几种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的评价

目的对三种检测耐甲氧西林葡萄球菌方法的可靠性和临床实用性进行评价。方法以PCR检测金黄色葡萄球茵甲氧西林决定因子A（mecA）为金标准,按临床实验室标准化委员会（CLSI）操作规程用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法对临床分离的155株金黄色葡萄球菌进行检测。结果155株金黄色葡萄球菌经mecA基因检测,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）为61．9％（96／155）;头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100％;苯唑西林纸片扩散法的敏感性为95．8％,特异性为91．5％;苯唑西林琼脂稀释法的敏感性为100％,特异性为98．3％;头孢西丁纸片扩散法优于苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林琼脂稀释法。结论头孢西丁纸片扩散法操作简便、敏感性高、特异性好、结果可靠,可作为医院微生物实验室日常工作中检测耐甲氧西林葡萄球菌的常规方法。     

头孢西丁纸片法替代苯唑西林纸片法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的评价

目的评价头孢西丁纸片法替代苯唑西林纸片法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的方法。方法采用头孢西丁纸片法（30μg/片）和苯唑西林纸片法（1．0μg／片）检测MRSA,以胶乳凝集试验检测PBP2a为参考方法。结果用胶乳凝集实验检测的106株金黄色葡萄球菌,其中PBP2a阳性为87株,阴性为19株,用头孢西丁纸片法筛查MRSA敏感性为98．9％,特异性为100％。苯唑西林纸片检测MRSA敏感性为95．4％,特异性为94．7％。结论头孢西丁纸片法筛查MRSA与PBP2a的检测具有较好的一致性,该法可在常规工作中推广使用。     

改良琼脂筛选法检测耐甲氧西林葡萄球菌

目前耐甲氧西林葡萄球菌 (ＭＲＳ)的检测方法较多 ,如纸片琼脂扩散法、琼脂筛选法、微量肉汤稀释法、Ｅｔｅｓｔ等。纸片琼脂扩散法和普通Ｍ Ｈ琼脂平板检测法菌株漏检率较高 ,我院采用含 4 %Ｎａｃｌ,6ｕｇ/ｍｌ苯唑西林的ＭＨ琼脂平板检测ＭＲＳ ,较好防止了菌株漏检 ,提高了检出率。1　临床资料1.1材料1.1.1　实验菌株 :1999年至 2 0 0 0年 6月本院门诊、住院病人标本分离出的葡萄球菌共 144株 ,严格按《全国临床检验操作规程》鉴定 ,质控菌株用金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ2 592 3。1.1.2　试剂 :苯唑西林药敏纸片。1.1.3　培养基 :ＭＨ平板…     

三种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的比较

目的 比较3种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法.方法 以胶乳凝集法作为对照,比较头孢西丁纸片扩散法、BD phemox-100全自动微生物鉴定/药敏系统检测MRSA的敏感性和特异性.结果 用胶乳凝集法检测95株金黄色葡萄球菌,检出MRSA 64株,阳性率为67.4%(64/95).头孢西丁纸片扩散法检出MRSA 64株,敏感性和特异性均为100%(64164、31/31),BD phoenix-100全自动微生物鉴/药敏系统检出MRSA 63株,敏感性和特异性分别为98.5%(64/65)和100%(31/31).结论 3种方法均能较准确地检测出MRSA.     

耐甲氧西林葡萄球菌三种常规检测方法的比较评价

目的:比较分析耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)3种临床常用检测方法对MRS检出率.方法:同时采用普通M-H平板、1μg/ml苯唑西林药敏纸片扩散法,含4%NaCl的M-H平板、1μg/ml苯唑西林药敏纸片扩散法及含4%NaCl、6μg/ml苯唑西林琼脂筛选法对临床分离的53株葡萄球菌进行检测,比较3种方法对MRS的检出率.结果:对53株葡萄球菌(凝固酶阳性14株,凝固酶阴性39株),3种方法对MRS的检出率分别为72.55%、70.59%和50.98%.普通M-H平板药敏纸片扩散法和含4%NaCl的M-H平板药敏纸片扩散法MRS检出率差异无显著性(P＞0.05),两种纸片扩散法与琼脂筛选法在MRS检出率差异均有显著性(P＜0.05).结论:纸片扩散法对MRS的检出率明显高于作为MRS检测推荐方法的含盐琼脂平板筛选法.     

耐甲氧西林葡萄球菌三种常规检测方法的比较评价

目的 :比较分析耐甲氧西林葡萄球菌 (MRS) 3种临床常用检测方法对MRS检出率。方法 :同时采用普通M H平板、1μg/ml苯唑西林药敏纸片扩散法 ,含 4 %NaCl的M H平板、1μg/ml苯唑西林药敏纸片扩散法及含 4 %Na Cl、6 μg/ml苯唑西林琼脂筛选法对临床分离的 5 3株葡萄球菌进行检测 ,比较 3种方法对MRS的检出率。结果 :对 5 3株葡萄球菌 (凝固酶阳性 14株 ,凝固酶阴性 39株 ) ,3种方法对MRS的检出率分别为 72 .5 5 %、70 .5 9%和 5 0 .98%。普通M H平板药敏纸片扩散法和含 4 %NaCl的M H平板药敏纸片扩散法MRS检出率差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,两种纸片扩散法与琼脂筛选法在MRS检出率差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :纸片扩散法对MRS的检出率明显高于作为MRS检测推荐方法的含盐琼脂平板筛选法。     

用头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的 探讨用头孢西丁纸片扩散法确证耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)在临床实验室的应用.方法 采用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的120株葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌(SA)、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)各60株.并与苯唑西林纸片扩散法、苯唑西林-NaCl琼脂筛选法进行比较.结果 三种方法检测MRSA结果没有差异;在CNS中有1株头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林-NaCl 琼脂筛选法检测耐药,苯唑西林纸片扩散法敏感;6株头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法耐药,苯唑西林-NaCl琼脂筛选法敏感.结论 头孢西丁纸片扩散试验可用于多种表型的MRS,尤其对低水平表达、异质性耐药的MRS,是临床实验室确证MRS的一种可靠方法.     

耐甲氧西林葡萄球菌检测方法的比较

目的以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因为金标准，比较头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的优缺点。方法对临床分离的70株葡萄球菌（其中金黄色葡萄球菌40株，凝固酶阴性的葡萄球菌30株）分别用PCR法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌，药敏试验方法按标准KB（Kirby Bauer）法进行。结果经PCR法检测mecA基因，耐甲氧西林的金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的发生率分别为75．0％（30／40）和80．0％（24／30）；头孢西丁纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为93．3％、95．9％；90．0％和100％；苯唑西林纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为90．00%、87．5％；90．0％和83．3％；乳胶凝集法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为100．0%、100．0％；100．0％和100．0％。与PCR结果比较，3种方法所获得的结果经统计学分析，差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法是成批检测的理想方法；乳胶凝集法检测快速，结果可靠，但检测成本高；实验室应选择合适的方法，以提高MRS的检出率。     

Phoenix-100检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的 比较分析耐甲氧西林葡萄球菌全自动微生物鉴定/药敏仪检测与头孢西丁扩散法检测的检出率,对全自动微生物鉴定/药敏仪检测耐甲氧西林葡萄球菌初步评估.方法 将临床分离到的257株葡萄球菌用Phoenix-100全自动微生物鉴定/药敏系统检测的同时按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准操作规程进行头孢西丁纸片扩散法检测,比较两种方法的检出率.结果 Phoenix-100法与头孢西丁纸片扩散法耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的检出率分别为:79.4% 和 78.2%,两种方法差异无显著性.结论 Phoenix-100法操作简便,结果可靠,可以直接根据全自动微生物鉴定/药敏仪结果报告临床,对指导临床合理使用抗生素,有效控制感染具有积极意义.     

6种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的应用评价

目的 对6种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法进行应用评价.方法 分别采用6种方法检测134株临床分离的金黄色葡萄球菌耐甲氧西林的情况:聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、琼脂稀释法检测苯唑西林最小抑菌浓度、琼脂稀释法检测头孢西丁最小抑菌浓度、显色培养基法.结果 以PCR检测mecA基因为“金标准”,65.7％的金黄色葡萄球菌耐甲氧西林 ;苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的敏感性和特异性分别为95.5％和97.8％ ;头孢西丁纸片扩散法敏感性和特异性分别为97.7％和97.8％;苯唑西林和头孢西丁琼脂稀释法敏感性均为100％,特异性分别为97.8％和91.3％ ;显色培养基法敏感性和特异性分别为98.9％和97.8％.结论 6种检测方法具有较好的一致性.头孢西丁纸片扩散法简便、可靠,可作为临床实验室常规检测MRSA的方法.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的评估

目的 评价 4 种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)方法的临床应用价值.方法 对94株临床分离的金黄色葡萄球菌采用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林微量稀释法筛选MRSA,并采用聚合酶链反应(PCR)检测mecA 基因作为检测MRSA的金标准.结果 94株中有63株为MRSA,检出率为67%;其中头孢西丁纸片扩散法筛选MRSA敏感性为100.0%,特异性100.0%;苯唑西林K-B 法筛选MRSA敏感性为96.8%,特异性为87.1%;苯唑西林微量稀释法筛选MRSA敏感性为98.4%,特异性为96.8%.结论 综合分析头孢西丁纸片扩散法可作为医院微生物实验室日常工作中检测MRSA的简便又准确的实验方法.     

葡萄球菌属对常用抗生素耐药情况调查

目的了解葡萄球菌属,特别是耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的耐药情况,为临床用药提供参考。方法从2002年1~7月送检的住院病人的血、痰、脓液、分泌物等标本中分离出的金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及其他血浆凝固酶阴性的葡萄球菌共105株,并进行药敏和多重耐药分析。结果MRS的分离率较高,为68.6%,耐甲氧西林金黄色葡葡球菌(MRSA)为69.2%;耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)为63.3%。MRS较非耐甲氧西林葡萄球菌(MSS)耐药率明显高,且MRS比MSS多重耐药率高得多;MRSA对四种不同作用机制的抗生素:泰能、阿米卡星、环丙沙星、复方新诺明具有很高的多重耐药率,达到50%以上。结论鉴于MRS的高分离率和多重耐药率,在治疗感染性疾病时,应加强病原学检查,提高标本鉴定的阳性率;在有效的治疗MRS感染的同时还应注意遏制MRS的产生。     

MRSA-PBP2a单克隆抗体乳胶凝集检测法的建立

 【目的】 应用抗PBP2a单克隆抗体,以化学交联法致敏羧化聚苯乙烯乳胶,建立快速检测MRSA-PBP2a的乳胶凝集法?【方法】 以辛酸-硫酸铵法纯化PBP2a单克隆抗体,将纯化后单克隆抗体和羧化乳胶经碳化二亚胺(EDC)共价偶联,并对偶联条件(偶联抗体浓度?乳胶浓度?偶联时间和偶联缓冲液)进行探索和优化,建立检测PBP2a的乳胶凝集法?【结果】 140 mg/L的抗体浓度与15 g/L的羧化聚苯乙烯乳胶,在pH 5.8缓冲液中偶联8 h后有较好的凝集效果和偶联效率,所建立的乳胶凝集法敏感性和特异性良好?【结论】 初步建立了检测PBP2a的胶乳凝集法,为研制MRSA快速鉴定试剂盒奠定了良好的基础?     

婴幼儿耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染状况和耐药基因的研究

目的了解感染婴幼儿的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药性和耐药基因,明确检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a)和甲氧西林耐药基因(mecA)的临床价值。方法用金黄色葡萄球菌乳胶凝集试验和梅里埃鉴定金黄色葡萄球菌,同时用纸片扩散法完成12种常用抗生素的药敏试验。对头孢西丁的结果,按当年CLSI标准执行,用于判断菌株甲氧西林的耐药性。采用PBP2检测试剂盒检测PBP2a蛋白,PCR检测mecA基因。结果 2007-2009年婴幼儿共检出245株金黄色葡萄球菌,其中MRSA检出率为17.6%(43/245)。MRSA对庆大霉素、复方新诺明、克林霉素、红霉素、氯霉素的耐药性均显著高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(P<0.05),其余抗生素的差异无统计学意义(P>0.05),43株MRSA的PBP2a蛋白和mecA基因的检测结果全为阳性,阳性率为100%。结论用头孢西丁(30μg)能有效地筛查MRSA,检测PBP2a蛋白和mecA基因均能正确地确认MRSA。且检测PBP2a蛋白方便快捷,特异性好,值得临床推广。     

紫花地丁联用苯唑西林对质粒介导的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染小鼠败血症的治疗作用

目的观察紫花地丁联用苯唑西林对质粒介导的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillinresistant staphylococcus aureus,MRSA)感染小鼠败血症的治疗作用,探寻逆转MRSA抗药性的新方法。方法采用腹腔注射质粒介导的MRSA诱导小鼠败血症模型,分别以生理盐水、紫花地丁、苯唑西林、紫花地丁联用苯唑西林进行干预,观察各组小鼠的死亡数及存活率。结果模型组小鼠存活率为0%,紫花地丁组与苯唑西林组小鼠存活率分别为0%和6.67%,与模型组比较差异无统计学意义(P0.05),紫花地丁联用苯唑西林组小鼠存活率为53.33%,明显高于苯唑西林组(P0.01)。结论紫花地丁能增强苯唑西林对MRSA的敏感度,提高苯唑西林对MRSA感染小鼠败血症的治疗作用。     

耐甲氧西林葡萄球菌4种检测方法的比较及临床应用

[目的 ]通过检测 2 80株临床分离的葡萄球菌比较其耐甲氧西林葡萄球菌 (MRS)阳性检出率 ,对其可靠性和临床实用性进行评估。 [方法 ]K -B纸片扩散法、琼脂筛选法、琼脂二倍稀释法(MIC)、mecA基因检测法测试。 [结果 ]K -B法苯唑西林耐药葡萄球菌 1 4 1株 ,阳性率为5 0 .36 % ;琼脂筛选法苯唑西林耐药葡萄球菌 1 35株 ,阳性率为 4 8.2 1 % ;MIC法苯唑西林耐药 1 30株 ,阳性率为 4 6 .4 3% ;mecA阳性葡萄球菌 98株 ,阳性率为 35 %。 3种表型检测法检测结果经 χ2检验无明显差异 ,而与mecA基因检测法结果稍有差异。 [结论 ]mecA基因检测法是检测MRS的一种可靠的方法 ,但受设备、仪器、试剂和费用的限制 ,不易在广大医院临床实验室普遍开展 ,K -B法、琼脂筛选法、MIC法是检测MRS较为适用的方法。     

基因扩增和3种表型筛查法检测耐甲氧西林葡萄球菌的应用评价

目的比较4种方法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的阳性检出率、灵敏度和特异度,以便临床检测MRS时选择。方法用Vitek-32全自动细菌鉴定仪法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁纸片扩散法和mecA基因检测法分别检测175株葡萄球菌中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS),经行×列表资料的χ2检验比较阳性检出率,并以mecA基因检测法为"金标准"计算其他3种方法的灵敏度和特异度。结果4种方法检出MRSA的阳性率无差别(χ2=1.640,P>0.05),但检测MRCNS的阳性率有差别(χ2=9.478,P<0.05),其中Vitek-32全自动细菌鉴定仪法和苯唑西林琼脂稀释法检出MRCNS的阳性率高于mecA基因检测法;3种表型检测法检测MRSA的灵敏度和特异度分别为100%、96.3%、96.3%和88.2%、100%、100%,检测MRCNS的灵敏度均为100%,特异度分别为50%、46.1%和65.4%。结论最终判定MRS时,要考虑到mecA基因和苯唑西林最低抑菌浓度两个因素,并区别对待mecA基因介导的MRS和非mecA基因介导的MRS。