2型糖尿病大鼠血清AGEs与种植体周围骨代谢相关性研究

目的探讨血清晚期糖基化终末产物（advanced glycation end prcxtucts,AGEs）水平与种植体周围骨代谢指标改变的相互关系。方法选用2月龄SD大鼠40只,随机分为糖尿病种植组（T组）、糖尿病对照组（Tn组）、正常种植组（C组）、正常对照组（C。组）。糖尿病模型组采用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素诱导建立;种植组模型于大鼠胫骨近骺端植入1．3mm×7mm纯钛种植体。于8周后处死大鼠,收集胫骨和血清样本,测定血清AGEs含量,观察骨代谢指标血清钙、磷、骨钙素（boneglaprotein,BGP）及胫骨种植体周围骨密度变化。结果与正常组相比,糖尿病组大鼠血清AGEs含量显著升高,种植体周围骨密度、血清BGP显著降低,AGEs与骨密度、血清BGP之间存在负相关。结论2型糖尿病大鼠血清AGEs含量显著升高,可能是导致糖尿病模型大鼠骨量下降、骨生物力学改变、种植体骨整合减少的原因之一。     

透明质酸钠复合rhBMP-2促进骨质疏松症种植体骨结合的实验研究

目的:探讨重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对于骨质疏松症种植体骨结合的影响?方法:构建骨质疏松症大鼠模型,随机分为对照组?模型组和实验组,于胫骨内植入种植体?实验组种植体周围植入透明质酸钠复合rhBMP-2,对照组及模型组植入同等体积的透明质酸钠?术后4周和8周,通过X线?组织学切片及扫描电镜分析技术,观察各组胫骨内种植体骨结合的情况?结果:实验组种植体周围新生骨组织包绕,骨质致密,结构优良,未见明显骨吸收现象,骨结合良好?对照组种植体周围同样新生骨形成,部分区域见炎症反应,少量结缔组织长入种植体周围?模型组种植体周围骨组织形成较少,种植体脱落,未形成骨结合,种植体窝内炎症反应明显,周围结缔组织增生,部分区域出现骨质断裂?结论:rhBMP-2能够显著促进骨质疏松症大鼠胫骨内种植体周围新骨形成,加快成骨速度,促进骨质矿化,形成良好的骨结合?     

糖尿病对大鼠骨缺损愈合影响的实验研究

目的初步探讨糖尿病对大鼠骨缺损愈合的影响。方法雄性Wistar大鼠90只随机分为实验组(n=54)和正常对照组(n=36)。实验组腹腔注射四氧嘧啶建立糖尿病动物模型,然后在各组鼠胫骨处用手术方法制成骨缺损模型,每周分别处死4只大鼠,取出骨标本,脱钙后制成切片,采用免疫组化方法进行染色,光镜下观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的表达强度。并于术后4周、5周、6周进行生物力学检测。结果糖尿病组与正常组相比,糖尿病鼠骨缺损处机械力量降低。免疫组化显示:在骨缺损愈合早期,BMP-2在骨痂内广泛表达,而糖尿病组骨痂组织中表达比正常组低得多。结论实验结果表明糖尿病明显影响大鼠骨缺损处骨痂形成,降低BMP-2表达,糖尿病可能通过降低骨缺损处细胞因子的合成,影响骨缺损的愈合。     

糖尿病大鼠早期骨微结构改变及其BMP-2基因的表达

目的 观察糖尿病大鼠早期的骨密度、骨微结构改变及骨组织中BMP-2基因的表达.方法 清洁级健康成年雄性Wistar大鼠30只,按照随机数字表将其分为A组(普通饲料对照组)、B组(高脂饲料 链脲佐菌素组)和C组(普通饲料 大剂量链脲佐菌素组).饲养12周后,分别对各组大鼠进行骨密度、光镜、扫描电镜、骨形态计量学的观察以及BMP-2基因表达等指标的检测.结果 与A组相比,B组骨微结构无明显变化(P＞0.05),但BMP-2基因表达增高(P＜0.05),C组骨微结构明显改变(P＜0.05),BMP-2基因表达降低,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 不同的糖尿病大鼠模型早期骨微结构及BMP-2基因表达情况改变不完全一致,可能与高胰岛素血症、胰岛素抵抗有一定关系.     

补肾化痰方对去卵巢大鼠骨组织中BMP-2和TGF-β1表达的影响

目的:观察补肾化痰方对去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织中骨形态发生蛋白2(BMP-2)、转化生长因子β(1TGF-β1)表达的影响。方法:50只大鼠随机分为模型组、假手术组、西药组、中药低剂量组、中药高剂量组,除假手术组外,其他各组大鼠行双侧卵巢切除术,术后3个月治疗组开始灌胃给药,连续8 w;处死大鼠,免疫组化检测大鼠胫骨组织中BMP-2、TGF-β1的表达。结果:补肾化痰方低、高剂量组大鼠BMP-2、TGF-β1表达水平均明显高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾化痰方能改善骨代谢,对去卵巢大鼠骨质疏松症有较好的治疗作用。     

BMP-2在糖尿病肾病大鼠肾内小动脉中表达的意义

目的 观察骨形态蛋白2(BMP-2)在糖尿病肾病(DN)大鼠肾实质内小动脉上的表达及其变化规律,探讨其对糖尿病肾病血管病变的影响.方法 设对照组(N组)和糖尿病肾病组(DN组),建立链脲佐菌素(STZ)诱导的DN大鼠模型.茜素红染色观察肾实质内小动脉周围钙盐沉积,并分别采用免疫组化及mRNA 原位杂交法检测BMP-2在肾实质内小动脉上的蛋白表达及基因定位.结果 (1)茜素红染色DN 组第4～12周时偶见肾内小动脉少许点状红色钙盐沉积,第24 周时可见肾实质内小动脉及周围组织有较多红色点片状沉积,N 组茜素红染色为阴性.(2)DN 组肾实质内小动脉BMP-2蛋白及mRNA 在4周时已有表达,随时间延长表达逐渐增强,各时间点均明显高于N组,N组各时间点表达差异无统计学意义.结论 (1)DN大鼠肾内小动脉钙化前即已有BMP-2的表达;(2)BMP-2可能是糖尿病血管钙化的重要转录因子及早期生物学标志之一; (3)肾内小动脉上BMP-2的表达变化可能参与DN进展.     

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠心肌细胞钙通道基因表达的影响研究

目的研究银杏叶提取物对2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌细胞L型Ca2+通道蛋白mRNA表达的影响,探讨银杏叶提取物对T2DM的治疗作用。方法用高糖-高脂肪饲料刺激加小剂量链脲佐菌素(STZ)制备T2DM大鼠模型,将糖耐量减低的20只大鼠随机分为糖尿病组(10只)和治疗组(10只),另设10只正常大鼠(正常组)作为对照。治疗组大鼠给予银杏叶提取物灌胃,糖尿病组和正常组大鼠给予0.9%氯化钠注射液灌胃。治疗10周后采用半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测3组大鼠心肌细胞L型Ca2+通道蛋白mRNA表达量。结果正常组、糖尿病组、治疗组大鼠心肌组织L型Ca2+通道蛋白mRNA表达量分别为(0.157±0.028)、(0.257±0.025)和(0.226±0.029),3组间比较差异有统计学意义(F=28.232,P=0.000);糖尿病组、治疗组大鼠心肌组织L型Ca2+通道蛋白mRNA表达量均显著高于正常组,而治疗组显著低于糖尿病组,差异有统计学意义(P<0.05)。另外,实验10周时,糖尿病组大鼠葡萄糖耐量试验各时点血糖水平较正常组大鼠显著升高,而治疗组大鼠则较糖尿病组显著下降,差异有统计学意义(P<0...     

二氢杨梅素通过抑制骨骼肌TCPTP改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗

目的观察二氢杨梅素(DMY)对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素抵抗的影响。方法将SD雄性大鼠随机分成正常对照组、2型糖尿病组、2型糖尿病DMY组、DMY对照组。高糖高脂饮食联合链脲佐菌素造模。16周末,大鼠称重后测定空腹血糖(FBG)和血胰岛素(FINS),计算胰岛素敏感指数(ISI),Western blot检测大鼠骨骼肌T细胞蛋白酪氨酸磷酸酶(TCPTP)、蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)及磷酸化蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(p-Akt)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)及磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达。结果成功建立2型糖尿病大鼠模型。与正常对照组比较,2型糖尿病组大鼠体质量、ISI及p-Akt、p-PI3K、GLUT4的表达水平显著降低,FBG、FINS及TCPTP表达水平显著升高(P＜0.05);与2型糖尿病组比较,2型糖尿病DMY组大鼠体质量、ISI及p-Akt、p-PI3K、GLUT4的表达水平显著升高,FBG、FINS及TCPTP表达水平显著降低(P＜0.05),DMY对正常大鼠上述指标无显著影响。结论二氢杨梅素可能通过抑制骨骼肌TCPTP的表达从而改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗。     

2型糖尿病大鼠心肌IR、IRS-1的表达与罗格列酮及APP5肽类似物P165的干预效应

目的 研究2型糖尿病大鼠心肌胰岛素信号转导通路蛋白胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达与正常SD大鼠的区别,并探讨进行罗格列酮及APP5肽类似物P165干预后对上述蛋白表达的影响.方法 60只SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、正常对照+罗格列酮组(C+RSG组)、2型糖尿病组(T2DM组)、2型糖尿病+罗格列酮组(T2DM+RSG组)、糖尿病给予P165小剂量组(T2DM+P165小剂量组)、糖尿病给予P165大剂量组(T2DM+ P165大剂量组),其中糖尿病动物采用高脂饮食后给予小剂量STZ腹腔注射的方法造模.后将各组SD大鼠处死,采用免疫组织化学染色和Western blot的方法检测心肌组织IR、IRS-1的表达. 结果 (1)2型糖尿病组(T2DM组)心肌组织IR、IRS-1的表达水平显著低于对照组(C组);(2)2型糖尿病+罗格列酮组(T2DM+ RSG组)心肌组织IR、IRS-1的表达水平显著高于T2DM组;(3) 免疫组化染色发现2型糖尿病+P165小/大剂量组(T2DM+P165小/大剂量组)心肌组织IR、IRS-1免疫反应阳性颗粒沉着的累积光密度值显著高于T2DM组;Western blot 结果显示T2DM+P165小/大剂量组心肌组织IRS-1的表达水平显著高于T2DM组;而IR的表达水平与T2DM组相比无差别.结论 (1)2型糖尿病大鼠心肌存在胰岛素抵抗或信号转导障碍;(2)罗格列酮干预后可以改善2型糖尿病心肌的胰岛素信号转导异常;(3)P165对2型糖尿病大鼠心肌胰岛素信号转导具有调节作用,其作用靶点可能为胰岛素受体底物.     

大鼠肝纤维化组织中BMP-2的动态表达和意义

目的探讨大鼠肝纤维化组织中骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)的表达趋势及意义。方法用皮下注射四氯化碳构建大鼠肝纤维化模型,造模后4周、8周、12周分别检测血清层粘蛋白(LN)、透明质酸(HA)的变化,采用HE及Masson染色光学显微镜下观察肝组织损伤情况,采用Real-Time PCR、免疫组织化学和Western印迹检测各组大鼠肝组织中BMP-2的表达。采用单因素方差分析进行多组均数间的比较。结果肝纤维化模型组血清LN、HA明显升高。在对照组和肝纤维化模型组中BMP-2 mRNA均有表达。模型组4周时BMP-2 mRNA表达与对照组无显著差异(P0.05),模型组8周、12周较对照组显著下降(P均0.05)。与模型组4周相比,模型组BMP-2 mRNA的表达在8周、12周显著下降(P均0.05),12周达最低。免疫组织化学证实,BMP-2在肝纤维化模型组较对照组大鼠肝组织中表达减少。在对照组和肝纤维化模型组中BMP-2蛋白均有表达。模型组4周时BMP-2蛋白表达与对照组无显著差异(P0.05),模型组8周、12周较对照组显著下降(P均0.05)。与模型组4周相比,模型组BMP-2蛋白的表达在8周、12周显著下降(P均0.05),12周达最低。结论 BMP-2在正常SD大鼠肝脏有表达,随着肝纤维化进展,表达减少,提示BMP-2参与肝纤维化的发生、发展过程。     

实时荧光定量PCR法检测糖尿病肾病大鼠肾脏中BMP-2与MGP

目的:检测糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏中骨形成蛋白2(BMP-2)和基质Gla蛋白(MGP)的基因表达量的变化规律,探讨其对糖尿病肾病的影响.方法:设对照组(N组)及糖尿病肾病组(DN组,STZ诱导的DN大鼠模型);采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)方法检测4、12、24周DN大鼠及正常大鼠肾脏中BMP...     

罗格列酮对糖尿病大鼠心肌损害防护作用的机制研究

目的探讨罗格列酮对糖尿病大鼠心肌损害防护作用的机制。方法用链脲佐菌素(STZ)将39只10周龄雄性Wistar大鼠诱导成糖尿病大鼠模型,分为胰岛素治疗组、罗格列酮治疗组及未治疗组(每组13只),并以13只正常大鼠作对照。于第16周末抽取各组大鼠心脏血测定TNF-α、IL-6、C-反应蛋白、SOD及P物质水平,并处死取心脏进行病理学观察;用免疫组织化学染色观察心肌中晚期糖基化终末产物(AGEs)与过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)含量的变化。结果未治疗对照组血清IL-6、TNF-α、C-反应蛋白水平均明显高于正常对照组(P<0.05),胰岛素治疗组和罗格列酮治疗组与正常对照组比较无差异;未治疗对照组血清SOD、P-物质水平与正常对照组相比明显降低(P<0.01),胰岛素治疗组和罗格列酮治疗组的SOD和P-物质显著高于未治疗对照组(P<0.01,P<0.05)。组织学观察:未治疗对照组部分心肌细胞肥大、玻璃样变;心肌间质纤维组织增生,不规则分隔心肌细胞;胰岛素治疗组和罗格列酮治疗组未出现明显的组织学改变。免疫组织化学显示,AGEs蛋白、PPAR-γ蛋白均呈棕黄色颗粒状,弥漫或斑片状沉积于心肌细胞胞浆中;在未治疗对照组AGEs最高,PPAR-γ最低。结论糖尿病大鼠受损的心肌中AGEs蓄积和血清炎症因子增高,罗格列酮与胰岛素一样对糖尿病大鼠心肌损害具有防护作用。     

胰高血糖素样多肽-1对超重2型糖尿病患者的临床意义

【目的】探讨不同体质指数2型糖尿病患者血浆胰高血糖素样多肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)水平变化。【方法】选取2型糖尿病患者87例,其中正常体质指数组47例,超重组40例,选取正常体检者30例作为对照组,所有入选者检测空腹血糖、胰岛素及GLP-1,进食100 g馒头餐后测定餐后30 min、120 min血糖、胰岛素、GLP-1水平。【结果】(1)2型糖尿病患者餐后30 min及120 min GLP-1曲线下面积低于正常对照组(P<0.05)。(2)2型糖尿病患者超重组餐后30 min、餐后120 minGLP-1、GLP-1曲线下面积低于正常体质组(P<0.01)。【结论】超重2型糖尿病患者比正常体质指数2型糖尿病患者GLP-1分泌减少。     

老年2型糖尿病血清脂联素与周围血管病的关系

目的探讨老年2型糖尿病患者血清脂联素水平与周围血管病之间的关联。方法入选60名老年2型糖尿病患者,根据ABI数值分为两组,一组为无周围血管病组(ABI≥0.9),另一组为合并周围血管病组(ABI<0.9),并选取30名健康老年人群作为对照组,同时收集入选者的临床资料及生化指标,计算稳态模型的胰岛素抵抗指数,并用酶联免疫法测定血清脂联素水平。结果合并周围血管病组血清脂联素水平明显低于无周围血管病组及健康对照组(P<0.05);糖尿病患者血清脂联素水平低于健康对照组(P<0.05);相关性研究表明,血清脂联素与血糖、TG、TC、LDL-C显著负相关,与HDL-C、ABI显著正相关。结论老年2型糖尿病患者血清脂联素水平与周围血管病密切相关。     

上颌窦内提升同期植入短种植体的临床应用

【目的】观察上颌窦内提升同期植入短种植体在上颌后牙区萎缩牙槽骨牙种植中的成功率。【方法】22例患者行上颌窦内提升同期植入37颗短种植体,术后六个月行临时义齿修复,临时修复半年后行永久修复。【结果】种植体术后观察8~24个月,种植体均稳定无松动,无疼痛,能负担固定修复体的咬合力。X片显示所有种植体周围及底部均有硬组织包绕,垂直骨吸收量〈1 mm。【结论】上颌窦内提升同期短种植体植入可以减轻手术创伤,减少手术并发症,缩短就诊时间,是上颌后区萎缩牙槽骨种植修复的有效方法。     

外周血单个核细胞caveolin-1的表达在新诊断2型糖尿病患者中的变化及其与胰岛素抵抗的关系

【目的】 探讨窖蛋白-1(caveolin-1)在新诊断2型糖尿病患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平,并分析其与胰岛素抵抗的关系。【方法】 检测47例新诊断2型糖尿病患者和41例正常血糖对照者PBMC中caveolin-1 mRNA和蛋白的表达,分析caveolin-1 mRNA表达与体质指数(BMI)、腰围、臀围、腰臀比、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1C)、空腹胰岛素(FINS)、稳态模型的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和血脂的相关性。【结果】 新诊断2型糖尿病患者PBMC中caveolin-1 mRNA和蛋白水平均明显低于对照组(P < 0.05),且其caveolin-1 mRNA水平与FPG?HbA1C?HOMA-IR及甘油三酯(TG)呈负相关(r分别为-0.376?-0.294?-0.309?-0.397,P均 < 0.05),以caveolin-1 mRNA为因变量,年龄、性别、BMI、臀围、FPG、logFINS、logHOMA-IR、HbA1C、TG为自变量,进行多重线性逐步回归分析,结果显示HbA1C是caveolin-1 mRNA 的独立影响因素. 【结论】 Caveolin-1在新诊断2型糖尿病患者PBMC中表达较正常血糖人群下降,其低表达与新诊断2型糖尿病高血糖及胰岛素抵抗相关.     

2型糖尿病大鼠肾脏相关细胞因子表达与足细胞损伤关系

目的 探讨转化生长因子β1（TGF-β1）、骨形态发生蛋白7（BMP-7）、结缔组织生长因子（CTGF）、nephrin在2型糖尿病肾病（DKD）大鼠肾脏组织表达变化,及其与肾脏足细胞损伤的关系。方法 雄性SD大鼠50只,随机分为正常对照组（NC组,20只）和模型组（DKD组,30只）,DKD组给予高糖高脂饲料喂养8周建立2型糖尿病模型,建模成功后空腹状态下给予小剂量链脲佐菌素（STZ,30 mg/kg）一次性腹腔注射;NC组给予常规饲料喂养,腹腔注射等量枸橼酸缓冲液,继续喂养8周。于8周末检测两组24 h尿清蛋白（UAL）、空腹血糖（FBG）、血肌酐（Scr）、尿肌酐（Ucr）,电镜观察肾小球足细胞超微结构的变化,光镜检测肾小球硬化指数（GSI）,免疫组化、实时定量PCR检测肾组织nephrin、BMP-7、CTGF、TGF-β1的表达。结果 与NC组比较,DKD组大鼠UAL、GSI明显升高,肾小球足细胞nephrin、BMP-7表达下调,而CTGF及TGF-β1表达上调,差异均有显著性（t=3.20-41.17,P〈0.01）。光镜下观察,DKD组大鼠肾小球肥大,系膜细胞增生,细胞外基质增多。电镜下观察,DKD组大鼠肾脏足细胞肿胀,足突融合消失,足细胞损伤。结论 DKD 大鼠肾小球存在足细胞损害,其机制可能与 BMP-7 表达下调及 CTGF、TGF-β1 过度表达有关。