HCMV急性间质性肺炎小鼠模型的建立

目的建立人巨细胞病毒( HCMV)急性间质性肺炎的小鼠模型。方法用5.5×105 PFU的HCMV AD169株尾静脉注射6~8周SPF级BALB/c小鼠作为实验组,同时设立正常细胞作为对照组,分别于接种后第5天和第30天处死小鼠,无菌取小鼠肺组织,通过病毒分离、PCR检测病毒特定保守基因、免疫组化、Western blot和HE染色的方法,观察检测小鼠肺组织中HCMV及其组织病理变化。结果在感染后第5天和第30天实验组小鼠的肺组织中分离出了HC-MV病毒;PCR检测到HCMV 特异性早晚期基因IE和UL55 DNA;Western blot、免疫组化检测到HCMV特异性早晚期蛋白IE和gB;HE染色证实肺组织有明显急性间质性肺炎的病理改变;对照组对应结果全为阴性。结论通过尾静脉注射HCMV AD169株病毒,在感染后第5天成功构建了HCMV急性间质性肺炎小鼠模型,该模型的建立有利于该种疾病的发病机制研究及相关抗病毒疫苗和药物的研发。     

人巨细胞病毒先天性中枢神经系统感染小鼠模型的建立

将人巨细胞病毒 (HCMV)接种至 8～ 12周龄 BAL -B/ c雌雄小鼠腹腔后合笼交配。待雌鼠临床产时剖宫取出胎鼠脑双侧大脑皮层 ,进行病毒分离、病理学检测及用地高辛标记的 HCMV寡核苷酸探针对大脑皮层细胞压印片进行原位分子杂交检测。病理学研究结果证实 ,鼠脑为侵袭性脑膜炎性病理改变 ,并在神经细胞内发现病毒特征性的大的核内嗜碱性包涵体 ;原位杂交结果显示 ,病毒核酸存在于受染神经细胞及神经胶质细胞核内及胞浆内 ;在鼠脑组织上清液中分离出HCMV。且感染组雌鼠血清特异性 Ig M抗体阳性率为73.9% ,Ig G抗体阳性率为 95 .7% ;而对…     

先天性感染人巨细胞病毒小鼠肝脏损伤模型的建立

目的:建立人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)先天性感染肝脏损伤的小鼠模型,为研究 HCMV感染性疾病及抗HCMV药物的筛选提供实验基础.方法:取健康纯系清洁级10 周龄Balb/c鼠 24只,雌雄各半,随机分为3组,每组4对.A、B两组为感染组,将6.0 logTCID50 HCMV-...     

同种异体近交系小鼠原位气管移植模型的建立

目的:建立近交系小鼠同种异体原位气管移植模型.方法:供受体体质量配对后,C57BL/6 和BALB/c小鼠随机分为2组,每组各10对,A组为C57BL/6(供体) → BALB/c(受体)组,B组BALB/c(供体) →BALB/c(受体)组,昆明种小鼠10对作为C组即KM(供体) →KM(受体)组. 利用颈前肌肉及周围组织被覆移植气管提供血供建立同种异体小鼠原位气管移植模型. 使用HE染色以及扫描电镜对同种异体小鼠原位气管移植模型进行评估,观察比较上皮积分、淋巴细胞计数以及无核软骨细胞/全部软骨细胞等指标.结果:A, B组全部存活,C组存活6只. A, C组移植气管均发生一定程度的排斥反应,B组无排斥反应发生. A, B, C三组上皮积分分别为: 1.094±0.120分,2.872±0.059分及0.995±0.444分;无核软骨细胞数/骨细胞总数比值分别为:(27.22±1.09)%, (10.60±1.01)% 及(31.40±6.43)%;淋巴细胞计数分别(20.18±1.31)个/HPF,≤5个/HPF及(22.55±4.87)个/HPF. A, B组及C,B组各项指标相比均有统计学意义,而A,C组相比则差异无统计学意义;且C组各数值离散程度均大于A组.结论:成功建立了C57BL/6(供体) → BALB/c(受体)小鼠原位气管移植模型. 近交系及封闭群模型均能反应移植气管的各种病理生理变化,但封闭群模型稳定性较近交系差.     

人巨细胞病毒原发感染BALB/c小鼠大脑皮质模型的建立

目的建立人巨细胞病毒(HCMV)原发感染BALB/c小鼠大脑皮质的模型,为进一步研究其发病机制奠定实验基础。方法分别用2×106、2×105、2×104、2×103、2×102PFU/ml的HCMV AD169株腹腔注射6~8周SPF级BALB/c小鼠雌雄各6只作为实验组,同时设立灭活病毒对照组和细胞对照组。1个月后取各组小鼠大脑皮质组织进行病毒分离与鉴定、PCR和RT-PCR分别检测各标本中HCMVUL83基因及UL54的转录、HE染色。结果2×106、2×105PFU/ml实验组的雌性小鼠病毒分离、PCR及RT-PCR均为阳性;HE染色可见海马区出现了明显的病理变化。雄性小鼠、低剂量(2×104、2×103、2×102PFU/ml)实验组、灭活病毒组和HF对照组均为阴性。结论HCMV AD169株腹腔注射6~8周龄SPF级雌性小鼠1个月可测出大脑皮质发生急性炎症反应,为HCMV所致的原发感染状态,且小鼠性别及病毒的接种量可能与感染发生存在密切关系。     

小鼠缺血后肢移植瘤模型的制作

相对于正常细胞，肿瘤细胞的生存能力更强．在缺血缺氧等较为恶劣的内环境中也能够分裂增殖．侵袭周围组织并发生远处转移。为研究肿瘤生长的这一性状，国外的学者们建立了小鼠缺血后肢移植瘤模型。通过在小鼠缺血后肢上种植肿瘤．观察移植瘤的生长，可以研究缺血缺氧环境下肿瘤的生长情况，营养来源以及外环境对肿瘤血管生成的影响。     

异基因外周血造血干细胞移植后巨细胞病毒间质性肺炎

目的：探讨异基因外周血造血干细胞移植(Allo-PBSCT)后间质性肺炎（IP）的病因,危险因素及防治方法。方法;将Allo-PBSCT患者分为更昔洛韦（GCV）预防组18例和对照组（未预防组）22例,比较两组巨细胞病毒南性肺炎（CMV－IP）的发生率。结果：对照组Allo-PBSCT患者中并发CMV－IP5例,预防组无1例发生CMV－IP。发生CMV－IP的高危因素为女性供者,合并移植物抗宿主病（GVHD）。4例治愈,1例治疗无效死亡。结论：Allo-PBSCT后CMV感染是IP的主要病因,IP的发生与GVHD严重程度及妇性供者密切相关,GCV能有效预防和治疗CMV－IP。     

皮下注射登革热病毒-2型建立Balb/c小鼠感染模型

目的：经皮下注射登革热病毒-2型(DEN-2)，建立Balb／c小鼠感染模型，观察DEN-2不同毒株感染情况。方法：用DEN-2NGC株和临床分离株(B株)以不同剂量经皮下多点注射方式感染Balb／c小鼠，通过测量初次、再次感染后小鼠的体温、血小板数量、分离血浆中病毒、间接ELISA检测特异性抗体，观察动物感染模型建立情况。结果：(1)初、再次感染后实验动物可出现弓背、耸毛、震颤、低热、血小板数量降低等登革热(DF)临床表现，从血浆中检测到抗DEN-2 IgM，IgG类抗体，并分离到病毒；(2)两株病毒感染后实验动物的血小板数量及病毒血症期及特异性抗体的变化存在一定的差异。结论：经腹部皮下多点注射DEN，模拟自然感染方式可建立BALB／C小鼠感染模型，其感染情况与感染剂量、感染毒株有关。     

经口感染弓形虫垂直传播小鼠模型的建立

目的建立经口感染弓形虫RH株速殖子垂直传播小鼠模型。方法将54只妊娠0天的BALB/c孕鼠随机分为6组,于妊娠第8天,分别用0,1000,2000,4000,8000,16000个弓形虫速殖子灌胃感染,妊娠第18天处死,记录活胎率,测定母鼠肝、胎盘和胎仔脑组织弓形虫抗原。结果经ELISA检测弓形虫循环抗原证实,孕鼠死亡率与胎盘和胚胎感染率均随感染剂量的增加而升高,而活胎率下降。1000,2000组的胎盘、胚胎未发生感染,4000组的胚胎感染率5.13%,16000组的胚胎感染率20.00%,但孕鼠的健康状况差、死亡率高,均不适宜建立弓形虫垂直传播动物模型。综合分析表明,8000组孕鼠既有较高的存活率,又可保证胎盘和胚胎较高的感染率。结论每只孕鼠灌胃感染8000个速殖子为建立弓形虫垂直传播小鼠模型的适宜剂量。     

MCMV感染对小鼠海马胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨小鼠巨细胞病毒感染对小鼠学习记忆及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法采用颅内注射制造CMV颅内感染小鼠模型,利用Morris水迷宫试验对2组动物的学习和记忆成绩进行3 d测试,记录其成绩并观察海马组织GFAP表达水平的变化。结果 Morris水迷宫测试的结果显示,病毒感染组小鼠的学习记忆成绩明显下降,海马组织中GFAP的表达较对照组增高,差异有统计学意义(P0.01)。结论巨细胞病毒感染能够导致小鼠学习记忆能力下降,海马组织GFAP的表达明显增强。     

鼠巨细胞病毒感染C57BL/6小鼠急性肝炎动物模型的建立与鉴定

目的：建立鼠巨细胞病毒（MCMV）感染C57BL/6小鼠急性肝炎模型并对其感染特点进行分析及鉴定。方法：将24 只C57BL/6小鼠随机分为阴性对照组（n =12）及病毒感染组（n =12）,病毒感染组腹腔注射1.0×106 PFU（200 μL）MCMV悬液,阴性对照组注射等体积小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）悬液。于感染后第3天和第7天取外周血分离血清检测谷丙转氨酶（ALT）及谷草转氨酶（AST）。同时进行肝组织病毒分离、组织病理学及MCMV IE和M55基因、细胞因子白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的检测。结果：病毒感染组肝组织匀浆病毒分离均为阳性,肝炎发生率为100%。在感染后第3天即发生肝炎病理改变,病毒感染组血清ALT及AST较阴性对照组明显升高（P ＜0.01）;病毒感染组肝脏HE染色第3天可见局灶性炎性细胞浸润及肝脏点灶状坏死,持续至第7天,Ishak评分较阴性对照组明显升高（P ＜0.01）;在感染后第3天病毒感染组肝组织内可检测到MCMV IE及M55基因,且在感染后第7天仍可测得IE基因;感染后第3天及第7天病毒感染组炎性细胞因子IL-6、TNF-α及IL-1β mRNA表达水平明显升高（P ＜0.05）。 结论：成功建立MCMV感染C57BL/6小鼠急性动物肝炎模型,其感染表现主要集中在急性感染前期。     

大鼠部分肝移植模型的建立

目的 建立大鼠部分肝移植模型.方法 采用雄性SD大鼠,二袖套法行全肝移植和部分肝移植,分析手术情况和术后存活情况.结果 全肝移植组和部分肝移植组2天存活率分别为88%（22/25）和68%（17/25）;1周存活率分别为80%（20/25）和52%（13/25）.结论 大鼠部分肝移植是目前研究活体肝移植和劈离式肝移植肝再生的理想模型,本研究采用改良方法成功建立了大鼠部分肝移植模型.     

适用于无异体皮覆盖的大鼠全层创面抗挛缩改良模型研究

目的 为克服大鼠创面容易挛缩和自咬现象,从复制创面的位置和缝合技巧的细节方面深入研究,为复制大鼠全层损伤创面模型提供可靠的技术方案。方法 选取24 只SD 大鼠随机分为A、B、C 组,每组8 只。A 组为传统抗挛缩创面并进行植皮;B 组为改良方法制备创面并进行植皮;C 组为空白对照,为改良方法制备创面但不植皮。术后7、14 和21 d 分析3 组创面挛缩、钢丝圈暴露、线结脱落情况及所移植皮片生长情况。结果 3 组术后7、14 和21 d 的创面收缩率有差异（P <0.05）。术后21 d 时,3 组创面收缩率有差异（P <0.05）;A 组较B 组创面收缩率高（P <0.05）,相对容易收缩;B 组与C 组的创面收缩率比较,差异无统计学意义（P >0.05）。3 组创面收缩率变化趋势有差异（P <0.05）。术后21 d,A、B、C 组钢丝圈脱出总长度分别为35、16 和13 cm。3 组术后21 d 时剩余线结数比较,差异有统计学意义（P <0.05）,A 组剩余线结数较少。术后7 d,A、B 组移植皮片成活;术后14 d,A 组移植皮片无明显生长,B 组移植皮片生长良好;术后21 d,A 组与B 组创面移植皮片覆盖面积比较,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 复制合适的大鼠创面模型与植皮修复创面的疗效关系密切,合理选择创面位置可以避免大鼠自咬创面,改良缝合方式可以使钢圈缝合更加牢固。     

制作皮肤坏死模型的一种新方法

目的介绍一种利用L-精氨酸(L-ARG)制作成年大鼠皮肤坏死模型的新方法。方法给大鼠饮水中增加L-ARG,用量为500 mg/kg·b.w.·d,时间1周左右。结果L-ARG 可使50%左右的大鼠皮肤坏死、溃疡面形成。结论一定量的L-ARG可引起成年大鼠皮肤坏死,可用于制作皮肤坏死模型。该方法简捷、成模时间短、成模率高。     

建立小鼠异位心脏移植模型

目的:建立小鼠腹腔异位心脏移植模型.方法:选用建康C57近交系小鼠和BALB/c近交系小鼠,参考大鼠心脏移植Ono式模型,并加以改良.同系移植组(n=20)供、受体均采用BALB/c小鼠;同种异品系移植组(n=20)供体为C57近交系小鼠,受体为BALB/c近交系小鼠.结果:成功建立了小鼠腹腔异位心脏移植模型,供心热缺血时间为(0.9±0.05)min,冷缺血时间为(34.8±0.7)min,手术成功率为90%.同系移植组小鼠心脏移植物获得长期存活(＞100 d);同种异品系移植组小鼠心脏移植物存活期为(7.5±0.1)d.结论:提高供心的摘取技术及受体的血管吻合技术是手术成功的关键.     

小鼠肝癌原位移植模型的建立及生物学特性

目的:探讨建立小鼠肝癌原位移植模型的可行性,并观察其生物学特性.方法:用肝癌细胞株H22接种于ICR小鼠皮下,建立异位移植模型,然后用此移植瘤组织再接种于小鼠肝内,建立肝原位移植瘤模型.结果:小鼠肝癌原位移植模型成功率为95.6%,自发转移率为81.8%;大量腹水发生率为40.9%,自发消退率为0%.模型平均自然生存期为28 d,约移植14 d后进入快速增殖期.结论:小鼠肝癌原位移植模型成功率高,有高转移、无自发消退现象,可作为研究肝癌转移机制和药物筛选的理想模型.