大鼠脊髓横断伤后护理对生存质量及功能评分的影响

目的通过脊髓损伤(SCI)后的科学护理,探讨提高动物的生存率及生存质量的方法。方法制作SCI动物模型,分为A、B两组,脊髓横断伤不作护理为A组(非护理组),脊髓横断伤行术后护理为B组(护理组)。观察两组动物的生存率、生存质量及行为学评分(BBB),并进行比较。结果脊髓损伤护理组的生存率及生存质量与脊髓损伤非护理组比较,具有显著性差异(P<0.05),护理组高于非护理组。结论脊髓横断伤模型护理可提高动物生存率,改善生存质量,有助于提高实验动物的样本量。     

脊髓半横断猕猴的护理

脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）是脊柱骨折的严重并发症。有效的动物模型是脊髓损伤修复研究的基础。以往的研究都是建立在啮齿类动物上的，而人类神经系统生理结构及修复能力与啮齿类动物有很大不同。建立猴脊髓半横断（hemi-sected SCI，hSCI）和全横断（transected SCI，tSCI）脊髓损伤模型，更深入地研究脊髓损伤修复机理，为临床提供治疗脊髓损伤提供新的策略。动物模型建立之后，正确的护理是实验成功的必要环节，常常决定了实验的成败。为提高非人灵长类动物在脊髓损伤与修复研究中的成活率，本对实践中猴脊髓半横断损伤模型有效的护理经验进行了总结。     

大鼠脊髓全横断损伤模型的建立

目前用于脊髓全横断的动物模型,常遗有部分未损脊髓组织,局部脊髓损伤范围很大,尤其是破坏了的血运扩大了继发性变性,造成了复杂的局部病理变化,致使难以分析治疗性脊髓伤区内移植的疗效。因此迫切需要一种还原论式的脊髓横断模型,本实验设计了一种切割辅以吸除的方法,可以在局部造成平均约0.6mm的清洁横断区,同时保存脊髓腹、背动脉及脊髓背静脉的大鼠脊髓横断模型,并用H.E.染色法、神经丝(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的免疫组织化学方法及生物素化的葡萄糖胺(BDA)的追踪方法检验损伤区及其两侧脊髓的组织反应。     

脊髓损伤药物治疗新进展

脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)在大多数国家年发病率约为20-40/100万.但直到上世纪80年代,对SCI治疗仍然是前景悲观.之后随着基础、临床研究的深入发现绝大多数急性SCI非离断伤,而表现为挫裂伤、出血、水肿、微循环障碍[1],损伤程度一方面与脊髓瞬间受力所致的初发损伤程度有关,由重至轻可致脊髓横断,完全脊髓损伤,不完全脊髓损伤,脊髓震荡伤4级病理改变,另一方面SCI后几乎立即发生的继发于初期创伤的一系列神经生化、微循环失调形成的恶性病理连锁反应对SCI发展可能扮演更重要角色[2].     

不同脊髓损伤模型大鼠行为学及形态学的变化

背景：在脊髓全断模型中有切割伤模型、切除伤模型,为了更好地选择脊髓损伤修复研究的全断动物模型,有必要对这两种模型进行比较及探讨。 目的：分析不同脊髓损伤模型的行为学及病理变化,选择适用于再生研究及治疗的脊髓损伤动物模型。 方法：将160只SD大鼠随机均分为2组,分别制作切割型脊髓损伤模型与切除型脊髓损伤模型,术后1,2,4,8,10,20,30,50周内进行后肢行为学BBB评分及组织化学、免疫组织化学染色,观察损伤区残余纤维情况;术后4,10,26,52周分别在大鼠脑皮质运动区与颈髓注射BDA-FITC示踪剂,观察损伤区残余纤维的连续性。 结果与结论：切割脊髓损伤模型组大鼠术后2-50周双后肢的BBB得分明显高于切除脊髓损伤模型组(P < 0.05);切割脊髓损伤模型组在损伤区残存大量组织和神经丝、胶质纤维酸性蛋白纤维,而切除脊髓损伤模型几乎没有残存纤维;不论是切割脊髓损伤模型还是切除脊髓损伤模型,皮质脊髓束均不能通过损伤区,终止于损伤区的头端;在切割脊髓损伤模型中,脊髓固有束重新进入尾侧端的宿主脊髓组织中,而在切除脊髓损伤模型中脊髓固有束终止于损伤区的头端。表明切除脊髓损伤模型更适用于脊髓损伤后再生效果及治疗手段或药物的筛选与评价。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程      

急性脊髓挫伤后内皮素-1 mRNA表达变化

目的：观察脊髓损伤（SCI）后内皮素-1（ET-1）mRNA表达的解剖和空间以及含量变化规律。方法：改良Allen's法（50 g-cm）制备急性大鼠脊髓挫伤模型。原位杂交检测SCI前后脊髓组织中ET-1 mRNA。图像分析半定量测定伤区邻近段ET-1 mRNA含量。结果：SCI后损伤邻近段脊髓组织中ET-1 mRNA阳性表达的神经元、胶质细胞与血管内皮细胞数量多于及信号强于对照组，以神经元表达改变为主。除48 h组，伤后各时点脊髓灰质ET-1 mRNA阳性染色的阳性单位与对照组比较差异显著（P<0.05）。伤区脊髓中ET-1 mRNA阳性染色神经元随时间逐渐减少，而胶质细胞阳性表达增加。结论：SCI后脊髓组织中ET-1 mRNA表达上调，提示ET-1参与SCI后病理生理改变。神经元是SCI后脊髓组织中ET-1升高的主要来源。     

骨髓间质干细胞修复大鼠脊髓损伤的效果的实验研究

目的研究骨髓间质干细胞（Bone marrow stromal cells，BMSCs）用于修复大鼠脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）的效果。方法30只成年SD大鼠按改良Tuszynsl法建立大鼠脊髓完全横断伤模型，损伤水平位于T9，损伤24h后随机分为对照组、实验组，实验组经尾静脉注射BMSCs，对照组经静脉注射PBS。利用BBB（Basso-Beetle-Bresnahan）评分法进行后肢运动功能评价，并进行斜板实验。结果实验组运动功能改善，实验组与对照组的BBB评分比较差异有统计学意义（P〈0．05），实验组的神经功能恢复较快。其中实验组大鼠在注射BMSCs后35d时后肢能支撑身体站立行走。斜板实验结果2组相比有显著性差异（P〈0．05）。结论骨髓间质干细胞移植组大鼠脊髓功能恢复优于对照组，说明骨髓间质干细胞用于修复大鼠SCI作用显著。     

BMSC修复大鼠脊髓损伤的效果的实验研究

目的 研究骨髓间质干细胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs)用于修复大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的效果. 方法 30只成年SD大鼠按改良Tuszynsl法建立大鼠脊髓完全横断伤模型,损伤水平位于T9,损伤24 h后随机分为对照组、实验组,实验组经尾静脉注射BMSCs,对照组经静脉注射PBS.利用BBB(Basso-Beattie-Bresnahan)评分法进行后肢运动功能评价,并进行斜板实验. 结果 实验组运动功能改善,实验组与对照组的BBB评分比较差异有统计学意义(P<0.05),实验组的神经功能恢复较快.其中实验组大鼠在注射BMSCs 后35 d时后肢能支撑身体站立行走.斜板实验结果2组相比有显著性差异(P<0.05). 结论 骨髓间质干细胞移植组大鼠脊髓功能恢复优于对照组,说明骨髓间质干细胞用于修复大鼠SCI作用显著.     

α-硫辛酸对大鼠全横断脊髓损伤后GAP-43和Caspase-3表达的影响

目的:研究α-硫辛酸对脊髓全横断损伤(SCI)大鼠损伤部位神经生长相关蛋白(GAP-43)、神经细胞凋亡相关蛋白(Caspase-3)的表达,探讨α-硫辛酸对大鼠脊髓全横断损伤功能恢复的作用。方法:制作并评价SD大鼠SCI模型后,64只大鼠随机分为假手术组、脊髓损伤组(SCI组)、SCI+游泳训练组(游泳组)和SCI+α-硫辛酸组(硫辛酸组)。各组按手术后7、14、21、28 d等4个时间点收集标本,每个时间点大鼠均为4只。各组大鼠进行BBB评分。各组4个时间点的GAP-43和Caspase-3表达用免疫组化测定,同时用Western Blot检测GAP-43表达。结果:游泳训练和用硫辛酸均能提高脊髓损伤大鼠的BBB评分(P0.05)。与SCI组比较,游泳组和硫辛酸组GAP-43表达显著增加,Caspase-3表达则明显降低(P0.05),且硫辛酸组比游泳组的GAP-43表达增加和Caspase-3表达降低更为明显(P0.05)。结论:游泳训练和α-硫辛酸可以上调脊髓损伤大鼠GAP-43表达和抑制Caspase-3表达促进损伤神经修复,对改善大鼠运动功能有一定疗效。     

大鼠脊髓全横断损伤后Wnt信号基因的表达

目的探讨大鼠脊髓全横断损伤后,Wnt信号基因在不同时相脊髓表达的变化及意义。方法成年健康Wistar大鼠30只,随机分为假手术组(sham组)和脊髓损伤组(SCI组),SCI组分为术后1d、3d、7d、14d、21d组,每组5只。SCI组大鼠T11脊髓段做全横断损伤,sham组仅行椎板切除术,术后大鼠进行BBB运动功能评分。采用半定量RT-PCR方法检测脊髓损伤组织中Wnt信号基因的表达。结果SCI组所有动物在术后均表现为双后肢瘫痪,BBB运动功能评分明显低于sham组。SCI组在脊髓横断术后1d、3d、7d Wnt3a表达均较sham组明显增加;尾侧端Wnt3a较同时相头侧端的表达多,且在21d又出现明显的升高。在sham组和SCI组均未检测到神经基因蛋白1(Ngn1)的表达。发状分裂相关增强子1(Hes1)的表达在SCI后第1d较sham组有明显的下降,第3d出现升高,之后逐渐下降。结论Wnt信号可能参与了脊髓损伤后修复再生的过程。     

SHH缓释纤维蛋白支架移植促大鼠脊髓损伤的修复

目的:研究应用可缓释音猬因子(sonic hedgehog,SHH)的纤维蛋白胶(fibrin glue,FG)支架促大鼠脊髓完全横断损伤的修复效果。方法:(1)制作体外缓释SHH的纤维蛋白胶支架模型,探究缓释效果。(2)选用健康的SD大鼠60只,制作大鼠脊髓完全横断模型,随机分为三组:单纯脊髓横断组(SCI),纤维蛋白胶组(FG),音猬因子-支架移植组(F-SHH)。术后每周记录大鼠双后肢功能活动(BBB评分)。术后12周取出脊髓组织,采用免疫组织化学染色和免疫蛋白印迹检测,观察脊髓损伤的近远端神经元存活情况及神经丝蛋白(neurofilament200,NF200),生长再生相关蛋白(growth associated protein-43,GAP43),胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达情况。结果:(1)载SHH的纤维蛋白胶具有良好的缓释SHH的效果;(2)F-SHH组BBB评分从术后到第十二周较FG、SCI组上升明显(P0.05);(3)免疫组化结果显示:F-SHH组脊髓横断端有一些神经元存活且排列规则,许多神经纤维未完全溃变。SCI组细胞凋亡明显,纤维溃变严重,退变空泡大,FG组较SCI组稍好;(4)Western Blot结果显示:F-SHH组NF200,GAP43相对含量高于FG、SCI组(P0.05),而GFAP相对含量低于FG、SCI组(P0.05)。结论:SHH缓释纤维蛋白支架缓释效果良好,对大鼠脊髓完全横断损伤的修复有明显的促进作用,SHH对于脊髓损伤的修复机理值得进一步研究。     

补阳还五汤对大鼠脊髓损伤后移植神经干细胞存活、增殖与迁移的影响

目的:探讨补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction,BYHWD)灌胃对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后移植胚胎神经干细胞(neural stem cells,NSCs)存活、增殖与迁移的影响。方法:将SD大鼠随机分为SCI组、NSCs移植组、NSCs移植联合补阳还五汤灌胃组。制作大鼠脊髓横断损伤模型,将BrdU标记NSCs细胞按浓度1×106/ml分别移植入移植组和联合组的脊髓横断处,损伤组用等量DMEM/F12完全培养基代替。术后联合组每天用BYHWD予以灌胃治疗1次,损伤组和移植组用生理盐水代替。各组在7、14、28 d后分别取材,用免疫荧光组织化学法检测移植在SCI处的NSCs存活、增殖和迁移情况。结果:损伤组未见BrdU标记阳性细胞;联合组各时间点BrdU标记阳性细胞数量均多于移植组各时间点,并有显著性统计学意义(P<0.05);联合组28 d时BrdU标记阳性细胞数量最多,与联合组7 d和14 d相比有显著性统计学意义(P<0.05);在联合组各时间点,BrdU标记阳性细胞向SCI处头尾端组织迁移的距离明显长于移植组各时间点。结论:脊髓横断损伤后,移植胚胎NSCs能够存活并增殖和迁移。补阳还五汤能够促进大鼠脊髓全横断损伤处移植的NSCs存活、增殖和迁移。     

脊髓3/4横断伤动物模型的建立及其电生理评价

背景：建立稳定、标准的脊髓损伤动物模型是研究脊髓损伤修复的前提。 目的：建立一种实用、标准、可靠的急性大鼠脊髓损伤模型。 方法：将60只成年雌性Wistar大鼠随机均分成两组。脊髓损伤组：打开T8胸椎对应脊髓,剪开硬膜,用特殊设计的眼科维纳斯剪横跨脊髓背侧中线剪断脊髓的后3/4,深度1.5 mm。1 h后行感觉诱发电位和运动诱发电位检查。对照组：只打开椎板,剪开硬膜,暴露脊髓进行假手术。 结果与结论：造模成功率为100%。对照组造模后1周功能恢复接近正常;脊髓损伤组造模后第2周开始恢复,到第4周基本停止,最终运动功能评分未超过10分,两组比较差异有显著性意义。脊髓损伤组可以明显看到感觉诱发电位与运动诱发电位的波幅值急剧降低,且潜伏期明显延长,差异有显著性意义(P < 0.01)。说明3/4横断伤急性大鼠脊髓损伤模型制作法操作简便、重复性好,是研究脊髓再生修复的理想模型。     

Chondroitinase对成年大鼠脊髓完全性横断损伤后胶质瘢痕的影响

目的研究Chondroitinase(chABC)对成年大鼠脊髓完全性横断性损伤(spinal cord injury,SCI)后胶质瘢痕及纤维浸润的长期影响。方法 Wistar大鼠24只,在第10胸段脊髓(T10)给予破坏脊膜的完全性横切术,然后随机分为2组,在SCI处分别给予chABC或生理盐水。14周后,脊髓横断从胸9至胸11(10mm组织块)连续切片,首先用Trichrome组织学染色切片确定SCI中心及距中心头侧和尾侧各500μm位置,Trichrome染色和免疫组织化学染色测量损伤脊髓中胶原蛋白浸润的面积,硫酸软骨素蛋白聚糖(CSPGs)的免疫反应强度。免疫荧光共聚焦显微成像检测pCREB(1:25)和GFAP表达,以及测量在SCI处纵向的最短GFAP阴性距离。结果应用chABC治疗可降低脊髓完全性横断后结缔组织的浸润。在SCI处胶原蛋白的纵向最大浸润距离以及在脊髓横断切片上的浸润面积,在chABC组显著减小(p0.05)。在SCI处纵向的最短GFAP平均阴性距离在chABC组中显著低于未治疗组(p0.05),表明更多的剩余正常组织在SCI后得以保留。chABC还能有效地清除轴突再生的抑制因子CSPGs(p0.05)。结论 Chondroitinase通过减少纤维浸润和胶质瘢痕以及清除抑制性细胞外基质分子CSPGs,可为脊髓损伤后神经功能恢复和轴突再生提供有利的局部环境。     

脊髓损伤患者的婚姻恋爱

谈及脊髓损伤（SCI）患者的婚姻恋爱，许多人认为是荒诞可笑的，理由是生活重负，脊髓中枢损伤失去性功能。本文大量资料证明，SCI患者婚恋已成为现实。提示我们，截瘫患者的婚姻恋爱是SCI患者精神、心理康复的重要内容，也是其回归社会的重要标志之一。1资料本文所用资料，SCI患者都是由于1976年7月28日唐山大地震外伤造成的截瘫。所考察的对象在震时没有婚恋关系，或虽有这种关系但配偶在震中丧生，共127例。所说的婚恋关系，是指在震后形成的（伤后5年以上），不包括早已存在的家庭困地震致一方或双方脊髓损伤而婚姻关系未解体者。…     

稳定内皮和周细胞微管改善脊髓损伤中微循环障碍的作用及其机制

目的 探讨稳定内皮细胞和周细胞微管改善脊髓损伤(SCI)中微循环障碍的作用及其机制.方法 培养大鼠脑微血管内皮细胞和周细胞,建立糖氧剥夺(OGD)模型,采用CCK-8法检测细胞活力,采用免疫荧光和Western blotting分别检测α-微管蛋白(α-tubulin)表达;建立脊髓横断损伤模型(n=36),采用免疫荧...     

MnTBAP对脊髓损伤大鼠脂质过氧化和运动功能的影响

目的观察脊髓损伤(SCI)后锰卟啉(MnTBAP)对损伤早期脂质过氧化反应、活性氧水平和伤后4W内运动功能的影响,探讨MnTBAP对脊髓继发性损伤的保护作用。方法用钳夹法制备大鼠SCI模型,分为假手术组、损伤组、MnTBAP治疗组和甲基强的松龙(MP)治疗组。损伤组术后立即腹腔注射生理盐水,MnTBAP组伤后立即腹腔注射MnTBAP(10mg/kg体重),MP组伤后立即腹腔注射MP(100mg/kg)。经1、6、12、24h,取SCI段标本,用于测定损伤段脊髓超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)和活性氧水平(ROS),经1、7、14、21、28d,进行斜板试验,评价运动功能。结果与假手术组相比,损伤组伤段脊髓组织SOD显著减少(均<0.01),MDA和ROS显著增加(均<0.01);与损伤组相比,MnTBAP治疗组伤段脊髓组织SOD水平显著增加(均<0.01),相反,MDA和ROS水平显著减少(均<0.01),其作用和MP相当;斜板试验结果观察,除1d组外,MnTBAP治疗组斜板角度与损伤组相比明显增加(均<0.01)。结论 MnTBAP有效抑制SCI早期受损脊髓脂质过氧化反应和活性氧水平,改善SCI大鼠运动功能,对继发性SCI具有保护作用。     

皮质脊髓束半横断损伤模型大鼠皮质脊髓束的超微结构改变

背景：有关皮质脊髓束受损后损伤附近及远处超微结构的整体变化的报道甚少。 目的：观察大鼠皮质脊髓束半横断损伤后皮质脊髓束超微结构的变化。 方法：选择性切割SD大鼠延髓左侧锥体,建立皮质脊髓束半横断损伤模型,于造模后4,14,28 d取受损皮质脊髓束,制备电镜标本。 结果与结论：透射电镜观察发现受损皮质脊髓束髓鞘和轴索发生肿胀,形态不规则。随着时间的延长,溃变进行性加重,受损皮质脊髓束主要表现为髓鞘破坏、溶解及轴索脱髓鞘病变、胞浆浓缩、细胞器增多及空泡样变性。脊髓颈、胸、腰段受损皮质脊髓束的溃变比损伤部位严重。     

中枢神经系统损伤过程中Nogo-A降解片段的检测

目的观察大鼠脊髓横断、脑缺血和海人藻酸(KA)注射所致的脑损伤模型Nogo-A的降解情况，以推测Nogo-A降解片段产生的机制和可能的作用。方法制作大鼠脊髓横断、脑缺血和KA注射所致的脑损伤模型，Western免疫印迹方法检测Nogo-A降解片段。结果大鼠脊髓横断和脑缺血模型均检测到Nogo-A降解片段，而KA注射所致的脑损伤模型未发现Nogo-A降解片段。结论CNS机械性和缺血性损伤可能通过某些机制导致Nogo-A发生降解。     

脊髓损伤后前炎症细胞因子的表达

脊髓损伤 (spinal cord injury,SCI)后其病理发生发展过程由两种损伤机制主导 ,即原发性和继发性损伤机制。对于SCI来说 ,原发性损伤是一个不可逆转的过程 ,而继发性损伤则是一个可逆的且可控制的过程 [1 ] 。因此 ,探究继发性损伤机制具有重要的现实意义。在继发性损伤的早期 ,存在一个重要的炎症反应过程 ,它能够触发其后发生的一系列针对受损脊髓的细胞和分子水平的反应 ;此外 ,炎症反应可以导致受损脊髓局部胶质细胞的疤痕形成 ,也有可能阻碍脊髓的再生。现已明确 ,SCI后介导炎症反应发生发展的是一类重要的细胞因子 (cytokine) ,它…