柠檬醛诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡机制的研究

目的探讨柠檬醛诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡的机制。方法不同浓度的柠檬醛处理NB4细胞48 h后,RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2及Bax的mRNA表达变化,流式细胞仪检测细胞caspase-3及核因子kappaB(NF-κB)表达的变化。结果随着柠檬醛浓度增加,RT-PCR结果显示受测细胞的Bax mRNA表达增强,Bcl-2mRNA表达减弱;流式细胞仪检测结果显示受测细胞的caspase-3表达增加,NF-κB表达下降。结论降低NF-κB、Bcl-2表达及促进Bax、caspase-3表达可能是柠檬醛诱导NB4细胞株凋亡的机制之一。     

葛根总黄酮体外诱导人早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡的实验研究

目的探讨葛根主要成分葛根总黄酮对急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞株NB4增殖及凋亡的影响。方法采用MTT比色法检测葛根总黄酮对NB4细胞增殖抑制率;光学显微镜及荧光显微镜观察细胞形态改变;AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡率;DNAPI染色法分析细胞周期及亚二倍体峰。结果12.5～200μg/ml葛根总黄酮均能抑制NB4细胞的增殖。光镜及荧光显微镜下可见核固缩、凋亡小体等典型的细胞凋亡改变;AnnexinV＋/PI-细胞呈时间-剂量依赖性增加;DNAPI染色法发现细胞亚二倍体比例增加,G1期比例下降、S期比例增高。结论葛根总黄酮能有效抑制NB4细胞增殖、阻滞细胞周期进程、诱导细胞凋亡。     

三种维甲酸同分异构体对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4增殖及分化作用的研究

研究了三种维甲酸同分异构体，即全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）、９顺式维甲酸（９Ｃ－ＲＡ）和１３顺式维甲酸（１３Ｃ－ＲＡ）在体外对人急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）细胞株ＮＢ４细胞的增殖和分化作用。形态学、细胞生长曲线、细胞周期动力学、细胞膜表面分化抗原、硝基蓝四唑试验（ＮＢＴ）等多参数研究的结果表明，维甲酸诱导细胞分化早期伴有细胞的增殖；ＡＴＲＡ诱导ＮＢ４细胞分化的效应优于１３Ｃ－ＲＡ，而９Ｃ－ＲＡ又优于ＡＴＲＡ。这对阐明维甲酸诱导早幼粒白血病细胞分化的作用机理，对发掘具有应用前景的新型维甲类分化诱导剂具有一定的价值。     

尿多酸肽诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株凋亡的实验研究

目的探讨尿多酸肽(CDA-Ⅱ)对急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)细胞NB4及耐维甲酸的NB4-R1细胞的凋亡作用。方法以NB4和NB4-R1细胞作为体外模型,观察CDA-Ⅱ作用前后细胞的形态和生长增殖情况。流式细胞术检测细胞凋亡特征。Western印迹法检测凋亡调控蛋白蛋白激酶C(PKCδ)及Caspase-3的水解活化。结果 CDA-Ⅱ作用于NB4和NB4-R1细胞后,细胞生长受到抑制;形态上观察到分化和凋亡现象;Annexin V-PI法发现,用药24 h后NB4和NB4-R1细胞凋亡比例分别上升至(58.7±3.1)%和(87.8±0.5)%;PKCδ和Caspase-3水解活化。结论 CDA-Ⅱ作用于细胞后,水解活化Caspase-3,裂解PKCδ生成活性片段,诱导细胞凋亡。     

氧化砷诱导早幼粒细胞白血病细胞凋亡的体内研究

细胞凋亡已成为当前肿瘤研究的热点之一［１］,氧化砷和硫化砷等砷化合物治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）为促进凋亡治疗恶性肿瘤这一新的治疗途径提供了成功的范例［２］。我院自１９９４年１２月起应用三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）治疗了３６例ＡＰＬ复发的患者,其中...     

三种维甲酸同分异构体对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4增殖及…

研究了三种维甲酸同分异构体，即全反式维甲酸、９顺式维甲酸和１３顺式维甲酸在体外对人急性早幼粒细胞白血病细胞株ＮＢ４细胞的增殖和分化作用。形态学、细胞生长曲线、细胞周期动力学、细胞膜表面分化抗原、硝基蓝四唑试验等多参数研究的结果表明，维甲酸诱导细胞分化早期伴有细胞的增殖；ＡＴＲＡ诱导ＮＢ４细胞分化的效应优于１３ＣＲＡ，而９Ｃ－ＲＡ又优于ＡＴＲＡ。     

不同锑剂对早幼粒细胞白血病凋亡诱导作用比较

目的：通过不同锑剂对早幼粒白血病细胞株NB4细胞的凋亡诱导作用的比较，力求找到有效治疗早幼粒细胞白血病锑剂药物。方法：采用细胞生长曲线、形态学及NBT（硝基四氮唑蓝）还原试验判定NB4细胞的生长、分化及功能；细胞周期分析和DNA电泳研究细胞凋亡。结果：三价锑剂能够诱导早幼粒白血病细胞凋亡，且具有时间剂量依赖性，而五价锑剂对早幼粒白血病细胞没有凋亡诱导作用。结论：三价锑剂能够有效地诱导早幼粒白血病细胞凋亡，提示酒石酸锑钾作为临床治疗寄生虫病有效药物，可以老药新用，有望用于临床治疗早幼粒细胞白血病。     

高三尖杉酯碱对急性白血病NB4细胞凋亡机制的影响

目的 观察高三尖杉酯碱(HHT)对急性早幼粒细胞白血病(APL)NB4细胞凋亡的作用及对PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达的影响,探讨其可能的作用机制.方法 将不同浓度(5、10、50、100、500 μg/L)HHT作用于NB4细胞,采用流式细胞术检测细胞凋亡,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞生长的抑制作用,...     

塞来昔布诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株MR2凋亡及机制的研究

目的:探讨塞来昔布诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株MR2细胞凋亡作用及其可能机制。方法:应用MTT法分析塞来昔布对细胞增殖的影响;琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段化分析;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;PCR检测融合基因PML/RARα和凋亡相关基因Survivin表达;免疫印迹检测caspase-3、9和PARP蛋白表达。结果:MTT示塞来昔布对MR2细胞具有明显的增殖抑制作用,并具有时间和剂量依赖性。琼脂糖凝胶电泳见DNA片段化,形成典型梯状条带。流式细胞仪检测发现塞来昔布处理24 h后,随着作用浓度增加,MR2细胞早期凋亡率从5.06%增至36.1%,细胞内Survivin表达降低而PML/RARα无明显变化。同时伴有caspase-3、9和PARP蛋白的激活。结论:塞来昔布能够通过诱导凋亡抑制MR2细胞增殖,其机制可能与抑制Survivin表达有关,但与融合基因PML/RARα无明显关系。     

氯化甲基汞对NB4和K562白血病细胞凋亡及增殖的影响

目的：研究氯化甲基汞（MMC）对NB4和K562白血病细胞凋亡及增殖的影响。方法：NB4、K562细胞经1.25、2.50、5.00、10.00和20.00 μmol•L^-1MMC、三氧化二砷（ATO）分别作用0、6、12、24、48和72 h,采用MTT法测定细胞的存活率,采用Hoechst 33258染色后荧光镜下观察细胞凋亡情况。结果： NB4和K562细胞接触10 μmol•L^-1 MMC 24 h后,细胞存活率分别为22.0%和70.0%,与对照比较差异有显著性（P值分别为0.000和0.014）;NB4和K562细胞接触10 μmol•L^-1ATO 24 h后,细胞存活率分别为24.4 %和52.0%（P值分别为0.001和0.000）;荧光镜检呈现明显的凋亡图像。MMC与ATO对NB4、K562细胞诱导凋亡及抑制增殖作用相似。结论：MMC能诱导NB4和K562细胞凋亡,抑制其增殖,并呈时间剂量依赖性。     

反义核酸和维甲酸对早幼粒白血病细胞NB4的诱导分化

目的：探讨反义核酸和维甲酸对早幼粒白血病细胞株ＮＢ４细胞生长分化的影响。     

雷公藤红素对ATRA诱导白血病细胞分化成熟的影响

目的观察雷公藤红素对ATRA诱导白血病细胞分化成熟的影响。方法用细胞形态学、生化指标、分子标志等指标,观察雷公藤红素／＆ATRA同处理组NB4分化情况。结果与对照组相比。ATRA诱导后,NB4细胞呈现中性粒细胞分叶核形态;NBT还能力明显增加;分化抗原CD13和CD33表达下降,而CD11b和CD15表达增加。雷公藤红素与ATRA联合应用,结果与ATRA处组相似。结论雷公藤红素不影ATRA诱导NB4胞分化成熟作用,提示雷公藤红素作为分化综合征的治疗和预防药物值得进一步研究。     

辛伐他汀对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞NF-kB信号通路的影响

目的探讨辛伐他汀对人急性早幼粒细胞白血病细胞株（NB4细胞）增殖与凋亡的影响以及对凋亡信号转导通路NF．KB通路相关基因mRNA表达的影响,以探讨辛伐他汀抗白血病效应及可能机制。方法以不同浓度辛伐他汀处理NB4细胞,取对数生长期细胞进行实验。实验分为阴性对照组和辛伐他汀处理组（终浓度分别为5、10、15μmol／L）,培养24、48、72h。采用MTT法观察NB4细胞增殖能力;流式细胞术测定NB4细胞凋亡指标Annex—inV／propidiumiodide变化;PCR芯片研究NB4细胞NF—KB通路相关基因mRNA的差异表达。结果辛伐他汀对NB4细胞的生长有明显抑制作用和促凋亡作用（均P〈0．01）,且呈时间与剂量依赖性。15μmol／L辛伐他汀处理NB4细胞24、48、72h细胞抑制率分别达到45．75％、92．91％、96．46％,而细胞早期凋亡率分别为30．25％、64．34％、87．38％。与对照组相比,15μmol／L辛伐他汀处理NB4细胞48h组中NF—KB通路有56个基因表达发生改变,其中47个基因表达下调、9个基因表达上调。结论辛伐他汀能抑制NB4细胞增殖并诱导其凋亡,其诱导凋亡机制可能与辛伐他汀调节NF—KB通路相关基因的表达有关。     

急性早幼粒白血病细胞ATRA耐药株HL-60R、NB4R的构建及鉴定

目的：构建急性早幼粒细胞白血病细胞系HL-60、NB4的全反式维甲酸耐药株HL-60 R、NB4 R,并对其生物学性状进行鉴定。方法：以全反式维甲酸（ ATRA ）为诱导药物,采用浓度递增间歇诱导法构建HL-60、NB4细胞相应的ATRA耐药株。 CCK8法鉴定其ATRA耐药性,并检测耐药细胞株的生长曲线及多药耐药性。结果：成功构建了ATRA耐药细胞株HL-60 R、NB4 R,并发现与亲代细胞相比,其生长增殖速度减慢,群体倍增时间延长,且对其它多种化疗药物产生一定程度的交叉耐药。结论：成功构建的耐药细胞系HL-60R、NB4R为急性早幼粒细胞白血病多药耐药机制的进一步研究奠定了基础。     

Mechanism of apoptosis induced by citral in NB4 cells

目的 探讨柠檬醛诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡的机制.方法 不同浓度的柠檬醛处理NB4细胞48 h后,RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2及Bax的mRNA表达变化,流式细胞仪检测细胞caspase-3及核因子kappaB (NF-κB)表达的变化.结果 随着柠檬醛浓度增加,RT-PCR结果显示受测细胞的Bax mRNA表达增强,Bcl-2 mRNA表达减弱;流式细胞仪检测结果显示受测细胞的caspase-3表达增加,NF-κB表达下降.结论 降低NF-κB、Bcl-2表达及促进Bax、caspase-3表达可能是柠檬醛诱导NB4细胞株凋亡的机制之一.     

雷公藤多甙对人急性髓性白血病细胞株HL-60的生长抑制及凋亡诱导作用

目的：探讨雷公藤多甙对人急性髓性白血病细胞株HL-60细胞的增殖及凋亡的影响。方法：应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、荧光染色法、流式细胞仪（FCM）检测、DNA片段化分析等方法研究雷公藤多甙对HL-60细胞的影响。结果：雷公藤多甙能显著抑制白血病细胞的增殖,降低肿瘤细胞的存活率,其半数细胞抑制剂量( IC50 )为5.0 μg/ml,阻滞细胞周期于G2/M期（P<0.05）。雷公藤多甙实验组在形态学上可见明显凋亡细胞,且凋亡细胞百分率显著上升(P<0.05),凝胶电泳分析有DNA梯状条带出现。结论：雷公藤多甙能显著抑制人急性髓性白血病细胞株HL-60细胞的生长增殖并促进细胞凋亡。