基于JAK2/STAT3/VEGF通路探讨周氏固金消瘤汤抗人肺腺癌A549细胞的机制研究

目的   研究周氏固金消瘤汤(ZSGJXLT)对人肺腺癌A549增殖、凋亡和血管生成的影响及其机制。方法   通过CCK-8法检测ZSGJXLT对细胞活性的影响;Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;体外血管形成实验观察血管生成情况;Western blot法检测Bcl-2、Bax、VEGF、JAK2、p-JAK2、STAT3及p-STAT3表达;构建小鼠A549肺癌皮下移植瘤模型,并给予不同浓度ZSGJXLT治疗,21 d后处死小鼠称取瘤质量,计算抑瘤率。结果   ZSGJXLT显著抑制A549的活性(P < 0.01),具有时间及浓度依赖性;ZSGJXLT诱导A549细胞凋亡(P < 0.05~0.01),具有浓度依赖性;ZSGJXLT显著抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)体外小管形成(P < 0.01),呈浓度依赖性;Western blot结果显示ZSGJXLT能引起Bax/Bcl-2表达明显上调(P < 0.05~0.01),VEGF、p-STAT3/STAT3和p-JAK2/JAK2的表达明显下调(P < 0.01);小鼠体内实验结果表明,与模型组比较,不同浓度ZSGJXLT(0.25、1、4 g/kg)均可显著抑制肿瘤生长(P < 0.05~0.01),抑瘤率分别为21.66%、35.52%和48.24%。结论   周氏固金消瘤汤可以通过影响JAK2/STAT3/VEGF通路的活化,发挥抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,抗血管生成等多途径抗人肺腺癌A549的作用。为开发新型抗肺癌中药复方ZSGJXLT提供了实验依据。      

柴胡桂枝汤加减方联合卡培他滨抑制三阴性乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的生长：基于抑制IL-6/STAT3信号通路

目的 探讨柴胡桂枝汤加减方（CHGZD）联合卡培他滨对三阴性乳腺癌裸鼠皮下移植瘤生长及凋亡的影响及其作用机制。方法 建立三阴性乳腺癌移植瘤模型,随机分为模型对照（等体积双蒸水）组,CHGZD低（10.62 g/kg/d）、中（21.23 g/kg/d）、高（42.46 g/kg/d）剂量组,卡培他滨（0.2 mg/kg/d）组,联合组（CHGZD 42.46 g/kg/d+卡培他滨0.2 mg/kg/d）,10只/组,干预21 d。观察小鼠一般情况,给药结束后测瘤体积、称瘤质量并计算抑瘤率;苏木素-伊红（HE）染色观察肿瘤组织病理学改变;ELISA检测血清中IL-6水平;实时荧光定量聚合酶链式反应、Western blot分别检测各组肿瘤组织中IL-6、STAT3、p-STAT3蛋白水平及肿瘤生长和凋亡相关基因Bax、Bcl-2和CyclinD1的表达。结果 与模型对照组比较,中药组和联合组乳腺癌荷瘤裸鼠摄食量增加,精神状态较好,反应灵敏,体质量增加,瘤体积、瘤质量显著降低（P<0.01）;与卡培他滨组比较,中、高剂量组及联合组抑瘤率显著升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中、高剂量组及联合组肿瘤组织出现了不同程度的肿瘤细胞退变,肿瘤细胞密度明显减少;中药组和联合组IL-6水平,IL-6、STAT3 mRNA,IL-6、STAT3和p-STAT3蛋白表达显著降低（P<0.05）,其下游基因Bcl-2和CyclinD1 mRNA和蛋白表达显著降低（P<0.05）,Bax mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.05）。结论 柴胡桂枝汤加减方与卡培他滨联用可显著抑制三阴性乳腺癌裸鼠体内肿瘤的生长,其作用机制可能为抑制IL-6/STAT3信号通路,调控Bax、Bcl-2和CyclinD1基因表达抑制细胞的增殖和分化,诱导细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。     

柴芪益肝颗粒联合紫杉醇抑制裸鼠肝癌生长的在体成像研究

目的探讨柴芪益肝颗粒(CG)和紫杉醇(taxol)对裸鼠异位肝癌的作用及对Bax、p53和VEGF表达的影响。方法应用转染及G418筛选构建单克隆Hep G2/EGFP细胞系,细胞注射至裸鼠形成异位肝癌模型,应用荧光成像技术在体观察在柴芪益肝颗粒合Taxol作用下肿瘤的生长,用免疫组化法检测肿瘤组织中Bax、p53、VEGF的表达。结果与对照组相比,Taxol组和Taxol+CG组在3周和4周时降低肝癌增殖速度,Taxol+CG组抑制作用显著优于Taxol组比。Taxol+CG组增加Bax表达,降低p53表达和VEGF表达。结论柴芪益肝颗粒明显增强Taxol对裸鼠异位肝癌生长的抑制作用,其作用与增加Bax表达、抑制p53、VEGF表达相关。     

大黄酸通过抑制CDK9/STAT3途径防治低氧性肺动脉高压

目的：探究中药单体大黄酸对低氧性肺动脉高压（HPH）的影响及其作用机制。方法：以SPF级SD大鼠为研究对象,设置常氧组（N）、低氧组（H）、低氧+大黄酸组（HR）。Western blot法检测每组大鼠体内提取的肺组织匀浆中p-CDK9、CDK9、p-STAT3/STAT3、PCNA、Bcl-2、Bax、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3（CC-3）蛋白表达差异。以右心导管法插管检测平均肺动脉压（mPAP）评估大鼠的血流动力学情况,称重法检测右心肥厚程度,HE染色后观察血管形态以评估大鼠的肺血管重塑情况。结果：与N组比,H组肺匀浆中p-CDK9、CDK9、p-STAT3/STAT3、PCNA、Bcl-2 蛋白表达均上调,而Bax、Caspase-3、CC-3 蛋白表达下调（均P ＜0.05）,H组大鼠的mPAP及右心肥厚指数显著上升（均P ＜0.05）,管壁面积（WA）/管总面积（TA）明显增加（P ＜0.05）,提示大鼠的肺血管重塑程度明显加重;与H组比,HR组肺匀浆中p-CDK9、CDK9、p-STAT3/STAT3、PCNA、Bcl-2蛋白表达均下调,而Bax、Caspase-3、CC-3 蛋白表达上调（均P ＜0.05）,mPAP及右心肥厚指数显著降低（均P ＜0.05）,WA/TA明显降低（P ＜0.05）,提示肺血管重塑改善。结论：大黄酸可能通过抑制CDK9的表达及磷酸化,抑制STAT3的磷酸化,缓解低氧诱导的大鼠肺动脉高压,改善肺血管重塑和右心肥厚。     

蔡氏扶正消癥汤联合奥沙利铂抑制胃癌生长的研究

目的探讨蔡氏扶正消癥汤联合奥沙利铂对体内外胃癌生长的影响及其机制。方法奥沙利铂、蔡氏扶正消癥汤及联合用药作用人胃癌细胞株SGC-7901后,CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting检测胃癌细胞中Bax和Bcl-2的表达;建立裸鼠胃癌皮下移植瘤模型,分别给予奥沙利铂、蔡氏扶正消癥汤及联合治疗,实验结束后分别测量各组裸鼠皮下移植瘤重量后计算抑瘤率;免疫组织化学法检测各组裸鼠肿瘤组织中Bax和Bcl-2的表达。结果蔡氏扶正消癥汤可明显增强奥沙利铂对体外胃癌细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用;同时蔡氏扶正消癥汤联合奥沙利铂可显著抑制裸鼠胃癌皮下移植瘤生长,与对照组和奥沙利铂组相比较均有显著性差异(P<0.05);蔡氏扶正消癥汤联合奥沙利铂可分别上调和下调Bax和Bcl-2在体内外胃癌中的表达。结论蔡氏扶正消癥汤可增强奥沙利铂对体内外胃癌生长的抑制作用,该作用可能通过上调Bax表达和下调Bcl-2表达而实现。     

Anti-tumor effects of polybutylcyanoacrylate nanoparticles of diallyl trisulfide on orthotopic transplantation tumor model of hepatocellular carcinoma in BALB/c nude mice

Background Hepatocellular carcinoma (HCC) ranked the second among the causes of cancer mortality in China since the 1990s. Up to now, medication still plays an important role in the treatment of HCC. The therapies based on the allicin as a potential chemopreventive analog although is in its infancy at the present time, may have a significant role in the future management of HCC. Diallyl trisulfide (DATS) is a natural compound derived from garlic. In this study, we investigated the inhibitory effects of hepatic targeted polybutylcyanoacrylate nanoparticles of diallyl trisulfide (DATS-PBCA-NP) on orthotopic transplanted HepG2 hepatocellular carcinoma in nude mice. Methods DATS-PBCA-NP were detected by transmission electron microscope (TEM) and high-performance liquid chromatography (HPLC). The orthotopic transplantation HCC models were established by implanting HCC HepG2 xenograft bits under the envelope of the mice liver. Successful models (n＝29) were divided into 4 groups: normal saline (NS), empty nanoparticles (EN), DATS and DATS-PBCA-NP were intravenously administered to the mice respectively for 2 weeks. In vivo antitumor efficacy was evaluated by the measurement of tumor volume. Terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) assay and protein levels of apoptosis and cell proliferation proteins by immunoblotting in tumor tissues were performed to elucidate the possible mechanism.Results DATS-PBCA-NP possessed smooth and round appearance, dispersed well, and released in vitro in accord with double phase kinetics model. DATS-PBCA-NP changed the tissue/organ distribution of DATS in vivo. The successful rate of tumor implantation was 100%. Intravenous administration of DATS-PBCA-NP significantly retarded the growth of orthotopically transplanted hepatoma in BALB/c nude mice (compared with the other three groups, all P&lt;0.05) without causing weight loss (P&gt;0.05). TUNEL staining showed that the tumors from DATS-PBCA-NP treated mice exhibited a markedly higher apoptotic index compared with control tumors. Western blot analysis of tumor tissue revealed that the down-regulated expression of proliferation cell nuclear antigen (PCNA) and Bcl-2 proteins in DATS-PBCA-NP group, and there were no significant differences in the expression of Fas, FasL and Bax proteins among the four groups (P&gt;0.05).Conclusions DATS-PBCA-NP has good prolonged release effect in vivo and hepatic-targeted activity, and significant anti-tumor effect on the orthotopic transplantation HCC model in mice in association with the suppression of proliferation and the induction of apoptosis of tumor cells. These advantages are probably due to their liver targeting characteristics and consequently bring a higher anti-tumor activity.     

重组人腺病毒P53和碘125粒子调节Bax和Bcl2对裸鼠胆管癌移植瘤增殖和凋亡的影响

目的 探讨重组人腺病毒P53（rHAd－P53）和碘125 粒子调节Bax 和Bcl2 对胆管癌裸鼠移植瘤增殖和凋亡的影响。方法 选用人胆管癌细胞构建人裸鼠胆管癌移植瘤模型,按随机数字表法将48 只裸鼠分为空白对照组、rHAd-P53 组、碘125 粒子组和rHAd-P53+碘125 粒子组。测量治疗前后移植瘤大小、重量,免疫组织化学法检测增殖相关蛋白（Ki－67）,TUNEL 法检测凋亡指数,Realtime－PCR 法检测Bcl2 和Bax mRNA 表达,Western blot 检测Bcl2 和Bax 蛋白表达。结果 治疗后,与空白对照组比较,rHAd-P53 组、碘125 粒子组、rHAd-P53+碘125 粒子组移植瘤体积差值、瘤重、增殖指数、Bcl2 和Bcl2/Bax mRNA、Bcl2 蛋白均显著性降低,Bax mRNA 和蛋白均显著性升高。与rHAd-P53 组比较,碘125 粒子组或rHAd-P53+碘125 粒子组移植瘤体积差值、瘤重、增殖指数、Bcl2 和Bcl2/Bax mRNA、Bcl2 蛋白均显著性降低,抑瘤率、Bax mRNA 和蛋白均显著性升高。与碘125 粒子组比较,rHAd-P53+碘125 粒子组移植瘤体积差值、瘤重、增殖指数、Bcl2 和Bcl2/Bax mRNA、Bcl2 蛋白均显著性降低,抑瘤率、Bax mRNA 和蛋白均显著性升高。结论 rHAd-P53 和碘125 粒子能通过抑制Bcl2 的表达、促进Bax 的表达而抑制裸鼠胆管癌移植瘤增殖、促进其凋亡,rHAd-P53 能增强碘125 粒子放疗的敏感性,二者联用较单独使用效果增加。     

垫状卷柏提取物诱导凋亡抗肿瘤作用研究

目的 研究垫状卷柏提取物抗肿瘤作用及相关机制。方法 采用皮下接种H22肝癌细胞株构建小鼠H22肝癌移植瘤模型,随机分为对照组（生理盐水）、5-FU组（30 mg/kg）、垫状卷柏提取物（SP）高、低剂量组（189、63 mg/kg）,连续灌胃15 d。观察小鼠肿瘤生长情况,计算抑瘤率及肝、脾、胸腺指数;TUNEL法观察肿瘤组织细胞凋亡,Western blot测定凋亡相关蛋白的表达,qPCR检测Bax mRNA和Bcl-2 mRNA。结果 与对照组比较,SP高、低剂量组小鼠体质量及肝、脾、胸腺指数均无显著差异;SP高、低剂量组小鼠的肿瘤质量均显著降低,呈现较高抑瘤率（P<0.01）,且高剂量组与5-FU组相近;经TUNEL染色法观察,可见明显凋亡形态改变。qPCR检测表明,SP显著上调Bax mRNA的表达,下调Bcl-2 mRNA的表达。Western blot结果显示SP处理后,Bax、cytochrome c及cleaved caspase-3,caspase-8和caspase-9的表达显著上调（P<0.01）,Bcl-2表达明显减弱,呈剂量依赖性。结论 SP有效抑制H22小鼠体内肿瘤生长,其机制与激活caspase诱导凋亡相关。      

地龙提取液对小鼠结肠癌移植瘤血管新生的抑制作用

目的:观察地龙提取液对小鼠结肠癌移植瘤生长及血管新生的抑制作用,并探索相关分子机制。方法:将裸鼠皮下注射人结肠癌HCT116细胞以建立小鼠移植瘤模型,分为模型组和地龙组,分别灌胃给予溶媒和地龙提取液(100 mg·kg-1·d-1),持续28 d,其间测量肿瘤体积。干预结束后取材,称取肿瘤质量,分析肿瘤组织中血红蛋白含量,实时定量PCR检测CD31和CD105的mRNA水平,Western blot检测JAK和STAT3的蛋白及磷酸化水平。结果:地龙提取液可以抑制肿瘤体积及质量,从肿瘤植入后第12天开始即有显著作用(P0.05)。地龙提取液显著降低肿瘤组织中血红蛋白含量以及内皮标志物CD31和CD105的mRNA水平(P0.01),地龙提取液显著降低JAK及STAT3的磷酸化水平(P0.01)。结论:地龙提取液对小鼠结肠癌移植瘤的生长及血管新生有显著抑制作用,该作用可能与其抑制JAK-STAT3通路有关。     

MicroRNA-16抑制人卵巢癌在裸鼠皮下移植瘤生长的研究

目的:探讨microRNA-16(miRNA-16)转染对人卵巢癌细胞株SKOV-3在裸鼠皮下移植瘤形成的抑制作用。方法:将成熟miRNA-16双链模拟物及其阴性对照序列转染人卵巢癌SKOV-3细胞株,然后分别接种于裸鼠皮下,观察两组肿瘤出现时间及肿瘤体积变化,接种20d后取出肿瘤组织称重,计算抑瘤率。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肿瘤组织中Bcl-2mRNA表达,并进行免疫组化检测两组肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达。结果:miRNA-16转染组肿瘤生长相对延缓,种瘤20d后miRNA-16转染组移植瘤重量明显小于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),抑瘤率达38.46%;PCR结果显示miRNA-16转染组Bcl-2 mRNA表达量与阴性对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);移植瘤组织免疫组化分析两组Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:miRNA-16对人上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤生长有抑制作用,可能成为卵巢癌基因治疗的新靶点。     

大蒜素纳米粒抑制原位移植性肝癌生长的实验研究

目的：探讨大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒（DATS-PBCA-NP）对人肝癌裸鼠原位移植瘤生长的影响及其可能的分子机制。方法：采用在裸鼠肝包膜下接种肝细胞HepG2移植物的方法构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型,并将其分为空白对照组、空白纳米粒组、大蒜素（DATS）注射液组和DATS纳米粒组(DATS-PBCA-NP)进行实验;用药2周后处死实验动物,观察肿瘤体积的变化,计算抑瘤率,采用免疫组化法检测肿瘤组织中的增殖细胞核抗原（PCNA）,Western blot检测原位肝癌移植物组织中细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达。结果：人肝癌裸鼠原位移植瘤模型构建成功率为100％,DATS纳米粒组平均肿瘤体积明显缩小（P＜0.05),免疫组化法和Western blot检测显示,DATS纳米粒组PCNA蛋白表达明显降低（P＜0.05）,而Fas和FasL蛋白的表达各组差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：DATS-PBCA-NP对肝脏具有明显的靶向性,能显著抑制肝癌体内生长,其机制可能是抑制肿瘤细胞的恶性增殖。     

白细胞介素-24基因对B16细胞小鼠移植瘤的抑制作用

[目的]探讨重组质粒pEGFP-N1-白细胞介素(IL)-24基因对黑色素瘤B16细胞小鼠移植瘤的抑制作用及其机制.[方法]构建黑色素瘤B16细胞小鼠模型,随机分为3个组,分别向各组小鼠瘤体内注射给予脂质体包裹的基因重组质粒pEGFP-N1-IL-24(实验组),pEGFP-N1(阳性对照组)和PBS缓冲液(阴性对照组).应用HE染色对肿瘤组织形态进行观察,RT-PCR法测定移植瘤中Bax,Bcl-2,VEGF的表达,Western Blot方法研究肿瘤细胞凋亡情况.[结果]HE染色观察结果显示,实验组肿瘤组织细胞变大、胞质疏松、核深染,可见核固缩、核溶解、核碎裂.RT-PCR实验扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测结果示,实验组Bax基因及Bax蛋白的表达均较其他两组明显升高(P<0.05),而实验组Bcl-2和VEGF基因及Bcl-2和VEGF蛋白的表达均较其他两组明显降低(P<0.05).[结论]IL-24对小鼠体内的黑色素瘤B16细胞的生长有抑制作用.     

Hsa_circ_0000711在人肝癌细胞系中的功能研究

目的 研究环状RNA hsa_circ_0000711在人肝癌细胞系中的表达以及对肝癌细胞生物学功能的影响.方法 利用RT-qPCR检测环状RNA hsa_circ_0000711在肝癌细胞系的表达;通过小干扰RNA特异性敲低hsa_circ_0000711的表达;通过CCK-8实验检测肝癌细胞系的增殖情况;利用流式细胞技术检测细胞周期及细胞凋亡.Western blot检测下调hsa _circ _0000711后Cyclin D1、CDK4、 cleavaed Caspase 3及Bcl-2蛋白的表达水平.结果 Hsa_circ_0000711在肝癌细胞HepG2和SMMC- 7721中明显高表达(P＜0. 05) .与对照组相比,hsa_circ_0000711干扰组的肝癌细胞增殖能力显著降低(P＜0. 05),处于G1期细胞增多(P＜0. 05),且凋亡细胞显著增加(P＜0. 05) .干扰hsa_circ_0000711的表达后,肝癌细胞中Cyclin D1、CDK4和Bcl-2的蛋白表达量显著降低(P＜0. 05),cleavaed Caspase 3蛋白表达量显著升高(P＜0. 05) .结论 Hsa_circ_0000711可能通过调控细胞周期及凋亡影响肝癌细胞的增殖.     

丙泊酚对人胃癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的 探讨丙泊酚对人胃癌裸鼠移植瘤生长的影响,及其可能的作用机制。方法 培养人胃癌 细胞株SGC7901,复制裸鼠移植瘤模型30 只,随机分为对照组、生理盐水组和丙泊酚组,每组10 只。对照 组未做任何处理;生理盐水组腹腔注射生理盐水1.5 ml/kg ;丙泊酚组腹腔注射丙泊酚20 mg/kg,1 次/d,连 续2 周。观察各组裸鼠给药前后一般情况的变化,给药后每3 d 用游标卡尺测量移植瘤的长径和短径,计算移 植瘤体积。第15 天时将裸鼠脱臼处死,剥离瘤体。采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot 检测各组 裸鼠移植瘤组织中核因子E2 相关因子2（Nrf2）、NAD（P）H 醌氧化还原酶1（NQO1）、血红素加氧酶-1 （HO-1）、B 淋巴细胞瘤（Bcl-2）、Bcl-2 相关X 蛋白（Bax）基因和蛋白的表达。结果 丙泊酚组裸鼠给药 后3、6、9、12 和15 d 的移植瘤体积小于对照组和生理盐水组（P <0.05）。与对照组和生理盐水组相比,丙 泊酚组裸鼠移植瘤体质量降低,而抑瘤率升高（P <0.05）。与对照组和生理盐水组相比,丙泊酚组裸鼠移植瘤 组织中Nrf2、NQO1、HO-1、Bcl-2 mRNA 和蛋白相对表达量降低,而Bax mRNA 和蛋白相对表达量升高 （P <0.05）。结论 丙泊酚可抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与抑制Nrf2/ARE 信号通路,从而促 进细胞凋亡有关。     

丹参注射液对小鼠Lewis肺癌细胞周期素D1表达的影响

目的:观察丹参注射液对小鼠Lewis肺癌细胞周期素D1(Cyelin D1)的表达.方法:建立Lewis肺癌小鼠模型,用免疫组织化学方法检测丹参对肿瘤细胞Cyclin D1表达的影响,测肿瘤体积、瘤重.结果:生理盐水组Cyclin D1阳性表达率与丹参组和环磷酰胺组有显著性差异,而后两组差异无显著性.结论:丹参可抑制小鼠Lewis肺癌Cyclin D1的异常表达并抑制小鼠IJewis肺癌生长.     

干扰素诱导跨膜蛋白3 在结肠癌组织中的表达及对结肠癌细胞凋亡的调控作用研究

目的 探讨干扰素诱导跨膜蛋白3（IFITM 3）在结肠癌组织中的表达及对结肠癌细胞凋亡的调控作用。方法 实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测结肠癌组织和对应的癌旁组织中IFITM 3 的表达水平。细胞转染si-IFITM 3 抑制IFITM 3 的表达,同时转染si-control 作为对照,MTT 检测转染后48 h的细胞增殖情况。流式细胞术检测细胞凋亡情况。Western blot 检测细胞中Bcl-2、Bax、p-STAT3、STAT3蛋白表达水平。结果 IFITM 3 在结肠癌组织中的表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义（P <0.05）。si-IFITM 3 组结肠癌细胞HT29 和HCT116 的存活率与si-control 组相比下降,差异有统计学意义（均P <0.05）。转染si-IFITM 3 后的结肠癌细胞HT29 和HCT116 凋亡率高于si-control 组,差异有统计学意义（均P <0.05）。转染si-IFITM 3 后的结肠癌细胞HT29 和HCT116 中STAT3 蛋白表达水平没有变化,p-STAT3、Bcl-2 蛋白表达水平低于si-control 组,Bax 蛋白表达水平高于si-control 组。结论 干扰素诱导跨膜蛋白3在结肠癌组织中过度表达。抑制干扰素诱导跨膜蛋白3 的表达,可以抑制结肠癌细胞的增殖,促进癌细胞凋亡,其作用机制与Bcl-2、Bax、STAT3 有关。     

氯化两面针碱对垂体腺瘤GH3细胞的抑制作用

目的 探讨氯化两面针碱对垂体腺瘤GH3细胞的抑制作用及其机制。方法 不同浓度的氯化两面针碱作用于GH3细胞,培养不同时间后分别检测其作用效果:CCK-8检测各组GH3细胞存活率;Annexin V/PI凋亡试剂盒染色后,采用流式细胞术检测各组GH3细胞凋亡率;PI染色后采用流式细胞术进行细胞周期分析;实时定量PCR检测凋亡相关基因Bax、 Bcl-2,以及细胞周期相关基因Cyclin B1、CDK1、p21和p27的mRNA表达水平;Western blotting法检测Bax、Bcl-2、Cyclin B1和CDK1蛋白,以及丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)和细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路蛋白的表达水平。结果 氯化两面针碱可抑制GH3细胞增殖,促进GH3细胞凋亡及细胞周期阻滞于G2/M期;氯化两面针碱能够抑制AKT及ERK信号通路的激活。结论 氯化两面针碱有效抑制垂体腺瘤GH3细胞的增殖和促进其凋亡,可作为有效治疗垂体腺瘤的潜在药物。     

化学修饰的茯苓多糖抗肿瘤效应的免疫组织化学观察

目的:揭示化学修饰的茯苓多糖抗肿瘤效应与凋亡相关基因蛋白Fas、Bcl-2和Bax的关系。方法:①在背部皮下接种了Sarcoma 180肿瘤细胞(5×106)的7-8周龄BALB/c小鼠,被随机分为茯苓多糖治疗组和PBS缓冲溶液阴性对照组,每组10只。进行腹腔注射,每天1次,连续注射7 d。于第9天处死小鼠取出肿瘤组织。②用免疫组织化学SP法测定荷瘤小鼠肿瘤组织中Fas、Bcl-2和Bax基因蛋白的表达。结果:实验组Fas阳性率为64.99%,阴性对照组阳性率为4.12%,两组间差异有显著性意义(P<0.01);实验组Bcl-2阳性率为17.97%,阴性对照组阳性率为47.96%,两组间差异有显著性意义(P<0.01);实验组Bax阳性率为48.05%阴性对照组阳性率为2.45%,两组间差异有显著性意义(P<0.01)。结论:化学修饰的茯苓多糖对小鼠Sarcoma 180肿瘤细胞有诱导凋亡的作用。     

Effects of Oxymatrine on the Apoptosis of Human Esophageal Carcinoma Eca109 Cell Line and Its Mechanism

The effects of Oxymatrine （Oxy） on the proliferation and apoptosis of human esophageal carcinoma Ecal09 cell line and the mechanism were investigated. The human esophageal carcinoma Eca 109 celis were cultured in vitro. The Oxy-induced apoptosis of Eca 109 cells was assayed by using flow cytometry. The expressions of p-ERKII2, Cyclin D1, p21^waf/cipl, Bax and Bcl-2 were detected by Western blot. Flow cytometry revealed that Oxy could induce the apoptosis of Eca l09 cells. Western blot showed that Oxy of different concentrations suppressed the expressions of p-ERK1/2, Cyclin D1 and Bcl-2, but up-regulated the expression of p21waf/cip1 and Bax, and the ratio of Bax/Bcl-2 was increased. It was suggested the Oxy could induce the apoptosis of Eca l09 cells, which might be related to the upregulation of p21waf/cip1 and the downregulation of p-ERK1/2, Cyclin D1 and p21^waf/cip1. The possible pathway may be related to Bcl-2/Bax.     

Cyt-c、Bax、Bcl-2在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义

目的探讨凋亡相关因子Cyt-c、Bax、Bcl-2蛋白在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法及Image-ProPlus图像分析软件检测Cyt-c、Bax、Bcl-2蛋白在15例正常卵巢组织、15例卵巢上皮性良性肿瘤、15例卵巢上皮性交界性肿瘤及30例原发性上皮性卵巢癌中的表达情况。结果 Cyt-c、Bax、Bcl-2在恶性组中的阳性表达显著高于其它三组。Cyt-c蛋白表达与临床分期及淋巴结转移有关,Bax、Bcl-2蛋白表达与临床分期有关。Bax与Bcl-2在上皮性卵巢癌中的表达呈负相关。结论 Cyt-c、Bax、Bcl-2与上皮性卵巢癌的发生有关;Cyt-c、Bcl-2的高表达提示预后不良。