遗传性胎儿血红蛋白持续症和δβ-地中海贫血

在血红蛋白合成的遗传性疾病中,以成年期胎儿血红蛋白(HbF)增加为特征的那些疾病,在帮助我们了解红细胞内珠蛋白基因表现的调控方面具有很大的重要性。在这些疾病中,δβ-地中海贫血和遗传性胎儿血红蛋白持续症(Hereditary persistence of fetal haemo-globin,HPFH)在杂合子状况下就可有 HbF的增加,它们与其它一些伴有 HbF 增高的遗传性疾病如β-地中海贫血、镰状细胞性贫血等不同,后者在杂合子时 HbF 仅轻微升高。其纯合子的 HbF 升高可能是一种继发效应,而不是原发性遗传性缺陷的直接结果。HbF 通常包括两种类型γ链的混合物,它们的不同仅仅是在136位上是甘氨酸(Gγ)还是丙氨酸(Aγ)。Gγ和 Aγ链是不同基因的产物,这些基因与调控 HbA 和 HbA_2之β和δ链的基因以 GγAγδβ的顺序相环联。已经报告了各种类型的δβ-地中海贫血和 HPFH,它们在HbF 产生量和两种类型γ链的相对比例上不同。近来用溶液杂交和核酸内切限制酶图象的方法分析了 HPFH 或δβ-地中海贫血患者的DNA,发现某些这类疾病是由于珠蛋白基因     

β-珠蛋白生成障碍性贫血患者血红蛋白F表达与BCL11A基因rs11886868位点单核苷酸多态性的关系

本研究通过分析β-珠蛋白生成障碍性贫血患者的血红蛋白F(HbF)表达及BCL11A基因rs11886868位点的单核苷酸多态性,探讨二者之间的关系。选取89例已知基因突变类型的轻型β-珠蛋白生成障碍性贫血患者,通过毛细管电泳分析患者的红细胞HbF含量;提取患者基因组DNA,通过聚合酶链反应扩增含rs11886868位点的BCL11A基因片段,用DNA测序法确定rs11886868位点的单核苷酸多态性。结果显示,在89例深圳地区β-珠蛋白生成障碍性贫血患者的BCL11A基因rs11886868位点中发现C和T两种单核苷酸多态性;携带C/C单倍型患者的红细胞HbF含量为(4.47±3.42)%,高于携带C/T单倍型患者的(2.79±2.21)%。结论:β-珠蛋白生成障碍性贫血患者BCL11A基因rs11886868位点存在C和T两种单核苷酸多态性,其中C多态性可能与红细胞内HbF高表达存在相关性。     

β-地中海贫血研究对象B细胞淋巴瘤因子11A基因rs4671393、rs766432位点检测分析

目的 检测β-地中海贫血患者B细胞淋巴瘤因子11A(BCL11A)基因rs4671393、rs766432位点的多态性并研究其与胎儿血红蛋白（HbF）水平的相关性,为临床提供参考。方法 选取2020年1月至2021年6月深圳市宝安区石岩人民医院收治的120例β-地中海贫血患者设为观察组,另选取同期院内100名健康体检者设为对照组,进行回顾性分析。采集两组研究对象外周血2mL,进行血红蛋白电泳检测HbF;提取血液基因组DNA,PCR扩增,分析BCL11A目的基因rs4671393、rs766432位点多态性PCR限制性片段长度多态性,并对扩增产物进行DNA测序验证酶切结果。比较两组研究对象的rs4671393、rs766432位点基因型与等位基因频率;分析BCL11A基因rs4671393、rs766432位点不同基因型与HbF的相关性。结果 观察组研究对象rs4671393位点AA基因型、A等位基因频率高于对照组（P<0.05）,观察组研究对象rs766432位点CC基因型、C等位基因频率较高于对照组（P<0.05）,经Spearman检验,BCL11A基因rs467139...     

抗胎儿血红蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定

目的 制备和鉴定抗胎儿血红蛋白(fetal hemoglobin,HbF)单克隆抗体(mAb),为相关疾病的研究提供支持与工具.方法 用脐带血红细胞裂解物免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(NS-1)融合制备杂交瘤,经筛选和三次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体.用ELISA以及western blot等方法鉴定单克隆抗体的特性(效价、Ig亚类、特异性以及亲和力).结果 筛选到3株可稳定分泌抗HbF单克隆抗体的杂交瘤细胞6A5、5C8、2C8,腹水效价分别为1×10-6、 2×10-6和4×10-6.单抗亚类均为IgG1,抗体亲和力分别为7.8×109、2.2×108和8.6×109.ELISA和western blot结果显示,6A5、5C8、2C8 mAb只与HbF的二聚体特异性结合,与其他类型血红蛋白不发生交叉反应.结论 获得3株能特异性识别HbF的高亲和力mAb,可结合二聚体与单体HbF,为临床检测HbF水平及相关研究提供了有效的工具.     

中国型Gγ+(Aγδβ)0地中海贫血的基因诊断和临床特征分析

目的 对42例中国型Gγ+(Aγδβ)0地中海贫血患者进行基因诊断并分析其临床特征.方法 所有患者的外周血标本进行血红蛋白毛细管电泳和包括平均红细胞体积(mean corpuscular volume,MCV),平均血红蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)等红细胞参数的分析,应用Gap-PCR、PCR-RDB的方法进行地中海贫血基因检测. 结果 40例患者为中国型Gγ+(Aγδβ)0杂合子,血红蛋白正常或轻度下降,血红蛋白分析显示HbF为10.6％～20.6％;2例为中国型Gγ+(Aγδβ)0合并其它常见的β地中海贫血,表现为中重度的贫血,HbF为80.8％～ 93.1％. 结论 中国人群中中国型Gγ+(Aγδβ)0是比较常见的缺失型β地中海贫血类型,其杂合子临床症状较轻,当合并其他地中海贫血时可改变原有的血液学表现.     

血液病患者抗碱血红蛋白测定及其临床意义的初步探讨

本文报道正常人50名和各种血液病患者114例抗碱血红蛋白(HbF)的检测结果。其中各型白血病、再生障碍性贫血(再障)、β型地中海贫血(地贫)、粒细胞减少症,继发性铁粒幼细胞贫血等的HbF均值均与正常对照组有显著差异。而缺铁性贫血、巨细胞性贫血、肾性贫血、血小板减少性紫癜的HbF均值与对照组无显著性差异。结合复习有关文献,初步提出HbF值测定对各种血液病的临床意义。探讨了在白血病、再障等疾惠时,HbF升高的机理。     

反相高效液相层析技术用于新生儿~A γ~T基因频率分析

为检测贵州省苗族新生儿血红蛋白中的A T 变异体 ,以便进一步分析变异个体的基因型 ,首先必须用适当的方法检测出新生儿脐带血HbF中的A T 链。介绍用反相高效液相层析技术 (RHPLC)检测人类HbF中的A T 链 ,所用主要试剂乙腈为国内产品。该检测方法具有程序化、自动化、灵敏度高     

Hb Lepore-BW伴发IVS-II-654杂合变异的诊断及产前筛查的临床意义

目的:鉴定四川地区罕见Hb Lepore-BW伴发IVS-Ⅱ-654杂合变异的病例.方法:采用血常规和血红蛋白电泳方法分析先证者及其父母的外周血和孕妇脐血的血常规参数、血红蛋白A2(HbA2)和血红蛋白F(HbF);采用地中海贫血基因检测和Sanger测序方法分析并鉴定先证者及其父母和孕妇脐血的血红蛋白突变.结果:检测...     

MTHFR基因多态性与脊髓亚急性联合变性的相关性分析

目的　探讨5,10- 亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因C677T 位点和A1298C 位点多态性与脊髓亚急性联合变性（SCD）的关系。方法 选择2017 年1 月～ 2020 年7 月于宝鸡市中心医院神经内科诊治的85 例SCD 患者作为病例组,另外募集100 例健康体检者作为对照组。采用荧光定量PCR 法检测MTHFR 基因C677T和A1298C 位点多态性,比较各组两位点基因型和等位基因频率,分析两位点多态性与SCD 发病的相关性。结果　病例组C677T 位点TT 基因型和T 等位基因频率均高于对照组（χ2=10.527,11.144,均P ＜ 0.05）,A1298C 位点CC 基因型和C 等位基因频率均高于对照组（χ2=6.575,6.076,均P ＜ 0.05）,差异均有统计学意义。C677T位点和A1298C 位点基因多态性均与同型半胱氨酸水平增高密切相关（χ2=19.625,10.786,均P ＜ 0.05）;与血清VitB12 和叶酸水平均无明确相关性（χ2=1.827~5.549,均P ＞ 0.05）。多因素分析示携带C677T 位点TT 基因型是SCD 发病的独立危险因素（OR=2.768,95% CI:1.487~5.516,P=0.005）,A1298C 位点基因多态性与SCD发病无明确相关性（OR=2.190,95% CI:0.958~5.004,P=0.067）。结论　MTHFR 基因C677T 位点突变与SCD发病密切相关。     

临床前期主观认知功能下降的研究现状

<正>痴呆严重影响老年人的生活质量,阿尔茨海默病(AD)是痴呆的主要类型,β淀粉样蛋白(Aβ)被认为在AD的进展中发挥着重要作用~([1])。主观认知功能下降(SCD)是从认知正常到轻度认知障碍(MCI)需要经历的阶段,对SCD的研究有望为AD的早期识别、早期干预提供帮助。本文对SCD的概念、诊断、研究方法等进行综述。     

毛细管电泳筛查小儿β地中海贫血的应用研究

目的:探讨毛细管电泳在小儿β地中海贫血筛查中的价值,并建立本实验室HbA2、HbF的截断值。方法:分析886例血红蛋白电泳的结果以及它们对应的β地中海贫血基因结果,通过ROC曲线确定HbA2、HbF的截断值。结果:HbA2筛查轻型β地中海贫血的截断值是3.65%,特异度是0.996,敏感度是0.995。HbF筛查轻型β地中海贫血的截断值是1.45%,特异度是0.751、敏感度是0.675;由此还检出了1例Codon5(CCT→C)突变、1例SEA-HPFHβ缺失、1例-28(A→G)合并IVS-Ⅰ-128(T→G)双重杂合突变、1例尚未见报道47bp的β缺失。结论:毛细管电泳在筛查小儿β地中海贫血中具有较高的灵敏度和特异性,尤其是对罕见β地中海贫血的检测具有重要意义。     

乙肝相关肝癌患者肝组织硬脂酰辅酶A脱氢酶的表达与预后的相关性

目的:探讨乙肝相关肝癌组织中硬脂酰-辅酶A脱氢酶(stearoyl-CoA desaturase,SCD)的表达水平及临床意义。方法:构建176例距离肝癌边界3cm以上肝组织的组织芯片,应用免疫组化技术检测SCD的表达水平,并分析其与临床病理学特征之间的关系。结果:SCD在乙肝相关肝癌患者肝组织中的阳性率为85.80%(151/176)。且肝组织中SCD表达量与肿瘤数目、微血管侵犯、肝硬化等相关(P0.05),SCD高水平表达组患者无瘤生存时间和总体生存时间均短于SCD低水平表达组。结论:SCD在乙肝相关肝癌患者肝组织中的表达量与临床病理及不良预后之间存在一定联系,提示肝癌患者肝组织中SCD的表达量可以作为不良预后的标志物。     

DBBF修饰提高人脐带血红蛋白P_(50)的理化条件研究

目的提高人脐带血血红蛋白(Hb F)P50以使血红蛋白(Hb)能更好地向组织供氧。方法采用双(3,5-二溴水杨基)延胡索酸酯(DBBF)修饰人脐带血血红蛋白(Hb F)提高P50到血液生理值26 torr,以影响修饰反应溶液的pH、HbF浓度以及DBBF与Hb F反应的摩尔比为3个主要条件,血氧分析仪测定氧合曲线得到P50和希尔系数,按三者各自较佳反应条件试验得到DBBF修饰后HbF最优工艺,检测其所得样品P50、希尔系数及波尔效应等。结果Hb的底物浓度为7 g/d L,反应溶液p H为8.00,DBBF与HbF反应的摩尔比为2∶1,能提高HbF的P50接近血液生理值26 torr。结论筛选修饰工艺中反应溶液的pH、Hb浓度及DBBF与Hb F反应的摩尔比等3个条件,可使DBBF修饰提高HbF的P50,有助于修饰后HbF能更好地向组织供氧。     

肇庆地区β-珠蛋白生成障碍性贫血基因突变分析

目的分析肇庆地区β-珠蛋白生成障碍性贫血基因突变类型。方法收集2014年5月至2017年6月肇庆地区7 350例血液标本,检测血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、红细胞平均容积(MCV)、血红蛋白A2(HbA2)、胎儿血红蛋白(HbF)呈阳性且HbA2和(或)HbF大于该年龄段上限值的标本,采用PCR-反向斑点杂交(PCR-RDB)方法同时检测17种中国人常见的β-珠蛋白生成障碍性贫血的基因突变确定基因型,PCRRDB法不能确诊的基因突变,采用基因直接测序法确定。结果 432例β-珠蛋白生成障碍性贫血标本,421例为轻型,11例为重型,共484条11号染色体携带β-珠蛋白缺陷基因,检出22例10种少见的β-珠蛋白生成障碍性贫血基因突变,其中CD43(G→T)7例,IVS-I-1(G→T)和-29(A→G)各3例,CD27/28(+C)和CD14-15(+G)各2例,CAP[CAP+1(A→C)/nts40-43(-AAAC)]、CD31(-C)、CD113(GTG→GAG)、-90(C→T)、CD37(TGG→TAG)各1例。结论肇庆地区β-珠蛋白生成障碍性贫血基因突变类型较多,人群筛查、诊断和产前诊断应予以高度重视。     

中华医学会超声医学分会超声心动图学组中国超声医学工程学会超声心动图专业委员会

正是最常见的遗传性心血管疾病,约40%～60%的HCM患者是由编码心肌肌小节收缩蛋白的基因突变引起,目前报道至少有27个基因中发现超过1400多个位点的突变与HCM发病有关,其中最主要致病基因是编码肌小节粗肌丝的β肌球蛋白重链(β-MHC)基因(MYH7)和编码心脏型肌球结合蛋白C(cMYBPC)的基因(MYBPC3)[1-2]。HCM临床表现具有高度异质性,患者或无明显症状或症状轻微,或早期就出现明显的心肌肥厚、症状严重,甚至发生心力衰竭、心源性猝死(sudden cardiac death,SCD)等严重后果,是青少年和运动员SCD的首要原因[3]。HCM早期精准诊断是正确治疗和预防猝死的关键。     

高效液相色谱法测定HbF的临床实验评价

目的对高效液相色谱法(HPLC)测定HbF进行临床实验评价。方法用日本TOSOH公司生产的HLC723G7(简称G7)全自动糖化血红蛋白分析仪(分析原理为HPLC)的β模式测HbF,与抗碱变试验法测得HbF含量进行比较;并对该方法精密度、线性、抗干扰性等指标进行实验。结果共测定标本77份,其中成人及儿童标本42份,检出HbF高于正常值(含量>3.1%)的标本17例。该方法精密度测定CV在1.9-3.2%之间;线性良好,回归方程y=0.9915x-0.03704,与碱变性试验的相关性良好γ=0.9900;HbF的线性范围可达35.8%;胆红素浓度在250μmol/L,甘油三脂浓度在22.0mmol/L以下时对测定结果无影响。但是对35例新生儿标本的检测表明,HbF与碱变性试验结果不符,仪器测定结果均为0,碱变性试验结果为65.02±11.69%。结论高效液相层析法测定HbF,对成人及儿童β地中海贫血检查有良好的效果,能很好地分辨出增高的HbF,重复性好,不受脂浊、黄胆标本的干扰,且检测速度快。但G7对新生儿HbF的测定尚存在不足之处,如果对仪器分析软件进行调整,则对新生儿的HbF含量也可以定量。     

高效液相色谱法测定Hb F的临床实验评价

目的就高效液相色谱法(HPLC)测定HbF进行临床实验评价。方法用全自动糖化血红蛋白分析仪G7(分析原理为HPLC)的β-模式测定HbF,与抗碱变试验法测得HbF含量进行比较;并对该方法精密度、线性、抗干扰等指标进行实验。结果共测定标本77份,其中成人及儿童(除新生儿外)42份,用本法检出HbF高于正常值(含量>3.1%)共17例。该方法精密度CV1.9%~3.2%之间;与碱变性试验的相关性良好γ=0.9900;回归方程为y=0.9915x-0.03704,HbF的线性范围可达35.8%;胆红素在250μmol/L,三酰甘油22.0mmol/L以下时对测定结果无影响。但是对35例新生儿标本的检测表明,HbF在HPLC法与碱变性试验结果不符,HPLC法测定结果均为0,碱变性试验结果为65.02±11.69%。结论全自动糖化血红蛋白分析仪G7测定HbF,对成人及一般儿童能很好检测,且检测速度快。但G7对新生儿HbF的测定需对仪器分析软件进行调整,才可以正确定量。     

血红蛋白电泳及地中海贫血基因联合检测对地中海贫血诊断价值探讨

选取2014年1月~2016年5月在我院接受婚检、产检的疑似地中海贫血患者200例。所有患者均接受血红蛋白电泳检测、地中海贫血基因检测,比较α-地中海贫血、β-地中海贫血以及阴性标本中HbA、HbA2、HbF,并比较血红蛋白电泳、血红蛋白电泳联合基因检测的阳性检出率。结果α-地中海贫血、β-地中海贫血的HbA、HbA2、HbF与阴性标本相比,均具有统计学意义(P0.05)。血红蛋白电泳联合基因检测对α-地中海贫血的检出率较单一的血红蛋白电泳检测更高(P0.05),对β-地中海贫血无统计学差异(P0.05)。采用血红蛋白电泳联合地中海贫血基因检测对地中海贫血进行诊断,可有效检出地中海贫血。     

HbF变异体对三种不同HbAlc检测系统的干扰评价

目的评价血红蛋白变异体F(HbF)对三种糖化血红蛋白(HbA1c)检测系统测定结果的干扰。三种方法分别为离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)、硼酸盐亲和层析高效液相色谱法(AC-HPLC)和免疫抑制比浊法。方法分别用三种检测系统检测血红蛋白结构正常标本及含有胎儿血红蛋白(HbF)的标本,依据美国国家糖化血红蛋白标准化计划(NGSP)的判定标准,对检测结果进行比对分析和偏倚评估。结果以Primus Ultra2(AC-HPLC)为比较系统,IE-HPLC和免疫比浊法为检测系统,两种检测系统与比较系统检测正常样品HbA1c值的相关性良好。当HbF≤8.75%时,IE-HPLC测定结果与比较系统偏差6%;HbF为17.50%时,IE-HPLC测定结果与比较系统偏差6%;当HbF浓度达35.00%~70.00%时IE-HPLC无法检测出结果。免疫比浊法测定不同HbF浓度HbA1c值与比较系统偏差均6%,测试几乎不受HbF的干扰。结论 HbF对不同HbA1c检测系统的干扰程度不同,临床实验室在进行HbA1c检测时,应注意血红蛋白变异体的存在,必要时选用替代指标或者合适的方法进行HbA1c测定以防止干扰的发生。     

硬脂酰辅酶A去饱和酶1抑制剂治疗卵巢癌的研究进展

卵巢癌发病隐匿,早期症状常不典型,多数患者就诊时已处于中晚期,预后较差。硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturases 1, SCD1)是将饱和脂肪酸转化为单不饱和脂肪酸的限速酶,参与卵巢癌的发生、发展。SCD1抑制剂可抑制卵巢癌细胞增殖、诱导卵巢癌细胞凋亡及铁死亡、抑制卵巢癌细胞腹腔转移、降低化疗药物的耐药性。本文就SCD1的结构与功能、SCD1在卵巢癌中的作用及SCD1抑制剂治疗卵巢癌的可能机制作一综述。