前B细胞克隆增强因子在急性呼吸窘迫综合征大鼠肺组织中表达及对炎症因子TNF-α、IL-1β、NF-κB p65表达影响的研究

目的：观察前B细胞克隆增强因子（pre-B cell colony enhancing factor,PBEF）在急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）大鼠中肺组织的表达,以及对ARDS大鼠肺组织炎症因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）mRNA以及核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）p65蛋白表达的影响,通过以上指标的变化,结合已有体外实验所观察到的现象试图证实前B细胞克隆增强因子在ARDS中的促炎作用。方法：将40只成年SD大鼠随机分为空白对照组（C组）、模型组（OA组）、药物干预组（D组）、溶媒对照组（S组）,OA组、D组及S组大鼠用油酸尾静脉注射复制ARDS模型,D组造模前腹腔内注射PBEF抑制剂FK866,S组造模前注射等体积FK866溶媒二甲基亚砜。造模成功6 h后取材,比较各组大鼠肺组织PBEF、TNF-α、IL-1β mRNA以及NF-κB p65蛋白表达情况。结果：C组大鼠肺组织中几乎见不到PBEF表达,而在其他各组大鼠肺组织肺泡壁及肺泡水肿液中、支气管黏膜上皮及血管内皮均可发现PBEF蛋白分布;OA组、D组和S组大鼠PBEF及炎症因子mRNA和NF-κB p65蛋白表达增加（PBEF：P=0.000,P=0.000,P=0.000;TNF-α：P=0.0３５,P=0.000,P=0.000;IL-1β：P=0.000,P=0.000,P=0.000;NF-κB p65：P=0.000,P=0.000,P=0.000）,D组大鼠肺组织PBEF、炎症因子mRNA和NF-κB p65蛋白表达较OA组和S组低（PBEF：P=0.002,P=0.006;TNF-α：P=0.004,P=0.001;IL-1β：P=0.001,P=0.015;NF-κB p65：P=0.001,P=0.000）。结论：PBEF可能通过激活炎症反应、促进炎症因子表达等途径造成肺组织的炎性损伤,进而在ARDS发生发展中起重要作用。     

莱菔硫烷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤炎症反应的影响

目的：研究莱菔硫烷（sulforaphane,ＳＦＮ）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤炎症反应的影响,并进一步探讨其可能的机制。方法：利用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型,于MCAO后1 h腹腔注射ＳＦＮ 5 mg/kg。缺血2 h,再灌注24 h时,检测大鼠神经功能缺损评分并用TTC染色测定脑梗死体积;通过检测脑组织髓过氧物酶的含量反映中性粒细胞浸润和炎症反应的程度;Western blot检测核因子－κB（nuclear factor-κB,NF-κB）、肿瘤坏死因子－α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）以及白介素－６（interleukin-6,IL-6）的表达变化。结果：与模型组相比,5 mg/kg ＳＦＮ治疗组均能改善大鼠缺血再灌注损伤后神经功能缺损[（2.49±0.48）分 vs. （1.34±0.62）分,P=0.000] 、减少脑梗死体积[（0.41±0.02）% vs. （0.26±0.03）%,P=0.000],降低髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）的含量[（0.43±0.02） Ｕ/g vs. （0.35±0.02） U/g,P=0.000]。Western blot的结果显示,ＳＦＮ组脑组织NF-κB、TNF-α以及IL-6蛋白表达与MCAO组比较表达明显降低,分别为（0.39±0.05） vs. （1.65±0.05）,P=0.000;（0.30±0.05） vs. （0.91±0.03）,P=0.000;（0.49±0.11） vs. （1.50±0.03）,P=0.000。结论：ＳＦＮ可以通过减轻炎症反应对大鼠脑缺血/再灌注损伤起神经保护作用,其相关机制可能与其降低 NF-κB、TNF-α以及 IL-6表达有关。     

姜黄素对大鼠慢性细菌性前列腺炎的干预作用及其机制研究

目的：评价姜黄素对大鼠慢性细菌性前列腺炎（chronic bacterial prostatitis，CBP）炎性状态的影响及探讨其可能相关机制。方法：随机将40只SD大鼠分为姜黄素200 mg组、姜黄素100 mg组、氧氟沙星组、模型组及假手术组。采用大肠杆菌混悬液前列腺内注射的方法建立大鼠CBP模型，1个月后各治疗组给予药物治疗，持续12 d，电镜观察各组前列腺组织病理改变，real-time PCR测其环氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）与诱导性一氧化氮合成酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS） mRNA的表达，ELISA法检测肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）及Western blot测定核转录因子-?资B（nuclear factor κB，NF-κB）蛋白的表达水平。结果：①COX-2、iNOS mRNA及TNF-α在模型组中表达与假手术组比较都有升高（P=0.000，P=0.000，P=0.000），而各治疗组相对模型组而言其表达都有不同程度的降低（P<0.01），其中姜黄素200 mg组相对姜黄素100 mg组与氧氟沙星组表达量降低更为明显（COX-2：P=0.015，P=0.000；iNOS：P=0.000，P=0.000）。②采取姜黄素治疗的2组能够抑制NF-κB的表达，随着剂量提高作用越明显，且与COX-2、iNOS、TNF-α的表达呈正相关（rs=0.959，P=0.000；rs=0.945，P=0.000；rs=0.910，P=0.000），氧氟沙星组对NF-κB无明显影响。结论：姜黄素对大鼠CBP炎性状态有抑制作用，随剂量增加效果增强，其作用可能与抑制NF-κB的表达有密切关系。     

常压高浓度氧对脑缺血-再灌注大鼠缺血核心区核转录因子-κB的适度调节作用

目的 探究常压高浓度氧治疗（normobaric hyperoxia,NBO）对脑缺血-再灌注大鼠脑内白细胞介素-1β（interleukin 1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、核转录因子（nuclear factor-κB,NF-κB）及其抑制蛋白（inhibitor of κB,IκB）表达的影响,探讨NBO治疗对脑缺血后NF-κB介导的炎性反应损伤的作用。方法 将15只健康雄性SD大鼠（280~320 g）依据数字表法随机分为3组：假手术组（Sham,n=3）、正常氧浓度组（Normoxia,n=6）和NBO （n=6）组,应用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,缺血90 min再灌注24 h。Sham组和Normoxia组大鼠术后呼吸普通空气,NBO组大鼠术后至再灌注前呼吸100%常压氧气。采用免疫荧光染色和Western blotting的检测方法,研究NBO治疗对脑缺血核心区炎性因子IL-1β、TNF-α和转录调节因子NF-κB及其抑制蛋白IκB表达的影响。结果 免疫荧光结果显示：1与Sham组相比,Normoxia组缺血核心区IL-1β、TNF-α及核移位NF-κB p65阳性细胞数目明显增多（P<0.05）,荧光强度增强;2与Normoxia组相比,NBO组缺血核心区IL-1β、TNF-α及核移位NF-κB p65阳性细胞数目明显减少（P<0.05）,荧光强度减弱。Western blotting结果显示：1与Sham组相比,Normoxia组缺血核心区NF-κB p65显著升高,IκB明显降低（P<0.05）,2与Normoxia组相比,NBO组缺血核心区NF-κB p65水平显著降低,IκB明显升高（P<0.05）。结论 NBO治疗可能通过调节缺血核心区转录调控因子NF-κB的适度活化来抑制脑缺血再灌注炎性损伤,从而实现脑神经保护作用。     

雌激素对大鼠脑组织缺血-再灌注损伤的保护作用

目的：研究雌激素对绝经后雌性大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后NF-κB基因表达和TNF-α含量的影响。方法：采用线栓法复制局灶性脑缺血-再灌注模型,应用RT-PCR法检测NF-κB基因的表达,利用放免法检测TNF-α含量。结果：与模型组大鼠比较,雌激素组脑缺血-再灌注后NF-κB表达明显减弱（P＆lt;0.01）,TNF-α含量明显减少（P＆lt;0.01）。结论：雌激素能抑制大鼠脑缺血-再灌注后NF-κB表达,降低TNF-α含量,这可能是其脑保护作用的机制之一。     

重症急性胰腺炎大鼠心肌核因子-κB激活及重组葡激酶和益活清胰汤的干预作用

目的：研究重症急性胰腺炎（SAP）心肌功能损害时心肌NF-κB的活化及葡激酶的干预作用。方法：63只SD大鼠随机分为假手术组（n=9）、对照组（n=27）、葡激酶合用益活清胰汤治疗组（n=27）,SAP模型采用5%的牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射方法建立。ELISA法测定6 h、12 h、24 h各时点血TNF-α、IL-6含量,RT-PCR检测心肌NF-κBmRNA的表达,免疫组化法检测心肌NF-κB蛋白的表达,HE染色光镜下观察胰腺及心肌组织的病理变化。结果：术后6h大鼠心肌NF-κBmRNA及NF-κB蛋白表达异常增高,TNF-α、IL-6呈进行性升高,治疗组用药后心肌NF-κBmRNA及蛋白表达下调,与对照组相比（P〈0.05）,血TNF-α、IL-6明显下降,与对照组相比（P〈0.05）,治疗组胰腺及心肌组织的病理变化减轻。结论：SAP大鼠的心肌损伤可能与循环中TNF-α、IL-6水平升高导致的心肌NF-κB活化有关,益活清胰汤合用葡激酶对SAP并发的心肌损伤具有防治作用。     

右美托咪定对烧伤脓毒症患者TNF-α、NF-κB、IL-6及血气分析指标的影响

目的研究右美托咪定对烧伤脓毒症患者肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、核因子-κB（NF-κB）、白细胞介素6（IL-6）及血气分析指标的影响。方法选取2015 年1 月-2017 年1 月于该院选择择期手术治疗的烧伤脓毒症患者50 例。根据随机数字表分为观察组及对照组（各25 例）。所有患者均行常规麻醉诱导,观察组患者于麻醉诱导前15 min静脉输注右美托咪定0.3 μg/kg,且在手术过程中以0.3 μg/（kg·h）速率持续输注。对照组患者则给予等量生理盐水输注。分别比较不同时间两组患者的血压、心率（HR）、动脉血气分析指标水 平、静脉血TNF-α、NF-κB、IL-6水平以及住院时间、28 d病死率。结果两组患者T1、T2、T3及T4时的平均动脉压（MAP）、HR差异无统计学意义（P >0.05）。两组T1、T2、T3、T4 时的血清TNF-α、NF-κB、IL-6 水平比较,采用重复测量设计的方差分析：①不同时间TNF-α、NF-κB、IL-6水平有差异（ F=13.322、5.362和21.457,P =0.000、0.034和0.000）;②两组血清TNF-α、NF-κB、IL-6 水平有差异（F =11.472、16.813和14.195,均P=0.000）,观察组血清TNF-α、NF-κB、IL-6 水平均低于对照组;③两组血清TNF-α、NF-κB、IL-6 的变化趋势有差异（F =14.623、4.974和17.765,P=0.000、0.038和0.000）。两组T1、T2、T3、T4 时的血氧分压（PaO2）、动脉血二氧化碳分压（PaCO2）/ 吸入气中的氧浓度分数（FiO2）水平比较,采用重复测量设计的方差分析：①不同时间PaO2、PaCO2/FiO2水平有差异（F =15.382和17.367,均P=0.000）;②两组的PaO2、PaCO2/FiO2水平有差异（ F=9.276和12.343,均P=0.000）,观察组均高于对照组;③两组的PaO2、PaCO2/FiO2水平变化趋势有差异（F =9.156和10.485,均P=0.00）。观察组住院时间为（8.3±1.4）d,低于对照组的（9.3±1.5）d,差异有统计学意义（ <0.05）。结论右美托咪定应用于烧伤脓毒症患者手术中可有效维持术中循环稳定,具有一定的肺保护作用,有利于促进患者早日康复,值得临床推广应用。     

癫持续状态大鼠海马组织中肿瘤坏死因子α和核因子κB的变化及其相关性

目的探讨癫持续状态（SE）大鼠海马组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和核因子κB（NF-κB）的表达。方法对Wistar大鼠用10%匹罗卡品300 mg/kg腹腔注射（SE组,n=20）,产生SE后60 min终止发作;另设注射等量生理盐水的对照组（n=6）。饲养24 h后取大鼠海马组织,苏木精-伊红染色观察海马CA3区神经元数量,Western blotting测定海马组织NF-κB表达,双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）测定海马组织TNF-α表达。采用Pearson相关性分析法分析TNF-α和NF-κB表达的相关性。结果 SE组海马CA3区神经元数量（53.26±2.67）明显小于对照组（103.22±0.83）,差异具有统计学意义（P〈0.001）。SE组大鼠海马组织TNF-α和NF-κB表达水平均显著高于对照组（P〈0.001和P〈0.05）,且两者表达水平呈正相关（r=0.457,P=0.02）。结论 SE后24 h,TNF-α和NF-κB在大鼠海马组织中表达活性增强,且两者表达水平呈正相关。     

槲皮素通过调节SIRT1/NF-?资B通路抑制压力超负荷大鼠左心室肥厚

目的：通过动物实验探讨槲皮素对压力超负荷大鼠左心室肥厚的保护作用及其可能机制。方法：通过腹主动脉缩窄手术（abdominal aorta stenosis,AAC）构造大鼠左心室肥厚模型。将造模的40只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、AAC组、槲皮素组（Quercetin组）、EX527组,每组10只。Sham组、AAC组每日给予生理盐水灌胃和腹腔注射治疗;Quercetin组给予槲皮素50 mg/（kg·d）进行灌胃和生理盐水腹腔注射治疗;EX527组给予SIRT1特异性抑制剂EX527 5 mg/（kg·d）腹腔注射和槲皮素50 mg/（kg·d）灌胃治疗。4周后,计算心脏质量参数;超声心动图检测心脏功能、左心室后壁厚度;Masson染色检测心肌纤维化程度;免疫组织化学染色和蛋白质印迹法检测I型胶原（collagen type Ⅰ,ColⅠ）、Ⅲ型胶原（collagen Ⅲ,ColⅢ）、沉默信息调节因子1（silent information regulator 1,SIRT1）、核因子-?资B（nuclear factor-?资B,NF-?资B）的蛋白表达。结果：槲皮素可增强SIRT1的蛋白表达（Sham组：1.000±0.000,AAC组：0.364±0.071,Quercetin组：1.138±0.070,EX527组：0.293±0.092,F=240.539,P=0.000）,降低心脏质量（Sham组：1.139±0.053,AAC组：1.300±0.056,Quercetin组：0.998±0.085,EX527组：0.924±0.054,F=47.296,P=0.000）、左室后壁厚度（Sham组：1.587±0.136,AAC组：2.657±0.355,Quercetin组：1.800±0.200,EX527组：2.700±0.306,F=37.304,P=0.001）和心肌纤维化程度（Sham组：8.515±1.343,AAC组;23.832±1.095,Quercetin组：13.260±0.674,EX527组：24.162±1.312,F=278.741,P=0.000）,降低ColⅠ（Sham组：1.000±0.000,AAC组：3.132±0.372,Quercetin组：1.556±0.164,EX527组：2.819±0.368,F=82.083,P=0.000）、ColⅢ（Sham组：1.000±0.000,AAC组;2.395±0.437,Quercetin组：1.583±0.287,EX527组：2.434±0.461,F=23.608,P=0.024）、NF-?资B（Sham组：1.000±0.000,AAC组：5.498±0.642,Quercetin组：3.637±0.715,EX527组：5.125±0.682,F=79.912,P=0.005）蛋白的表达;EX527的使用降低了SIRT1蛋白的表达（P=0.000）,增加了心脏质量（P=0.001）、左室后壁厚度（P=0.000）和心肌纤维化程度（P=0.000）,增加了ColⅠ、ColⅢ、NF-?资B蛋白的表达（P=0.001,P=0.024,P=0.023）。结论：槲皮素可减轻压力超负荷大鼠左心室肥厚程度,其机制与调节SIRT1/NF-?资B通路有关。     

HIF-2α通过抑制炎症反应减轻大鼠脑出血损伤

目的：探讨缺氧诱导因子2α（hypoxia-inducible factor 2α,HIF-2α）在脑出血损伤后（intracerebral hemorrhage,ICH）的作用,并明确其是否参与调控脑出血后的炎症反应。方法：健康雄性SD大鼠95只,其中35只随机分配用于以下时间点分析：Sham、12 h、24 h、48 h、3 d、5 d和7 d,每组5只;另外60只随机分为Sham组（假手术组,注射等量生理盐水）、ICH组（脑出血模型组组,胶原酶诱导的脑出血模型）、Vehicle组（空载体组组,建模前注射空载慢病毒载体）和Oe-HIF-2α组（HIF-2α过表达组,建模前注射HIF-2α过表达慢病毒载体）用于脑含水量检测、神经功能评分、免疫印记分析和免疫荧光检测。通过脑含水量和Garcia神经功能评分评估脑损伤的严重程度;免疫印迹检测HIF-2α及肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor α,TNF-α）、白细胞介素-18（interleukin 18,IL-18）和白细胞介素-1β（interleukin 1β,IL-1β）的表达水平,免疫荧光检测病灶周边髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）的表达。结果：HIF-2α表达在ICH后24 h（0.555 4±0.070 2,P=0.000）开始上调并于3 d（2.368 4±0.346 6,P=0.000）达到峰值,随后降低;与ICH组相比较,Oe-HIF-2α组脑3 d时含水量明显降低（0.793 5±0.002 5,P=0.000）,神经功能明显改善（14.700 0±0.674 9,P=0.000）;与ICH组相比,Oe-HIF-2α组TNF-α（1.350 4±0.191 5,P=0.000）、IL-1β（1.158 4±0.070 8,P=0.000）、IL-18（0.784 2±0.073 9,P=0.000）等炎性介质在3 d时表达明显降低;Oe-HIF-2α组（3.500 0±0.534 5）病灶周边区域MPO表达明显低于ICH组（5.125 0±0.991 0,P=0.002）。结论：脑出血后,HIF-2α表达上调并且通过抑制TNF-α、IL-1β、IL-18等炎症因子的表达,抑制炎症反应减轻大鼠脑出血损伤。