亚低温脑保护的机制

20世纪50年代，国外学者将中度(28～32℃)、深度(17～27℃)低温用于脑保护和脑复苏的研究，发现低温脑复苏的效果并不令人满意，且低温会出现严重的并发症，限制了它的临床应用。Ditsworth等用深低温停循环猪模型研究发现：脑部温度降至19℃时，新皮质神经元发生凋亡的数目明显增加。由此可见深低温状态对神经元有明显损伤作用。     

亚低温对缺血大鼠的脑保护作用与一氧化氮表达的相关性

目的：研究在尿激酶溶解脑血栓治疗过程中，亚低温对大鼠一氧化氮和一氧化氮合酶表达的影响。方法：以肾血管性高血压大鼠(renvoascular hypertensive stroke-prone,RHRSP)为研究对象，用光化学法制成一侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MACO)模型，在血栓形成后应用尿激酶静脉溶栓结合亚低温治疗，以观察溶栓治疗时，亚低温对一氧化氮和一氧化氮合酶影响及对缺血半影区的保护作用。结果：亚低温治疗能明显降低MCAO大鼠溶栓治疗后脑组织中一氧化氮合酶的高表达(t=6．37，P&;lt;0．01)；实验组脑组织一氧化氮合酶mRNA浓度(28&;#177;4)个／mm^2与对照组(17&;#177;2)个／mm^2比较(t=13．02，P&;lt;0．01)差异有非常显著性意义，降低血清(t=16．96，P&;lt;0．01)和脑组织(t=12．75，P&;lt;0．01)中一氧化氮的含量，实验组脑梗死面积(24&;#177;3)％与对照组(38&;#177;4)％比较，差异有非常显著性意义(t=6．26，P&;lt;0．001)。结论：亚低温对缺血性脑卒中的保护作用可能是通过影响一氧化氮和一氧化氮合酶的表达而实现的。     

脑缺血再灌注亚低温保护临床与实验研究进展

脑缺血再灌注损害是神经内外科亟待解决的一大难题，在这一领域，目前认为亚低温是最有前途的一种治疗方法，但是，有关脑缺血再灌注及亚低温的保护机制尚未认识透彻，最佳的亚低温方法、亚低温治疗时间窗、亚低温疗效评价、脑温的测定、复温等方面均处于探索阶段。本文就上述方面作一综述。     

亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡和Caspase-3活性的影响

目的：探讨亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡和Caspase—3活性的影响。方法：采用大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，大脑中动脉阻塞2h，再灌注损伤12h，用TUNEL法和荧光四肽底物(AC—DEVD-AMC)法分别检测假手术组、对照组和亚低温组的凋亡细胞百分率和Caspase—3活性水平。结果：与对照组比较，亚低温组和假手术组的凋亡细胞百分率和Caspase活性水平显著降低。结论：Caspase—3活性明显降低可能是亚低温处理大鼠脑缺血再灌注损伤后凋亡细胞百分率显著下降的分子机制之一。     

异丙酚对全脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用及其机制

背景：静脉麻醉药异丙酚可能通过抗凋亡作用保护脑缺血神经元，但是，异丙酚抗凋亡作用的研究还很少，机制尚不明确。目的：观察异丙酚对大鼠全脑缺血再灌注损伤神经元凋亡率、坏死率和凋亡相关基因蛋白表达的影响，探讨异丙酚的脑保护作用及其机制。设计：随机对照的实验研究。地点和对象：在首都医科大学附属北京神经外科研究所进行研究。成年雄性Wistar大鼠19只，随机分为缺血组(n=7)、异丙酚组(n=7)和假手术对照组(n=5)。干预：制备大鼠全脑缺血再灌注模型。异丙酚组再灌注开始后立即静脉输注异丙酚1．5mL／h，持续30min。于再灌注24h取脑，用流式细胞仪检测凋亡率，坏死率，bcl．2，Bax和p53蛋白在大鼠海马神经元中的表达情况。主要观察指标：凋亡率，坏死率，bcl-2，Bax和p53蛋白在大鼠海马神经元中的表达情况。结果：异丙酚组海马神经元的凋亡率和坏死率【(7．01&;#177;0．79)％和(12．80&;#177;0．92)％】较缺血组【(10．89&;#177;0．80)％和(16．67&;#177;1．04)％】明显降低(P&;lt;0．01)。异丙酚组Bax和p53蛋白表达【(49．93&;#177;5．41)％和(10．34&;#177;1．65)％】较缺血组【(57．05&;#177;1．91)％和(13．84&;#177;0．97)％】明显降低(P分别&;lt;0．05和0．01)，而异丙酚组bcl-2蛋白表达(9．45&;#177;1．16)％较缺血组(9．69&;#177;0．94)％未见显著性差异(P&;gt;0．05)。结论：异丙酚能够降低大鼠全脑缺血再灌注神经元的凋亡率和坏死率，起到脑保护作用，其机制可能与降低促凋亡基因Bax和p53蛋白的表达有关。     

脑温改变对大鼠脑缺血再灌注组织兴奋性氨基酸的影响

目的 研究轻度高温、亚低温对局灶脑缺血组织兴奋性氨基酸(EAA)的影响。方法 91只Wistar大鼠按随机数字表法分为：轻度高温、常温、亚低温条件下缺血2h再灌注0，l，2，3h组(按不同脑温分别标志为O2R0，O2R1，O2R2，O2R3组)及假手术组，共13组(n=7)；采用大鼠大脑中动脉(MCA)缺血再灌注线栓模型，诱导目标脑温，用HPLC荧光法检测脑组织谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)含量。结果 不同时间点轻度高温组Glu，Asp，Gly含量明显高于相应时间点常温组或假手术组(0h：轻度高温组的Glu，Asp，Gly含量分别为(4．3&;#177;0．6)，(9．4&;#177;1．0)，(3．4&;#177;0．5)μmol／g；常温组分别为(3．0&;#177;0．4)，(7．0&;#177;0．6)，(3．O&;#177;0．4)μmol／g；假手术组分别为(2．4&;#177;0．3)，(4．8&;#177;0．5)，(1．7&;#177;0．3)μmol／g;(F=8．17～174．17，P=0．0052～0．0001)，不同时间点亚低温组Glu,Asp，Gly含量明显低于相应时间点常温组或轻度高温组(F=5．80～174．17，P=0．0179～0．0001)；再灌注后3h内，各脑温组Glu，Asp及亚低温组和常温组Gly均有不同程度下降，但轻度高温组Gly无明显下降，仍高于常温组(F=8．57，P=0．0043)。结论 轻度高温促进EAA增高，在持续增加Glu“兴奋毒性”方面起重要作用；亚低温抑制EAA增高，在降低Glu“兴奋塞性”方面起重要作用。     

长期脑缺血再灌注大鼠脑的形态及功能行为研究

目的：观察长期脑缺血再灌注大鼠脑的形态和组织病理学的变化，探讨建立脑萎缩模型的可行性。方法：再灌注后结扎双侧颈总动脉，动态监测大鼠缺血后行为学、脑质量，同时苏木精-伊红染色观察脑的组织病理学变化。结果：大鼠脑缺血后脑萎缩出现于2—4个月，随时间延长而加重，对照组脑质量：4个月时为(2．080&;#177;0.107)g，6个月时为(2，213&;#177;0．072)g，脑缺血组大鼠脑质量逐渐减轻，6个月降至(1.834&;#177;0.059)g，较对照组差异有非常显著性意义(t=4.287，P&;lt;0.01)。苏木精-伊红染色显示脑组织变性坏死，细胞丢失严重。结论：再灌注后结扎双侧颈总动脉可建立较稳定的脑萎缩模型，较好的模拟了临床上反复脑缺血导致的脑萎缩的发展过程。     

局灶脑缺血再灌注期亚低温对神经元凋亡及Bcl－2和Bax表达的影响

目的：研究再灌注期实施亚低温治疗对大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)后神经元细胞的凋亡及Bcl-2，Bax基因表达的影响。方法：采用Longa线栓法制作MCAO模型，模型成功后分别进行缺血期3h、再灌注期3h、缺血期至再灌注期6h的亚低温治疗。再灌注后24h断头取脑，连续切片作TUNEL染色及Bcl-2，Bax免疫组化染色。结果：①与对照组的Bcl-2阳性细胞百分率[(19．79&;#177;0。92)％]相比，缺血期亚低温3h组[(23．04&;#177;3．76)％]和缺血亚低温至再灌亚低温6h组[(25．47&;#177;2．03)％]的Bcl-2阳性细胞率增加(q=4．19,0．O1&;lt;P&;lt;O．05；q=7．17，P&;lt;0．01)。比较单纯再灌亚低温3h组[(22．21&;#177;2．25)％]与缺血亚低温至再灌亚低温6h组的Bcl-2阳性细胞百分率，前者Bcl-2阳性细胞率较后者低(q=4．1l，P&;lt;0．01)。②与对照组的Bax阳性细胞百分率[(52．15&;#177;6．18)％]相比，缺血期亚低温3h组[(32．35&;#177;3．71)％]和缺血亚低温至再灌亚低温6h组[(26．86&;#177;2．43)％]的Bax阳性细胞百分率均降低(q=14．21，P&;lt;0．O1；q=18．95，P&;lt;0．01)；而单纯再灌亚低温3h组的Bax阳性细胞百分率[(47．26&;#177;4．52)％]降低不明显(q=2．75，P&;gt;0．05)。③凋亡细胞阳性率与Bcl-2／Bax的比值呈负相关关系(r=-O．9759，P&;lt;O．01)。结论：①单纯于再灌注期实施亚低温3h不能明显抑制神经元细胞凋亡，对Bcl-2和Bax基因的表达也无明显影响；但将缺血期实施的亚低温延长至再灌注期后3h能进一步抑制神经元细胞凋亡并降低Bax基因的表达。②Bcl-2／Bax的比值能影响细胞凋亡的发生。     

丙泊酚脑保护作用机制研究进展

脑缺血再灌注、急性颅脑损伤、体外循环等可导致脑组织不同程度的损伤,其机制主要包括氧化应激、能量代谢异常、钙离子超载、炎症细胞和炎症因子的作用、血管舒缩因子失衡、蛋白和酶表达异常等。丙泊酚是目前应用最广泛的静脉麻醉药,具有一定的脑保护作用,可能机制有降低脑代谢、改善脑血管功能、抗自由基、抑制脂质过氧化、抑制细胞内钙超载、抑制炎性细胞因子的表达、抑制细胞凋亡等。     

亚低温干预联合青皮升压对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制探讨

目的观察中药青皮联合亚低温干预对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的保护作用及对脑梗死灶周边葡萄糖利用率（LCGU）的影响，同时探讨其相关的脑保护机制。方法将64只实验大鼠随机分为对照组、青皮升压组、亚低温组及亚低温＋升压组。将上述4组大鼠制成局灶性脑缺血再灌注模型，其中青皮升压组于缺血再灌注后给予升压干预，亚低温组于缺血再灌注后给予亚低温治疗，亚低温＋升压组于缺血再灌注后同时给予升压及亚低温处理，对照组则未给予特殊处理。观察各组实验大鼠神经功能缺损评分、脑梗死灶体积及缺血侧大脑半球梗死灶周边区LCGU水平的变化情况。结果青皮升压组、亚低温组及亚低温＋升压组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死灶体积、LCGU水平均明显低于对照组（均P〈0．05）；亚低温＋升压组大鼠脑梗死体积、LCGU水平明显低于青皮升压组及亚低温组（均P〈0．05）。结论升压及亚低温干预措施均对局灶性脑缺血再灌注损伤具有明显脑保护作用，两者联用具有协同功效，能进一步提高疗效，其相关治疗机制可能包括升压及亚低温协同治疗能改善缺血半暗带区局部脑血流量与LCGU不匹配的现象。     

亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤后谷氨酸载体EAAC1mRNA表达和损伤神经细胞凋亡的影响

目的　探讨亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤后谷氨酸载体EAAC1mRNA表达和损伤神经细胞凋亡的影响。方法　采用大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型 ,大脑中动脉阻塞 30min ,再灌注损伤 90min ,用原位杂交法和原位缺口末端标记 (TUNEL)法分别检测假手术组、对照组和亚低温组的谷氨酸载体EAAC1mRNA表达阳性率和凋亡细胞百分率。结果　与对照组比较 ,亚低温组和假手术组的EAAC1mRNA表达阳性率和凋亡细胞百分率均明显降低 (P <0 0 5和P <0 0 1) ;而亚低温组EAAC1mRNA表达阳性率显著升高 (P <0 0 5 ) ,凋亡细胞百分率明显下降 (P <0 0 5 )。结论　亚低温的抗脑缺血再灌注损伤后损伤神经细胞凋亡作用可能与其上调EAAC1mRNA表达、诱导EAAC1合成及增加谷氨酸的摄取有关     

亚低温对缺血再灌注大鼠海马CA1区Bcl-2和Bax表达动态变化的影响

目的：研究脑缺血再灌注后全身亚低温的脑保护作用及其对Bcl-2和Bax表达的动态影响，探讨亚低温脑保护作用的机制。方法：实验于2002-01／12在江苏省麻醉医学研究所(省级重点实验室)完成。实验动物选择126只SD雄性大鼠随机分为假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组。采用Pulsinelli四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型，即刻全身亚低温4h，分别在再灌注后4，8，24，48，72，96h，7d，7个时间点取脑标本，进行Bcl-2和Bax免疫组织化学及苏木精-伊红染色。结果：与常温组相比，全身亚低温组海马CA1区死亡细胞数明显减少[常温比亚低温24h：(195&;#177;18)比(214&;#177;20)个／mm，P&;lt;0．05；48h：(185&;#177;17)比(215&;#177;21)个／min．P&;lt;0．01；72h：(130&;#177;20)比(200&;#177;17)个／mm，P&;lt;0．01)]；Bcl-2蛋白免疫反应强度峰值增高，持续时间延长[灰度值：常温比低温：24h(40&;#177;8比57&;#177;8，P&;lt;0．01)；48h(42&;#177;6比55&;#177;8，P&;lt;0．01)；72h(38&;#177;4比41&;#177;6，P&;lt;0．01)]。Bax蛋白免疫反应强度峰值减低，持续时间缩短[灰度值：常温比低温24h(32&;#177;4比24&;#177;5．P&;lt;0．05)；48h(30&;#177;7比24&;#177;6，P&;lt;0．05)；72h(26&;#177;4比22&;#177;5，P&;lt;0．05)]。结论：全身亚低温对缺血性锥体细胞损害有较好的保护作用。可增强具有抗凋亡的Bcl-2蛋白的表达，延长其表达持续时间，而减弱具有促凋亡的Bax表达，同时缩短其表达持续时间，此可能是亚低温对缺血性脑组织损害产生保护作用的分子机制之一。     

缺血预处理、缺血后处理的脑保护进展

脑动脉自然闭塞或以治疗目的而人为血管夹闭都可能会造成脑缺血损害及再灌注损害。因此寻找有效保护方法,最大可能地激发脑保护机制,使脑损害降至最低程度,是临床上急待解决的问题。近20多年来的研究,人们发现缺血预处理（IPC）和后处理均能有效地减少梗死面积、保护细胞功能,是缺血再灌注损伤较有力的内源性保护机制。     

低温液滴注兔侧脑室对脑局部缺血再灌注后的神经保护作用

背景：低温对脑缺血再灌注后的神经保护效应已认识已久，但全身低温应用方法烦琐，不利于手术后患者意识及神经功能的观察。探索新型的脑局部低温方法，有重要的理论意义。目的：研究低温液持续滴注兔侧脑室并引流对新西兰兔大脑中动脉闭塞模型缺血区神经元的保护作用。设计：以实验动物为研究对象，随机对照研究。单位：一所军区总医院的神经外科和病理科。材料：实验于2002—06／2003-01在解放军南京军区南京总医院神经外科实验室完成。选择出生4—6个月健康新西兰纯种白兔18只，雄性，体质量2．8～3．2kg，随机分为夹闭组、低温组、对照组。干预：左侧大脑中动脉夹闭2h，再灌注24h，导致新西兰兔脑局部缺血再灌注损伤。主要观察指标：神经功能评分、左右半球脑组织含水量、左侧大脑中动脉供血区神经细胞病理改变。结果：①低温组动物神经功能评分(2．48&;#177;0．49)分明显优于夹闭组(7．58&;#177;0．58)分，差异有非常显著性意义(P&;lt;0．01)，而和对照组(1．13&;#177;0．22)分相比，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。②夹闭组(81．64&;#177;0．82)％、低温组(79．26&;#177;1．30)％左侧脑组织含水量比较差异有显著性意义(P&;lt;0．05)，夹闭组左侧(81．64&;#177;0．82)％、右侧(78．47&;#177;1．68)％脑组织含水量差异有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。③光镜观察见夹闭组大脑中动脉供血区神经节细胞胞核固缩、浓染，而低温组大脑中动脉供血区脑组织无明显病理改变。结论：低温液持续滴注侧脑室可减轻脑缺血再灌注损伤，改善脑缺血后神经功能，有显著脑保护作用。     

亚低温联合升压治疗对局灶性脑缺血的脑保护作用

目的 :观察升压联合亚低温治疗对大鼠局灶性脑缺血的脑保护作用。方法 :6 8只大鼠随机分为对照组、升压治疗组、亚低温治疗组及升压联合亚低温治疗组 ;制作大鼠局灶性脑缺血模型 ,观察各组的神经功能缺失评分、脑梗死体积和脑组织水含量。结果 :升压治疗组、亚低温治疗组及升压联合亚低温治疗组的神经功能缺失评分、脑梗死体积均明显低于对照组 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ;升压联合亚低温治疗组脑梗死体积小于升压治疗组和亚低温治疗组 (P均 <0 .0 5 ) ,升压组、亚低温治疗组和联合治疗组脑组织水含量均明显低于对照组(P均 <0 .0 5 )。结论 :升压和亚低温对局灶性脑缺血大鼠有明显的脑保护作用 ,联合应用保护作用更强。     

含雌激素中药脑保护作用的实验研究

目的：探讨含雌激素中药对实验动物缺血后脑损伤的保护作用及其临床意义。方法：实验于2004-03／09在南京大学医学院附属鼓楼医院神经科实验室进行。将清洁级SD大鼠30只随机分为两组各15只，分别灌注中药和饮用水7d后，制成缺血再灌注脑损伤模型。在再灌注12，14h时每组各取6只取脑切片，TFC染色，计算梗死面积。另3只取缺血侧皮质，提取蛋白，并作雌激素受体β测定。结果：中药组脑梗死面积再灌注12h时为(40．62&;#177;1．68)％、再灌注24h时为(58．89&;#177;2．12)％，与对照组[(5．23&;#177;1．23)％和(69．86&;#177;2．43)％1相比，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)；免疫印迹蛋白测定，中药处理组缺血侧脑皮质雌激素受体表达高于空白对照组。结论：含雌激素中药有明显的脑保护作用。可能通过激活雌激素受体B而具有脑保护作用。     

亚低温疗法用于脑复苏的国内外研究概况

随着心肺复苏技术的发展,心脏骤停后心肺复苏水平已有明显提高,但由于脑组织对缺血的耐受性较差,易引起不可逆损害,导致脑复苏失败而影响了心脏骤停后整个心肺脑复苏水平。减少脑缺血对脑组织的损害,提高脑复苏水平已成为现代急救的关键所在。近10多年,国内外学者对脑复苏的研究越来越多,改进脑复苏方法主要包括[1]:①加压再灌注。②紧急心肺旁路。③药物(如钙离子拮抗剂等)。④低温疗法。中度低温效果确切,但因其在应用中难于管理和引起的并发症而受到限制[2],其中亚低温对脑组织具有明显的保护作用,而对心血管等其他系统无不利影响,是脑复…     

亚低温在大鼠脑缺血再灌注中的脑保护作用

目的 探讨亚低温在脑缺血再灌注损伤中的保护作用。方法 采用大鼠大脑中动脉线栓闭塞／再通法建立大鼠局灶性缺血-再灌注模型，常温组和亚低温组分别于脑缺血3h再灌注6h、12h、24h、48h、72h后断头取脑，假手术组则于再灌注24h断头取脑，测定MPO的活性和免疫组化法观察ICAM—1、Mac-1的表达。同时常温组和亚低温组在再灌注24h进行神经功能评分和脑梗死体积的比较。结果 （1）脑缺血再灌注6h后，脑缺血灶ICAM-1和Mac-1表达逐渐出现增高趋势，脑组织MPO活性也逐步增高，再灌注48h达高峰，它们与假手术组比较差异有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。（2）缺血早期进行亚低温干预，能明显抑制ICAM-1、Mac—1的表达和MPO活性（P〈0．05，P〈0．01）。（3）亚低温可以改善大鼠脑缺血再灌注后的神经功能障碍，减少脑梗死体积（P〈0．01）。结论 脑缺血再灌注后炎症反应是造成脑损伤的重要因素之一；亚低温干预能明显抑制再灌注后脑组织炎症反应，起到神经保护作用，这可能是亚低温在脑缺血再灌注损伤中的重要保护机制之一。     

亚低温对局灶性脑缺血再灌注大鼠Dickkopf-1表达的影响

目的研究亚低温对局灶性脑缺血再灌注大鼠Dickkopf-1（Dkk-1）表达的影响,进一步探讨亚低温脑保护作用的机制。 方法线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型,分假手术组、假手术+亚低温组、模型组及模型+亚低温组。应用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、Western blotting和免疫组化技术分别检测再灌注后不同时相缺血侧皮质Dkk-1 mRNA和蛋白水平的表达。 结果假手术组、假手术+亚低温组Dkk-1 mRNA及蛋白有少量表达。脑缺血2 h再灌注3 h,Dkk-1 mRNA和蛋白表达开始增加,随再灌注时间的延长表达量逐渐增加,至再灌注24 h达高峰,然后明显减少,再灌注72 h时仍高于假手术组的水平。每一相同再灌注时间点,模型+亚低温组Dkk-1 mRNA和蛋白表达量均明显低于模型组。 结论Dkk-1可能参与了局灶性脑缺血再灌注损伤的病理过程。亚低温可通过抑制Dkk-1的表达而发挥一定程度的脑保护作用。