人巨细胞病毒先天性感染实验室诊断的研究进展

人巨细胞病毒(HCMV)是引起先天性及围生期感染的重要病原微生物之一,HCMV活动性感染的孕妇可通过胎盘或产道感染胎儿和新生儿,导致胎儿宫内发育迟缓及新生儿小头畸形、智力低下、黄疸、肝脾肿大、听力或视力丧失等多脏器、多系统不可逆性损害.由于HCMV感染缺乏特异的临床症状和体征,且大多数呈隐性感染,故确诊HCMV感染主要...     

人巨细胞病毒活动性感染的研究

报道１６２例小儿活动性人巨细胞病毒感染的临床研究，所有病例ＣＭＶ－ＩｇＭ抗体皆阳性，４８／７１例尿中找到巨细胞包涵体，先天性感染组７９全，其中全身感染３２例，年龄３周～１２周组２９例。该两组临床表现以病理性黄疸，肝脾肿大和肝损害为主，余为先天畸形和神经系统异常（１７／３１例有听通路传导障碍）先天组中新生儿窒息２０例，〉１２周龄组５４例，其中肾病，肾炎或不明原因的血尿，蛋白尿共３２例，死亡４例，借助     

人巨细胞病毒增殖性感染新生乳鼠大脑皮质神经细胞

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)AD169株在体外增殖性感染新生乳鼠大脑皮质神经细胞。方法在长成单层的Balb/c新生乳鼠的大脑皮质神经细胞培养物上,接种TCID50为5×103/3ml的HCMVAD169株感染的HF细胞上清液。通过相差显微镜、PCR、RT-PCR、间接免疫荧光、TCID50、透射电镜等方法观察和鉴定HCMV在神经细胞内的感染状况。结果接种病毒的大脑皮质神经细胞在感染后第1天即可观察到特征性细胞病变效应,且随着感染时间的延长病变逐渐加重;HCMVIE和UL83DNA及mRNA检测均可见阳性条带;HCMVpp65蛋白免疫荧光检测亦为阳性,蛋白质表达量随着培养时间的延长明显提高;TCID50检测随着感染时间的延长病毒滴度逐渐上升;在神经元胞浆内通过透射电镜观察到病毒颗粒。结论HCMVAD169株可能具有增殖性感染乳鼠大脑皮质神经细胞的能力。     

人巨细胞病毒先天性中枢神经系统感染小鼠模型的建立

将人巨细胞病毒 (HCMV)接种至 8～ 12周龄 BAL -B/ c雌雄小鼠腹腔后合笼交配。待雌鼠临床产时剖宫取出胎鼠脑双侧大脑皮层 ,进行病毒分离、病理学检测及用地高辛标记的 HCMV寡核苷酸探针对大脑皮层细胞压印片进行原位分子杂交检测。病理学研究结果证实 ,鼠脑为侵袭性脑膜炎性病理改变 ,并在神经细胞内发现病毒特征性的大的核内嗜碱性包涵体 ;原位杂交结果显示 ,病毒核酸存在于受染神经细胞及神经胶质细胞核内及胞浆内 ;在鼠脑组织上清液中分离出HCMV。且感染组雌鼠血清特异性 Ig M抗体阳性率为73.9% ,Ig G抗体阳性率为 95 .7% ;而对…     

先天性巨细胞病毒感染误诊2例报告

自1956年从组织培养中成功分离人巨细胞病毒(Cytomegalovirus，CMV)以来，世界各地已对人类CMV感染进行了广泛而全面的研究。巨细胞病毒感染，是由人巨细胞病毒(CMV)引起的人类感染性疾病。属疱疹病毒类，具有潜伏——活动的生物学特征。CMV侵入人体后长期存在，可在人体细胞内引起病变，现在知道CMV不仅能使不同年龄人     

ELISA检测脐血中巨细胞病毒IgM抗体诊断先天性巨细胞病毒感染的探讨

作者用直接和间接ELISA方法,对成都市6所医院初生婴儿582例的脐应进行了巨细胞病毒(CMV)IgM抗体检测。结果:两种方法检出CMV IgM抗体阳性者共27扮,阳性率4.6％,其中用直接ELISA检测,阳性者25份,间接ELISA阳性者为15份。前者明显优于后者(P<0.05),表明其敏感性高,特异性强。CMV IgM抗体阳性儿临床随访至5～6月龄,2例听力异常,1例眼底可疑异常。     

先天性巨细胞病毒感染脑炎l例

患儿 ,男 ,22d,主因间断抽搐1d入院。患儿系第一胎第一产 ,足月 ,顺产 ,生后无窒息史 ,出生体重3.65kg。母乳喂养至今。入院前1d ,患儿无明显诱因于夜间突然出现抽搐 ,表现为意识不清 ,双眼上吊 ,四肢抖动 ,伴哭声发直 ,面色潮红 ,持续约数秒钟 ,自行缓解 ,抽后入睡 ,清醒后精神反应差 ,间隔约2～3h抽搐1次 ,未予特殊处理 ,病情进行性加重 ,间隔时间短 ,持续时间长 ,最长达4～5min ,症状同前 ,无发热及呕吐 ,急诊来本院 ,门诊以“抽搐原因待查 ?”收入院。自发病以来 ,精神反应差 ,吃奶少 ,二便量可。无外伤及中毒史 ,既往史无可记述。母孕…     

先天性感染人巨细胞病毒小鼠肝脏损伤模型的建立

目的:建立人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)先天性感染肝脏损伤的小鼠模型,为研究 HCMV感染性疾病及抗HCMV药物的筛选提供实验基础.方法:取健康纯系清洁级10 周龄Balb/c鼠 24只,雌雄各半,随机分为3组,每组4对.A、B两组为感染组,将6.0 logTCID50 HCMV-...     

肾移植术后感染巨细胞病毒性肺炎的多因素分析

目的 探讨肾移植术后感染巨细胞病毒性(CMV)肺炎的多种高危因素,提出早期预防措施.方法 回顾2005年1月～2007年12月间曾在我院接受同种异体肾脏移植术并因发生CMV肺炎而再次入院患者28例,采用卡方检验及多元logistie回归分析方法分别对影响CMV肺炎的一些凶素进行逐步分析.结果 与CMV肺炎感染密切相关的独立因素包括:受者年龄、急性排斥反应、术前透析时间、移植肾功能延迟恢复、受者PRA水平、供体CMV血清学、麦考酚酸酯的应用;logistic回归分析认为供体CMV血清学IgG(+)、术后急性排斥反应及术前长期血透时间为高危因素.结论 肾移植术后为减少巨细胞病毒性肺炎的发生发展,抑制早期急性排斥反应非常重要,同时尽量选择血清学阴性供体,缩短肾移植术前血透时间也能减少其发病率.     

先天性巨细胞病毒感染对无症状患儿生长发育的影响

目的 探讨陕南贫困山区先天性巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对无症状患儿体格和智能发育的影响.方法 对1997年10月至2000年10月在陕南贫困山区出生的34例先天性HCMV感染无症状儿(宫内感染组)、72例妊娠期活动性感染无先天性感染儿(无宫内感染组)和106例无妊娠期活动性感染儿(正常组)进行随访,随访内容包括:新生儿期和幼儿期的体格测量、幼儿期和学前期的智能测定、学前期听力测试.结果 与正常组比较,宫内感染组和无宫内感染组新生儿出生时和幼儿期平均体质量、身长、头围,差异无显著性(P＞0.05);无论在幼儿期或学前期,宫内感染组智能发育落后的发生率明显高于正常组,尤其是言语能力明显低下(P＜0.05);与正常组相比,宫内感染组学前期纯音听阈异常的发生率显著增加(P＜0.05).结论 HCMV先天性感染对无症状儿的体格发育无明显影响,但可影响患儿远期言语能力和听力,对智能发育有明显影响.应重视HCMV宫内感染儿远期智能和听力的监测,对语言能力和听力异常的患儿应适时采取干预措施.     

巨细胞病毒糖蛋白B基因型与新生儿感染关系研究

目的：探讨感染新生儿人巨细胞病毒（HCMV）糖蛋白B（gB）基因型分布，研究不同HCMVgB基因型致病性的差异。方法：采用巢式聚合酶链反应（nested PCR），限制性片段长度多态性（RFLP）分析技术等测定88例感染患儿尿中HCMV gB基因型，并分析gB基因型与不同临床症状的关系。结果：感染新生儿HCMV4个gB基因型分布为gB1型占48％，gB2型占舻％，gB3型占18％，gB4型占7％。不同gB基因型HCMV感染的临床表现存在差异。结论：4个gB基因型HCMV均能引起新生儿感染，以gB1型为主。不同HCMVgB型感染可导致不同的临床结果。     

先天性巨细胞病毒感染婴儿脑干听觉诱发电位变化及其临床意义

目的观察先天性人巨细胞病毒感染婴儿脑干听觉诱发电位(brainstem auditory evoked potential,BAEP)的变化及其临床价值。方法收集本院2007年5月至2010年5月经病原学诊断为先天性人巨细胞病毒(human cytomegalo-virus,HCMV)感染的新生儿及婴儿296例进行BAEP测定,并对BAEP结果进行分析。结果本组先天性HCMV感染婴儿BAEP异常率为25.3%,多为周围段听路损害,新生儿期HCMV感染患儿BAEP异常率高于其他组,BAEP异常患儿性别、居住环境、年龄间差异无统计学意义(χ2=0.831、0.313、3.976,P>0.05)。结论新生儿期HCMV感染更易导致听力损害,因此,对先天性HCMV感染婴儿进行早期BAEP检测能早期评估婴儿听神经系统的感觉功能,及时发现听力损害,有利于指导早期系统干预治疗。     

Diagnostic value of human cytomegalovirus late mRNA detection in active intrauterine infection

目的：探讨人巨细胞病毒晚期mRNA检测在宫内活动性感染中的应用价值。方法：采用逆转录-PCR法对42例HCMV-IgM阳性孕妇外周血及部分胎儿附属物进行HCMV晚期mRNA检测。结果：42例IgM阳性孕妇检出晚期mRNA23例,两符合率为54.7％。对其中13例mRNA阳性孕妇胎儿附属物进行检测发现7例阳性,母婴传播率为53.8％;而12例mRNA阴性HCMV-DNA阳性孕妇胎儿附属物中仅1例阳性,母婴传播率为8.3％;两有非常显性差异。结论：HCMV-IgM的阳性结果并不能完全准确地反映受检时HCMV的活动状态。HCMV的活动状态与母婴传播率密切相关,mRNA的检测不仅能够正确反映HCMV活动性感染时的宫内传播率,而且可以了解受检时胚胎或胎儿组织内HCMV的活动状态,并估计其愈后。     

人巨细胞病毒UL145基因在先天感染患儿临床株中的多态性研究

目的：研究人巨细胞病毒（HCMV）UL145序列在先天感染患儿临床株中的基因多态性，探讨HCMV基因多态性与先天感染引起的不同临床症状之间的关系。方法：对16株临床低传代分离株和15株未传代临床株的HCMV临床标本分别进行UL145全序列PCR扩增，对PCR扩增阳性的31例标本进行序列测定及分析，并且与9株已在GenBank递交的HCMVUL145序列进行比较分析。结果：序列分析结果表明31株HCMV临床株的UL145基因是高度保守的。所有临床株的HCMVUL145开放阅读框架均为393bp，编码蛋白含有130个氨基酸。所有临床株的核苷酸同源率为95．9％～100％，编码蛋白的同源率为97．7％～100％。临床症状不同的患儿其HCMVUL145基因及其编码蛋白具有相似的结构。所有先天感染患儿临床株的UL145编码蛋白具有蛋白激酶C（PKC）磷酸化功能位点和酪蛋白激酶（CK2）磷酸化功能位点。结论：HCMVUL145基因在临床株中是高度保守，未发现其与HCMV先天感染不同临床症状间存在明显的关系。HCMV UL145基因的高度保守性在先天感染中具有重要作用。     

先天性巨细胞病毒感染患儿的听力筛查

目的:探讨先天性巨细胞病毒(CMV)感染对婴幼儿听力的影响.方法:应用耳声发射(DPOAE)、听觉脑干诱发电位(ABR), 对38例先天性CMV感染儿(感染组)及16例非感染儿(对照组),于新生儿期进行听力筛查及评估.结果:感染组38例66耳(86.8%)通过首次筛查,6个月内复查58耳(76.3 %)通过;6个月以后随访52耳(68.4%)通过.对照组16例31耳(96.9%)通过.感染组38例76 耳,极重度听力损失13耳(17.1%),重度听力损失5耳(6.6%),中重度听力损失6耳(7 .9%).感染组婴幼儿ABRⅤ波反应阈值明显高于对照组(P<0.005).在随访中感染组听力损失,新生儿期3例(7.9%),3～4个月9例(23.7%),6个月以后3例(7.9%). 结论:先天性CMV感染可引起速发性与迟发性听力损失.采用检测先天性CMV 感染与新生儿听力筛查相结合的方法进行听力筛查及评估,可早期发现听力异常.     

器官移植病人HHV-6和HCMV感染的追踪研究

用病毒分离、ＰＣＲ和血清学方法追踪研究３１例器官移植病人ＨＣＭＶ和ＨＨＶ６感染情况及其对移植的影响。结果显示：ＨＣＭＶ和ＨＨＶ６分离率分别为３５５％和４５２％。术后ＤＮＡ阳性率分别为２５８％和３２３％;术前相应的ＩｇＭ阳性率分别为０％和３２％,术后ＩｇＭ阳性率分别为１９４％和２５８％;术前ＤＮＡ阳性率分别为３５０％和４５２％。术后ＤＮＡ阳性率分别高达４５２％和６１３％,并在３个月内维持高水平。早期死亡病例１００％有ＨＣＭＶ和／或ＨＨＶ６感染。活动性ＨＨＶ６和ＨＣＭＶ感染率分别为３２３％和２５８％,多为复发性,术后２周出现,３～４周达高峰,３月内均可发生。提示术后ＨＨＶ６和／或ＨＣＭＶ感染是移植成败的关键之一     

秦巴山区HCMV感染母婴垂直传播与HCMV gB基因分型的关系

目的:了解陕西秦巴山区母婴人巨细胞病毒(HCMV)感染流行株的gB基因型分布,探讨HCMV gB基因型与宫内HCMV感染结局的关系. 方法: 采用巢式PCR方法检测214对孕妇血清和新生儿脐血血清中的HCMV gB基因,利用限制性核酸内切酶Rsa I和Hinf I分别对HCMV gB基因进行限制性片段长度多态性分析(RFLP). 结果: ①214例孕妇血清中HCMV-DNA阳性13例,阳性率为6.1%. 新生儿脐血血清中HCMV-DNA阳性5例,阳性率为2.3%. 在13例HCMV-DNA阳性孕妇中,其配对脐血阳性4例,HCMV宫内传播率为30.8%. ②13例HCM VgB DNA阳性标本均为gB2型,3例症状性HCMV感染婴儿与2例无症状性感染婴儿均具有相同的基因型. ③HCMV感染孕妇早产、胎儿生长受限、低出生体质量儿(＜2500 g)及病理性黄疸的发生率均高于非感染孕妇(P＜0.05),而新生儿窒息两组间无明显差异. 结论: 陕西秦巴山区母婴HCMV流行株以gB2型为主. gB2基因型可引起母婴传播.     

更昔洛韦治疗先天性巨细胞病毒感染疗效观察

目的: 观察更昔洛韦治疗先天性巨细胞病毒感染的临床疗效。方法: 将先天性巨细胞病毒感染患儿随机分为病毒唑治疗组(26例)及更昔洛韦治疗组(27例),对两组患儿的临床表现及治疗效果进行观察。结果: 病毒唑治疗组和更昔洛韦治疗组疗程结束后,在临床表现、实验室检查及病毒学结果转归方面进行比较,差异均有显著性(P<0。05)。结论: 更昔洛韦对先天性巨细胞病毒感染有显著疗效,且副作用小,值得临床推广。     

HCMV感染小鼠脑组织的蛋白质组学研究

目的建立人类巨细胞病毒(HCMV)感染小鼠脑组织前后的比较蛋白质组学双向电泳技术研究体系。方法昆明系小鼠40只,随机分为两组:实验对照组(20只)和病毒感染组(20只),在接种HCMVAD169株30d后,取小鼠脑组织,研磨、超声裂解、抽提蛋白,采用双向凝胶电泳分离,进行染色,Image Master 2D Platinum软件分析、识别差异表达蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应肽质量指纹图谱,搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点,并对其中部分蛋白质的表达进行免疫印迹的验证。结果从双向电泳图谱上获得蛋白质斑点:实验对照组(1096±82)个,感染HCMV组(1210±101)个,发现显著差异点36个,对其中6个点进行了筛选鉴定;免疫印迹实验结果也较为吻合。结论利用蛋白质组学技术,检测正常小鼠脑组织及HCMV感染的小鼠脑组织的差异蛋白质,为疾病的早期诊断、致病机制及有效药物靶点的发现提供实验和理论依据。