殖的促进作用,探讨其与前列腺癌激素依赖性的关系。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测瘦素作用不同时间后雄激素依赖性前列腺癌细胞株22RV1和雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3的增殖率;用MTT法检测不同浓度瘦素及双氢睾酮(DTH)作用后前列腺癌细胞株22RV1和PC-3的增殖率。结果瘦素作用于PC-3细胞不同时间后吸光度(OD值)均明显增高(P<0.05),在48 h达到顶点;且随瘦素浓度逐渐增高,其促进PC-3细胞增殖率亦逐渐增高;而瘦素对22RV1细胞作用不同时间后OD值增高不明显(P>0.05)。DTH对22RV1细胞增殖作用最明显,增殖率随其浓度增高而逐渐升高,但其促进PC-3细胞增殖率明显较低(P<0.01)。结论瘦素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞增殖具有明显的选择性促进作用,其可能与前列腺癌雄激素非依赖性的发生发展有密切关系。     

泛素连接酶WWP1和Smurfs在前列腺癌组织中的表达及其与骨转移的关系

目的探讨泛素连接酶E3 WWP1(WW domain containing E3 ubiquitiin pProtein ligase 1)、Smurf1(smad ubiquitination regulatory factor 1)、Smurf2在前列腺癌骨转移中的作用。方法采用免疫组织化学法和实时定量PCR法分别对良性前列腺增生(对照组)、前列腺癌不伴骨转移患者(无转移组)及前列腺癌伴骨转移患者(转移组)前列腺癌组织中泛素连接酶E3 WWP1、Smurf1、Smurf2进行检测。结果与对照组相比,前列腺癌患者肿瘤组织中泛素连接酶E3 WWP1、Smurf1、Smurf2免疫组织化学染色累积光密度值及mRNA表达显著增高,且具有统计学意义(P<0.05);与无转移组相比,转移组患者前列腺癌肿瘤组织中泛素连接酶E3WWP1、Smurf1、Smurf2免疫组织化学染色累积光密度值及mRNA表达显著增高,且具有统计学意义(P<0.05)。结论泛素连接酶E3 WWP1、Smurf1、Smurf2表达增高是前列腺癌发生发展及侵袭转移过程中的可能机制之一。     

嗜铬粒蛋白A与去势抵抗性前列腺癌的相关性研究

目的  探讨嗜铬粒蛋白A（CgA）与去势抵抗性前列腺癌（CRPC）的相关性。方法  选取2011年1月-2012年8月于川北医学院附属医院经前列腺穿刺活检证实为前列腺癌的75例组织标本,以免疫组织化学方法检测CgA在穿刺标本中的表达情况,分析CgA表达率与前列腺癌各临床病理参数的关系,并比较CgA表达阳性组与阴性组发展至CRPC的差异。结果  75例前列腺癌穿刺标本中,36例CgA表达阳性（48.0%）。CgA的表达与PSA水平、Gleason评分以及临床分期有关（P <0.05）,CgA阳性组发展至CRPC的发生率明显高于CgA阴性组（P <0.01）。结论  CgA与CRPC的发生密切相关。监测CgA的表达情况,对前列腺癌的内分泌治疗效果的预测可能有一定的临床指导意义。

     

Real-time PCR判断前列腺癌盆腔淋巴结微转移的价值

目的 确定实时定量PCR(Real-time PCR)判断新辅助治疗后前列腺癌盆腔淋巴结微转移的价值.方法 对54例临床诊断T2c-T3a的前列腺癌患者行足背淋巴管造影,对无明显淋巴结转移者行3个月新辅助治疗,根治性前列腺切除术前在X线萤光屏监视下,对盆腔可疑癌转移淋巴结行经皮穿刺抽吸淋巴液,用real-time PCR方法检测淋巴液内PSAmRNA和PSMAmRNA的表达,与同法抽取淋巴液的6例女性因膀胱癌行根治性全膀胱切除检测结果作对照,阳性表达示前列腺癌淋巴结转移.同时与术中所取淋巴结组织切片行病理和免疫组化检查结果相比较.结果 术前在可疑癌转移淋巴结抽吸液行Real-time PCR方法检测PSAmRNA和PSMAmRNA的表达中,显示23例淋巴结存在癌转移,而病理切片免疫组化检查中仅有6例淋巴结癌转移.结论 前列腺癌经新辅助治疗后,由于病理检查有时难以发现变性的前列腺癌细胞以致于漏诊,采用Real-tine PCR方法检测淋巴结抽吸液内PSA和PSMA基因表达有利于探测新辅助治疗后前列腺癌淋巴结微转移的存在,为前列腺癌术前临床分期提供可靠的诊断依据.