CD62p、CD63和vWF在脑梗死患者中的临床意义

目的：研究血管性血友病因子（vWF）和血小板活化的分子标志物CD62p、CD63在脑梗死中的意义。方法：测定脑梗死患者48例和健康对照组30例血浆vWF和血小板CD62p、CD63。结果：脑梗死组vWF（206．33±63．59）、CD62p（12．29±3．24）、CD63（16．69±4．97）均显著高于对照组vWF（95．12±22．13）、CD62p（2．32±1．17）、CD63（6．85±2．71）。结论：脑梗死患者存在内皮功能异常和血小板活化增强,这些变化与脑梗死的病理过程有关。     

P-选择素在急性肺栓塞中的临床意义

目的:探讨P-选择素(PS)在急性肺血栓栓寒症(PTE)的发生、发展及治疗后中的变化和意义.方法:采用酶联免疫吸附法分别测定正常人群组、肺栓塞组二组人群的血浆中可溶性PS、流式细胞术检测血小板膜上活化标记物P-选择素(CD62p),比较二组人群中PS、CD62p的区别,并比较急性PTE患者治疗前后二项指标的变化.结果:PTE患者血小板活化指标CD62p表达水平、血浆内PS含鼍高于正常对照组(P<0.01);急性PTE患者溶栓治疗后二项指标呈现出明显降低趋势(P<0.01).结论:急性PTE患者体内存在着明显的血小板活性增强,P-选择素作为血小板活化的特异性标记,参与了PTE的发生、发展和转归.可作为临床上监测病情和判断预后的指标.     

脑出血患者血小板CD42b,CD62p的表达与脑水肿形成的相关性

目的分析比较脑出血患者与健康人血小板CD42b,CD62p的表达差异及急性期脑出血患者血小板CD42b,CD62p的表达量与脑水肿体积的相关性,探讨急性期脑出血患者血小板表面糖蛋白CD42b,CD62p的表达及其与血肿周围脑水肿形成的关系。方法选自2002-01/08华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科住院治疗的脑出血患者20例。健康者选自2002-01/08华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科住院患者家属,共15例,利用流式细胞术(FCM)测定20例脑出血患者和15例健康人血小板CD42b和CD62p的表达,根据头颅CT测量脑出血患者血肿周围脑水肿带的大小,并对脑出血患者血小板CD42b和CD62p的表达与血肿周围脑水肿带的大小进行相关性分析。结果与健康人犤(9.7±1.1)%,(81.6±3.1)%犦比较,急性期脑出血患者血小板CD42b的表达(74.2±6.4)%减少,CD62p的表达(4.7±4.8)%增加(tCD42b=4.328,P<0.01;tCD62p=4.017,P<0.01);急性期脑出血患者血小板CD42b和CD62p表达量与血肿周围脑水肿带的大小有相关性(rCD42b=-0.489,P<0.05;rCD62p=0.646,P<0.01)。结论脑出血急性期血小板活化,活化的血小板参与了血肿周围脑水肿形成这一病理损伤过程。     

脑血管疾病患者血小板微颗粒与CD62P、GPⅡb/Ⅲa相关性探讨

目的检测脑血管疾病患者治疗前后血小板微颗粒(PMP)数量的变化,研究其与血小板表面膜糖蛋白CD62P GPIIb/IIIa活化比率的关系,探讨其在脑血管疾病患者中的临床意义。方法采用流式细胞仪分别对正常对照组、治疗前和治疗后血栓性脑血管疾病组进行测定,分析各组血小板微颗粒表达状况,血小板表面膜糖蛋白CD62P、GPIIb/IIIa活化比率。结果血栓性脑血管疾病组治疗前PMP213±53/104Plt CD62P51.19±12.07%GPIIb/IIIa76.95±l3.82%;治疗后PMP134±17/104PltCD62P30.12±16.40%GPIIb/IIIa40.01±11.38%;两者PMP、CD62P、GPIIb/IIIa水平均较正常对照组PMP66±17/104PltCD62P4.27±2.17%、GPIIb/IIIa10.23±3.44%有显著性升高(P<0.01),治疗后较治疗前有显著性下降(P<0.01);相关性分析表明血小板微颗粒数量与CD62P、GPIIb/IIIa活化比率存在明显正相关,相关系数分别为:与CD62Pr=0.69(P<0.01)与GPIIb/IIIar=0.86(P<0.01)结论血小板微颗粒在血栓性脑血管疾病中与CD62P、GPIIb/IIIa活化比率间存在明显正相关可作为血栓性脑血管疾病血小板体内活化的特异性指标。本文研究结果为临床症状缓解后患者长期抗血小板治疗提供了理论依据。     

急性脑梗死患者血浆CD62p水平与血小板参数的动态变化

目的:通过研究急性脑梗死患者血浆CD62p水平和血小板参数的动态变化,探讨CD62p在脑梗死中的作用及其CD62p水平与血小板平均体积、血小板计数和血小板体积分布宽度动态变化的相关关系。方法:实验于2001-02/2002-09在湘雅医院神经内科完成,用夹心酶联免疫吸附法和血球计数仪分别同时测定60例脑梗死患者发病第48小时,第6～8天及第15天血浆CD62p水平和血小板参数。同期测定对照组为30例年龄,性别相匹配的健康者血浆CD62p水平。结果:①脑梗死患者血浆CD62p水平(9.25±1.82)μg/L较对照组(2.23±0.56)μg/L明显增高,差异有非常显著性意义(t=27.42,P<0.001)。②脑梗死患者第48小时血浆CD62p水平较其他两时期高,差异有非常显著性意义(P<0.01)。③血浆CD62p水平与血小板平均体积和血小板体积分布宽度成正相关(r=0.51,0.47,P<0.01),与血小板计数成负相关(r=-0.32,P<0.01)。结论:CD62p参与了脑梗死并发挥重要作用,其水平变化与血小板计数,血小板体积分布宽度和血小板平均体积有关。     

急性冠脉综合征患者血小板表面活化标志的研究

目的通过与血管内皮损伤标志物进行对比分析,探讨流式细胞术(FCM)测定血小板表面活化标志物在急性冠脉综合征(ACS)患者中的意义。方法应用FCM测定36例ACS患者药物治疗前后外周血中血小板糖蛋白(CD62p)和血小板质膜蛋白(CD61)的表达水平,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆假性血友病因子(vWF),并对两者在ACS时的变化作对比分析。20例健康体检者作对照组。结果CD62p在ACS患者的表达明显高于正常人(P<0·05),药物干预治疗后明显下降(P<0·05),其水平的变化与vWF、心绞痛和心电图缺血ST-T的改善相一致。CD61在ACS患者的表达与正常人的表达无显著性差异(P>0·05),药物干预治疗后变化不明显(P>0·05)。结论CD62p是血小板活化的敏感指标,并与vWF、临床疗效有很好的相关性;FCM是检测血小板活化功能准确可靠的方法。     

冠心病患者血小板CD62p及GpⅡb/Ⅲa的变化

目的 观察冠心病患者血小板膜P选择素(CD62p)和GpⅡb/Ⅲa(PAC-1)的变化及其临床意义.方法 采用流式细胞术(FCM)三色荧光标记技术检测40例冠心病患者及30名正常人血小板膜CD62p和PAC-1的阳性百分率.结果 冠心病组血小板CD62p[(27.6±14.0)%]与PAC-1[(31.8±16.7)%]阳性百分率显著高于对照组[(3.1±1.5)%,(7.0±1.8)%,P均＜0.01].结论 CD62p和PAC-1是血小板活化的敏感和特异指标,全血流式细胞术测血小板功能可用于冠心病的监测和评价抗血小板药物的疗效,监测治疗干预的效果和预测并发症.     

普伐他汀在体内外对血小板CD62P、CD41表达的影响

目的　研究高胆固醇血症 (HC)患者血小板CD62P及CD4 1表达及调脂药物干预后的变化。方法　 2 0例HC患者口服普伐他汀 10～ 2 0mg/d ,疗程 8周 ,治疗前后进行上述指标的检测。在体外研究中 ,于HC患者的血标本中加入不同浓度的普伐他汀 ,测定加药前后血小板CD62P及CD4 1表达的变化。结果　HC患者服用普伐他汀 4周和 8周后 ,CD62P平均荧光强度由治疗前的 31.8± 7.8分别降至2 7.2± 6 .9和 2 6 .8± 4.9;CD62P糖蛋白阳性血小板百分数由治疗前的 (31.3± 9.3) %分别降至 (2 6 .4±7 4) %和 (2 5 .3± 9.1) % ,P <0 .0 5。CD4 1由治疗前的 483.2± 2 6 3.9分别降至 348.1± 192 .4和 30 6 .8±12 8 0 ,P <0 .0 5。普伐他汀在体外对血小板CD62P及CD4 1的影响与与体内相似。血总胆固醇 (TC)和低密度脂蛋白 (LDL C)水平及血小板聚集功能在治疗后均明显下降 (P <0 .0 1)。结论　普伐他汀能改善HC患者血小板功能及CD62P和CD4 表达 ,可能是其促进动脉粥样斑块消退的机制之一 ;体外实验结果提示 ,调脂药物对血小板存在直接作用     

有氧运动对冠状动脉慢血流患者的疗效及血小板功能的影响

摘要 目的：探讨有氧运动对冠状动脉慢血流患者的疗效及血小板功能的影响。 方法：冠状动脉造影诊断为冠状动脉慢血流的患者43例,观察在常规治疗的基础上,规律有氧运动前后的临床症状,血小板膜CD62P、CD61的阳性百分率（%）及血小板聚集率的变化。 结果：在常规治疗的基础上行运动疗法3个月,胸痛症状明显减轻; 运动后与运动前相比,血小板膜CD62P阳性百分率(%)分别为23.6±3.5及30.3±3.4 (P<0.05) 、CD61阳性百分率(%)分别为22.1±2.8及28.3±3.5 (P<0.05),血小板聚集率(%)分别为61.3±4.3及71.5±5.7 (P<0.05)。 结论：规律运动可以改善冠状动脉慢血流患者的症状,降低患者血小板表面活化受体分子的活性及血小板聚集。     

联合吸入沙美特罗/丙酸氟替卡松对哮喘患者血小板膜蛋白分子表达的影响

目的研究联合吸入沙美特罗/丙酸氟替卡松(舒利迭)对哮喘患者血小板膜蛋白分子CD62P、CD40配体(CD40L)表达的影响。方法体外分离29例哮喘患者血小板,用流式细胞仪测定哮喘患者持续吸入沙美特罗/丙酸氟替卡松治疗前后血小板膜蛋白分子CD62P、CD40L的表达,并分析其与肺功能的关系。结果哮喘急性发作患者治疗前血小板膜蛋白分子CD62P、CD40L表达率为(46.7±12.8)%、(21.1±7.4)%,均较正常人(10.4±2.7)%、(4.4±2.1)%升高(P<0.01),且CD62P、CD40L的表达水平与患者的1秒钟用力呼气量(FEV1)占预计值百分比(FEV1%Pred)成负相关(r=-0.541,P<0.01;r=-0.506,P<0.01);持续吸入沙美特罗/丙酸氟替卡松3个月后CD62P、CD40L表达率为(11.8±4.7)%(、5.3±2.9)%,较治疗前明显下降(P<0.01)。结论哮喘急性发作患者存在血小板膜蛋白分子CD62P、CD40L的表达增高,其表达水平与哮喘患者的FEV1%Pred呈显著负相关,持续吸入沙美特罗/丙酸氟替卡松可以抑制其表达,血小板可能是沙美特罗/丙酸氟替卡松作用的又一种靶细胞。     

老年血小板膜糖蛋白CD62P、CP6345例分析

目的：探讨老年心血管病、老年糖尿病、老年非心血管病血小板膜糖蛋白ＣＤ６２Ｐ、ＣＤ６３ 变化及其临床意义。方法：采用美国Ｂｅｃｔｏｎ－ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ 公司生产的Ｆａｃｓｃａｎ 型流式细胞仪检测老年心血管病、老年糖尿病、老年非心血管病各１５ 例血小板膜糖蛋白活化水平。结果：老年心血管病、老年糖尿病较老年非心血管病血小板膜糖蛋白ＣＤ６２Ｐ 增高（Ｐ＜ ０．０１）,且随着年龄增高呈递减趋势,ＣＤ６３ 于７１～８０ 岁增高明显（Ｐ＜ ０．０１）。老年心血管病组以高血压脑卒中血小板膜糖蛋白异常率最高,老年高冠心病次之,单纯高血压、冠心病最低。结论：老年血小板膜糖蛋白ＣＤ６２Ｐ、ＣＤ ６３ 活化与动脉硬化病变相关。而ＣＤ６３ 可能是血小板活化更敏感的指标。     

人血小板表面CD36糖蛋白检测方法的建立及初步应用

个体血小板表面CD36抗原缺乏在随机输注时有产生抗-CD36免疫反应的风险,是血小板输注无效的原因之一。本研究应用流式细胞术检测杭州地区单采血小板供者的血小板表面CD36抗原表达情况,并分析个体血小板上CD36缺失表型的频率。留取献血者新鲜抗凝血样,经离心获取富血小板血浆,洗涤并调整血小板计数至1×106。采用CD36-FITC、CD41-PE单克隆抗体和血小板孵育反应,然后用流式细胞仪检测和分析血小板表面糖蛋白CD36抗原表达情况。对于血小板表面CD36抗原阴性的标本,进一步筛查其单核细胞表面CD36的表达情况。结果表明:192例无偿献血者筛查出7例血小板表面CD36抗原阴性,CD36缺失型频率为3.6%,均为Ⅱ型缺失。人群中个体CD36抗原表达强度存在差异,参照CD36几何平均荧光强度数值大小,59例为低表达,126例为高表达。结论:人群中存在CD36Ⅱ型缺失表型,这些数据将为研究CD36抗原分布提供参考,有助于解决血小板输注无效问题。     

不稳定性冠状动脉病患者CD62P,CD63含量的变化

目的检测血小板膜表面CD62P,CD63的含量,研究不稳定性冠状动脉病(UCAD)患者血小板活化程度,探讨UCAD检测的新途径。方法病例来源于2001-10/2002-12在我院心血管门诊和心内科住院的65例UCAD患者。其中不稳定性心绞痛(A组)50例;非Q波性心肌梗死(NQMI,B组)15例。正常健康对照组(C组)59例。入选者性别、年龄大致相同。采用全血法流式细胞术(flowcytometry,FCM)分别测定U-CAD中UA、NQMI组和正常对照组患者血小板膜活化CD62P、CD63的含量。各组数据均用均数±标准(x珔±s)表示。成组设计的两样本比较采用u检验。结果65例UCAD中A组患者CD62P,CD63含量分别为21.92±18.74和3.49±3.19;B组含量分别为21.24±13.36和3.76±2.20;C组的含量分别为4.16±1.59和1.64±0.82。A组、B组分别与C组比较,P<0.001,差异有非常显著性意义,两组血小板膜上CD62P,CD63水平均显著高于正常对照组。A、B两组之间CD62P、CD63含量比较差异无显著性(P>0.5)。结论UCAD患者中不论是A组、还是B组均存在血小板活性增高。采用FCM检测CD62P、CD63可为临床上评价UCAD患者血小板活化程度的高低提供早期、特异诊断指标,亦可能是对UCAD疾病诊断、治疗方案选择、预后判断检测的一种新途径。     

Semaphorin 7A inhibits platelet production from CD34+ progenitor cells

Background:  The multifunctional protein semaphorin 7A (Sema7A) may have regulatory effects on blood cell differentiation via its receptors β1‐integrin and plexin C1. As thrombocytopenia can be treated with transfusion of ex vivo CD34⁺ cell‐derived megakaryocytes, we investigated the effect of Sema7A on differentiation of CD34⁺ progenitor cells into megakaryocytes and platelets. Methods:  Megakaryocytes and platelets were differentiated with a specific cytokine cocktail (CC) from CD34⁺ progenitor cells in the presence or absence of Sema7A. Expression of cell markers CD41, CD42a and CD61 or detection of the activation of the signal mediator focal adhesion kinase (FAK) was performed by flow cytometry, cytokine secretion by Luminex technology, and megakaryocyte cell density and morphology by microscopic studies. Sema7A levels in vivo were assessed by real‐time PCR and ELISA in hematological patients undergoing chemotherapy. Results:  CD34⁺ progenitor cells expressed the receptors for Sema7A. Expression of CD41, CD42a and CD61 was markedly reduced in the presence of Sema7A, after CC‐dependent platelet production from CD34⁺ progenitor cells. As revealed by microscopic analysis, megakaryocyte cell density was significantly lower in the presence of Sema7A as compared with controls. Blocking of CD29 abrogated the Sema7A‐mediated inhibition. Sema7A activated FAK in CD34⁺ progenitor cells and significantly increased secretion of the proinflammatory cytokines IL‐6, IL‐8 and GM‐CSF. Finally, Sema7A levels were up‐regulated in 50% of patients after chemotherapy. Conclusions:  Sema7A markedly reduces the production rates of megakaryocytes and platelets from CD34⁺ progenitor cells. Hence, up‐regulation of Sema7A may be a major risk factor for a reduced platelet repopulation after hematopoietic stem cell transplantation.     

富含血小板血浆制备过程中血小板CD62p表达

为了探讨大批量制备冰冻保存富含血小板血浆（Cryo-PRP)全过程中影响血小板质量变化的因素，以优化Cryo-PRP制作过程，提高Cryo-PRP质量，采用流式细胞术测定Cryo-PRP全过程中血小板膜表面CD62p表达。冰冻保存血小板全过程包括血液采集，离心制备，添加DMSO，－80℃冰箱保存和38℃水浴解冻，结果表明，在血液采集、离心制备，添加DMSO过程中血小板膜CD62p阳性率有一个突然的升高，其幅度约占整个过程的82％，对血小板的损害较大，结论：在Cryo-PRP的制备过程中，血小板的离心制备和DMSO的添加方式均可以得到良好的优化的优化，而对冰冻富含血小板血浆的质量影响也易于控制，但冰冻保存的损害较大，且不可避免，因此，迫切需要一种新型的血小板冰冻保护液和改进冰冻保存方法，以冰冻损害，进一步提高冰冻血小板质量。     

高血压脑出血患者血小板CD62p和CD42b的表达及其与脑水肿形成的关系

目的　研究高血压脑出血患者血小板CD6 2p和CD4 2b的表达及其与脑水肿形成的关系。方法　采用流式细胞术检测脑出血患者血小板CD6 2p和CD4 2b的表达 ,并与脑水肿进行相关性分析。结果　脑出血患者血小板CD6 2p和CD4 2b的表达量与脑水肿体积有相关性 (rCD4 2b=- 0 4 89,P <0 0 5 ;rCD6 2p=0 6 4 6 ,P <0 0 1)。结论　高血压脑出血患者出现血小板活化现象 ,血小板的活化有可能是促进脑水肿形成的病理机制之一     

CD41+ and CD42+ hematopoietic progenitor cells may predict platelet engraftment after allogeneic peripheral blood stem cell transplantation

The objective of this study was to quantify subpopulations of CD34+ cells such as CD41+ and CD42+ cells that might represent megakaryocyte (MK) precursors in peripheral blood stem cell (PBSC) collections of normal, recombinant human granulocyte‐colony stimulating factor (rhG‐CSF) primed donors and to determine whether there is a statistical association between the dose infused megakaryocytic precursors and the time course of the platelet recovery following an allogeneic PBSC transplantation. Twenty‐six patients with various hematologic malignancies transplanted from their HLA identical siblings between July 1997 and December 1999 were used. All patients except one with severe aplastic anemia who had cyclophosphamide (CY) alone received busulfan‐CY as preparative regimen and cyclosporine‐methotrexate for GVHD prophylaxis. Normal healthy donors were given rhG‐CSF 10 μg/kg/day subcutaneously twice daily and PBSCs were collected on days 5 and 6. The median number of infused CD34+, CD41+ and CD42+ cells were 6.61 × 10⁶/kg (range 1.47–21.41), 54.85 × 10⁴/kg (5.38–204.19), and 49.86 × 10⁴/kg (6.82–430.10), respectively. Median days of ANC 0.5 × 10⁹/L and platelet 20 × 10⁹/L were 11.5 (range 9–15) and 13 (8–33), respectively. In this study, the number of CD41+ and CD42+ cells infused much better correlated than the number of CD34+ cells infused with the time to platelet recovery of 20 × 10⁹/L in 26 patients receiving an allogeneic match sibling PBSC transplantation (r = ?0.727 and P < 0.001 for CD41+ cells, r = ?0.806 and P < 0.001 for CD42+ cells, r = ?0.336 and P > 0.05 for CD34+ cells). There was an inverse correlation between the number of infused CD41+ and CD42+ cells and duration of platelet engraftment. Therefore, as the number of CD41+ and CD42+ cells increased, duration of platelet engraftment (time to reach platelet count of ≥ 20 × 10⁹/L) shortened significantly. Based on this data we may conclude that flow cytometric measurement of CD41+ and CD42+ progenitor cells may provide an accurate indication of platelet reconstitutive capacity of the allogeneic PBSC transplant. J. Clin. Apheresis. 16:67–73, 2001. © 2001 Wiley‐Liss, Inc.     

血小板及CD62P在Ⅱ型糖尿病患者中的变化

目的 探讨血小板、平均血小板容积、血小板体积分布宽度、大血小板比率及血小板a颗粒膜糖蛋白(CD62P)在Ⅱ型糖尿病患者中的变化.方法 使用血细胞分析仪对40例Ⅱ型糖尿病患者及40例健康体检者进行血小板及其参数的测量,用流式细胞仪法观察血小板CD62P的变化.结果 与对照组相比,Ⅱ型糖尿病患者中血小板、平均血小板容积、血小板体积分布宽度及大血小板比率均有显著性变化(MPV分别为12.13±1.18 fl和10.98±1.07fl,PLT分别为188±65 × 109/L和223±55×109/L,P-LCR分别为41.04±10.04%和32.11±8.17%,PDW分别为17.01±3.47 fl和14.10±2.53 fl,P均<0.01),血小板CD62P阳性程度显著高于对照组(18.8±9.4%和3.1±5.3%,P<0.01),血小板CD62P表达与MPV为正相关关系(r=0.57,P<0.01).结论 血小板的各项参数在Ⅱ型糖尿病患者中有显著性改变,提示糖尿病患者存在着血小板活化及凝血活性增高的现象,血小板活性改变在糖尿病患者的病情发展及血栓性并发症的发生中起着一定的作用.     

奥扎格雷对不稳定心绞痛患者血小板CD_(63)、CD_(62P)表达及血浆PAI-1、C-RP含量的影响

目的探讨奥扎格雷对不稳定心绞痛患者血小板CD63、CD62P表达及血浆PAI-1、C-RP含量的影响。方法 66例不稳定心绞痛患者随机分为对照组和治疗组,各33例。对照组给予常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用奥扎格雷80mg/d,14d为1个疗程。检测2组患者治疗前后血小板CD63、CD62P及血浆PAI-1、C-RP水平的变化。结果随着不稳定心绞痛分级程度的加重,CD63、CD62P、PAI-1、C-RP水平逐渐增加。2组治疗后CD63、CD62P、PAI-1、C-RP水平均较治疗前明显降低(P<0.05);治疗组治疗后CD63、CD62P、PAI-1水平明显低于对照组治疗后(P<0.05)。结论血小板活化纤溶机制异常、炎症反应物在不稳定心绞痛患者的发生发展中具有重要作用;奥扎格雷抗血小板活性、改善纤溶活性的突出作用对预防不稳定心绞痛的发生发展具有极其重要的意义。