环状RNA hsa_circ_0002203对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡能力的影响

目的 探讨环状RNA hsa_circ_0002203对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞系恶性生物学行为的影响。方法 纳入OSCC患者40例,使用实时荧光聚合酶链反应检测环状RNA hsa_circ_0002203在OSCC组织、癌旁组织、OSCC细胞系和人口腔黏膜角质形成细胞（HOK）中的表达水平。慢病毒感染SCC15和CAL27细胞,实时荧光聚合酶链反应检测环状RNA hsa_circ_0002203的表达,细胞计数（CCK-8）实验检测细胞增殖能力,划痕实验和Transwell迁移及侵袭实验检测细胞迁移侵袭能力,流式细胞凋亡实验检测细胞凋亡水平,蛋白质印迹法检测细胞增殖凋亡侵袭相关蛋白的表达。通过裸鼠成瘤实验观察hsa_circ_0002203对SCC15细胞体外成瘤能力的影响。结果 环状RNA hsa_ circ_0002203在OSCC组织的表达低于癌旁组织（P<0.01）,在OSCC细胞系中的表达低于人类角质形成细胞（P< 0.001）。慢病毒感染SCC15和CAL27细胞后hsa_circ_0002203的表达增加;SCC15和CAL27细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降,凋亡水平增加;裸鼠肿瘤体积、质量减小,生长速度降低。结论 环状RNA hsa_circ_ 0002203在口腔鳞状细胞癌中的低表达可以增强肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制肿瘤细胞凋亡。     

环状RNA hsa_circ_0002203对口腔鳞状细胞癌 细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡能力的影响

目的 探讨环状RNA hsa_circ_0002203对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞系恶性生物学行为的影响。方法 纳入OSCC患者40例,使用实时荧光聚合酶链反应检测环状RNA hsa_circ_0002203在OSCC组织、癌旁组织、OSCC细胞系和人口腔黏膜角质形成细胞（HOK）中的表达水平。慢病毒感染SCC15和CAL27细胞,实时荧光聚合酶链反应检测环状RNA hsa_circ_0002203的表达,细胞计数（CCK-8）实验检测细胞增殖能力,划痕实验和Transwell迁移及侵袭实验检测细胞迁移侵袭能力,流式细胞凋亡实验检测细胞凋亡水平,蛋白质印迹法检测细胞增殖凋亡侵袭相关蛋白的表达。通过裸鼠成瘤实验观察hsa_circ_0002203对SCC15细胞体外成瘤能力的影响。结果 环状RNA hsa_ circ_0002203在OSCC组织的表达低于癌旁组织（P<0.01）,在OSCC细胞系中的表达低于人类角质形成细胞（P< 0.001）。慢病毒感染SCC15和CAL27细胞后hsa_circ_0002203的表达增加;SCC15和CAL27细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降,凋亡水平增加;裸鼠肿瘤体积、质量减小,生长速度降低。结论 环状RNA hsa_circ_ 0002203在口腔鳞状细胞癌中的低表达可以增强肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制肿瘤细胞凋亡。     

长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其相关功能

目的 分析长链非编码RNA（lncRNA）肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1（AFAP1-AS1）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达及其对OSCC细胞生物行为学的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测OSCC患者（55例）癌组织、癌旁正常黏膜组织及人口腔鳞状细胞癌SCC25、人正常口腔角质细胞株（NOK）细胞中lncRNA AFAP1-AS1的表达,分析AFAP1-AS1与OSCC患者病理特征的相关性,通过Kaplan-Meier生存曲线分析AFAP1-AS1与患者预后的关系。AFAP1-AS1 siRNA转染SCC25细胞,细胞计数（CCK-8）及Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭的变化,蛋白质印迹（Western blot）检测侵袭相关蛋白、肌动蛋白纤维相关蛋白1（AFAP1）及Rho GTP酶家族成员蛋白的表达情况,免疫荧光染色检测细胞骨架肌动蛋白微丝结构的变化。结果 OSCC组织中AFAP1-AS1的表达高于癌旁正常黏膜组织,SCC25细胞中AFAP1-AS1的表达高于NOK细胞（P<0.001）。AFAP1-AS1的表达与OSCC的分化程度、TNM分期及淋巴结转移密切相关（P<0.05）,AFAP1-AS1高表达患者的生存率低于AFAP1-AS1低表达者（P<0.05）。AFAP1-AS1 siRNA转染后AFAP1-AS1的表达水平下调,SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭能力降低,AFAP1、RhoA、Rac2、Rab10、RhoGDI和Pfn1的表达上调,RhoC的表达下调,细胞骨架中应力纤维丝减少,肌动蛋白完整性丢失。结论 lncRNA AFAP1-AS1在OSCC组织及SCC25细胞中高表达,与OSCC的发生进展及预后相关。下调AFAP1-AS1能够抑制OSCC的增殖、迁移和侵袭能力,其可能是通过调控肌动蛋白纤维丝的完整性实现的。     

长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其相关功能

目的 分析长链非编码RNA（lncRNA）肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1（AFAP1-AS1）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达及其对OSCC细胞生物行为学的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测OSCC患者（55例）癌组织、癌旁正常黏膜组织及人口腔鳞状细胞癌SCC25、人正常口腔角质细胞株（NOK）细胞中lncRNA AFAP1-AS1的表达,分析AFAP1-AS1与OSCC患者病理特征的相关性,通过Kaplan-Meier生存曲线分析AFAP1-AS1与患者预后的关系。AFAP1-AS1 siRNA转染SCC25细胞,细胞计数（CCK-8）及Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭的变化,蛋白质印迹（Western blot）检测侵袭相关蛋白、肌动蛋白纤维相关蛋白1（AFAP1）及Rho GTP酶家族成员蛋白的表达情况,免疫荧光染色检测细胞骨架肌动蛋白微丝结构的变化。结果 OSCC组织中AFAP1-AS1的表达高于癌旁正常黏膜组织,SCC25细胞中AFAP1-AS1的表达高于NOK细胞（P<0.001）。AFAP1-AS1的表达与OSCC的分化程度、TNM分期及淋巴结转移密切相关（P<0.05）,AFAP1-AS1高表达患者的生存率低于AFAP1-AS1低表达者（P<0.05）。AFAP1-AS1 siRNA转染后AFAP1-AS1的表达水平下调,SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭能力降低,AFAP1、RhoA、Rac2、Rab10、RhoGDI和Pfn1的表达上调,RhoC的表达下调,细胞骨架中应力纤维丝减少,肌动蛋白完整性丢失。结论 lncRNA AFAP1-AS1在OSCC组织及SCC25细胞中高表达,与OSCC的发生进展及预后相关。下调AFAP1-AS1能够抑制OSCC的增殖、迁移和侵袭能力,其可能是通过调控肌动蛋白纤维丝的完整性实现的。     

长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因22调控微小RNA-27b-3p对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的 探究长链非编码RNA (LncRNA)小核仁RNA宿主基因（SNHG） 22调控微小RNA (miR)-27b-3p对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 收集52例OSCC患者的癌组织及癌旁组织标本,体外培养人正常口腔角质细胞HOK和3种人OSCC细胞（CAL-27、SCC-25和HSC-3）,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测癌组织、癌旁组织、HOK细胞和3种OSCC细胞中SNHG22、miR-27b-3p表达情况。对SCC-25细胞进行转染并将其分为Ctrl组（未进行转染）、si-SNHG22组、si-NC组、miR-27b-3p inhibitor组、inhibitor-NC组、si-SNHG22+inhibitor-NC组和si-SNHG22+miR-27b-3p inhibitor组,检测各组SCC-25细胞增殖情况[细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法检测增殖率、流式细胞术检测增殖指数（PI）];Transwell实验检测各组SCC-25细胞侵袭情况;划痕愈合实验检测各组SCC-25细胞迁移情况;双荧光素酶实验验证SNHG22与miR...     

长非编码RNA lncRNA ADAMTS9-AS2促进唾液腺腺样囊性癌侵袭转移的研究

目的检测不同转移能力的唾液腺腺样囊性癌(salivary gland adenoid cystic carcinoma,SACC)细胞中差异表达的长非编码RNA(lncRNA),探讨lncRNA在唾液腺腺样囊性癌侵袭转移中的作用。方法以腺样囊性癌高转移细胞株SACC-LM为实验组,低转移细胞株SACC83为对照组,采用lncRNA芯片初步筛选差异表达的lncRNA,通过qRT-PCR进一步验证差异表达的lncRNA。通过侵袭迁移实验检测转染差异表达的lncRNA siRNAs前后腺样囊性癌细胞株侵袭迁移能力的变化。并对差异表达的lncRNA与SACC患者的临床病理特征和预后进行分析。结果芯片筛选出ADAMTS9-AS2在高转移细胞系(SACC-LM)中高表达,实时定量RT-PCR进一步验证了其在高转移细胞系(SACC-LM)显著上调,通过侵袭迁移实验发现在转染后下调ADAMTS9-AS2的表达水平后侵袭迁移能力明显降低(P<0.001)。临床病理资料分析表明,ADAMTS9-AS2在SACC组织中高度表达。高表达的ADAMTS9-AS2与SACC患者预后不良和肿瘤转移率高有关。结论高表达ADAMTS9-AS2促进SACC细胞迁移和侵袭,ADAMTS9-AS2在SACC组织中上调,并且与高转移率和不良预后相关。     

lncRNA CASC9通过调节miR-125a-3p/VEGF对口腔鳞癌CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探究长链非编码RNA癌症易感性候选基因9(lncRNA CASC9)对口腔鳞癌(OSCC)CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭的调控机制。方法:构建lncRNA CASC9敲低的CAL-27细胞,并在lncRNA CASC9敲低细胞系中进行microRNA-125a-3p(miR-125a-3p)的回复。检测细胞中lncRNA CASC9、miR-125a-3p和VEGF mRNA水平,检测细胞增殖、迁移及侵袭能力以及细胞中VEGF蛋白表达。结果:敲低lncRNA CASC9表达后,CAL-27细胞增殖活性、迁移与侵袭能力、VEGF mRNA和蛋白水平降低(P<0.05),miR-125a-3p水平升高(P<0.05)。敲低lncRNA CASC9可显著抑制细胞在体内移植瘤生长和血管生成(P<0.05)。下调miR-125a-3p表达可减弱lncRNA CASC9敲低对CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭以及对体内移植瘤生长和血管生成的抑制作用(P<0.05)。结论:lncRNA CASC9可能通过调节miR-125a-3p/VEGF促进OSCC细胞增殖、迁移和侵...     

微小RNA663b对口腔鳞状细胞癌细胞迁移、侵袭和上皮间充质转化的影响

目的　探讨微小RNA663b（miR-663b）对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞迁移、侵袭和上皮间质转化（EMT）的影响。方法　通过基因表达数据库（GEO）使用R Studio进行OSCC组织与癌旁正常组织的差异表达分析。实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-663b在组织和细胞中的表达。检测miR-663b敲除质粒的HN30细胞转染效率，Transwell法检测迁移、侵袭能力。生物信息学方法预测miR-663b的靶向mRNA，双荧光素酶实验验证结合情况。Western blot检测EMT相关标志物的表达。结果　miR-663b在OSCC组织中表达上调，在HN30、CAL27、SCC-9细胞中表达较HOEC细胞高（P<0.05）。敲除miR-663b可以抑制HN30细胞的迁移和侵袭（P<0.05），抑制EMT的发生。生信预测SH3BP2与miR-663b靶向结合，SH3BP2低表达的患者预后较差（P<0.05）。双荧光素酶实验证明miR-663b可以与SHBP2靶向结合（P<0.05）。敲除miR-663b的OSCC细胞中SH3BP2的表达增加，EMT的发生受到抑制。结论　敲除miR-663b可靶向调节SH3BP2抑制OSCC细胞的迁移、侵袭和EMT。     

Mechanism of long-chain noncoding RNA PCGEM1 in the regulation of the invasion and metastasis of oral squamous carcinoma cells via transforming growth factor β2/Smad2 signaling pathway

目的 探讨长链非编码RNA（lncRNA）PCGEM1通过转化生长因子β2（TGF β2）/Smad2信号通路调控口腔鳞状细胞癌（OSCC）侵袭和转移的机制。方法 将60例OSCC患者癌组织及距离癌组织超过2 cm处的正常组织纳入研究,实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-148a、lncRNA PCGEM1在OSCC组织及正常组织、人正常口腔黏膜上皮细胞（OMEC）及人源OSCC细胞株KB、BcaCD885、SCC-4、CAL27、SCC-15中的表达情况;分析lncRNA PCGEM1和miR-148a表达与患者临床病理信息之间的关系。构建lncRNA PCGEM1沉默细胞系KB-siPCGEM1及阴性对照（KB-NC）,并以KB作为空白对照组,采用MTT、Transwell和划痕实验检测lncRNA PCGEM1对KB细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响;使用生物信息学网站starBase预测lncRNA PCGEM1可以互补结合的微小RNA（miRNA）,再根据www.microRNA.org网站预测相应miRNA可靶向结合的基因;免疫印迹（Western blotting）检测TGF β2/Smad2信号通路蛋白表达情况。结果 qRT-PCR结果显示,OSCC组织中lncRNA PCGEM1、miR-148a的表达水平高于正常组织（P<0.05）;lncRNA PCGEM1和miR-148a在不同TNM分期、淋巴结转移和组织分化程度的患者癌组织中表达差异均有统计学意义（P<0.05）;与空白对照组和KB-NC组相比,KB-siPCGEM1组细胞OD_{492 nm}值下降,细胞侵袭数量及迁移率降低,差异均具有统计学意义（P<0.05）;生物信息学预测结果显示,lncRNA PCGEM1可与miR-148a互补结合,miR-148a与TGFβ2存在靶向结合位点;qRT-PCR和Western blotting检测结果显示,KB-siPCGEM1组中miR148a、TGFβ2及p-Smad 2的表达明显低于空白对照组与KB-NC组（P<0.05）,空白对照组和KB-NC组的差异无统计学意义（P>0.05）。结论 lncRNA PCGEM1在OSCC中高表达,高表达lncRNA PCGEM1可能通过上调miR-148a水平,强化TGF β2/Smad2信号通路,从而促进OSCC的进展。     

环状RNA hsa＿circ＿0085576调控微小RNA-498/B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1轴对口腔鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭的影响

目的 探究环状RNA hsa＿circ＿0085576对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法 使用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白印迹法检测OSCC细胞中hsa＿circ＿0085576、微小RNA-498 (miR-498)以及B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1 (BMI-1)的表达水平。使用CCK-8、划痕实验、Transwell实验以及qRT-PCR、蛋白印迹法分别检测SCC-15细胞增殖活力、迁移及侵袭能力以及相关基因和蛋白的相对表达量。结果 OSCC细胞中hsa＿circ＿0085576与BMI-1表达上调,miR-498表达下调（P<0.05）。下调hsa＿circ＿0085576表达或过表达miR-498后SCC-15细胞的增殖活性、划痕愈合率、侵袭细胞数目以及细胞周期蛋白D1、波形蛋白表达水平下调,miR-498和E-钙黏蛋白表达水平上调（P<0.05）;抑制miR-498表达可减弱下调hsa＿circ＿0085576表达对OSCC细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用;上调BMI-1表达可减弱过表达miR-498对...     

miR-362-3p调控垂体肿瘤转化基因1抑制口腔鳞状细胞癌侵袭及增殖的研究

目的 探讨垂体肿瘤转化基因1 (PTTG1)在miR-362-3p作用下对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞Cal-27、 HN-30侵袭以及增殖能力的影响。方法 生物信息学在线数据库查询PTTG1在头颈部鳞状细胞癌（HNSCC）中的表达。蛋白质印迹法（Western blot）实验检测PTTG1在Cal-27、HN-30以及HOK细胞系中的表达。划痕愈合实验、Transwell侵袭实验及5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）细胞增殖实验检测PTTG1对Cal-27、HN-30细胞迁移、侵袭、增殖的影响。生物信息学在线数据库预测PTTG1的上游miRNA,双荧光素酶实验检测结合情况,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测该miRNA在组织中的表达。结果 ENCORI数据库结果显示PTTG1在OSCC组织中表达上调;Western blot实验显示Cal-27、HN-30细胞中PTTG1表达量较HOK细胞中高。转染Si-PTTG1质粒的Cal-27、HN-30细胞的迁移能力、侵袭能力和细胞增殖能力均较对照组降低（P<0.05）。通过网站预测出PTTG1的上游miRNA为miR...     

长链非编码RNA MEG3对头颈鳞状细胞癌增殖和侵袭的影响

目的探究长链非编码RNA母系表达基因3(lncRNA MEG3)对头颈鳞癌细胞增殖和侵袭的影响。方法体外培养头颈部鳞癌细胞系HN6转染MEG3,分为MEG3阴性对照组(MEG3对照组)、MEG3慢病毒过表达转染组(MEG3过表达组)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测MEG3 mRNA表达;CCK-8、transwell检测细胞增殖、侵袭耐力;蛋白免疫印迹法(western blottingWB)检测细胞中ZEB2、波形蛋白(vimentin)、E-钙黏着蛋白(E-cadherin)蛋白表达情况。结果在HN6细胞系中,与MEG3对照组相比,MEG3过表达组细胞中MEG3 mRNA表达升高(P<0.05)。与阴性对照组相比,MEG3过表达组细胞增殖、侵袭能力均降低(P<0.05)。与阴性对照组相比,MEG3转染组ZEB2、vimentin蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。结论 MEG3表达升高后可抑制头颈鳞癌细胞的增殖、侵袭,其机制可能与抑制细胞上皮-间充质转化有关。     

TEAD4与口腔鳞癌预后和细胞迁移侵袭的研究

目的:研究TEA转录因子4(TEAD4)在口腔鳞癌(OSCC)组织中的表达与临床病理参数、预后的关系。方法:免疫组化检测79例原发性OSCC标本和21例口腔正常上皮黏膜中TEAD4的表达水平,分析其与临床病理参数之间的关系。使用小干扰RNA(siRNA)转染沉默Cal27细胞内源性TEAD4,通过Western blot、qRT-PCR、划痕试验、Transwell侵袭等实验探究TEAD4沉默对OSCC细胞系Cal27迁移、侵袭的影响。结果:免疫组化结果显示TEAD4在OSCC组织中表达明显高于正常口腔黏膜(P<0.05)。TEAD4高表达与患者颈淋巴结转移、临床分期和患者总体生存率相关(P<0.05)。TEAD4沉默后Cal27细胞侵袭、迁移能力明显减弱。结论:TEAD4高表达与OSCC恶性表型及预后有关,参与OSCC细胞迁移、侵袭表型的调控。     

miR-204-5p靶向溴结构域蛋白4对舌鳞状细胞癌细胞SCC25增殖和迁移侵袭的影响研究

目的 探讨miR-204-5p对溴结构域蛋白（BRD）4的靶向作用机制以及对舌鳞状细胞癌SCC25细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测舌鳞状细胞癌组织以及不同细胞株系间的miR-204-5p和BRD4 mRNA的表达水平;miR-204-5p转染SCC25细胞后,细胞计数试剂盒（CCK）8法检测其对细胞增殖的影响,Transwell小室法检测miR-204-5p对SCC25迁移和侵袭的影响;使用TargetScan和荧光素酶实验分析并验证miR-204-5p与BRD4的靶向调控关系;RT-qPCR和Western blot检测miR-204-5p模拟物和抑制剂对BRD4表达水平的影响;Transwell小室法和CCK8法检测miR-204-5p调控BRD4对SCC25增殖和迁移侵袭的影响。结果 miR-204-5p在舌鳞状细胞癌组织和SCC25细胞中表达下调,BRD4在舌鳞状细胞癌组织和SCC25细胞中表达上调;提高miR-204-5p表达量抑制SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭;TargetScan和荧光素酶实验证实miR-204-5p与BRD4具有靶向负调控关系;miR-204-5p模拟物抑制BRD4表达,miR-204-5p抑制剂促进BRD4表达上调;当在SCC25细胞中同时过表达miR-204-5p和BRD4时,BRD4能够回补miR-204-5p对SCC25细胞的抑制作用。结论 miR-204-5p能够通过靶向负调控BRD4抑制舌鳞状细胞癌SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭。     

E3泛素连接酶RNF126调控舌癌细胞侵袭能力的分子机理研究

目的:在人E3泛素连接酶cDNA文库中筛选得到与舌癌发生相关的候选蛋白环指蛋白126(RNF126),利用体外实验进一步分析RNF126调控舌癌发生的分子机制。方法:分子克隆方法构建RNF126克隆和RNAi表达载体,MTT法检测RNF126对人舌癌细胞SCC25增殖的影响,细胞迁移实验分析人舌癌细胞迁移能力受RNF126的影响。结果:与对照组相比,RNF126明显促进SCC25细胞的增殖;抑制RNF126的表达后SCC25细胞的生长明显减缓。单个SCC25细胞形成克隆的能力在抑制RNF126后也受到明显的抑制。Transwell小孔实验证实SCC25细胞迁移能力随着RNF126表达的抑制而降低(P<0.05)。结论:体外实验结果提示RNF126与舌癌的侵袭有一定的关系。     

KLF4转染对口腔鳞癌细胞侵袭能力的影响

目的 观察KLF4转染对人口腔鳞癌细胞系SCC15侵袭能力的影响.方法 培养人口腔鳞癌细胞系SCC15,构建pReceiver-Lv105/KLF4慢病毒表达载体,包装病毒颗粒,感染SCC15后,puromycin筛选KLF4稳定表达的细胞系.荧光显微镜和免疫荧光细胞化学鉴定病毒感染成功.然后通过划痕实验检测KLF4转导对细胞体外迁移能力的影响.Transwell细胞侵袭实验检测KLF4转导对细胞侵袭能力的影响.实时荧光定量PCR检测与细胞侵袭和迁移密切相关的因子MMP-9和Twist1的表达.结果 与对照载体转导组SCC15/Lv105细胞相比,SCC15/KLF4细胞中KLF4的表达明显增强.SCC15/KLF4细胞的相对迁移率显著高于SCC15/Lv105细胞(P＜0.01).SCC15/KLF4组的侵袭穿膜细胞数明显多于SCC15/Lv105组(P＜0.05).另外,SCC15/KLF4细胞中MMP-9和Twist1 RNA的表达也高于对照组SCC15/Lv105细胞,其中MMP-9 RNA的表达升高更为显著(P＜0.01).结论 KLF4转导SCC15细胞后,可能通过增强MMP-9和Twist1的表达促进细胞的迁移和侵袭能力.     

EP300对口腔鳞癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨EP300在口腔鳞癌中的表达水平以及对口腔鳞癌细胞增殖、迁移的影响。方法 通过在线数据库收集并分析EP300基因在泛癌组织及正常组织中的表达差异。采用qRT-PCR和Western blot分别检测EP300在正常口腔黏膜上皮细胞株NOK和两种不同OSCC细胞株HSC3、UM1中的基因和蛋白表达水平;通过质粒转染沉默HSC3和UM1细胞株中EP300基因,平板克隆和CCK-8检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力。结果 生信分析发现EP300在头颈部鳞癌HNSCC中的表达较癌旁组织显著上调;与NOK组比较,HSC3和UM1中EP300基因和蛋白表达水平显著增高(P<0.05),且HSC3和UM1两种细胞系的EP300内源性表达相对更高。CCK-8增殖实验和克隆形成实验检测发现,沉默EP300后HSC3和UM1的增殖能力明显降低(P<0.05);细胞划痕实验检测发现沉默EP300后HSC3和UM1的迁移能力明显降低(P<0.05)。结论 EP300在口腔鳞癌细胞株HSC3和UM1中高表达,EP300低表达能够抑制口腔鳞癌细胞的增殖和迁移。     

Wnt1在口腔鳞癌中的表达及其与淋巴结转移关系的研究

目的 :研究Wnt信号传导通路中Wnt1蛋白在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达水平,初步探讨Wnt1在OSCC淋巴结转移中的作用。方法:采用免疫组织化学方法,检测60例OSCC中Wnt1的表达情况;采用Western blot法检测5对OSCC临床标本和配对癌周组织中Wnt1的表达;通过实时定量PCR法和Western blot法分别检测高、低转移潜能的HN-12和HN-4口腔鳞癌细胞系中Wnt1基因和蛋白的表达水平;采用生长曲线、划痕实验和Transwell法,分别检测重组蛋白Wnt1对2种细胞的生长情况、迁移能力和侵袭能力的影响。结果:24例淋巴结转移的OSCC中高表达Wnt1,16例未有淋巴结转移的OSCC中低表达Wnt1,Wnt1的表达在两组之间差异有统计学意义(P<0.01);高转移细胞系HN-12较低转移细胞系HN-4在m RNA水平和蛋白水平上Wnt1表达显著增高;重组蛋白Wnt1,能够提高肿瘤细胞的生长、迁移和侵袭能力。结论:Wnt信号通路中的关键分子Wnt1在OSCC中有表达,且与淋巴结转移相关,为进一步探讨Wnt信号通路影响肿瘤转移的分子机制奠定基础。     

Semaphorin 3A及其受体在舌鳞癌中的表达及作用

目的：检测Semaphorin（Sema）3A及其受体Neuropilin1（NRP1）在舌癌组织和舌鳞状细胞癌SCC9细胞株中的表达情况,同时观察外源性Sema 3A蛋白对舌鳞状细胞癌SCC9细胞株的影响。方法：通过细胞免疫化学、RT-PCR和Western blot-ting方法检测Sema 3A、NRP1在舌癌组织和SCC9细胞株中的表达情况;通过MTT实验检测外源性Sema 3A蛋白对SCC9细胞株增殖的影响;通过Transwell检测外源性Sema 3A蛋白对SCC9细胞株迁移、侵袭的影响。结果：Sema 3A在舌癌组织和SCC9细胞株中阴性表达,NRP1在舌癌组织和SCC9细胞株中阳性表达;100 ng/ml外源性Sema 3A蛋白明显抑制SCC9细胞株的增殖（P〈0.05）,对其迁移、侵袭能力影响未见统计学差异（P〉0.05）。结论：舌癌组织和舌鳞状细胞癌SCC9细胞株中Sema 3A的阴性表达、NRP1的阳性表达可能与舌癌的发生发展有关。     

干扰FGF4表达可抑制口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移及侵袭能力

目的 探索干扰成纤维细胞生长因子4(fibroblast growth factor 4,FGF4)表达对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 培养5株OSCC细胞株并检测FGF4 DNA拷贝数及mRNA的表达变化;转染siRNA干扰FGF4表达并进行验证;干扰FGF4表达后,采用CCK-8检测OSCC细胞株HSC-3、H314细胞增殖能力的变化,采用Transwell方法检测细胞迁移及侵袭能力的变化.结果 同对照组相比,干扰FGF4表达后,HSC-3、H314细胞增殖能力明显下降(P<0.05).在HSC-3中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003组迁移细胞数分别下降了64.52％、66.81％;在H314细胞系中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003组迁移细胞数下降了66.81％、82.01％.同对照组相比,在HSC-3中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003侵袭细胞数分别下降了52.34％、49.89％.在H314中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003侵袭细胞数分别下降了75.3％、90.63％.结论 在OSCC细胞中,干扰FGF4表达可抑制OSCC细胞的增殖、迁移及侵袭能力.