磷酸氯喹对心肌细胞膜损伤的保护作用

通过体外培养心肌细胞探讨磷脂酶 A2 (phospholipase A2 ,PL A2 )、脂多糖 (lipopolysaccharide,L PS)对心肌细胞膜的损伤及其磷酸氯喹 (chloroquine phosphate,CQP)对心机细胞膜的保护效应。实验结果表明 ,PL A2 、L PS在体外和培养心肌细胞一起孵育 ,能引起心肌细胞膜脂质过氧化损伤加重 ,降低细胞膜流动性 ,增加细胞膜通透性。L PS和体外培养心肌细胞一起孵育 ,可导致 PL A2 活性显著升高 ,细胞内脂质过氧损伤加重 ,细胞膜通透性增加 ,细胞膜流动性降低。而CQP可减轻心肌细胞膜的脂质过氧化损伤 ,抑制 PL A2 活性 ,改善细胞膜流动性 ,保护心肌细胞膜 ,减轻心肌细胞损伤     

维生素E对培养心肌细胞脂质过氧化损伤的保护

应用氢过氧化枯烯引发体外培养的乳鼠心肌细胞脂质过氧化损伤过程，观察了添加维生素Ｅ（２００ｍｇ／Ｌ的α－生育酚）的影响。结果显示：维生素Ｅ能明显减轻细胞脂质过氧化物的蓄积、细胞内肌酸激酶漏出和ＤＮＡ断裂，保护细胞膜流动性、肌球蛋白轻链肌酸激酶和头部ＡＴＰ酶的活性；但对￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入的影响不显著。表明维生素Ｅ具有抵抗脂质过氧化所致心肌细胞损伤的作用。     

脂质过氧化作用对培养心肌细胞维生素E含量及膜流动性的影响

应用氢过氧化枯烯引发培养乳鼠的心肌细胞脂质过氧化损伤，观察维生素Ｅ含量及细胞膜流动性的变化。结果显示：脂质过氧化作用能引起心肌细胞维生素Ｅ含量明显下降，其中以ｒ一生育酚的消耗更为显著，细胞膜流动性也降低。提示维生素Ｅ在对抗心肌细胞脂质过氧化损伤上起重要作用。     

铅致心肌细胞膜通透性改变的研究

运用心肌细胞培养体外模型．探讨了铅致心肌细胞膜通透性的改变及锌对其改变的影响。结果表明：铅可使乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及谷草转氨酶（ＧＯＴ）的漏出增加，且呈剂量－时间反应关系．铅先损伤质膜，后损伤线粒体膜；铅致酶漏出的剂量与其抑制酶的剂量有交叉；锌对铅所致的ＬＤＨ及ＧＯＴ漏出无明显影响．从而提示，铅致心肌细胞膜通透性改变可能是铅心脏毒性的一个机制，锌对铅所致的心肌细胞膜通透性改变无明显保护作用．     

L-卡尼汀对大鼠心脏移植再灌注损伤保护作用的研究

目的　探讨L -卡尼汀对大鼠心脏移植再灌注损伤的保护作用。方法　采用大鼠颈部异位心脏移植模型 ,随机分为2组 :L -卡尼汀组 ,对照组。再灌注 2h测定心肌脂质过氧化终产物MDA、过氧化物歧化酶SOD的含量 ,电镜观察心肌组织的病理变化。TUNEL法染色检测细胞凋亡 ,以心肌凋亡阳性细胞数占总心肌细胞数的百分比作为心肌细胞凋亡指数。结果　L -卡尼汀组心肌线粒体等结构损伤明显减轻 ,心肌MDA明显减少 (P <0 0 1) ,SOD明显增加 (P <0 0 1) ,心肌细胞凋亡指数明显降低 [(7 14± 0 3 8) %vs (3 8 3 6± 3 16) % ,P <0 0 1) ]。结论　L -卡尼汀能有效减轻脂质过氧化反应 ,保护心肌线粒体 ,抑制心肌细胞凋亡 ,对心脏移植再灌注损伤有显著保护作用。     

砷对心肌细胞生物膜损伤机制的探讨

为探讨砷对乳鼠心肌细胞生物膜损伤的机制，运用心肌细胞培养的方法，观察了三氧化二砷染毒后，Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心肌细胞的一系列酶的活力改变。结果表明：心肌细胞培养液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、肌酸激酶ＭＢ（ＣＫ－ＭＢ）活力明显增高，细胞存活率随砷浓度增加而降低；心肌细胞中谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活力明显下降，丙二醛（ＭＤＡ）水平则明显升高。提示：砷可直接导致心肌细胞损伤。生物膜损伤可能是砷所致心肌细胞损伤的重要机制之一，而生物膜损伤可能与砷致膜通透性增加和脂质过氧化有关。     

β-胡萝卜素对大鼠红细胞膜结构稳定性的影响

目的 :　利用四氧嘧啶诱发大鼠体内广泛脂质过氧化 ,研究β-胡萝卜素 (βC)对红细胞脂质过氧化和红细胞膜流动性的影响。方法 :　选用 2 m龄 Wistar大鼠 44只 ,按性别、体重随机分为 A、B、C、D四组 ,其中 A、B两组分别喂予基础饲料 ,C、D两组分别喂含维生素 E(VE2 0 0mg/kg)和含天然 βC晶体 (2 0 0 mg/kg)的基础饲料。饲养 4w后 ,除 A组外 ,在空腹状态下腹腔注射四氧嘧啶 ,制成人工高自由基动物模型 ,48h后宰杀动物 ,收集血液 ,摘取肝脏 ,测红细胞膜、血清、肝匀浆中丙二醛 (MDA)含量 ,全血谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)活性、红细胞膜 Na+ ,K+ -ATP酶活性及细胞膜流动性。结果 :　 1 .四氧嘧啶可使 GSH- Px、Na+ ,K+ - ATP酶活性下降 (P<0 .0 1 ) ,MDA含量增高 ,红细胞膜流动性下降 (P<0 .0 1 )。 2 .添加βC或 VE后 ,GSH- Px、Na+ ,K+ -ATP酶活性、细胞膜流动性明显升高 (P<0 .0 5 ) ,MDA含量明显降低 (P<0 .0 5 )。结论 :　βC或VE能降低体内脂质过氧化 ,从而保护红细胞膜结构与功能的稳定。     

高原红细胞增多症红细胞膜流动性的改变及相关机理

目的：测定高原红细胞增多症（ＨＡＰＣ）患者红细胞膜流动性,了解过氧化脂质和超氧化物歧化酶对红细胞膜流动性的影响,为临床治疗提供依据。方法：ＨＡＰＣ患者２７例,正常对照２３例。测定红细胞膜流动性,红细胞膜过氧化脂质,血浆和红细胞超氧化物歧化酶活力。结果：ＨＡＰＣ患者红细胞膜荧光偏振度与对照组比较增加（Ｐ〈０．０１）。红细胞膜过氧化脂质与对照组比较增高（Ｐ〈０．０１）。血浆及红细胞超氧化物歧化酶与对照     

高温下L-精氨酸对脂质过氧化及细胞膜影响

目的探讨L-精氨酸（L一Arg）对高温下脂质过氧化及细胞膜脂流动性的影响。方法采用三因素析因设计，将SD雄性大鼠随机分成3组：A（灌水对照组），B（补充L—Arg组），C[维生素E（VE）组]。饲养12d。取1和2h热应激时间，在热应激前、后不同的时间点采样。测定血清超氧化物岐化酶（SOD）、血清丙二醛（MDA）；细胞膜脂流动性检测采用激光扫描共聚焦显微镜。结果热应激后各组SOD活性均较相应常温对照组明显升高，而B组和C组又明显高于A组（P〈0．05）。各组血清MDA含量明显高于相应的常温对照组（P〈0．05），且随着热应激时间的增加。B组和C组血清DMA含量低于A组（P〈0．05）。热应激后B组和C组巨噬细胞膜脂流动性明显升高。并且高于A组（P〈0．05）。结论适量补充L—Arg能增强SOD活性。减少MDA含量，有效地保持细胞膜脂流动性，抑制脂质过氧化损伤。L—Arg具有与Ⅶ同样的抗氧化能力可能与其提高SOD活性及通过L—Arg—NO途径、参与氧化应激调节有关。     

葡萄糖酸锌抗石英细胞毒作用的研究

为探讨葡萄糖酸锌（ＺｎＧ）抗石英尘细胞毒作用及可能的作用机制，作者采用体外细胞实验方法，观察了ＺｎＧ对肺泡巨噬细胞膜脂质过氧化、膜通透性、膜流动性及溶血作用的影响。结果表明，ＺｎＧ与ＳｉＯ２、肺泡巨噬细胞共孵后，抑制了肺泡巨噬细胞的脂质过氧化，使其膜通透性及流动性下降；ＺｎＧ与红细胞共孵后能降低石英的溶血作用。     

Aβ25-35诱导大鼠心肌细胞内质网应激和细胞凋亡的研究

目的 研究β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)对培养大鼠心肌细胞的凋亡及内质网应激相关蛋白的影响,探讨内质网应激在A β25-35所致心肌损伤中的作用.方法 体外培养大鼠心肌细胞,给予不同浓度Aβ25-35刺激,用MTT方法观察心肌细胞的存活率,采用Hoechst33258染色观察心肌细胞的形态,流式细胞术检查细胞凋亡率,采用Western blot方法检测内质网应激蛋白X盒结合蛋白-1(XBP-1)、葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的水平,以及凋亡蛋白cleaved caspase-3和cleaved PARP的水平.结果 Aβ25-35可以降低体外培养大鼠心肌细胞的存活率,促进凋亡,且呈现浓度依赖的方式.给予Aβ25-35后内质网应激蛋白XBP-1、GRP78和CHOP表达增加,同时凋亡蛋白cleaved caspase-3和cleaved聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)表达也增加.结论 Aβ25-35可以导致体外培养的大鼠心肌细胞发生凋亡,而内质网应激可能参与了心肌细胞发生凋亡过程,为有效防治AD相关性心肌损伤提供新思路.     

车前子对高脂血症大鼠脂质过氧化的影响

目的 :　探讨车前子对高脂血症大鼠脂质过氧化的影响。方法 :　采用大鼠血清及多脏器组织 ,观察车前子对高脂血症大鼠脂质过氧化的影响。结果 :　高脂对照组血清和心肌超氧化物歧化酶 ( SOD)活性显著降低 ,而脂质过氧化物 ( LPO)含量明显升高 ,血清和肝脏的过氧化氢酶( CAT)、谷胱苷肽过氧化物酶 ( GSH-Px)活性明显降低。补充车前子后显著升高血清及心肌组织SOD活性 2 2 %和 2 8% ,以及肝脏 GSH-Px活性 2 2 %。而使血清及心肌的 LPO含量分别下降 3 2 %和 1 7%。结论 :　 1 5 g/kg车前子可提高高脂血症大鼠体内抗氧化能力并免受自由基损伤     

硒、维生素E对心肌胶原蛋白代谢的影响

目的：阐明硒（Ｓｅ）、维生素Ｅ（ＶＥ）与心肌胶原蛋白代谢的关系。方法：以病区粮（低Ｓｅ、低ＶＥ）喂养大鼠,并注射异丙基肾上腺素（ＩＳＯ）诱发心肌缺血缺氧性坏死,检测心肌中谷胱甘肽氧化酶（ＧＳＨ－ＰＸ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、丙二醛（ＭＤＡ）和胶原蛋白含量变化。结果：低Ｓｅ低ＶＥ组血浆和心肌ＧＳＨ－ＰＸ、ＣＡＴ活性下降,ＭＤＡ含量上升,与心肌胶原蛋白含量变化有相关性。补Ｓｅ补ＶＥ后,ＧＳＨ－ＰＸ、ＣＡＴ活性上升,ＭＤＡ水平下降,心肌胶原蛋白含量下降。结论：低Ｓｅ低ＶＥ加重ＩＳＯ诱发的心肌损伤,脂质过氧化和自由基与心肌胶原蛋白代谢关系密切。补Ｓｅ补ＶＥ后,能缓解心肌细胞对诱发因素所造成的损伤,对保护心肌细胞和防止心肌纤维化的形成具有一定作用。     

镉致心肌细胞线粒体损伤的研究

目的：研究氯化镉对心肌细胞线粒体的损伤情况。方法：运用原代细胞培养技术培养大鼠心肌细胞，MTT法测定心肌细胞的死亡率，生化法测定ATP酶和乳酸脱氢酶（LDH）活性变化，流式细胞仪法检测心肌细胞线粒体膜电位（MMP）的变化，分光光度法测定线粒体膜通透性（MPT）变化情况。结论：氯化镉可导致心肌细胞ATP酶和乳酸脱氢酶活性的降低，并且使线粒体膜电位降低、膜通透性改变。     

番茄红素对体外氧化损伤的影响

[目的]观察不同浓度的番茄红素对体外氧化损伤的影响。[方法]当人胚肺二倍体细胞（SL-7细胞）处于对数生长期时,加入不同浓度的番茄红素,作用24h后除溶剂对照组外其余再加入H2O2作用1h。测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）的含量;同时测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）的含量以及超氧化物歧化酶（SOD）的活性。[结果]0.5、1、5μmol/L番茄红素能维持细胞膜的完整性,LDH和MDA的含量与H2O2组比较显著降低（P﹤0.05）,同时SOD活力增强（P﹤0.05）,GSH的含量增加（P﹤0.05）。但10μmol/L番茄红素组上述作用不明显。[结论]0.5、1、5μmol/L番茄红素对体外氧化损伤有保护作用;10μmol/L番茄红素无保护作用。     

2450MHz微波诱导猪视网膜色素上皮细胞脂质过氧化损伤及锌的防护效应

为观察微波对体外培养的猪视网膜色素上皮细胞的脂质过氧化损伤作用及锌的生物防护作用 ,体外培养猪视网膜色素上皮细胞 ,微波按强度分为 3组 (10、2 0、30 m W· cm- 2 )辐照 1h。 30 m W· cm- 2 为防护组 ,在培养液中加入不同浓度的硫酸锌。辐照后立即测定 SOD活性、MDA含量 ,检测细胞存活率。结果显示微波辐照后 ,SOD活性下降 ,MDA含量升高 ,细胞存活率明显下降 ,加入锌后 ,可减轻这种损伤。在本实验条件下 ,微波可引起体外培养的猪视网膜色素上皮细胞的脂质过氧化损伤 ,锌可提高细胞的抗氧化能力 ,减轻细胞的损伤。     

铁矿尘对肺泡巨噬细胞影响的实验研究

采用大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）体外培养的方法,对铁矿积尘进行毒性研究。染尘浓度为０、０．２、０．６和１．２ｍｇ／ｍｌ,染尘１、５、２０小时后,通过对大鼠ＡＭ功能、形态、细胞膜通透性变化以及脂质过氧化、抗氧化等的观察,初步探讨了铁矿尘对ＡＭ的毒作用及其机理。结果表明,染尘后ＡＭ吞噬酵母菌能力降低;随铁矿尘浓度增高和染尘时间延长,细胞培养液中ＬＤＨ活性升高,细胞内ＡＣＰ活性降低,Ｋ＾＋水平降低,说明铁矿     

丹参酮ⅡA对阿霉素所致体外心肌细胞氧化损伤的保护作用

目的 探讨丹参酮ⅡA对阿霉素所致心肌氧化损伤的保护作用.方法 选择出生1～3 d的SD大鼠,进行心肌细胞培养.培养4d后心肌细胞随机分为5组:正常对照组、阿霉素损伤组(阿霉素1.72× 10-6 mol/L)、丹参酮ⅡA低剂量组(阿霉素1.72×10-6 mol/L+丹参酮ⅡA10×l0-6 mol/L)、丹参酮ⅡA中剂量组(阿霉素1.72×10-6 mol/L+丹参酮ⅡA20×l0-6 mol/L)、丹参酮ⅡA高剂量组(阿霉素1.72×10-6 mol/L+丹参酮ⅡA40×10-6 mol/L).作用48 h后测定心肌细胞活力、乳酸脱氢酶活性、超氧化物歧化酶、丙二醛含量、一氧化氮含量.结果 ①阿霉素损伤组心肌细胞活力显著低于正常对照组(P＜0.01);丹参酮ⅡA低、中、高剂量组心肌细胞活力分别高于阿霉素损伤组(P＜0.05).②阿霉素损伤组心肌细胞乳酸脱氢酶活性显著高于正常对照组(P＜0.01);丹参酮ⅡA低、中、高剂量组心肌细胞乳酸脱氢酶活力显著低于阿霉素损伤组(P＜0.05).③阿霉素损伤组心肌细胞内丙二醛含量显著高于正常对照组(P＜0.01);丹参酮ⅡA低、中、高剂量组心肌细胞内丙二醛含量显著低于阿霉素损伤组(P＜0.05).④阿霉素损伤组心肌细胞超氧化物歧化酶活性显著低于正常对照组(P＜0.01);丹参酮ⅡA低、中、高剂量组心肌细胞超氧化物歧化酶活性显著高于阿霉素损伤组(P＜0.05).⑤阿霉素损伤组心肌细胞内一氧化氮含量显著高于正常对照组(P＜0.01);丹参酮ⅡA低、中、高剂量组心肌细胞内一氧化氮含量显著低于阿霉素损伤组(P＜0.05).结论 丹参酮ⅡA对阿霉素所致心肌细胞氧化损伤有保护作用,可能与丹参酮ⅡA的抗氧化作用有关.     

非电离辐射对大鼠心肌细胞的损伤及其机制

目的探讨非电离辐射对大鼠心肌细胞损伤效应及机制。方法采用9GHz950mW/cm2微波脉冲和0～100MHz6×104V/m电磁脉冲分别辐照原代培养心肌细胞72h,用原子力显微镜、激光扫描共聚焦显微镜、流式细胞仪和全自动生化检测仪等多种实验手段检测受辐照细胞的细胞膜形态、结构和功能的变化。结果微波脉冲和电磁脉冲辐照后,心肌细胞搏动减慢,形态异常,活力下降,凋亡和坏死率明显增加。细胞膜出现数量不等、大小不一的电穿孔。细胞培养液中Na+、K+、Ca2+、Cl-、Mg2+和无机磷离子浓度显著升高(P<0.01)。结论心肌细胞是电磁辐射损伤的敏感细胞,脉冲电磁场可致心肌细胞膜电穿孔,细胞形态、结构和功能均受到严重损伤。电穿孔效应是解释电磁辐射非热效应的关键机制之一。电穿孔导致的细胞膜通透性和膜结构改变存在一定发展规律。     

二甲基甲酰胺致心肌细胞氧化损伤的体外实验研究

目的 探讨二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)对小鼠心肌细胞(H9c2)的氧化损伤作用及维生素C(vitamin C,VitC)的保护效应.方法 使用不同剂量梯度DMF作用心肌细胞24 h、48 h、72 h,同时分别用含有DMF(100 mM)和0.025 mM、0.050 mM、0.100 mM、0.250 mM的VitC培养液培养心肌细胞24 h、48 h、72 h,采用试剂盒测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量以观察细胞氧化应激状态和VitC的保护效应.结果 不同浓度的DMF分别作用于心肌细胞24h、48 h和72 h后使SOD和GSH含量降低,MDA含量升高,产生了明显脂质过氧化并呈现一定的剂量-时间效应关系.保护组VitC在低浓度(0.025 mM、0.050 mM、0.100 mM)时对DMF对心肌细胞的氧化损伤具有保护作用,使SOD和GSH含量升高,MDA降低.保护组VitC在高浓度(0.250 mM)时反而加重DMF对心肌细胞的氧化损伤.结论 二甲基甲酰胺(DMF)对小鼠心肌细胞细胞(H9c2)产生了明显的氧化损伤,从而证实DMF所致的氧化应激是其引起细胞毒性的重要机制.小剂量VitC对DMF致心肌细胞的氧化损伤具有明显的保护作用.