原发性肝癌患者肿瘤浸润T淋巴细胞亚群分析

目的:了解原发性肝癌患者肿瘤浸润T淋巴细胞中CD4+及CD8+的表达特点。方法:收集30例原发性肝癌患者(均有乙型肝炎病毒感染背景)的癌组织(乙肝肝癌组)和癌旁组织(乙肝癌旁组)以及30例因良性病变而行肝切除的患者的新鲜肝组织(对照组),分离组织浸润淋巴细胞,用抗CD3、CD4和CD8单克隆抗体同时荧光染色,用流式细胞仪检测各表面标志的表达情况。结果:1)乙肝肝癌组、乙肝癌旁组及对照组CD3+CD4+T细胞占浸润淋巴细胞的比例分别为(22.31±3.68)%、(10.69±2.47)%及(4.21±4.26)%。乙肝肝癌组显著高于乙肝癌旁组及对照组,差异有统计学意义(P=0.000,P=0.001),乙肝癌旁组高于对照组,差异亦有统计学意义(P=0.019)。2)乙肝肝癌组、乙肝癌旁组及对照组CD3+CD8+T细胞占浸润淋巴细胞的比例分别为(26.10±5.82)%、(21.82±2.70)%及(41.31±14.01)%,乙肝肝癌组及乙肝癌旁组显著低于对照组,差异有统计学意义(P=0.014,P=0.004),而乙肝肝癌组与乙肝癌旁组之间差异无统计学意义(P=0.651)。3)乙肝肝癌组组织浸润淋巴细胞中CD3+CD4+T细胞与CD3+CD8+T细胞的比值为0.91±0.30,显著高于乙肝癌旁组(0.47±0.11,P=0.003)及对照组(0.11±0.13,P=0.000),CD3+CD4+与CD3+CD8+T细胞的比值出现失衡。结论:原发性肝癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中T细胞亚群失调,表现为CD3+CD4+T细胞所占比例升高,CD3+CD8+T细胞所占的比例下降,CD3+CD4+/CD3+CD8+明显升高。     

肝癌病人外周血中CD4+CD25+FOXP3+调节性T淋巴细胞表达水平的临床研究

目的 了解CD4+CD25+FOXP3+T调节性T细胞在肝癌病人外周血中的表达水平并探讨其临床意义.方法 应用流式细胞术测定18例肝癌病人外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞百分比,并与26例l临床对照者和24例健康对照者进行比较.结果 肝癌病人外周血中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞百分比(4.25%±3.98%)明显高于临床对照组(1.34%±1.14%)及健康对照组(1.29%±0.95%)(P＜0.01),而两个对照组之间并无显著性差异(P＞0.05).CD4+CD25+FOXP3+T细胞在肝癌病人外周血所占CD4+T细胞比率(2.94%±0.91%)也较临床对照组(0.76%±0.34%)及健康对照组(0.81%±0.29%)显著升高(P＜0.001),且升高幅度强于CD4+CD25+T细胞水平,两个对照组之间并无显著性差异(P＞0.05).结论 CD4+CD25+FOXP3+T细胞是更为准确的调节性T细胞,其在肝癌病人外周血中表达水平明显升高,检测CD4+CD25+FOXP3+T水平对肝癌的预防治疗具有重要临床意义.     

记忆T细胞亚群与抗感染和肿瘤免疫

免疫记忆是机体免疫应答的主要特征之一。目前根据T淋巴细胞表面CD45RA、CD62L及CCR7的表达情况将T细胞划分为初始T细胞(na?ve T cells)、中心记忆T细胞(central memory T cells,TCM)、效应记忆T细胞(effector memory T cells,TEM) 。因TCM和TEM在组织分布及功能上的差异,在抗肿瘤及抗感染免疫中有着重要意义,是近年来研究的热点。     

CD4+CD25+FOXP3+T细胞在肝癌肝移植肿瘤复发中的作用

目的 探讨肝癌肝移植病人移植前后外周血和肿瘤组织中CD4+CD25+FOXP3+T细胞比例变化及其临床意义.方法 用流式细胞仪检测肝癌肝移植病人和其他肝移植病人术后外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞的比例,并采用正常人作对照.用免疫组化法检测肝癌病人和非肝癌病人肿瘤组织中FoxP3的表达及CD8+T细胞浸润的比例.观察肝癌肝移植病人术后及肿瘤复发后调节性T细胞的变化及其对肿瘤复发的影响.结果 流式细胞检测显示肝癌肝移植、非肝癌肝移植的病人术后外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞占CD4+T细胞的比例较正常人明显升高,分别为(10.15±1.00)%、(5.30±1.64)%和(3.20±1.18)%,P<0.05.肝癌肝移植肿瘤复发病人较未复发病人外周血CD4+CD25+FOXP3+T比例明显升高,分别为(15.15±1.50)%和(6.80±1.50)%,P<0.01.免疫组化检测显示肿瘤组织中FOXP3+T细胞增多,CD8+T细胞浸润明显减少.结论 肝癌肝移植肿瘤复发的病人外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞比例升高.调节性T细胞可能通过减少CD8+T细胞浸润,加速肿瘤复发.     

胃癌患者外周血调节性T细胞的变化及其意义

目的 探讨胃癌患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞、CD8+CD28-T淋巴细胞比例的变化及其临床意义.方法 采用流式细胞技术检测30例胃癌患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞、CD8+CD28-T淋巴细胞玎分比,对照组为30例慢件胃炎患者.结果 胃癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为8.7%±1.3%,与胃炎患者相比差异无统计学意义.胃癌患者外周血中CD8+CD28-调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为30.3%±3.3%,明显高于胃炎患者的20.3%±2.7%.外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞、CD8+CD28-T淋巴细胞百分比与胃癌淋巴结转移、病理分型无明显相关性.结论 外周血中调节性T细胞在胃癌发展中可能发挥一定作用.     

早期肝癌术后患者调节性T细胞数量及功能变化

目的通过分析早期肝癌患者肝癌切除手术前、后外周血中CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(Treg)数量及功能的变化,从免疫抑制角度探讨手术对肝癌患者免疫功能的影响。方法采集肝癌患者(病例组,15例)手术治疗前、后及正常人群(对照组,5例)外周血,提取淋巴细胞,行细胞外(CD4、CD25)及细胞内(FOXP3)染色,应用流式细胞仪分析Treg的数量及功能。结果 病例组CD4+CD25+T细胞和CD25+FOXP3+T细胞在术前外周血中所占比例均明显高于正常对照组〔(12.43±2.57)%比(5.56±1.02)%,(5.14±1.4)%比(2.18±0.83)%,P<0.05〕,病例组以上两种细胞在术后1周﹝(10.56±2.13)%,(4.28±1.08)%﹞较术前均有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05),而术后2周〔(7.30±0.89)%,(3.43±0.83)%〕较术前下降明显(P<0.05)。病例组CD8+T细胞和CD4+CD25-T细胞在术前外周血中所占比例明显低于正常对照组〔(23.42±1.80)%比(29.22±2.26)%,(36.14±1.12)%比(43.69±2.78)%,P<0.05〕,病例组以上两种细胞在术后2周〔(27.15±1.71)%,(40.30±2.00)%〕较术前均明显升高(P<0.05)。对Treg与AFP进行相关性分析发现二者具有低度相关关系(r=0.48,P<0.05)。结论肝癌切除术能够在一定程度上改善肝癌患者的免疫功能,且Treg在肝癌的诊治及预后的判断中,可能具有一定辅助意义。     

肝移植术后潜在免疫耐受者外周血自然杀伤细胞、调节性T细胞和记忆性T细胞的表达及其临床意义

目的 探讨肝移植术后潜在免疫耐受者免疫状态,为临床指导抗排斥治疗提供依据.方法 纳入1999年1月至2007年12月在本中心行肝移植存活至今潜在免疫耐受者29例,分为3～5年组(3Y组)10例,5～11年组(5Y组)19例,另纳入肝移植术后反复排斥反应者(RJ)10例,年龄匹配健康对照组(HC)17例;流式检测外周血单个核细胞中自然杀伤(NK)细胞、记忆性T细胞、调节性T细胞(Treg)3个亚群的表达.结果 3Y、5Y组CD4+ CD25+T细胞(3Y:27.56±4.63;5Y:30.07±3.91)、静息性Treg占CD4+T细胞比例(3Y:0.22±0.05;5Y:0.17±0.03)比R J组明显升高(CD4+ CD25+ T:11.78±4.28;静息性Treg:0.05±0.02)(P＜0.05);5Y组NK细胞占淋巴细胞比例(29.11±3.31)比RJ组(13.92±3.11)明显升高(P＜0.05);效应性记忆性CD8+T细胞比例3Y组(12.92±2.05)比RJ组(8.74±1.69)明显升高(P＜0.05).结论 肝移植术后潜在免疫耐受者外周血NK细胞、静息性调节性T细胞和效应性记忆性CD8+T细胞比例相对排斥反应者明显升高,可作为潜在的耐受标志物.     

晚期肺癌患者化疗前后细胞免疫功能及T细胞分泌细胞因子的变化

目的:探讨晚期肺癌患者化疗前后外周血中T细胞免疫功能及其分泌细胞因子水平的变化.方法:通过流式细胞仪检测57例晚期肺癌患者和22例健康体检者CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞在外周血单核细胞(PBMC)中所占比例以及外周血CD4+T细胞分泌细胞因子水平的变化.结果:晚期肺癌患者化疗前CD4+T细胞在PBMC中所占比例、CD4+T细胞与CD8+T细胞比值均低于健康人(P＜0.001),化疗后均较化疗前明显升高(P＜0.01或P＜0.001):化疗前CD8+T细胞在PBMC中所占比例高于健康人(P＜0.001),而于化疗后较化疗前明显下降(P＜0.05).治疗前后患者血清中CD4+T细胞分泌Th1细胞因子(IFN-y、TNF-α、IL-2)和Th2细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)水平均无明显变化(P＞0.05).结论:化疗能够增加肺癌患者外周血中CD4+T细胞所占比例,但对Th1、Th2所分泌的相关细胞因子水平影响不大.     

胰腺癌患者外周血CD4-CD8-T细胞的检测及其临床意义

目的 研究胰腺癌患者外周血CD4-CD8-T细胞含量,并探讨其含量与肿瘤的临床病理类型及临床分期的相关性.方法 应用流式细胞仪分析胰腺癌患者和健康对照组外周血中CD4-CD8-T细胞含量.结果 20例胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(4.13±1.81)%;20例健康对照组CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(6.39±1.83)%,两组之间差异有统计学意义(P＜0.01).高、中分化的胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(4.41±1.66)%;低分化胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞比例为(4.18±2.32)%,两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(2.96±1.50)%;Ⅰ、Ⅱ期胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(5.09±1.50)%,两组之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 CD4-CD8-T细胞在胰腺癌中低表达,可能促进胰腺癌进一步发生发展.     

不同分期前列腺癌患者外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞的变化及与胰岛素抵抗的相关性

目的 :观察不同分期前列腺癌患者外周血单个核细胞CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的变化及与胰岛素抵抗的关系。方法:采用流式细胞术检测62例前列腺癌患者(患者组,临床TNM分期Ⅰ期5例、Ⅱ期16例、Ⅲ期21例、Ⅳ期20例)外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目,计算CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率;并检测其空腹胰岛素及空腹血糖水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用ELISA法测定外周血胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平,分析CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与胰岛素抵抗的相关性,并与42例健康体检者进行对照。结果:与健康对照组相比,前列腺癌患者HOMAIR明显升高(6.68±1.66 vs 3.68±1.42),IGF-1水平明显下降[(96.39±21.21)ng/ml vs(164.56±30.58)ng/ml],PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分率[(13.88±0.96)%vs(5.33±0.65)%]及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对值[(3.55±0.29)×107vs(1.99±0.78)×107]明显升高(P0.05,P0.01)。患者PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分率及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数﹑HOMA-IR均随TNM分期逐渐加重而增加,IGF-1逐渐下降;相关性分析表明:CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数均与HOMA-IR呈明显正相关(r分别为0.689、0.722,P0.01),与IGF-1呈明显负相关(r分别为-0.896、-0.747,P0.01)。结论:前列腺癌患者存在不同程度的胰岛素抵抗,且随着疾病程度的加重,外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目和比例及胰岛素抵抗逐渐加重;CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞可能通过调节胰岛素抵抗参与其形成和发展。     

Persistent expansion of CD4+ effector memory T cells in Wegener's granulomatosis

In order to test the hypothesis that Wegener's granulomatosis (WG) is associated with an ongoing immune effector response, even in remission, we examined the distribution of peripheral naive and memory T-lymphocytes in this disease, and analyzed the function-related phenotypes of the memory T-cell population. Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were freshly isolated from WG-patients in remission (R-WG, n=40), active WG-patients (A-WG, n=17), and age-matched healthy controls (HCs, n=21). Expression of CD4, CD8, CD45RO, CCR7, interleukin (IL)-18Ralpha, ST2L, and FoxP3 were determined by four-color flow cytometric analysis. CD45RO and CCR7 were used for distinction between naive and memory T cells, IL-18Ralpha, ST2L, and FoxP3 for the assessment of Type1, Type2, and regulatory T-cells, respectively. In R-WG, the CD4+CD45RO+CCR7- effector memory T-cell subpopulation (TEM) was relatively increased, whereas the CD4+CD45RO-CCR7+ naive T-cell population (TNaive) was decreased as compared to HC. The distribution of naive and memory CD8+T cells did not differ between R-WG, A-WG, and HC, nor did CD4+CD45RO+CCR7+ central memory T cells (TCM). In contrast to HC, the percentage of CD4+TNaive cells in R-WG correlated negatively with age, whereas CD4+TEM cells showed a positive correlation. In R-WG, a skewing towards Type2 T cells was observed in CD4+TEM cells. No differences were detected in FoxP3+CD4+TEM cells between R-WG and A-WG, whereas the FoxP3-CD4+TEM cells were increased in R-WG and decreased in A-WG as compared to HC. Collectively, peripheral blood homeostasis of CD4+T cells is disturbed in R-WG with the persistent expansion of non-regulatory CD4+TEM cells. These cells might be involved in relapse and may constitute a target for therapy.     

基于协同刺激分子表达量建立慢性HBV感染患者T淋巴细胞免疫功能评价新体系的研究

目的 探讨慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染患者外周血T淋巴细胞CD28、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4）、程序性死亡分子-1（PD-1）和T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3（Tim-3）的表达及意义.方法 连续收集2012年10月至2013年6月在苏州大学附属第一医院住院的慢性HBV感染患者102例,其中慢性乙型肝炎（CHB） 42例,乙型肝炎肝硬化30例,肝癌30例.另选30名健康体检者作为对照组.采用流式细胞术和定量聚合酶链反应（PCR）技术测定所有研究对象外周血T淋巴细胞表面CD28、CTLA-4、PD-1和Tim-3的表达量,并采用单因素方差分析和LSD-t检验比较各组间的差异.采用Spearman秩相关分析外周血T淋巴细胞表面CD28、CTLA-4、PD-1和Tim-3的表达量与HBV DNA载量、乙型肝炎e抗原（HBeAg）和丙氨酸转氨酶（ALT）之间的相关性.结果 慢性HBV感染患者CD4＋ CD28＋、CD8＋ CD28＋和CD4＋ CTLA-4＋的表达均低于健康对照人群,其中肝癌组的CD4＋ CD28＋表达量低于CHB组（t=2.373,P＜0.05）,肝硬化和肝癌组的CD8＋CD28＋表达量低于CHB组（t=4.324和4.088,P＜0.01）.CHB组CD8＋ PD-1＋、CD4＋ Tim-3＋和CD8＋ Tim-3＋的表达量高于肝硬化、肝癌以及健康对照组（t=3.051,3.130,3.121,3.254和3.723,P＜0.01）.相关性分析显示,CD8＋T淋巴细胞PD-1表达量与ALT水平、HBV DNA载量呈正相关（r=0.516和0.582,P＜0.01）;CD8＋T淋巴细胞Tim-3的表达量与ALT水平、HBV DNA载量也呈正相关（r=0.578和0.556,P＜0.01）.此外,CD8＋T淋巴细胞PD-1与Tim-3的表达量也呈一定的正相关（r =0.506,P＜0.01）.结论 HBV感染患者外周血T淋巴细胞表面分子异常表达与其免疫功能紊乱和疾病慢性化的发生和发展相关.     

微波消融联合树突状细胞瘤内注射对荷瘤小鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的 观察微波消融联合树突状细胞(DC)瘤内注射对荷瘤小鼠T淋巴细胞亚群的影响.方法 建立BALB/C小鼠皮下骨髓瘤模型,分为对照组、微波消融组、微波消融联合不成熟DC组、微波消融联合成熟DC组,分别于微波消融后第1、3、5、7、9及11天采用流式细胞仪检测各组小鼠外周血T淋巴细胞亚群.结果 对照组小鼠的CD3~+、CD4~+及CD4~+/CD8~+值逐渐下降(P<0.05);微波消融组小鼠的CD3~+、CD4~+及CD4~+/CD8~+无明显改变(P>0.05);微波消融联合不成熟DC组小鼠的CD3~+、CD4~+及CD4~+/CD8~+在术后第3、5、7天明显减低(P<0.05),第9、11天恢复;微波消融联合成熟DC组小鼠CD3~+、CD4~+及CD4~+/CD8~+则在术后第3、5、7天明显增高(P<0.05),第9、11天下降.结论 微波消融联合成熟DC在一定时间内(约1周)能够增强实验小鼠的抗肿瘤免疫反应.     

慢性乙型肝炎病毒感染者外周血T细胞亚群及NK细胞的特点及意义

目的探讨慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染者外周血T细胞亚群及NK细胞的特点及临床意义。方法采用流式细胞术检测各研究组,包括慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）组33例、乙型肝炎失代偿期肝硬化（1iver cirrhosis,LC）组20例、慢性乙型重型肝炎（chronic severe hepatitis B,CSH）组17例及健康对照组（Control）20例的外周血T细胞亚群及NK细胞相对计数,并检测肝功能、HBVDNA含量及HBV血清标志物。结果按Control、CHB、LC、CSH顺序,CD3^＋T细胞、CD8^＋T细胞百分比依次升高,而CIM^＋T细胞、CD4^＋／CD8^＋比值及NK细胞百分比依次降低,且CHB、LC、CSH组与Control组及CHB组与CSH组相比,差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．008）。CHB患者的CD3^＋T细胞与血清总胆红素（total bilirubin,TB）、HBVDNA含量（log_10）呈正相关（P〈0．001;P〈0．001）;CD8^＋T细胞与HBVDNA含量（log_10）呈正相关（P=0．007）,NK细胞与HBVDNA含量（log_10）（P=0．001）呈负相关。CHB组乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性者的CD4^＋T细胞及CD4^＋／CD8^＋比值低于HBeAg阴性者（P=0．018;P〈0．001）,而HBVDNA含量（log_10）和CD8^＋T细胞高于HBeAg阴性者（P=0．012;P=0．019）。结论慢性HBV感染者外周血T细胞亚群及NK细胞相对值紊乱,且与临床类型、病情、血清HBVDNA水平及HBeAg相关。     

血栓闭塞性脉管炎与调节性T细胞的关系

【摘要】〓目的〓探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)与血栓闭塞性脉管炎(TAO)的关系。方法〓收集35例TAO患者,以35例动脉硬化性闭塞症(ASO)患者作为阳性对照组,35例健康人作为阴性对照组。采用流式细胞术检测外周血Treg及其转化生长因子β1(TGF-β1)及白介素10(IL-10)百分含量;采用ELISA法检测胞浆型抗中性粒细胞胞浆抗体(CANCA)和核周型抗中性粒细胞胞浆抗体(PANCA),并分析其相关性。结果〓与正常对照组比较,TAO组患者Treg及TGF-β1均显著升高(P<0.05),而ASO组患者Treg及TGF-β1则显著低于正常对照组,三组间Treg及TGF-β1两两差异具有统计学意义(P<0.05)。与Treg及TGF-β1不同,TAO及ASO组患者IL-10组间无统计学差异,且均显著低于正常对照组(P<0.0)。与正常对照组比较,TAO及ASO组患者CANCA及PANCA均呈不同程度升高,且TAO患者CANCA及PANCA均显著高于正常对照组,而ASO组患者与正常对照组之间并无统计学差异(P<0.05)。Pearson相关性分析显示Treg、TGF-β1及IL-10三者任意一者均与CANCA及PANCA呈显著正相关性(P<0.05)。结论〓Treg及TGF-β1升高可能参与TAO的发病机制。     

CD8+CD28-T细胞在脑疝患者的动态变化与临床意义

【摘要】 目的 探讨脑疝患者外周血CD8+CD28-T细胞的动态变化与临床意义。方法〓收集36例脑疝组(A组)患者外周血,以41例未出现脑疝的重型颅脑损伤患者(B组)及32例健康人(C组)作为对照,采用流式细胞术检测外周血CD8+CD28-T细胞及其胞内转化生长因子β1(TGF-β1)及白介素10(IL-10)百分含量。分别在伤后3 h、6 h及12 h观察A及B组患者外周血CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10变化。结果〓三组CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10总体差异均有显著性(P < 0.05),但B组与C组无统计学差异,而A组上述三者均显著低于另外B及C组(P < 0.05)。B组患者在伤后3 h、6 h及12 h的CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10差异均无统计学意义|A组患者3 h、6 h及12 h的CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10均呈进行性下降,表现为任意两个时间点的差异均有统计学意义(P < 0.05),且均显著低于B组(P < 0.05)。结论〓CD8+CD28-T细胞显著下降是脑疝患者的一个重要细胞免疫学特征,其伤后12h内进行性下降与病情进展密切相关。     

手足口病患儿外周血CXC趋化因子配体10表达、T细胞及细胞因子与预后的相关性

目的检测手足口病（HFMD）患儿外周血中的CXC趋化因子配体10（CXCL-10）表达水平、T淋巴细胞亚群及相关细胞因子与HFMD患儿预后的相关性。 方法选取2016年4月至2017年5月徐州市儿童医院收治的HFMD患儿60例为研究对象,根据病情诊断标准分为重症组（10例）和轻症组（50例）;根据随访结果又分为预后良好组（58例）和预后不良组（2例）。选择同期体检正常婴幼儿52例为对照组。采用ELISA法检测两组研究对象外周血CXCL-10表达水平;采用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群,采用ELISA法检测外周血中白细胞介素-17（IL-17）、IL-22、IL-23以及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。 结果重症组患儿外周血CXCL10水平、IL-17、IL-22、IL-23和TNF-α水平显著高于对照组和轻症组患儿（P均< 0.001）。轻症组患者细胞因子CXCL-10、IL-17、IL-22、IL-23和TNF-α水平高于对照组（P均< 0.005）。重症组HFMD患儿外周血CD3⁺ T、CD4⁺ T、CD8⁺ T以及CD4⁺/CD8⁺淋巴细胞比例显著低于轻症组患儿和对照组（P均< 0.05）;轻症组患儿外周血CD3⁺ T、CD4⁺ T、CD8⁺ T、CD4⁺/CD8⁺淋巴细胞比例与对照组差异有统计学意义（P均< 0.05）;经Pearson相关系数分析,HFMD患儿外周血CXCL-10表达水平与T淋巴细胞亚群CD3⁺T、CD4⁺ T、CD8⁺ T、CD4⁺/CD8⁺表达水平均负相关（r =－0.609、－0.714、－0.514、－0.524,P = 0.014、0.023、0.001、0.006）,HFMD患儿外周血中IL-17、IL-22、IL-23和TNF-α水平与外周血CXCL-10水平正相关（r = 0.519、0.473、0.418、0.459,P = 0.002、0.006、0.009、0.007）;预后不良组患儿外周血CXCL-10表达水平显著高于预后良好组（t = 2.055、P = 0.044）,外周血CD3⁺ T、CD4⁺ T、CD8⁺ T淋巴细胞比例显著低于预后良好组,差异均有统计学意义（t = 2.508、P = 0.015,t = 3.830、P < 0.001,t = 2.222、P = 0.030）。 结论手足口病患者外周血CXCL-10、T淋巴细胞亚群检测对病情监测及判断预后有重要价值。     

CD4+CD25+T细胞对同种异体小鼠心脏移植的免疫调节作用

目的 观察CD4+CD25+T细胞(Treg)对小鼠同种异体心脏移植的免疫调节作用.方法 流式细胞仪检测正常小鼠和胸腺切除+PC61小鼠淋巴结、脾脏和外周血的Treg的比例.将供体鼠BALB/C心脏移植到受体鼠B6腹腔内,观察对照组(n=6)、胸腺切除组(THY,n=8)、hCTLA4Ig组(n=8)、DST+hCTLA4Ig组(n=8)和THY+PC61+DST+hCTLA4Ig组(n=6)小鼠心脏移植后生存时间和移植心脏病理学检查.结果 正常B6小鼠淋巴结、脾脏和外周血的Treg的比例分别为5.1%、4.5%和1. 7%,明显高于胸腺切除+PC61处理组(1. 8%、1.7%、0.7%).移植心脏平均存活时间在对照组和胸腺切除组分别为(8.2±2.9)d和(7.6±3.0)d,两组间差异无统计学意义(P＞0.05);而在hCTLA4Ig组和DST+hCTLA4Ig组分别为(43.0±11.8)d和(135.0±29.7)d,均较对照组或胸腺切除组明显延长(P＜0.01);THY+PC61+DST+hCTLA4Ig组移植心脏平均存活时间(25.8±8.9)d,也明显较对照组明显延长,但短于hCTLA4Ig组和DST+hCTLA4Ig组(P＜0.01).DST+hCTLA4Ig组移植的心脏存活时间(135.0±29.7)d明显高于其他各组(P＜0.01),其病理组织学表现为间质内有较多的淋巴细胞浸润,伴毛细血管增生,管壁增厚,间质纤维化.结论 CD4+CD25+T细胞水平对同种异体心脏移植的免疫耐受具有免疫调节作用.

Abstract：

Objective To investigate the immunoregulation effects of CD4 + CD25 + T cells in mice heart allograft transplantation. Methods Flow cytometry was used to analyze the contents of CD4 + CD25 +T regulatory cells (Tregs) of the lymph nodes, spleen and blood in the normal mice group and the thymusectomy (THY) + PC61 group. BALB/C mice served as the donors and C57BL/6 (B6) mice as the recipients. Five groups were established, including control group ( n = 6 ), THY group ( n = 8 ), hCTLA4Ig group ( n = 8 ), DST ( donor-specific T-depleted spleen cells) + hCTLA4Ig group ( n = 8) and THY + PC61+ DST + hCTLA4Ig group (n = 6). The survival time after heart allograft transplantation was observed and pathological examination was done in different groups. Results In control group, the rate of Tregs in lymph nodes, spleen and blood was 5. 1%, 4. 5% and 1.7% respectively, which was significantly higher than in THY + PC61 group ( 1. 8% , 1. 7% and 0. 7% respectively). The average survival time of control and THY groups was 8. 2 ± 2.9 and 7.6 ± 3. 0 days respectively ( P ＞ 0. 05 ). The average survival time of hCTLA4Ig and DST + hCTLA4Ig groups was 43.0 ± 11.8 and 135.0 ± 29. 7 days respectively, which was significantly longer than in control group or THY group ( P ＜0. 01 ). The average survival time of THY +PC61 + DST + hCTLA4Ig group was 25.8 ± 8.9 days, which was significantly longer than in control group,but shorter than in hCTLA4Ig group or DST + hCTLA4Ig group ( P ＜ 0. 01 ). The survival time in DST +hCTLA4Ig group was 135.0 ± 29. 7 days, which was significantly longer than other groups ( P ＜ 0. 01 ).The pathological examination revealed that there were more lymphocytes infiltration and capillary vessel proliferation in the desmohemoblast in the transplanted heart of DST + hCTLA4Ig group. Conclusion CD4 +CD25 +T cells regulate the immune tolerance in the allograft transplantation.