星形细胞瘤中肿瘤抑制基因p53的表达及PCNA、GFAP、Vimentin、S-100的研究

目的检测30例不同病理级别星形细胞瘤标本中p53基因的表达状垠及肿瘤其它生物学特性。方法采用常规HE染色及免疫组化技术检测30例标本中p53、增殖细胞核抗原（PCNA）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、波形蛋白（VIM）、S－100蛋白的表达。结果p53免疫组化染色阳性率随病理级别增高而增高，Ⅳ级染色阳性率83．3％，Ⅰ～Ⅱ级15．4％，且不同级别染色有差异，PCNA均呈阳性，Ⅳ级病理染色阳性强度大于Ⅰ级。GFAP、S-100随病理级别升高而阳性率降低，VIM却随病理级别升高而升高。结论检测p53突变产物，可判定星形细胞瘤恶性程度与预后，p53基因在星形细胞瘤发展、演化中有重要作用。PCNA可反映星形细胞瘤增殖活性及恶性程度。GFAP、VIM、S－100的测定也可了解其分化程度，三者结合可增加判断的准确性。     

脑胶质瘤P^53蛋白表达的初步研究

作者随机选取２２例星形细胞瘤的新鲜标本作冰冻切片，然后采用抗Ｐ＾５３单克隆抗体ｐＡｂ２４０，按ＡＢＣ法作免疫组化检测。结果发现星形细胞瘤Ｉ级Ｐ＾５３蛋白表达阳性率为０，Ⅱ级阳性率为２５％，Ⅲ－Ⅳ级阳性率为５０％，三组间的阳性率有极显著差异。本文还讨论了Ｐ＾５３基因的生物学特性及其与临床的关系。     

p53,CerbB—2和PCNA在脑胶质瘤中表达的意义及其 …

目的 研究７６例脑质瘤的ｐ５３ＣｅｒｂＢ－２和ＰＣＮＡ表达意义及其相关性。方法 应用ＳＰ微波免疫组化技术和统计学分析。结果 （１）在７６例脑胶质瘤组织中；ｐ５３，ＣｅｒｂＢ－２和ＰＣＮＡ的阳性表达率分别是４４．７４％（３４／７６），３４．２１％（２６／７６）和８０．２６％（６１／７６）。（２）ｐ５３的表达强度与胶质瘤的组织学类型和恶性程度呈显著正相关（Ｐ〈０．０１）。（３）ｐ５３ＣｅｒｂＢ－２和Ｐ     

P16基因改变与脑胶质瘤生物学特性相关性的研究

目的 研究Ｐ１６基因改变与脑胶质瘤恶性程度分级及肿瘤细胞增殖活性之间的关系。方法 检测４１例不同级别脑胶质瘤标本和７例正常脑组织Ｐ１６基因改变和ＰＣＮＡ蛋白表达情况。结果 实验组Ｐ１６基因缺失和突变２２例（５４％），ｍＲＮＡ和蛋白表达缺失分别为２３例（５６％）和２７例（６６％），三者改变非一对一关系。Ｐ１６基因改变和ＰＣＮＡ指数随脑胶质瘤恶性程度级别增高呈上升趋势（Ｐ〈０．０５）。Ｐ１６基因改变与     

儿童恶性脑胶质瘤P53与细胞增殖核抗原表达的预后价值

目的探讨Ｐ５３与细胞增殖核抗原（ＰＣＮＡ）在儿童恶性脑胶质瘤表达的预后价值。方法采用ＡＢＣ免疫组化方法对３３例儿童恶性脑胶质瘤Ｐ５３与ＰＣＮＡ表达进行回顾性研究。结果３３例儿童恶性脑胶质瘤中Ｐ５３表达阳性１５例（４５％），ＰＣＮＡ表达阳性２９例（８８％）。间变性星形细胞瘤、胶质母细胞瘤及髓母细胞瘤Ｐ５３蛋白表达的阳性比例分别为５／１２、９／１６、１／５，肿瘤Ｐ５３蛋白阴性者其细胞增殖活性均较阴性者高（Ｐ＜００５）；ＰＣＮＡ标记指数与肿瘤的恶性程度呈正相关（Ｐｅａｒｓｏｎ列联系数＝０．５６，Ｐ＜００１）。Ｐ５３或ＰＣＮＡ表达阳性者存活率分别显著低于Ｐ５３或ＰＣＮＡ表达阴性者（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１）。结论Ｐ５３基因突变以及由此导致的细胞异常增殖与儿童恶性脑胶质瘤的发生和发展有关；ＰＣＮＡ能较好地反映胶质瘤的恶性程度，其表达检测对临床预后判定有重要参考价值。     

脑星形细胞瘤增殖活性的研究：FCM分析和PCNA表达的研究

目的探讨星形细胞瘤的增殖活性,及星形细胞瘤的ＤＮＡ倍体特性、细胞周期分布和增殖细胞核抗原标记指数（ＰＣＮＡ－ＬＩ）与病理分级的关系。方法应用流式细胞术（ＦＣＭ）和ＰＣＮＡ免疫染色对５０例星形细胞瘤新鲜组织标本进行ＦＣＭ检测以及ＰＣＮＡ阳性表达的研究。结果（１）ＦＣＭ测定结果示Ⅰ～Ⅳ级星形细胞瘤的异倍体率分别为９．１％、１２．５％、３０．８％和８０％。Ⅰ～Ⅳ级星形细胞瘤的ｓ期比例（ＳＰＦ）分别为１４．１２±４．８９％、１５．９１±１６．６４％、２５．１８±１４．８０％、４１．９２±１７．８４％。（２）正常对照组均未见ＰＣＮＡ阳性表达;Ⅰ～Ⅳ级星形细胞瘤的ＰＣＮＡ－ＬＩ分别为２８．６４±１３．７５％、４５．７５±２２．１４％、６４．３８±１９．１７％和８３．７±６．９９％。结论（１）ＦＣＭ直接评估星形细胞瘤的增殖活性,异倍体和ＳＰＦ有助于病理分级。（２）ＰＣＮＡ－ＬＩ可作为评估增殖活性的良好指标,尤其在Ⅰ级与Ⅱ级判别困难时,ＰＣＮＡ－ＬＩ具有重要价值。     

增殖细胞核抗原在星形细胞瘤中表达的研究

对３３例星形细胞瘤标本进行增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）抗体免疫组化标记。结果表明：ＰＣＮＡ阳性细胞数随肿瘤的恶性度增高而升高，各级星形细胞瘤的ＰＣＮＡ阳性细胞数除Ⅰ级与Ⅱ级之间无显著差异外（Ｐ＞０．０５），其余各级间都有非常显著的差异（Ｐ＜０．０１），而且Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级间有非常显著的差异。提示星形细胞瘤ＰＣＮＡ阳性细胞数与肿瘤的分级有密切的关系，ＰＣＮＡ表达水平能较客观地反映肿瘤的恶性程度，可作为临床评价星形细胞瘤生物学行为及病人预后的参考指标。     

星形细胞瘤恶性进展过程中 PCNA表达的研究

目的 研究增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在星形细胞瘤中的表达与肿瘤病理分级的关系,讨论ＰＣＮＡ在星形细胞瘤预后判断上的价值。方法 ＳＰ免疫组化方法对１０１例星形细胞瘤的ＰＣＮＡ表达进行观察,并着重对同一标本含有多个不同病理分级区的２２例肿瘤的ＰＣＮＡ阳性细胞百分率进行分析。结果 随着病理级别的升高,ＰＣＮＡ阳性细胞百分率升高,同一病例的不同病病分级区的ＰＣＮＡ的表达也呈同样的规律。结论 ＰＣＮＡ较准确     

脑星形胶质细胞瘤组织P21^WAF1／CIP1mRNA的表达与p53？…

目的：探讨脑星形胶质细胞瘤组织Ｐ２１＾ＷＡＦ１／ＣＩＰ２ｍＲＮＡ的表达与ｐ５３基因突变的关系及其意义。方法：应用ＲＴ－ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对３８例新鲜脑星形胶质细胞瘤组织中上述两种基因进行研究。结果：ｐ５３基因在脑星形胶质细胞瘤组织中的突变率为２８．９％（１１／３８），且在Ⅲ、Ⅳ级肿瘤突变率显著高于Ⅰ～Ⅱ级者（Ｐ〈０．０５）；Ｐ２１＾ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ｍＲＮＡ在Ⅲ，Ⅳ级中的表达显著低于Ⅰ～     

星形细胞瘤中肿瘤抑制基因及生物学标记表达的研究

目的:检测30例不同病理级别星形细胞瘤中p53基因的表达状况及肿瘤其它生物学特性.方法:采用常规HE染色及免疫组织化学技术检测30例标本中p53、PCNA、GFAP、VIM、S-100的表达.结果:P53免疫组化染色阳性率随病理级别增高而增高,Ⅳ级阳性率 83.3%,Ⅰ、Ⅱ级15.4%,且不同级别染色程度也有差异;PCNA均呈阳性,Ⅳ级病例染色阳性强度大于Ⅰ级.GFAP、S-100随病理级别升高而阳性率降低,VIM却随级别升高而升高.结论:检测P53基因突变产物,可判断星形细胞瘤恶性程度与预后,P53基因在星形细胞瘤发展、演化中有重要作用.PCNA可反映星形细胞瘤增殖活性及恶性程度,GFAP、VIM、S-100的测定也可了解其分化程度,三者结合,可增加判断的准确性.     

14-3-3β在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

目的探讨14-3-3β在人脑星形细胞瘤中表达与肿瘤病理分级的关系。方法采用免疫组化法检测14-3-3β亚型在80例人脑星形细胞瘤和10例正常脑组织标本中的表达水平。结果在正常脑组织中，14-3-3蛋白6亚型只表达于神经元胞体和突起，在胶质细胞中未见表达。母亚型在人脑星形细胞瘤的表达阳性率及免疫反应评分（IRS）分别为60％、1．86±1．83。Ⅰ～Ⅳ级脑星形细胞瘤中β亚型表达阳性率分别为40％（8／20）、50％（10／20）、70％（14／20）和80％（16／20）。Ⅰ～Ⅳ级脑星形细胞瘤中β亚型IRS分别为0．88．4±0．27、1．15±0．28、2．19±0．37和3．23±0．47。不同恶性级别的脑星形细胞瘤中，14．3-3蛋白β亚型的阳性表达率无显著差异，但其IRS有显著差异（P〈0．05）。结论14-3-3β在人脑星形细胞瘤中高表达，且随着星形细胞瘤病理级别的增高而表达增强，14-3-3蛋白β亚型在脑星形细胞瘤的发生过程中具有重要作用。     

针对胶质瘤发生发展组织芯片中表皮生长因子受体基因表达分析

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）基因在针对胶质瘤发生，发展相关组织芯片中的表达及意义。方法采用事先制作好的布有不同恶性程度胶质瘤临床标本、裸小鼠移植瘤标本、体外细胞系球体、脑肿瘤干细胞球体和相应对照标本共118例的组织芯片，进行EGFR的SABC法免疫组化染色，分析其表达率及表达强度。同时运用荧光实时定量PCR技术检测芯片中包含的几个细胞系EGFRmRNA表达量，对芯片中蛋白水平的研究进一步验证。结果EGFR染色主要位于细胞胞膜。在71例人脑胶质瘤组织中，EGFR阳性表达率为46．5％，各级别人脑胶质瘤组织中EGFR阳性表达率分别为Ⅰ级11．1％，Ⅱ级28．0％，Ⅲ级60．9％，Ⅳ级78．6％；各级别阳性率比较差异有显著性意义（X^2=15．668，P=0．001）；并且EGFR的阳性表达率与病理级别呈直线正相关（r=0．991，P=0．009）。在正常人脑组织、正常裸小鼠骨髓及神经干细胞球体中EGFR均呈阴性表达；在裸小鼠皮下移植瘤、人脑胶质瘤体外细胞系球体及脑肿瘤干细胞球体中EGFR均呈阳性表达。荧光实时定量PCR检测显示EGFR mRNA在人脑胶质瘤体外细胞系球体及脑肿瘤干细胞球体中表达含量高，在神经干细胞球体中表达含量极低，与芯片中蛋白水平的检测相一致。结论EGFR在正常组织和神经干细胞中未见表达，而在肿瘤中特别是脑肿瘤干细胞中高表达，并且是随着肿瘤恶性程度的增高而表达量增加。因此可作为胶质瘤发生发展的分子病因作进一步研究。     

Stathmin／Oncoprotein18（Op18）在人脑胶质瘤中的表达研究

目的探讨Stathmin／oneoprotein18（Op18）基因在人脑胶质瘤中的表达规律及意义。方法分别采用免疫组化法和Westernblot法检测10例正常脑组织和56例脑胶质瘤中Stathmin蛋白的表达。结果免疫组化法检测Stathmin蛋白在正常脑组织、低级别胶质瘤（Ⅰ～Ⅱ级）及高级别胶质瘤（Ⅲ～Ⅳ级）中阳性表达率分别为20％、65％、100％。正常脑组织分别与Ⅰ～Ⅱ级组、Ⅲ～Ⅳ级组比较，均有显著性差异（P〈0．05）；Ⅰ～Ⅱ级组与Ⅲ～Ⅳ级组比较，有显著性差异（P〈0．05）。Westernblot法检测显示，Stathmin蛋白在胶质瘤中的表达明显增高，正常脑组织分别与Ⅰ～Ⅱ级组、Ⅲ～Ⅳ级组比较，差异均有显著性（P〈0．01），Ⅰ～Ⅱ级组与Ⅲ～Ⅳ级组比较，差异有显著性（P〈0．01）。结论Stathmin在脑胶质瘤中过表达，Stathmin可能为脑胶质瘤的生物治疗提供一个新靶点。     

PCNA,P53,nm23—H1蛋白表达与垂体腺瘤生物学行为的关系

目的探讨垂体腺瘤中ＰＣＮＡ、Ｐ５３、ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达与肿瘤发生及生物学行为的关系。方法应用免疫组化ＡＢＣ法检测上述基因蛋白在５０例侵袭性垂体腺瘤与４０例非侵袭性腺瘤中的表达。结果ＰＣＮＡ、ｐ５３的表达在侵袭性腺瘤组明显高于非侵袭腺瘤组,复发组明显高于非复发组;ｎｍ２３－Ｈ１的表达在侵袭性腺瘤组明显低于非侵袭腺瘤组,复发组明显低于非复发组。结论ＰＣＮＡ。Ｐ５３、ｎｍ２３－Ｈ1基因蛋白的异常表达与垂体腺瘤发生及生物学行为改变有关,并可作为评价肿瘤侵袭性的参考指标。     

胶质瘤miRNA-25与NF-кB表达相关性分析

目的探讨胶质瘤微小RNA-25（mi RNA-25）和核因子kappa B（NF-кB）表达变化及其相关性。方法选取2012年7月至2012年9月手术切除胶质瘤标本29例,其中WHOⅠ级5例、Ⅱ级6例、Ⅲ级9例、Ⅳ级9例;选取同期去骨瓣内减压切除正常脑组织8例作为对照组。采用实时PCR检测mi RNA-25表达水平,采用免疫印迹法和免疫组化染色检测NF-кB表达水平。结果相比正常组织,Ⅰ级胶质瘤mi RNA-25表达水平显著降低（P〈0.05）,Ⅱ级胶质瘤无明显变化（P〉0.05）,而Ⅲ、Ⅳ胶质瘤均明显增高（P〈0.01）;随胶质瘤病理级别增高其表达水平显著增高（P〈0.01）。正常脑组织NF-кB呈阴性表达,胶质瘤组织均呈阳性表达;而且,随胶质瘤病理级别增高,其表达水平显著增高（P〈0.05）。胶质瘤mi RNA-25表达水平与NF-κB表达水平呈显著正相关（r=0.92;P〈0.05）。结论胶质瘤mi RNA-25和NF-кB表达均上调,且随病理级别增高显著增高;两者表达呈显著正相关。     

P16与P53蛋白在脑胶质瘤中的表达及意义

目的:探讨P16与P53蛋白在人脑胶质瘤中的表达及与病理分级的关系。方法:采用免疫组化方法检测52例胶质瘤手术标本及2株人脑胶质瘤细胞系中P16与P53蛋白的表达状况,并分析其与该类肿瘤病理级别的关系。结果:随胶质瘤病理级别的升高P16蛋白的表达率逐渐降低,Ⅰ～Ⅳ级阳性率分别为75.0％、64.7％、42.8％和33.3％,低度恶性组(Ⅰ～Ⅱ级)与高度恶性组(Ⅲ～Ⅳ级)间有显著差异(P<0.05)。P53蛋白表达率随胶质瘤病理级别的升高有上升趋势。结论:P16及P53基因表达在胶质瘤恶性演变中有重要意义。     

放射外科治疗对脑膜瘤细胞增殖活性的影响

目的：探讨脑膜瘤立体定向放射外科（ＳＲＳ）治疗后细胞增殖活性变化情况。方法：以９例曾行ＳＲＳ治疗的脑膜瘤手术标本为研究材料，选取同期年龄相近，病理亚型相同，未行ＳＲＳ治疗的脑膜瘤标本为对照组，采用免疫组织化学染色方法，检测肿瘤增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）标记指数（ＰＣＮＡＬＩ）值。结果：ＳＲＳ治疗组ＰＣＮＡＬＩ为０～４．４％（２．０±１．５％），未治疗组为２～２８．９％（８．１±８３．％），Ｐ＜０．０５。结论：放射外科治疗后脑膜瘤细胞增殖能力明显下降。     

Wnt信号调控因子Pygo2在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨Wnt信号重要成员Pygopus 2（Pygo 2）在人脑胶质瘤中的表达水平及与脑胶质瘤发生发展的关系。方法采用免疫组化方法检测Pygo2蛋白在80例脑胶质瘤和5例正常脑组织标本中的表达水平。结果 Pygo2在脑胶质瘤中的表达阳性率及免疫反应评分（IRS）为65.0%、3.32±2.51,正常脑组织未见染色。Ⅰ～Ⅳ级以及良、恶性脑胶质瘤Pygo2表达阳性率分别为38.5%、46.2%、78.9%、90.9%和43.6%、85.3%,在脑胶质瘤不同病理级别以及不同恶性度间Pygo2表达阳性率均有显著性差异（P〈0.01）。Ⅰ～Ⅳ级以及良、恶性脑胶质瘤Pygo2IRS分别为0.875±0.29、1.84±1.229、4.24±2.16、6.39±2.97和1.52±1.10、5.53±2.84,在脑胶质瘤不同病理级别以及不同恶性度间Pygo2IRS有极显著性差异（P〈0.01）。结论 Pygo2在脑胶质瘤中高表达,并随脑胶质瘤病理级别的增加而表达增强,可能在脑胶质瘤恶性发生发展过程中具有重要作用。     

雄激素受体在脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨雄激素受体（androgen receptor,AR）在不同级别脑胶质瘤的表达及意义。方法收集12例正常脑组织和73例不同级别脑胶质瘤组织标本．其中WHOⅠ级8例,Ⅱ级15例,Ⅲ级23例,Ⅳ27例。采用免疫组织化学染色法和实时荧光定量PCR检测AR蛋白及AR mRNA表达情况,并分析正常脑组织和不同级别胶质瘤间AR表达差异。结果各级别胶质瘤组织中的AR蛋白阳性率和mRNA水平均明显高于正常脑组织（均P〈0．05）。胶质瘤WHO分级与AR阳性细胞率呈显著正相关（m=0．584,P〈0．001）,胶质瘤WHO分级与AR mRNA表达呈显著正相关（rs=0．885,P〈0．001）。结论AR在胶质瘤组织中表达增加．其表达水平与病理级别密切相关,提示AR可能在脑胶质瘤的生物学行为中发挥重要作用。     

14-3-3蛋白在星形细胞瘤中的表达及意义

目的探讨14-3-3蛋白在星形细胞瘤中的表达与肿瘤病理分级和预后间的关系。方法采用免疫组化ABC法检测10例正常脑组织和67例确诊并有随访的人脑星形细胞瘤石蜡标本中14-3-3蛋白的表达情况。分析14-3-3蛋白的表达与肿瘤恶性程度及预后间的关系。结果在正常脑组织标本中，14-3-3蛋白主要表达于神经元胞体和突起，而在少数的胶质细胞中仅见其弱表达。绝大部分星形胶质细胞瘤中可见14-3-3蛋白阳性表达，其阳性表达率为：Ⅱ级76．5％（13／17），Ⅲ级76．2％（16／21），Ⅳ级79．3％（23／29）。不同恶性级别的星形细胞肿瘤中，14-3-3蛋白的阳性表达率无显著差别（P〉0．05），但14-3-3蛋白表达的强度和范围有随肿瘤的恶性度增高而增加的趋势（P〈0．05）。52例14-3-3蛋白阳性表达患者的生存期明显短于15例14-3-3蛋白表达阴性的患者（P〈0．01）。结论14-3-3蛋白在人脑星形细胞瘤中的表达上凋与肿瘤的恶性程度及预后相关。14-3-3蛋白有望成为星形细胞瘤基因治疗的新靶点。