����Soluplus�Ķ�ݹ������������Caco-2ϸ���ϵ���ȡ�ʹ�л

??OBJECTIVE To develop an analytical method for the quantification of scopoletin (Sco) and investigate the cellular uptake and metabolism of polyvinylcaprolactam-polyvinyl acetate-polyethylene glycol (soluplus)-based Sco micelles (Sco-Ms) in Caco-2 cells, as well as exploring the possible mechanisms involved in the oral absorption of Sco-Ms.METHODS Combined with enzymatic hydrolysis for pretreatment, a liquid chromatography-electrospray ionization-tandem mass spectrometric (LC-MS/MS) method was developed for the quantification of Sco and its corresponding metabolite. Then, cellular uptake efficiency and metabolic rate of Sco were calculated.RESULTS This method was proven to be linear over the concentration range of 5-1 000 ng??mL^-1. Cellular uptake of Sco-Ms increased significantly compared with that of free Sco at various time points. Meanwhile, Sco-Ms inhibited the enzymatic degradation of Sco. Sco-Ms were primarily internalized into enterocytes via macropinocytosis and clathrin-dependent pathways.CONCLUSION Enhanced cellular uptake and decreased metabolic rate are pivotal mechanisms by which Sco-Ms promotes oral absorption of Sco.     

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??OBJECTIVE To study the absorption characteristics of cajanonic acid A using in vitro Caco-2 cell model. METHODS The toxicity of cajanonic acid A on Caco-2 cells was investigated by MTS, the bi-directional transport of cajanonic acid A from AP??BL and BL??AP was investigated, the cumulative transport and apparent permeability(P_app) were calculated,and the relationships between the transport amount and concentration, time, and the P-glycoprotein inhibitor verapamil were further studied. RESULTS The transport amount of cajanonic acid A increased with time and concentration, the P_app from apical(AP) side to basolateral(BL) side was 2.01??10^-6-3.95??10^-6 cms^-1, and the P_app from basolateral(BL) side to apical(AP) side was 2.51??10^-6-6.03??10^-6 cms^-1. CONCLUSION The current data suggests that the absorption of cajanonic acid A in the Caco-2 cell model is not a simple passive diffusion, the efflux ratio indicates that the efflux protein of P-gp may be involved, and the P_app suggests that the oral absorption is medium.     

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??OBJECTIVE To investigate the intestinal absorption characters of mosapride citrate(MC) and its tablets. METHODS The Caco-2 cell monolayer was cultured and the in situ single-pass intestinal perfusion(SPIP) in rat model was created for studying the drug absorption properties, using phenol red method to revise the perfusate volume, a HPLC method was developed to simultaneously detect the phenol red and MC, the absorptive coefficient of P_app and P_eff was calculated. RESULTS MC was absorbed by the whole intestine segments in rats, mainly at upper small intestine. The tablets showed high permeability and good intestinal absorption in Caco-2 cells and SPIP in rats. CONCLUSION In the Caco-2 cells and rats SPIP models, the tablets are prepared showed good consistency with the branded drug.     

维生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯对Caco-2细胞模型转运宝藿苷Ⅰ的影响

目的 考察非离子表面活性剂维生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯(TPGS)对宝藿苷Ⅰ在Caco-2细胞模型转运的影响.方法 采用Caco-2细胞模型研究不同浓度的TPGS对宝藿苷Ⅰ细胞转运行为的影响,以超高压液相色谱(UPLC)法测定细胞样品溶液中宝藿苷Ⅰ的浓度,计算表观渗透系数(Papp).结果 在应用TPGS后,宝藿苷Ⅰ从细胞绒毛面供给侧(AP)→基底面外侧(BL)的跨膜转运量明显增高(P＜0.05),外排比率显著下降(P＜0.05).当宝藿苷Ⅰ与TPGS比例分别为1:1、1:3、1:9时,宝藿苷Ⅰ的外排比率分别为1.978 8、1.779 8、1.609 0,与仅用宝藿苷Ⅰ相比分别下降了73％、76％、78％.结论 在Caco-2细胞模型上,TPGS可显著促进宝藿苷Ⅰ的吸收.     

黄酮类化合物在Caco-2细胞模型中的吸收规律

目的:研究黄酮类化合物—槲皮素、木樨草素、芹菜素、大豆苷元、染料木素、木樨草苷、忍冬苷、黄芩苷及芦丁在Caco-2细胞模型中的吸收特性,探讨其吸收与结构的关系。方法:分别测定Caco-2细胞在各种条件下对9种黄酮类化合物的吸收。结果:Caco-2细胞对9种黄酮类化合物吸收均以偏酸性介质为佳;吸收量均随着浓度的增加而呈线性增加;当pH5·5时,5种黄酮苷元的吸收量顺序为:槲皮素>木樨草素>染料木素>芹菜素>大豆苷元;4种黄酮苷的吸收量的顺序为:木樨草苷>忍冬苷>黄芩苷>芦丁。结论:①酸性介质有利于9种黄酮类化合物在Caco-2细胞模型中的吸收,介质pH的改变对槲皮素在Caco-2细胞模型上吸收的影响最大,而对芹菜素、染料木素和大豆苷元的影响较小。②9种黄酮类化合物在Caco-2细胞模型上的吸收均为被动扩散。③黄酮苷元母核上的-OH数目及B-环的连接位置均对黄酮苷元的吸收有影响,而苷元糖苷化后,其连接糖的数目、种类及连接位置在黄酮苷的吸收中起主导作用。本实验中黄酮苷元的吸收均高于黄酮苷。     

替米沙坦在Caco-2细胞模型中的体外转运研究

 目的研究替米沙坦(telmisartan,TMS)在Caco-2细胞中的跨膜转运特征。方法采用体外培养的人小肠上皮细胞Caco-2模型对TMS的跨膜转运进行研究。考察了浓度、pH、P-糖蛋白(P-glyprotein,P-gp)抑制剂对TMS跨膜转运的影响。结果TMS在Caco-2细胞中的转运存在外排作用,并且外排作用随着浓度的增加趋于饱和;另外TMS的吸收转运随pH值的增加而减少。加入P-糖蛋白抑制剂环孢素A和胺碘酮后,P_ratio从3.5分别下降到1.2和0.9,加入前后有极显著性差异(P<0.01)。结论P-gp参与了TMS的跨膜转运,从而从吸收机制上初步解释了P-gp的外排作用可能是TMS生物利用度低,个体差异大的原因。     

紫草素在Caco-2细胞的摄取特性

目的:研究紫草素(SKN)在Caco-2细胞的摄取特性.方法:以Caco-2细胞单层模型研究紫草素的细胞摄取规律.采用高效液相色谱法测定细胞中SKN浓度,考察时间、pH、药物浓度及抑制剂对Caco-2细胞摄取SKN的影响.结果:SKN在Caco-2细胞中的摄取呈时间依赖性;SKN在0.2 ～3.2 mg·L-1内的摄取呈线性增加,符合被动扩散过程;pH 8.0条件下药物的细胞摄取量(0.350±0.004) mg·g-1显著低于pH 5.0[(0.450±0.008) mg·g-1,P＜0.01];加入维拉帕米,叠氮化钠及2,4-二硝基酚后,与对照组相比,SKN的细胞摄取量显著低,分别为(0.320±0.007),(0.340±0.003),(0.260±0.007) mg·g-1(P ＜0.01).结论:SKN的细胞摄取机制主要是被动转运;P-糖蛋白未参与SKN的转运过程.     

葛根素在Caco-2细胞模型中的吸收特性

目的研究葛根素在Caco-2细胞中的吸收特性。方法改变药物浓度、实验温度和使用合适的抑制剂,测定葛根素在Caco-2细胞中的跨膜转运特性。结果葛根素在Caco-2细胞的转运呈现较强的方向性,随着葛根素质量浓度的增加,其表观渗透率(PDR)降低(2.1~1.4)。随着温度升高PDR增大。当加入代谢抑制剂KCN和2,4-二硝基苯酚时,葛根素的PDR降低(由1.7分别降至1.0和1.2)。当加入100mg/L维拉帕米时,A面到B面的表观渗透系数Papp(A→B)从(0.84±0.18)×10-7cm/s增加到(1.01±0.17)×10-7cm/s,而B面到A面的Papp(B→A)从(1.43±0.18)×10-7cm/s降低到(1.11±0.24)×10-7cm/s。结论葛根素在Caco-2细胞模型中的转运受到P-糖蛋白的外排作用。     

应用Caco-2细胞模型进行毒性中药研究的思路

本文概述了Caco-2细胞模型的基本特点、培养方法及其在中药研究方面的应用, 提出了应用Caco-2细胞模型对毒性中药进行研究的新思路。     

应用Caco-2细胞模型进行毒性中药研究的思路

本文概述了Caco-2细胞模型的基本特点、培养方法及其在中药研究方面的应用,提出了应用Caco-2细胞模型对毒性中药进行研究的新思路。     

乌头碱在Caco-2细胞模型上的转运行为

目的:研究乌头碱在Caco-2细胞模型上的转运行为。方法:采用MTT法确定乌头碱在Caco-2细胞转运过程中的安全浓度范围,以乌头碱累积转运量及表观渗透系数Papp为指标,采用高效液相色谱法对成分进行检测,考察不同浓度、不同孵育时间乌头碱在Caco-2细胞模型上的双向转运。结果:乌头碱累积转运量与孵育时间、给药浓度呈正相关,不同浓度乌头碱Papp保持恒定,无统计学差异,且外排作用明显强于吸收,外排比接近1.5,Papp约为1×10-5cm·s-1。结论:乌头碱以被动转运为主,且可能存在外排蛋白的参与,为吸收良好的一类药物。     

硫辛酰胺与硫辛酸在Caco-2细胞单层模型中的转运研究

目的研究硫辛酰胺与硫辛酸在体外Caco-2细胞单层模型的转运。方法采用MTS法考察硫辛酰胺与硫辛酸对Caco-2细胞存活率的影响;考察硫辛酰胺与硫辛酸在肠腔侧(apical side,AP)与基底侧(basolateral side,BL)的双向转运,计算累计转运量,表观渗透系数(Papp)及转运百分比,进一步探究转运量与浓度和时间之间的关系。结果硫辛酰胺与硫辛酸转运量与浓度和时间呈依赖性增加,AP→BL硫辛酰胺与硫辛酸Papp值分别为2.44344×10^-5~2.39291×10^-5、8.17978×10^-6~7.89725×10^-6 cm·s^-1,BL→AP硫辛酰胺与硫辛酸Papp值分别为2.25813×10^-5~2.2143×10^-5、8.26798×10^-6~7.92673×10^-6 cm·s^-1。结论在Caco-2细胞的转运实验中硫辛酰胺优于硫辛酸,提示其口服吸收好,生物利用度高,但仍需体内药动学数据的验证。     

黄体酮及其前体脂质体制剂的Caco-2细胞转运研究

 目的 研究黄体酮及其前体脂质体制剂的胃肠吸收转运机制。方法 采用Caco-2细胞模型考察黄体酮及其脂质体的转运,考察转运时间、药物浓度及抑制剂（环孢素和维拉帕米）对黄体酮转运的影响。结果 黄体酮表观渗透系数随浓度变化而变化,抑制剂的加入会提高黄体酮的表观渗透系数,黄体酮脂质体能使黄体酮累积转运量提高,表观渗透系数明显增加,黄体酮脂质体的转运符合被动扩散特征。结论 黄体酮的吸收受P-糖蛋白的介导,这可能是导致其生物利用度低的原因之一。黄体酮属生物药剂学分类系统中Ⅱ类药物,提高溶解度可提高其生物利用度,黄体酮脂质体能通过改变黄体酮的吸收机制,使黄体酮转运以被动扩散方式进行,从而明显促进黄体酮的吸收。
     

羟基红花黄色素A的Caco-2细胞摄取转运研究

 目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)的胃肠吸收转运机制。方法采用Caco-2细胞模型考察孵育时间、介质pH、药物浓度及抑制剂(环孢菌素A和叠氮钠)对羟基红花黄色素A摄取转运的影响,并分析HSYA灌胃给药后在大鼠尿及粪中的累积排泄。结果HSYA的摄取符合被动扩散过程,pH7.8环境下药物的细胞摄取量[(1.05±0.045)mg·g^-1]低于pH5.4[(1.24±0.09)mg·g^-1](P<0.05),其在Caco-2单细胞层的表观透过系数(Papp)为(2.16±1.21)×10^-8cm·s^-1,加入环孢菌素A和叠氮钠后其Papp显著提高(P<0.05),分别为(47.92±17.8)×10^-8和(12.53±4.55)×10^-8cm·s^-1。HSYA大鼠灌胃给药(5.6mg·kg^-1)后31h,其尿和粪中的累积排泄量分别为给药剂量的0.74%和28.57%。结论HSYA的吸收基本符合被动扩散过程并有P-gp的参与,其黏膜透过性较差,碱性环境相对不利于药物的吸收。HSYA口服后的胃肠吸收较差,大量的药物被排出体外或在胃肠道内被代谢转化。     

复方脑忆源片主要成分淫羊藿苷在Caco-2细胞模型上的转运研究

目的:对复方脑忆源片中主要成分淫羊藿苷进行转运研究,阐明吸收特点.方法:利用Caco-2细胞模型,对复方脑忆源片中主要成分淫羊藿苷(ICA)进行体外转运,并通过高效液相(Luna Kromasil C18色谱柱(4.6 mm× 150 mm,5μm);流动相乙腈∶水(30∶70);流速1.0 mL· min-1;检测波长270 nm;)测定单体、药材及复方中的淫羊藿苷转运后的含量.结果:淫羊藿苷在小肠吸收转运过程随时间增长而增加,可能会被Caco-2细胞中的P-gp转运蛋白外排.与淫羊藿单体和淫羊藿提取物中的淫羊藿苷比较,脑忆源片可显著提高淫羊藿苷的转运,同时可降低淫羊藿苷的外排作用.结论:在脑忆源片中,由于淫羊藿苷外排减少,可认为通过复方配伍后,方中的其他药物抑制了淫羊藿苷的外排,使其可以更好的发挥药理作用.     

新穿心莲内酯在Caco-2细胞单层模型中的吸收机制研究

目的： 研究新穿心莲内酯在Caco-2细胞单层模型中的吸收机制。 方法： 通过研究新穿心莲内酯在模型中的双向转运,考察时间、药物浓度（50,75,100 μmol·L^-1）、温度（4,25,37℃）和抑制剂（碘乙酰胺、维拉帕米和MK-571）对新穿心莲内酯吸收的影响。用LC-MS-MS检测药物浓度,计算其表观渗透系数（P_app）。 结果： 新穿心莲内酯在Caco-2细胞模型中,随时间和浓度的增加,药物吸收呈线性增加。P_BA/P_AB≈1.0;温度37℃时,P_app为（2.02±0.31）×10^-6 cm·s^-1,与4℃[（5.97±0.11）×10^-7 cm·s^-1],25℃[（9.17±0.50）×10^-7cm·s^-1]比较有显著性差异（P < 0.05）;受抑制剂碘乙酰胺影响,P_app =（4.79±0.42）×10^-6 cm·s^-1与对照组新穿心莲内酯P_app [（1.28±0.69）×10^-6 cm·s^-1]比较有显著性差异（P<0.05）。 结论： 新穿心莲内酯在Caco-2细胞中的吸收方式主要是被动转运和载体介导的主动转运。     

蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运机制研究

 目的 研究蛇床子素在 Caco-2 细胞模型中的转运机制。方法 通过研究蛇床子素在 Caco-2 细胞模型中的转运,考察蛇床子素浓度、PEG600、P-gp抑制剂维拉帕米（verapamil及温度对蛇床子素转运的影响。结果 随着蛇床子素溶液浓度和温度的升高,蛇床子素在Caco-2 细胞中 AP-BL 的转运量增加;PEG600对蛇床子素在 Caco-2 细胞中的 AP-BL 的转运量有显著增加;P-gp 抑制剂维拉帕米对蛇床子素在 Caco-2 细胞中转运的表观通透系数 PAP 和 PBL 无显著影响。结论 蛇床子素表观通透系数 PAP大于10×10-6 cm·s-1,较易被 Caco-2 细胞吸收,但由于3个浓度蛇床子素溶液的PAP 和 PBL比值无明显变化、P-gp 抑制剂对 PAP 和 PBL 无明显影响及转运的活化能较低(17.31 kJ·mol-1,因此,蛇床子素在 Caco-2 细胞模型中的转运机制主要是被动转运。     

23-羟基白桦酸在Caco-2细胞模型中的吸收特性研究

 目的研究23-羟基白桦酸在Caco-2细胞模型中的吸收特性,为设计合理的给药方式提供依据。方法利用MTT实验筛选出23-羟基白桦酸在Caco-2细胞中的安全浓度,然后用Caco-2细胞单层模型研究23-羟基白桦酸的双向转运,采用同位素示踪法检测药物浓度,计算其表观渗透系数,考察时间、药物浓度对23-羟基白桦酸吸收的影响。结果23-羟基白桦酸在Ca- co-2细胞模型中的转运中对应时间点表观渗透系数值(P_app)A→B约等于(P_app)B→A,随时间增加P_app逐渐下降,而在所测浓度范围内P_app值基本保持恒定。结论23-羟基白桦酸在Caco-2细胞模型中的吸收机制主要是被动转运。     

卡莫氟在 Caco - 2 细胞模型中的吸收和转运特性

  目的 应用 Caco-2 细胞模型对卡莫氟 （ carmofur , 1-hexylcarbamoyl-5-fluorouracil , HCFU ） 的吸收、转运特性及其机制进行研究。 方法 分别考察时间、 pH 、浓度及抑制剂对 HCFU 吸收的影响;测定药物在不同时间双向转运的速度,计算 HCFU 的表观渗透系数,研究不同药物浓度对其转运的影响。 结果 Caco-2 细胞对 HCFU 的吸收在 20 min 内呈线性,药物摄取时间定为 10 min ; pH 对 HCFU 的吸收没有显著影响,浓度依赖性结果显示, HCFU 的吸收由一个饱和成分和一个非饱和成分组成; P- 糖蛋白（ P-glycoprotein , P-gp ）抑制剂维拉帕米对 HCFU 的吸收基本没有影响,而耐药相关性蛋白（ MRP ）抑制剂 MK571 的存在可显著增加对 HCFU 的吸收（ P <0.05 ）。双向转运的表观渗透性存在方向性差异,且受浓度的影响。 结论 HCFU 在 Caco-2 细胞中以主动和被动 2 种形式吸收,其吸收存在外排机制, MRP2 可能对 HCFU 的吸收有外排作用。