医疗机构ELISA法测定尿液HIV-1抗体的优势及存在问题的研究

目的 以尿液为标本,采用酶联免疫吸咐试验(ELISA)测定尿液中HIV-1抗体,并与血清为标本的ELISA检测结果进行比较,探讨使用尿液作为标本测定HIV-1抗体的优势及实际操作中存在的问题与不足,为临床更好应用提供借鉴.方法 平行采集受检者的尿液和血液各9108份,用ELISA方法同时测定HIV-1抗体;单采尿液5021份,用ELISA方法测定HIV-1抗体.阳性标本血清送确认实验室用蛋白印迹试验(WB)进行确认.结果 检测的9108份标本中,尿液检测5份阳性,血清检测5份阳性,检测符合率为100%,阳性标本血清WB法确认5份均为阳性,检测准确度为100%;单采尿液为标本的5021例中,初检出阳性3例,2份血清送确认实验室WB方法确认均为阳性(其中1例因受检者不配合而未采集血样).结论 以尿液为标本检ELISA方法测HIV-1抗体灵敏度和特异性均不低于以血为标本的ELISA方法,结果可靠,可作为常规的筛查方法,但在实际操作中还存在一些较为现实的问题,要在医疗机构推广使用,还需要法制的进一步健全、以及整个检测系统的配套规范.     

宁夏首例HIV-1/2型混合感染者的实验室诊断

目的 对筛查HIV呈阳性的标本进行实验室最终确认。方法 采用两种酶联免疫试剂对标本进行HIV抗体检测,结果 呈阳性的标本,再使用免疫印迹试剂对HIV抗体进行最终确认。结果标本筛查和复检试验均呈阳性,使用免疫印迹试剂分别检测到9条HIV-1型特异性抗体条带和6条HIV-2型特异性抗体条带。结论 此份标本为HIV-1型阳性和HIV-2型血清学阳性,在宁夏首次发现HIV-1／2型混合感染者。     

广州市荔湾区HIV抗体筛查阳性与免疫印迹试验结果比较

目的通过对HIV抗体试验初筛(ELISA)阳性与免疫印迹试验(WB)结果进行对比分析,探求HIV抗体筛查阳性与确证实验结果的关系。方法对98份ELISA方法检测为阳性的样本与其WB法确证结果进行比较,分析ELI-SA检测S/CO值变化与WB结果的关系。结果 HIV抗体筛查阳性标本经免疫印迹确证试验,阳性的有91例,均为HIV-1抗体阳性,阴性3例,结果不确定的4例。ELISA与WB的阳性符合率为92.86%。确认为阳性标本的S/CO平均值为14.01;不确定标本S/CO值的平均为6.65;阴性标本S/CO值的平均为5.17。在阳性标本中,gp160、gp120出现率最高为100%,p24为98.90%,而p55,p17出现率较低,分别为58.24%及69.23%,其余条带出现率均达到90%以上;不确定标本中,gp160、gp120、p24条带出现的几率最高,均为100%,p17出现率为25%。结论 HIV初筛试验存在假阳性结果,HIV抗体结果的报告必须以确认结果为准。高S/CO值预示HIV抗体阳性的可能性较大。WB确认方法检测不确定标本有一定的缺陷。     

合川片区2011－2014年 HIV 初筛阳性确认结果分析

目的：掌握合川片区艾滋病病毒（HIV）抗体检测，确认实验阳性结果的准确性，以便提高检测质量。方法：按《全国艾滋病检测技术规范》要求进行操作。酶联免疫吸附实验（ELISA）筛查 HIV 抗体和蛋白免疫印迹试验（WB）确认结果的一致性。结果：2011－2014年共采集1918人份疑似艾滋病血清标本，经采用两种 ELISA 筛查试剂阳性或一阴一阳的标本经 WB 确认，阳性1803人份，阳性率为94．0％（1803／1918），不确定为61人份．占被检测标本的3．18％（61／1918），阴性69人份，占被检测标本的3．6％（69／1918）。结论：艾滋病初筛实验结果不完全代表检测样本真实性，必须以确认检测实验报告为准。     

化学发光四代试剂结合病毒载量检测在HIV-1感染急性期诊断中的应用分析

目的分析化学发光四代HIV筛查试剂结合病毒载量检测在HIV感染诊断中的重要作用,补充确证实验的不足。方法对化学发光四代试剂筛查阳性,WB确证为HIV-1抗体不确定、阴性的20份标本进行病毒载量实验,并对其持续跟踪了解感染状况。结果 20份化学发光四代试剂筛查阳性的标本,确证结果为3份阴性和17份不确定,病毒载量结果最低1.9E5 cps/ml,病毒载量最高1.8E7 cps/ml,经2～4周随访后,WB确证均为HIV-1抗体阳性。结论四代试剂结合病毒载量检测可及早发现急性期高病毒血症的感染者,为控制HIV的传播提供科学的实验室依据。     

医院患者HIV抗体筛查阳性与免疫印迹试验结果对比分析

目的对比分析HIV抗体筛查试验与免疫印迹试验结果,探讨抗体筛查阳性结果与确证结果之间的关系。方法参照《全国艾滋病检测技术规范》要求,对HIV抗体初筛阳性标本采用免疫印迹试验进行确证。结果 287份筛查阳性标本经WB确证后,251例为HIV-1型抗体阳性(87.46%),16例不确定(5.57%),20例阴性(6.97%)。ELISA、胶体硒法与WB试验的阳性符合率分别为89.96%和90.29%。WB试验阳性、不确定和阴性标本的EIISA平均S/CO值分别为16.93、6.996和5.568。S/CO值大于或等于1而小于6,与确证试验阳性符合率为18.75%;大于或等于6而小于10,阳性符合率为69.23%;S/CO值大于或等于10,阳性符合率为97.05%。确证为HIV-1型抗体阳性的标本,gp160、gp120、gp41、p66、p51、p24出现频率都在95%以上。结论筛查试验存在一定假阳性结果,随着S/CO值的增高,与确证试验的阳性符合率也升高,但是高S/CO值样品并不代表感染HIV,HIV抗体结果报告必须以WB结果为准。WB确证方法在不确定标本中存在一定缺陷。     

焦作市在献血人群中应用ELISA检测尿液标本中HIV-1抗体结果分析

目的检验尿液标本检测人类免疫缺陷病毒(HIV)HIV-1抗体的可信度。方法对焦作市所属2县1区的400名献血人员分别采集尿液标本,应用ELISA方法采用尿液初筛试剂检测尿液标本中的HIV—1抗体。结果400份尿液标本中2份为HIV-1抗体阳性,阳性率为0.050％。结论 采用尿液进行HIV一1抗体检测,方便可行,值得在大范围推广。     

包头市2008年～2011年无偿献血者HIV感染情况分析

目的：了解包头地区近年来无偿献血者的HIV感染情况,为从低危人群采集血液,提高血液检测能力提供依据。方法：用两家不同厂家ELISA试剂进行筛查,对初筛阳性的标本送疾控中心HIV确认实验室做WB确认试验,对HIV确认阳性的人员进行分析,判断我市HIV感染状况和流行趋势。结果：2008～2011年包头市无偿献血人群中HIV感染呈上升趋势,男性大于女性,18～30岁的人群感染比率较高,感染途径以异性接触为主,男男同性恋者和吸毒者次之。结论：为了最大限度地保证血液的质量和安全,除了加强实验室管理,提高HIV检测水平,对献血者加强艾滋病知识的宣传教育也非常重要。     

血站HIV核酸检测反应性作为HIV补充试验的可行性验证

目的 探讨血站血液筛查工作中,HIV核酸检测(HIV nucleic acid test,HIV NAT)反应性是否可代替免疫印迹法(western blotting,WB)抗体确证试验作为HIV酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)筛查方法的确证依据.方法 选取2010年11月至2012年12月北京市红十字血液中心无偿献血者HIV ELISA筛查不合格的标本641份,比较其HIV NAT结果与疾病预防控制中心(Center for Disease Control and Prevention,CDC)判定的WB结果,并对HIV NAT反应性但WB不确定或阴性的献血者分析其CDC随访的WB检测结果.结果 641份标本中,219份(34.2％)HIV NAT结果为反应性,其中WB确证结果为阳性206份,WB不确定13份,WB阴性0份.对13份ELISA不合格HIV NAT反应性WB结果不确定的标本经北京市CDC随访成功7份,WB均转为阳性;其余6份HIV NAT和WB条带结果支持HIV早期感染,且依据2019版《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》判定为WB阳性.因此219份HIV NAT反应性的HIV ELISA筛查不合格献血者均为HIV感染者.结论 对采用HIV ELISA双试剂和HIV核酸并行检测程序的采供血机构,对于HIV NAT反应性的HIV ELISA筛查不合格的献血者,可考虑直接上报为HIV确证阳性;对于HIV NAT非反应性的HIV ELISA筛查不合格的标本则送CDC参照临床诊断检测策略进行确证,可助于缩短HIV阳性献血者的确证时间.     

晋中市2009年-2013年无偿献血者HIV感染状况分析

目的：分析近5年来晋中市无偿献血者人类免疫缺陷病毒（HIV）确认阳性者感染状况,探讨新形势下血液安全对策。方法对晋中市2009年—2013年111674名无偿献血者用两家不同厂家的ELISA试剂进行筛查,对HIV初筛阳性的标本送疾控中心HIV确认实验室做WB确认试验,并对HIV确认阳性献血者进行流行病学调查与分析统计,结果111674名无偿献血者中HIV初筛有反应性156例,WB法确认阳性19例,男性大于女性,18岁~30岁的人群感染比例较高,感染途径以性接触为主,男男同性恋者和吸毒者次之。结论晋中市无偿献血者2010年来确证HIV感染率有增长趋势,HIV感染人群呈现多元化趋势,表明HIV已由高危人群向一般人群扩散,影响了血液安全。建议血站加大对献血人群体检征询工作力度,稳定固定无偿献血者队伍,及时调整工作方法、检测方法,确保血液安全。     

自助采样传递检测HIV抗体模式应用研究

目的 探索新的艾滋病病毒（human immunodeficiency virus,HIV）抗体检测模式,为提高检测主动性、更大范围促进HIV抗体传递检测提供可推广的经验。方法 以专用尿液采集管、干血斑滤纸片作为传递载体,分别采集尿液和干血斑,依靠物流或志愿者传送采集样本到专业实验室。分别针对尿液HIV-1/2抗体和干血斑HIV-1/2抗体的诊断试剂盒（酶联免疫法）检测,检测结果上传至网站,求询者通过序列码在移动终端查询结果和咨询。结果 暗娼人群中回收干血斑和尿液各293人份,回收率97.67%,干血斑、尿液检测结果与确证结果的一致率分别为98.98%（290/293）和98.29%（289/293）;男男性行为人群（men have sex with men,MSM）中回收检测包1 595人份,回收率63.8%,干血斑传递检测HIV结果与快速自检结果的一致率为99.81%（1 586/1 589）;大学生人群中回收尿液样本180份,阳性检出率为4.4%。通过分析网络查询结果记录,男男性行为人群平均查询次数为1.2次,最高查询次数为26次;大学生平均查询次数为3.5次,最高查询次数为46次。结论 尿液和干血斑采集可以作为HIV抗体检测的样本,并且传递检测可作为一种新模式推广应用。     

限制性抗原亲和力酶免法用于MSM哨点HIV-1新发感染检测研究

目的获得新一代人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）新发感染检测方法-限制性抗原亲和力酶免法（LAg—avidityEIA,简称LAg）在现场男男性行为者（MSM）哨点人群中新发感染检测应用结果和与现有BED捕获酶免法（BEDCEIA,简称BED）比较的结果。方法用LAg检测2011年14个省（市、自治区）MSM哨点样本,McNermar方法检验LAg与BED新发感染判定结果的一致性,根据发病率公式计算LAg的HIV-1发病率,与已有的BED的HIV-t发病率比较。结果795份纳入新发感染检测的样本,LAg判定新发感染261人（32．83％,261／795）,BED判定新发感染323人（40．63％,323／795）。两种方法判定结果一致率87．17％,Kappa值为0．72,McNermar检验两种方法判定结果一致性差异有统计学意义（P〈0．01）。校正后LAg检测HIV-1发病率为3．94％（95％CI：3．32％～4．56％）、BED检测HIV-1发病率为3．49％（95％CI：2．99％～3．99Voo）;不用FRR校正,LAg和BED获得的HIV-1发病率分别为：4．08％（95％CI：3．52％～4．63％）和3．91％（95％CI：3．38％～4．43％）,两种方法计算的校正和未校正HIV-1发病率差异无统计学意义,未校正的HIV-1发病率均高于校正的HIV-1发病率,但LAg校正前后HIV-1发病率变化小于BED。结论对于MSM哨点样本,LAg判定新发感染比例低于BED,用国际公布LAg的校正系数计算我国MSM哨点人群HIV-1发病率与我国人群BED校正系数计算我国MSM哨点人群HIV-1发病率结果基本一致。     

应用BED-CEIA方法估算河南省2009年多类高危人群HIV-1新近感染率

目的了解河南省2009年三类哨点（男男性行为者、吸毒和性病门诊男性就诊者）和单阳配偶人群的艾滋病病毒（HIV）新近感染情况。方法收集2009年河南省男男性行为者、吸毒和性病门诊男性就诊者及单阳配偶人群各534、1 757、4 767及11 468例,通过酶联免疫和蛋白印迹实验检测出HIV-1感染的样品,再应用BED HIV-1发病捕获酶免疫测定法（BED HIV-1 capture enzyme immunoassay,简称BED-CEIA）检测出其中的新近感染样品,进而估算新近感染率。结果河南省2009年男男性行为者、吸毒和性病门诊男性就诊者哨点的新发感染率分别为4.50%、0.46%和0.13%。单阳配偶人群的新近感染率为0.39%。结论河南省2009年男男性行为人群新发感染率较高,同时不同地区单阳配偶人群的新近感染率有较大差别。     

HIV-1母婴传播早期诊断检测方法应用

目的应用核酸扩增技术对母婴传播婴幼儿人类免疫缺陷病毒(HIV)感染进行早期诊断,为临床应用提供依据。方法对2009-2010年HIV阳性孕产妇活产的34例3~14个月龄婴幼儿收集足底干血斑样本进行HIV-1 DNA检测。随访18个月后进行血清HIV抗体检测比较。结果 34例婴幼儿中,检出HIV-1 DNA 9例,检出率26.5%。9例HIV-1 DNA阳性患儿均未使用过抗病毒治疗。18个月后随访,34例婴幼儿除1例失访,2例检出HIV-1 DNA婴儿已死亡(根据临床有机会性感染体征诊断为AIDS),7例检出HIV-1 DNA婴儿血清抗体阳性外,其他24例未检出HIV-1 DNA的婴儿其血清抗体为阴性。两种方法检测结果比较符合率为100.0%。结论核酸检测是有效的早期诊断方法,早期诊断有利于后续开展母婴阻断工作。     

酶联免疫吸附试验(ELISA)测定风疹病毒抗体的探讨

本文介绍ELISA测定风疹病毒抗体的方法。用ELISA和HAI两种方法同时测定300份脐血。HAI效价≥1:8的274份阳性脐血中265份ELISA也是阳性。总的不符合率仅4.3％。比较来看,ELISA是一种简便、敏感和有效地检测风疹病毒抗体的方法。     

两种方法检测丙型肝炎病毒抗体的一致性比较

目的 用Kappa检验分析两种方法检测丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)抗体的一致性,为安全输血提供最佳的HCV抗体筛查方法.方法 选取2015年2月至2016年6月在我院就治而有可能需输血患者的丙型肝炎病毒抗体待检标本,用胶体金法HCV抗体检测试剂盒检测,将可疑结果和阳性结果标本再用酶联免疫吸附试验HCV抗体诊断试剂盒(ELISA)和化学发学测定法HCV抗体检测试剂盒CLIA)分别进行复检.用SPSS17.0软件分别对可疑和阳性结果、可疑结果、阳性结果进行Kappa分析一致性程度,并用U检验对Kappa系数进行统计分析.结果 胶体金法HCV抗体检测试剂盒检测全部标本共448例可疑阳性和阳性结果,其中112例为可疑结果,336例为阳性结果;用ELISA方法检测448例初检为可疑和阳性结果,结果为阴性、可疑和阳性的例数分别是54例(12%)、18例(4%)、376例(84%),用CLIA方法检测结果分别为42例(9.4%)、11例(2.5%)、395例(88.1%);用ELISA方法检测112例初检为可疑阳性结果,结果为阴性、可疑和阳性的例数分别是11例(9.8%)、30例(26.8%)、71例(63.4%),用CLIA方法检测结果分别为13例(11.6%)、21例(18.7%)、78例(69.7%);用ELISA方法检测336例初检为阳性结果,结果为阴性、可疑和阳性的例数分别是12例(3.6%)、28例(8.3%)、296例(88.1%),用CLIA方法检测结果分别为11例(3.3%)、19例(5.6%)、306例(91.1%).两种方法对可疑和阳性标本、可疑标本、阳性标本的Kappa系数分别为Kappa=0.730(u=16.22,P<0.01)、Kappa=0.497(u=6.81,P<0.05)、Kappa=0.705(u=11.56,P<0.01).结论 两种方法对可疑和阳性标本、阳性标本的检测结果有较好的一致性,而对可疑标本的检测结果一致性为中等,对可疑阳性结果应用更为敏感和特异的试验验证.     

昆明市2018年～2020年新发现HIV-1感染男男性行为人群新近感染分析

  目的  了解2018年～2020年昆明市通过社会组织新报告的HIV-1感染男男性行为人群（men who have sex with men,MSM）的新近感染情况和影响因素,为该人群的艾滋病防治提供参考。  方法  对昆明市2018年1月至 2020年12月经抗体筛查和确证检测后的MSM阳性样本采用HIV-1限制性抗原亲和力酶联免疫方法（HIV-1 LAg-Avidity enzyme immunoassay,LAg-Avidity EIA）结合CD4+T淋巴细胞计数判断新近感染,采用Logistic回归分析新近感染影响因素。  结果  共收集389份阳性样本,2018年1月至2020年12月HIV-1新近感染者比例分别为48.1%（90/187）、51.6%（49/95）、30.8%（33/107）,2018年1月和2019年12月的新近感染比例,差异无统计学意义（P > 0.05）,2020年的新近感染比例低于2018年和2019年（P < 0.05）。多因素Logistic回归分析显示职业为学生（P = 0.017,OR = 2.989,95%CI:1.221～7.318））检测出新近感染的比例高。  结论  昆明市MSM人群HIV-1新近感染的比例出现下降趋势,在部分人群中新近感染的比例较高,需要有针对性地采取措施,加强新近感染的监测,通过社会组织加强干预服务的可及性,进一步促进检测。     

幽门螺杆菌cagA基因片段原核表达载体的构建及其cagA基因和CagA蛋白及感染者血清抗体的检测

目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)cagA基因片段的原核表达系统,建立ELISA检测CagA及其抗体,了解表达CagA的Hp菌株(CagA Hp)感染与所致疾病种类的关系.方法:从快速尿素酶试验阳性的156例患者胃黏膜活检标本中分离Hp.采用PCR检测109株Hp cagA基因,并从临床菌株Y06中扩增2 148 bp的cagA基因片段(cagA1).构建cagA1原核表达系统,用SDS-PAGE检查目的重组蛋白(rCagA1)的表达情况,用Western blot和免疫双扩散试验鉴定rCagA1的免疫反应性和抗原性.建立ELISA,检测109株Hp CagA表达和相应患者血清中CagA抗体.分析CagA Hp感染与胃炎和消化性溃疡的关系.结果:80.8%胃黏膜活检标本中分离出Hp(126/156),97.2%的Hp菌株(106/109)cagA基因阳性.与文献报道比较,所克隆的cagA1片段核苷酸和氨基酸序列同源性分别为94.83%和93.30%.所构建的原核表达系统表达的rCagA1量约为细菌总蛋白的30.0%.rCagA1能与Hp全菌抗体发生结合反应,免疫家兔产生双扩散效价为1∶4的抗体.92.6%菌株(101/109)可表达CagA,88.1% 患者(96/109)血清CagA抗体阳性.消化性溃疡标本中CagA Hp菌株分离阳性率(97.9%)高于胃炎标本(88.5%),但无统计学差异(χ2=3.48,P>0.05).结论:本实验构建的原核表达系统表达的rCagA1有良好的免疫反应性和抗原性,建立的ELISA可用于Hp CagA及其抗体的检测,分离的Hp菌株cagA基因携带率和CagA表达率均很高.消化性溃疡和胃炎与其感染的Hp是否表达CagA无明显关系.     

2008~2009年江苏省3城市男男性行为人群HIV-1新发感染率调查

目的:了解江苏省男男性行为人群(men who have sex with men,MSM)HIV的感染状况,估算HIV在该人群中的新发感染率?方法:对2008~2009年南京?扬州?苏州3城市MSM 3轮调查的3 152份样本,进行HIV-1初筛?复检及确证试验,检出的HIV-1阳性样本,再应用BED HIV-1 IgG捕获酶免疫法(BED-CEIA)检出其中的新发感染样本,进而估算该人群的HIV-1新发感染率?结果:3 152份样本共检出HIV-1阳性样本175份,其中92份被判定为新发感染,南京市3轮调查的HIV-1新发感染率分别为7.05%?5.18%?3.71%,扬州市分别为6.99%?2.39%?12.27%,苏州市分别为6.73%?3.31%?9.84%?结论:HIV-1在江苏省MSM人群中的流行仍处于较高水平,且新发感染状况不容乐观,必须加大防控力度?