NS-398对人胃癌细胞系SGC-7901增殖、凋亡和COX-2表达的影响

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398对人胃癌细胞系SGC-7901增殖、凋亡及COX-2表达的影响,并进一步探讨其作用的可能机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测NS-398对SGC -7901细胞的杀伤抑制作用;免疫细胞化学法检测SGC-7901细胞内COX-2的蛋白表达情况;ELISA法检测NS-398作用于SGC-7901细胞后PGE2释放水平;流式细胞仪检测SGC-7901细胞的凋亡情况.结果 NS-398对胃癌SGC-7901细胞具有较强的抑制作用,且这种抑制作用随浓度和时间的增加而增强,呈剂量-时间双效应关系(P＜0.05);不同浓度NS-398作用下的SGC-7901细胞中,COX-2的表达明显减弱,且呈剂量梯度下降(P＜ 0.05);NS-398可抑制PGE2释放,并且这种抑制作用呈剂量效应关系,与对照组相比差异有统计学意义(P＜ 0.05);NS-398作用于SGC-7901细胞48 h后,细胞凋亡率升高,且呈剂量效应(P＜0.05).结论 NS-398通过COX-2依赖途径抑制SGC-7901细胞增殖并促进其凋亡.     

组蛋白H2AX与DNA损伤的分子感应

DNA双链断裂是电离辐射对DNA的重要损伤类型,与细胞死亡、基因突变甚至细胞恶性转化有密切联系。DNA发生双链断裂后最早反应之一是位于断裂点附近的组蛋白H2AX的C末端丝氨酸残基发生磷酸化,形成γ-H2AX。磷酸化的γ-H2AX快速转导DNA损伤信号,导致下游分子磷酸化的激活,引发一系列的生物级联反应和和细胞学反应。γ-H2AX是迄今所研究的最重要的DNA损伤感应分子。     

SDZ对人胃癌SGC-7901细胞的影响

[目的]观察SDZ体外对人胃癌SGC-7901细胞的影响。[方法]培养人胃癌SGC-7901细胞,加入不同浓度的SDZ,作用24h、48h、72h,用MTT法计算细胞生长抑制率,描绘细胞生长曲线,荧光染色和电镜检测并观察细胞凋亡情况。[结果]SDZ体外对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制率随作用浓度和作用时间的增加而增大。1000μg/ml、200μg/ml、40μg/ml、8μg/ml、1.6μg/mlSDZ对人胃癌SGC-7901细胞作用24h,细胞抑制率分别为38%、35%、33%、29%、20%。[结论]SDZ体外对人胃癌SGC-7901细胞有生长抑制作用,呈剂量依赖性和时间依赖性,与细胞生长抑制率呈正相关,能引起细胞凋亡。     

紫杉醇对人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的影响

目的:研究紫杉醇(PTX)对人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的影响,并与丝裂霉素(MMC)、阿霉素(ADM)、五氟尿嘧啶(5-FU)进行比较,阐明PTX对人胃癌细胞SGC-7901抑制作用及诱导凋亡的特点。方法:MTT比色法测定PTX、MMC ADM、5-FU对人胃癌细胞SGC-7901生长增殖的影响。流式细胞仪检测PTX、MMC ADM、5-FU诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡周期各期比例和凋亡率的影响。结果:PTX对人胃癌细胞SGC-7901抗增殖作用的强度随药物浓度增加而加强;随时间延长而加强;呈现时间和剂量双效应。在PTX、MMC、ADM、5-FU的Cmax浓度时,抑制率分别为(22.43%、20.53%、19.68%、16.32%),PTX与MMC抑制率相当(P>0.05),比ADM、5-FU高(P<0.05),在低浓度时(0.01 Cmax),抑制率分别为(7.32%、1.02%、1.34%、1.65%),PTX有较高抑制率,且明显高于其他三种药物(P<0.01)。人胃癌细胞SGC-7901在PTX作用后首先表现为G2/M期阻滞,并在G1峰前出现凋亡峰(AP峰),随着G2/M期细胞的减少,AP峰逐渐增多。PTX对人胃癌细胞SGC-7901的凋亡诱导作用呈剂量依赖性和时间依赖性,对不同浓度PTX、MMC、ADM、5-FU诱导的细胞凋亡率进行统计学分析,发现PTX、MMC、ADM、5-FU诱导的人胃癌细胞SGC-7901随浓度的增加而增加,低浓度时增加较快。结论:PTX能有效抑制体外肿瘤细胞增殖,并随药物浓度、时间增加而增强。PTX能诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡,并显示剂量、时间依赖效应。     

姜黄素对人胃癌细胞SGC-7901的影响

目的 探讨姜黄素对人胃癌细胞SGC-7901的影响.方法 人胃癌细胞SGC-7901接受不同浓度姜黄素处理,然后采用MTT法测定人胃癌细胞SGC-7901的增殖,Boyden chamber侵袭小室测定细胞侵袭能力,划痕实验测定细胞迁移能力.结果 姜黄素能够抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖,且作用与药物浓度有关(P＜0.05),浓度越大,抑制能力越强;姜黄素能够抑制人胃癌细胞SGC-7901侵袭、迁移,且作用与药物浓度有关(P＜0.05),浓度越大,抑制能力越强.结论 姜黄素能够抑制人胃癌细胞SGC-7901的增殖、侵袭、迁移,且这种作用具有剂量依赖性.     

微缺氧对三氧化二砷抑制胃癌细胞SGC-7901生长的影响

 目的 常氧和微缺氧条件下三氧化二砷（As₂O₃）注射液对人胃癌细胞株SGC-7901生长抑制作用的对比研究。方法 运用产气袋法（GasPaK）制造微缺氧条件，实验分为微缺氧组和对照组，用MTT法检测药物效应。流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡。结果 不同浓度As₂O₃对人胃癌细胞株SGC-7901生长有抑制作用，并呈剂量一效应关系。细胞滞留于G2／M及S期。微缺氧条件下As₂O₃对人胃癌细胞株SGC-7901生长抑制作用下降（P〈0．01）。凋亡细胞百分比下降。结论 As₂O₃对人胃癌细胞生长有抑制作用，但对缺氧胃癌细胞的抑制作用下降，单用As₂O₃治疗胃癌存在一定的局限性。     

rH2AX与MDC1特异性的结合在DNA损伤应答中的作用

0 引言 细胞周期检测点非常严格地检测DNA的损伤,并且延迟细胞周期进程而给DNA修复留出时间.如果损伤太剧烈,它们可以触发细胞死亡.越来越多的证据显示DNA检测点内的任何缺陷都可能导致遗传的不稳定性,如肿瘤细胞就是这样产生的[1].     

川芎嗪通过RAD52调控乳腺癌细胞DNA损伤修复

目的:探究TMP对乳腺癌BT474细胞增殖、细胞周期及其调控蛋白表达与DNA双链断裂修复通路的相关性。方法:CCK8法测定TMP对乳腺癌BT474细胞的增殖抑制情况；流式细胞术测定TMP对细胞周期的影响；单细胞凝胶电泳测定分析TMP对损伤后细胞DSBs累积情况的影响；Isce-I内切酶系统检测TMP对修复通路活性的影响；Western blotting检测DSBs修复通路相关染色体结合蛋白表达水平变化。结果:TMP通过使细胞阻滞在G₁期呈浓度依赖性抑制BT474细胞增殖，显著减少体内由Zeocin导致的细胞拖尾DNA含量(P<0.05);TMP显著增加BT474细胞对RAD52、ERCC1、XRCC4以及DNA LigⅣ蛋白募集，减少对KU80蛋白募集，促进了SSA以及NHEJ通路修复活性(P<0.05)。结论:TMP通过阻滞BT474细胞停留在G₁期使其发挥增殖抑制作用的机制之一；TMP通过增强损伤缺口对各个通路的关键染色体结合蛋白募集，促进SSA与NHEJ修复通路活性从而减少DNA损伤。     

胃癌组织中G9a 表达的预后意义及其对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探究组蛋白甲基转移酶G9a 在胃癌组织中的表达及其与预后的相关性,并观察G9a 抑制剂对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法：通过Kaplan-Meier Plotter 和Oncomine 数据库分析G9a 在胃癌组织中的表达水平及其与预后的相关性。选用人胃癌细胞株SGC-7901 和MKN-45 为研究对象,Western blotting 方法检测细胞中G9a 蛋白表达水平,以G9a 抑制剂BIX01294处理胃癌细胞,观察细胞形态变化,CCK-8 法和集落形成实验检测胃癌细胞增殖能力和集落形成率的变化,流式细胞术检测细胞凋亡的变化。结果：G9a 在胃癌组织中高表达（P<0.01）,其高表达与预后不良呈正相关（P<0.01）。BIX01294 能使胃癌细胞体积缩小、细胞间连接消失,甚至细胞皱缩、变圆、脱落等。BIX01294 能显著抑制胃癌细胞集落形成和胃癌细胞的增殖（均P<0.05）,同时促进胃癌细胞凋亡（P<0.05）。结论: G9a 在胃癌组织中高表达,其高水平表达与预后不良呈正相关;抑制G9a 的表达可显著抑制胃癌细胞的增殖和促进细胞凋亡。     

ANRIL对胃癌细胞增殖的影响

目的:研究在胃癌细胞系SGC-7901中，ANRIL对其增殖的影响，并探讨该作用是否与TGF-β/Smad通路相关。方法:采用小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）技术对SGC-7901细胞中的ANRIL基因、TGF-β1基因分别进行干预，并对ANRIL基因及TGF-β1基因进行联合干预；应用甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）法检测各实验组中细胞增殖能力的变化；采用Western blot法检测各实验组中TGF-β1蛋白和p-Smad蛋白的表达情况。结果:胃癌细胞系SGC-7901经转染24 h、48 h后，siANRIL组OD值明显低于NC组、MOCK组及BLANK组（P＜0.05）。siANRIL＋siTGF-β1组、siTGF-β1组OD值高于NC组、MOCK组及BLANK组（P＜0.05）。siANRIL＋siTGF-β1组OD值介于siANRIL组与siTGF-β1组之间（P＜0.05）。siANRIL组TGF-β1蛋白和p-Smad蛋白的表达高于NC组、MOCK组及BLANK组（P＜0.05）。在siTGF-β1组及siANRIL＋siTGF-β1组中TGF-β1蛋白和p-Smad蛋白的表达低于NC组、MOCK组及BLANK组（P＜0.05）。siANRIL＋siTGF-β1组TGF-β1蛋白和p-Smad蛋白的表达介于siANRIL组与siTGF-β1组之间（P＜0.05）。结论:在胃癌细胞系SGC-7901中，ANRIL对其细胞增殖发挥促进作用，且ANRIL可能是通过TGF-β/Smad信号传导通路发挥促进作用的。     

尼美舒利对人SGC-7901细胞系增殖及hTERT-mRNA表达的研究

目的探讨选择性环氧合酶-2抑制剂尼美舒利对人胃癌细胞系SGC-7901增殖和端粒酶hTERT—mRNA表达的作用。方法体外培养人胃癌细胞系SGC-7901后，加入不同浓度的尼美舒利（0、50、100、200、400μmol／L）进行共同培养。用相差显微镜动态地观察经尼美舒利处理后细胞的形态变化；MTT法检测人胃癌细胞系SGC-7901的增殖；RT—PCR法检测细胞端粒酶hTERT—mRNA表达。结果选择性环氧合酶-2抑制剂尼美舒利作用于人胃癌细胞系SGC-7901后，细胞增殖受到明显的抑制，呈时间和剂量依赖性，并且端粒酶hTERT-mRNA的表达降低呈剂量依赖关系，与对照组比较差异有显著性（P〈0．05）．结论尼美舒利能够抑制人胃癌细胞系的hTERT—mRNA的表达，从而抑制其生长，这表明尼美舒利可能是种新的端粒酶抑制剂。     

The Effect of Nimesulide on the Expression of NF-κB, Bcl-2 and Bax in the Human Gastric Cancer SGC-7901 Cell Line

OBJECTIVE To investigate whether nimesulide can suppress tumor growth and induce apoptosis in SGC-7901 gastric cancer cells and to explore the molecular mechanism involved.METHODS SGC-7901 cells were cultured in RPMI 1640 medium containing different concentrations of nimesulide (0,12.5, 50, 100, 200, 400 μmol/L). The MTT assay, morphological observation, electron microscopy (EM), immunohistochemical analysis and Western blot analysis were employed to investigate the effects of nimesulide on the SGC-7901 cells and to explore possible related molecular mechanisms.RESULTS Nimesulide inhibited the growth of SGC-7901 cells and elicited typical apoptotic morphologic changes. Nimesulide also decreased NF-κB and Bcl-2 expression, but increased the level of the Bax protein.The positive rate of Bcl-2 protein expression at 0, 50, 100 and 200 μmol/L of nimesulide was 58.3±14.0%, 50.2±9.9%, 32.8±5.0% and 22.7± 5.5% respectively based on immunohistochemical staining. The positive rate of Bax protein expression was 22.0±5.7%, 29.2±6.5%, 42.7±5.9% and 74.5±9.1% and the NF-κB expression was 74.2±10.9%, 61.8±7.6%,36.7±10.9% and 17.5±12.3%, Significant differences were found between 0 μmol/L and 100 μmol/L and 200 μmol/L. Western blot analysis also showed that the expression of NF-κB was decreased.CONCLUSION Nimesulide suppresses tumor growth and induces apoptosis by inhibiting NF-κB expression, which may be related to the overexpression of Bax relative to Bcl-2 expression.     

生存素反义寡核苷酸对胃癌细胞株SGC-7901生长的影响

目的　观察生存素蛋白在胃癌细胞株SGC 790 1中的表达及转染不同浓度的生存素反义寡核苷酸(ASODN )对胃癌细胞SGC- 790 1生长的影响。方法　采用细胞免疫组织化学染色观察生存素蛋白在胃癌细胞株SGC- 790 1中的表达。将胃癌细胞株SGC 790 1分为8个组:空白对照组,脂质体转染组,2 0 0nmol/L、40 0nmol/L、60 0nmol/L无义链转染组,2 0 0nmol/L、40 0nmol/L、60 0nmol/L反义链转染组,转染48h后,采用四氮唑盐(MTT )比色法,测定各组的细胞生长抑制率,并采用流式细胞仪检测60 0nmol/L无义链转染组、60 0nmol/L反义链转染组细胞的凋亡率以及生存素蛋白表达。结果　显示生存素蛋白在胃癌细胞株SGC- 790 1的胞核和胞质中均有表达,但以胞核为主;各组生存素ASODN对胃癌细胞株SGC- 790 1有明显的抑制作用(P <0 .0 1) ,抑制作用呈浓度依赖性,60 0nmol/L反义链转染组抑制率为最高,达40 .0 % ,流式细胞仪检测表明生存素ASODN有明显的诱导细胞凋亡的作用,定量检测结果显示生存素ASODN可以下调生存素蛋白至8.8% (P <0 .0 1)。结论　不同浓度的生存素ASODN均能通过下调生存素蛋白表达来抑制胃癌细胞株SGC- 790 1的生长。     

人参皂苷CK对胃癌细胞株SGC-7901及其内源性VEGF的影响

目的 研究人参皂苷CK对胃癌SGC-7901细胞增殖、细胞周期的影响及其对内源性分泌的血管内皮细胞生长因子(VEGF)的作用。方法 以50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625μg/ml的人参皂苷CK作用于胃癌细胞株SGC-7901,通过MTT法检测人参皂苷CK对细胞的抑制作用;采用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;ELISA定量检测细胞培养液中内源性VEGF的含量变化。结果 MTT法显示人参皂苷CK对胃癌细胞株SGC-7901有抑制作用,并且呈浓度、时间依赖关系;SGC 7901细胞经人参皂苷作用后出现明显凋亡峰,且细胞周期被阻滞在G0/G1期;人参皂苷CK处理组VEGF含量低于对照组(P<0.05),高浓度组低于低浓度组(P<0.05),且随着作用时间延长,VEGF含量降低。结论 人参皂苷CK可通过诱导凋亡抑制胃癌细胞株SGC-7901生长,并可抑制SGC 7901细胞内源性分泌VEGF,人参皂苷CK可能成为一种潜在的抗胃癌药物。     

蜂胶黄酮 pinobanksin-3-acetate对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响及机制

[目的]探讨蜂胶黄酮pinobanksin-3-acetate对体外培养的胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及部分基因表达的影响.[方法]采用四甲基偶氮唑盐(MTr)显色法检测不同浓度PB3A作用不同时间对SGC-7901细胞生长所产生的影响,计算生长抑制率和IC50值;倒置显微镜观察PB3A干预后细胞的形态变化;Annexin V-FITC/PI双染色、流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测PB3A(40、80μg/ml)干预24h后SGC-7901细胞FOS、GEM、RGS2、GADD45G及HSPA6的蛋白表达水平,利用Spearman进行候选基因相关性分析.[结果]PB3A可明显抑制SGC-7901细胞的增殖(P＜0.05),且抑制作用呈时间和剂量依赖性.随PB3A剂量的增多,SGC-7901细胞的凋亡率渐增,细胞的早期凋亡率从25.6％提高到50.2％.通过40μg/ml和80μg/ml PB3A干预胃癌SGC-7901细胞24h后与对照组相比,高浓度组GADD45G、HSPA6、GEM、RGSR及FOS蛋白表达有极显著性差异(P＜0.01),而低浓度组GADD45G、GEM和HSPA6蛋白表达有显著性差异(P＜0.05).[结论]PB3A在体外可明显抑制胃癌SGC-7901细胞增殖并诱导凋亡的作用,并呈剂量依赖性变化趋势.机制可能与其诱导GEM、RGSR、FOS及HSPA6蛋白的上调表达有关,以上基因可能相互协同导致肿瘤细胞增殖信号通路的抑制并促进胃癌细胞的凋亡.     

胃癌中MPZL1的表达及其对胃癌细胞增殖能力的影响

目的 探讨MPZL1在胃癌中的表达及其与胃癌患者预后的关系和对胃癌细胞增殖、克隆形成能力的影响。方法 利用GEPIA、UALCAN在线数据库分析MPZL1在多种恶性肿瘤中的表达情况，进一步运用KM Plotter和UALCAN数据库分析MPZL1对胃癌患者总生存时间的影响；采用Western blot检测胃癌细胞中MPZL1蛋白表达情况以及凋亡信号通路蛋白的变化；运用CCK-8和平板克隆实验分别检测MPZL1的表达变化对细胞增殖和克隆形成能力的影响。结果 在线数据库GEPIA发现MPZL1在多种恶性肿瘤中呈高表达趋势。UALCAN和KM Plotter数据库分析结果显示MPZL1在胃癌组织中高表达，可能与胃癌患者的总生存时间呈负相关；CCK-8和平板克隆形成实验结果显示，过表达MPZL1促进胃癌细胞的增殖和克隆形成能力（P<0.05）；Western blot结果显示，促凋亡蛋白Bad、Caspase-7表达水平在过表达组较对照组明显减少，在敲减组的表达水平高于对照组。结论 MPZL1在胃癌组织中高表达，且促进胃癌细胞的增殖、克隆形成能力，可能与抑制凋亡信号通路有关。     

原子力显微镜对华蟾素作用的SGC-7901细胞的凋亡研究

目的应用原子力显微镜（AFM）研究华蟾素对胃癌SGC-7901细胞的作用,在单细胞水平上分析胃癌SGC-7901细胞超微机构的变化,为进一步探讨华蟾素对胃癌SGC-7901细胞的作用机制奠定基础。方法利用原子力显微镜高分辨率、高灵敏度的特点,观察不同浓度（0、6.25、12.5、25、37.5、50ug/ml）华蟾素对胃癌细胞的作用,以及同等浓度药物作用下,随着作用时间（24h,48h,72h,96h）的延长,观察细胞超微结构的变化。同时,利用流式细胞仪对凋亡情况进行分析。结果药物作用后,细胞开始塌陷变矮。细胞表面结构的几何参数,包括高低差（Rp-v）、均方根粗糙度（Rq）、平均粗糙度（Ra）、平均高度（Meant Ht）均出现明显变化,且加药后的细胞凋亡率明显高于对照组（5.04±1.11）%。结论通过AFM观察细胞表面超微结构的变化,从纳米尺度上研究了华蟾素对胃癌细胞的作用,从另一层面增加了对胃癌细胞的认识,从而使AFM有望成为临床肿瘤诊断的一种新仪器。     

Cinobufacin Suppresses Cell Proliferation via miR-494 in BGC-823 Gastric Cancer Cells

Cinobufacin is used clinically to treat patients with many solid malignant tumors. However, the mechanismsunderlying action remain to be detailed. Our study focused on miRNAs involved in cinobufacin inhibition of GCcell proliferation. miRNA microarray analysis and real time PCR identified miR-494 as a significant cinobufacinassociatedmiRNA. In vivo, ectopic expression of miR-494 inhibited the proliferation and induced apoptosis ofBGC-823 cells on CCK-8 and flow cytometry analysis. Further study verified BAG-1 (anti-apoptosis gene) to beatarget of miR-494 by luciferase reporter assay and Western blotting. In summary, our study demonstrated thatcinobufacin may inhibit the proliferation and promote the apoptosis of BGC-823 cells. Cinobufacin-associatedmiR-494 may indirectly be involved in cell proliferation and apoptosis by targeting BAG-1, pointing to use as apotential molecular target of cinobufacin in gastric cancer therapy.