重楼克感滴丸质量标准研究

目的:建立重楼克感滴丸的质量标准。方法:采用薄层色谱方法对重楼克感滴丸中重楼和贯叶金丝桃进行鉴别。采用高效液相色谱法对金丝桃苷进行含量测定,色谱柱为Hypersil C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸(20∶80),检测波长360 nm,流速1.0 m L·min-1,柱温35℃。结果:金丝桃苷在0.198~1.98μg范围内线性关系良好(r=0.999 9)。金丝桃苷的平均加样回收率为99.84%(RSD=1.13%)。结论:所建方法简便可行,重复性好,专属性强,可用于重楼克感滴丸的质量控制。     

重楼克感滴丸成型工艺

目的:研究重楼克感滴丸的成型工艺。方法:以滴丸的溶散时限、丸重偏差和外观质量作为评价指标,在单因素试验的基础上采用正交试验法对基质组成、药粉与基质配比、药液温度和滴头滴距等进行筛选。结果:优选的最优工艺参数为PEG 4000与PEG 6000的配比为4∶1,药物细粉与基质的比例为1∶4,滴制温度85℃,滴距6 cm。滴丸的溶散时限、丸重差异和外观质量均满足要求。结论:工艺简明可行,滴丸成型性好,适宜工业化生产。     

HPLC法测定重楼克感滴丸中重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅱ的含量

目的:建立高效液相色谱法测定重楼克感滴丸中重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅱ的含量。方法:采用Kromasil C18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(42:58),检测波长为203nm,流速1.0mL/min,柱温40℃。结果:重楼皂苷Ⅰ在0.465-4.185μg范围内线性关系良好(r=0.9999),重楼皂苷Ⅱ在0.236-2.124μg范围内线性关系良好(r=0.9999)。重楼皂苷Ⅰ的平均加样回收率为99.56%(RSD=1.93%),重楼皂苷Ⅱ的平均加样回收率为99.64%(RSD=1.90%)。结论:该方法简便、快速、准确,可用于重楼克感滴丸的质量控制。     

药效学结合正交实验优选重楼克感滴丸的提取工艺

目的:对重楼克感滴丸的提取工艺进行优选。方法:在以药效指标考察处方水提和醇提工艺的基础上,以重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ总量和金丝桃苷含量为指标,采用正交试验多指标优选乙醇浓度、溶剂用量、提取时间和提取次数。结果:优选的重楼克感滴丸提取工艺为加7倍量70%乙醇,回流提取3次,每次1.5 h。结论:优选的重楼克感滴丸提取工艺稳定可行。     

重楼克感滴丸影响免疫功能及体外抑菌的实验研究

目的探讨重楼克感滴丸对小鼠免疫功能的影响,同时考察其体外抑菌作用。方法分别测试小鼠血清溶血素、淋巴细胞E花环数目和吞噬细胞功能;采用牛津杯法和双倍稀释法,测定滴丸对4种革兰阳性及3种革兰阴性细菌的药敏实验。结果滴丸可增强小鼠吞噬细胞功能及细胞免疫功能;在体外对大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌等具有抑制效应。结论滴丸可增强非特异性免疫和细胞免疫功能;并对大肠埃希菌等具有良好的体外抑菌作用。     

银翘散对流感病毒FM1感染小鼠的保护作用

目的:研究银翘散对流感病毒FM1感染小鼠的保护作用及作用机制。方法:将实验小鼠分为空白对照组、模型组、病毒唑组及银翘散大、中、小剂量组,分别观察实验小鼠行为状态、死亡率、肺指数及肺指数抑制百分率。结果:银翘散各剂量组有明显改善流感病毒FM1感染小鼠行为状态的作用;银翘散中、小剂量组与模型组比较,死亡率显著降低,表明银翘散对流感病毒FM1感染小鼠具有保护作用;银翘散大、中剂量组显著降低流感病毒FM1感染小鼠模型的肺指数,说明银翘散能显著抑制病毒在体内增殖,减轻肺部炎性病变。结论:银翘散中、小剂量组对流感病毒FM1感染小鼠具有保护作用,其作用机制可能与银翘散能显著抑制病毒在体内的增殖、减轻肺部炎性病变有关。     

克感利咽口服液对流感性肺炎小鼠免疫功能的若干调节作用

目的：探讨流感病毒感染对正常小鼠免疫器官的重量、脾组织结构和网状内皮系统吞噬功能的影响以及口服克感利咽口服液是否具有调节作用。方法：以流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠造成流感性肺炎模型,观察克感利咽口服液等药物对上述指标的影响。结果：流感病毒感染后可形成流感性肺炎,一周后,在肺指数明显增加的同时可见胸腺和脾脏指数明显减小,脾组织结构受到一定损伤,网状内皮系统吞噬功能受抑,给予中药克感利咽口服液、抗氧化酶SOD和抗氧化剂抗坏血酸后,显示明显的调节作用,可趋向或接近正常水平。结论：克感利咽口服液对流 感病毒感染小鼠受抑的免疫功能具有一定调节作用。     

痰热清注射液对流感病毒FM1感染小鼠的保护作用

目的研究痰热清注射液对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)感染小鼠的保护作用。方法观察痰热清注射液对流感病毒FM1感染小鼠的死亡保护作用,以及肺指数和肺组织病理形态学变化,同时检测肺组织匀浆中流感病毒血凝滴度。结果痰热清注射液治疗组对流感病毒FM1感染小鼠具有明显的保护作用,死亡保护率与模型组小鼠比较,差异显著(P<0.05);肺组织病理形态学观察发现,痰热清注射液治疗组肺部炎症反应较模型组有显著改善。另外,痰热清注射液对肺组织匀浆中流感病毒血凝滴度具有明显的抑制作用。结论痰热清注射液(4mL/kg)对流感病毒FM1感染小鼠具有明显的保护作用。这种保护作用与痰热清注射液在体内抑制流感病毒增殖、减轻肺部炎症反应有关。     

连花清瘟胶囊防治流感病毒FM1感染小鼠的实验研究

目的:探讨连花清瘟胶囊对流感病毒感染小鼠肺部炎性损伤的影响.方法:将小鼠随机分为正常对照组、模型组、连花清瘟低、中、高剂量组、利巴韦林组,以流感病毒甲型鼠肺适应株(FM1)滴鼻感染小鼠建立病毒性肺炎模型.观察连花清瘟胶囊对小鼠的一般情况、肺/脾脂数、肺组织炎性病理改变和病毒致小鼠死亡率的影响,并采用ELISA法检测小鼠肺组织炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的变化.结果:连花清瘟低、中剂量对流感病毒FM1株感染后的小鼠有如下作用:①肺指数均显著降低(P<0.05);②减轻肺组织炎性病变;③改善感染小鼠的临床症状,减少14 d内小鼠的死亡数,并能延长其平均存活时间(P<0.05);④能显著降低小鼠肺组织中TNF-α、IL-1β和IL-6含量(P<0.05).但实验各组小鼠脾指数无明显差异(P>0.05).结论:连花清瘟胶囊可通过调节炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达水平,平衡机体免疫状态以减轻FM1流感病毒引起的小鼠肺部炎性损伤.     

清暑解表方对流感病毒FM1感染小鼠的肺组织及肺、胸腺指数的影响

目的:研究清暑解表方对流感病毒FM1感染小鼠的肺组织及肺、胸腺指数的影响。方法:48只小鼠随机分为正常组、模型组、利巴韦林组、清暑解表方高、中、低剂量组,共6组,用流感病毒FM1滴鼻建立小鼠感染模型。观察肺组织病理变化情况,并测定肺、胸腺、脾指数。结果:与正常组比较,模型组肺指数明显升高(P0.05),胸腺指数明显降低(P0.05)。清暑解表方高剂量组能降低肺指数(P0.05),中剂量组能升高胸腺指数(P0.05),但3个剂量组对脾指数均无显著性差异(P0.05)。结论:清暑解表方能改善FM1感染小鼠的肺部病变,降低肺指数并升高胸腺指数。     

益气清瘟解毒合剂拆方对流感病毒FM_1感染小鼠血清炎性细胞因子的影响

目的:动态观察益气清瘟解毒合剂拆方辛温解表法、辛凉解表法、清热解毒法、益气法(以下简称四法)对流感病毒感染小鼠血清炎性细胞因子的影响,探讨四法在对抗流感免疫损伤及其修复方面的作用机制。方法:建立流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株FM1感染小鼠模型,采用ELISA法,在FM1感染的不同时相,动态观察四法对小鼠血清TNF-α,IL-6,IL-1,IFN-γ,IL-105种炎性细胞因子含量的影响。结果:FM1感染小鼠血清TNF-α,IL-6,IL-1,IFN-γ的含量显著增加,而IL-10的含量在感染后第1天低于正常空白组,在感染后3～7d明显高于正常组。四法中辛温解表法在FM1感染后第5天同时显著降低血清TNF-α,IL-6,IL-1的含量,并在感染后第3天及第7天,明显增加血清IL-10的含量,在一定程度上具有抑制免疫损伤的作用。辛凉解表法在FM1感染后5～7d,显著降低血清TNF-α和IL-6的含量,虽在感染后第3天,可能升高血清IL-1的含量,而在感染后第7天又明显降低IL-1的含量,同时在感染后第1～3天及第7天显著升高IL-10的含量,具有一定的抗炎性损伤的作用。清热解毒法在FM1感染后3～5d及第7天同时降低血清TNF-α,IL-6,IL-1的含量,在感染后各时相均显著升高IL-10的含量,具有较强的抑制及修复炎性损伤的作用。益气法在FM1感染后3～7d,显著降低血清TNF-α和IL-6的含量,虽在感染后第3天,可能升高血清IL-1的含量,但在感染后第7天又明显降低IL-1的含量,并且在感染后3～5d及第7天,明显增加IL-10的含量,具有一定的对抗炎性损伤的作用。辛凉解表法在FM1感染后第3天,显著增加血清IFN-γ的含量,而清热解毒法与益气法在FM1感染后1～3d及第7天明显升高血清IFN-γ的含量,具有一定的抗病毒及抑制免疫损伤的作用。结论:中药能通过纠正炎性细胞因子的失衡对抗机体的免疫损伤,并促进损伤的修复,对机体具有一定的保护作用。     

升降散对流感病毒鼠肺适应株FM1感染肺炎小鼠保护作用观察

目的:研究升降散对亚甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠的保护作用。方法:建立亚甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠肺炎模型,观察升降散全方、升降散拆方、升降散与麻黄杏仁甘草石膏汤合方对小鼠的一般状态、肺指数、肺干湿质量比、肺组织形态和肺泡Ⅱ型细胞结构变化的影响情况。结果:各用药组能减轻病毒性肺炎小鼠的全身症状,抑制体质量减轻,降低死亡率和肺指数,提升肺干湿质量比,降低肺组织病理学评分和改善肺泡Ⅱ型细胞结构的病理损伤。各项观察指标的改善,呈现出升降散组(4.55g/kg)作用优于各拆方组、合方组作用优于升降散、中药对照单方组的作用趋势。结论:升降散全方对流感病毒感染小鼠有一定保护作用,同时也能提升麻杏甘石汤的效用。     

益气清瘟解毒合剂拆方4法对流感病毒FM1 感染小鼠肺中炎性细胞因子表达的影响

目的:动态观察益气清瘟解毒合剂拆方4法(以下简称拆方4法)对流感病毒感染小鼠肺中炎性细胞因子表达的影响,探讨上述4法抗流感免疫损伤及免疫修复的机制.方法:在亚洲甲型鼠肺适应株FM1感染小鼠后的不同时相,用ELISA法检测拆方4法干预后小鼠肺中TNF-α,IL-6,IL-1,IL-10,IFN-γ的表达变化情况.结果:FM1感染小鼠肺中TNF-α,IL-6,IL-1,IFN-γ的表达均高于正常组,IL-10的表达无变化.拆方4法均在FM1感染后3～5d显著降低肺中TNF-α的表达.其中辛凉解表法、清热解毒法及益气法在FM1感染后各时相均明显增加肺中IFN-γ的表达.辛温解表法在FM1感染后1～3d及第7天显著降低肺中IL-6的表达,在3～7d降低IL-1的表达,在第3天及第7天增加IFN-γ的表达,第1天及5～7d明显增加IL-10的表达;辛凉解表法在FM1感染后各时相明显降低肺中IL-6的表达,但明显增加IL-10的表达,在感染后第3天,可能增加肺中IL-1的表达,但在感染后第7天又降低IL-1的表达;清热解毒法在FM1感染后3～7d显著降低肺中IL-6的表达,5-7d明显降低IL-1的表达,在1～5d明显增加肺中IL-10的表达;益气法在FM1感染后第1天及5～7d显著降低肺中IL-6的表达,在3～7d明显降低IL-1的表达,在第5天显著增加肺中IL-10的表达.结论:清热解毒法和益气法在FM1感染后第5天对肺组织免疫炎症损伤具有较强的对抗作用,有利于损伤的修复,而辛温解表法在感染后第3天、辛凉解表法在感染后第5天显示出一定的对抗肺组织免疫损伤的作用.     

痰热清注射液对流感病毒FM_1感染小鼠抗病毒作用的研究

目的:研究痰热清注射液对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)感染小鼠的抗病毒的作用。方法:采用流感病毒FM1制备小鼠肺感染模型,观察痰热清注射液对FM1感染小鼠肺组织病理形态变化、肺组织匀浆中流感病毒血凝滴度、T淋巴细胞的增殖功能以及肺组织匀浆中细胞因子γ干扰素(IFN-γ)的含量。结果:应用痰热清注射液治疗的FM1感染小鼠肺组织病理损伤与模型组比较,改善显著,而且还对肺组织匀浆中流感病毒血凝滴度具有明显的抑制作用。同时痰热清注射液还能显著增强FM1感染小鼠T淋巴细胞的功能,显著提高小鼠肺组织匀浆中IFN-γ含量。结论:痰热清注射液能改善流感病毒感染小鼠的肺组织病理损伤,对流感病毒FM1感染小鼠具有明显的抗病毒作用。痰热清注射液的抗病毒作用可能与其能够抑制病毒在细胞内的增殖,增强机体免疫功能有关。     

人参皂苷Rb_1减轻阿霉素诱导心肌细胞自噬的保护作用

该研究以H9c2细胞为研究对象,采用阿霉素诱导心肌细胞自噬活化,探讨人参皂苷Rb_1对阿霉素诱导心肌细胞自噬的作用。应用CCK-8法、透射电镜观察、荧光染色观察、Western blot等方法分别检测药物作用后H9c2细胞的增殖以及自噬变化。结果显示,阿霉素引起H9c2细胞活力下降,导致H9c2细胞的自噬相关结构增加、自噬标志性蛋白LC3由LC3-I转变为LC3-Ⅱ增加及p62蛋白表达降低;人参皂苷Rb_1可以减弱阿霉素引起的心肌细胞活力下降并抑制阿霉素诱导的自噬相关结构增加、LC3-I转变为LC3-Ⅱ的增加以及p62蛋白表达的降低。以上结果提示,阿霉素可引起H9c2细胞死亡并诱导细胞自噬的活化,而人参皂苷Rb_1对阿霉素诱导心肌细胞死亡具有保护作用,这种作用可能是通过调节自噬产生的。     

黄芩苷对流感病毒FM1肺炎小鼠肺损伤的保护研究

目的:研究黄芩苷对流感病毒FM1感染小鼠肺组织NO及氧化损伤的保护作用。方法:将96只ICR鼠随机分为正常对照组、模型组、利巴韦林组(100mg.kg-1.d-1),黄芩苷大剂量组(1 500mg.kg-1.d-1),黄芩苷中剂量组(750mg.kg-1.d-1)和黄芩苷小剂量组(375mg.kg-1.d-1),每组16只。用流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠,建立小鼠流感病毒性肺炎的生物模型,用不同剂量黄芩苷溶液灌胃治疗后,观察小鼠肺指数、肺组织H-E染色切片病理形态变化,比色法检测肺组织匀浆总NO合成酶(NOS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量或活性。结果:黄芩苷中、小剂量组均能明显降低肺指数,减轻肺组织病变;显著下调肺匀浆总NO合成酶、丙二醛及上调谷胱甘肽过氧化物酶含量或活性(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芩苷可通过抑制流感病毒性肺炎小鼠肺组织NO及过氧化物水平而发挥保护作用。     

滨蒿总黄酮对流感病毒PR8株感染小鼠的保护作用

目的:观察滨蒿总黄酮对流感病毒感染小鼠的保护作用并初步探讨其作用机制。方法:采用流感病毒鼠肺适应株A/PR/8/34(H1N1)滴鼻感染小鼠造成肺炎模型,观察滨蒿总黄酮对流感病毒PR8株感染小鼠的死亡率、死亡保护率、平均存活天数、生命延长率及血清中炎性细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的影响。结果:滨蒿总黄酮0.40g/kg可以明显降低流感病毒感染小鼠的死亡率,0.20、0.40g/kg可以明显延长流感病毒感染小鼠的平均存活天数;滨蒿总黄酮0.10、0.20、0.40g/kg可以显著降低流感病毒感染小鼠血清中IFN-γ、IL-6的含量,滨蒿总黄酮0.20、0.40g/kg可以显著降低小鼠血清中IL-8的含量。结论:滨蒿总黄酮对流感病毒PR8株感染小鼠具有一定的保护作用,其作用机制可能与抑制IFN-γ、IL-6和IL-8的分泌有关。     

升降散对流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠免疫功能的影响

目的:研究升降散对亚甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠免疫功能的影响。方法:建立亚甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠肺炎模型,用升降散全方、升降散拆方、升降散与麻黄杏仁甘草石膏汤合方治疗后,第5天用ELISA方法检测小鼠支气管肺泡、大小肠灌洗液中sIgA、血清中炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、IL-lra、sTNFR的含量;流式细胞仪法测定外周全血中T细胞亚群CD4~+、CD8~+的百分比和CD4~+/CD8~+值;计算胸腺指数和脾指数。结果:模型组小鼠较正常组小鼠支气管肺泡、大小肠灌洗液中sIgA含量显著降低,血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、IL-lra、sTNFR的含量显著升高,全血CD8~+的百分比增高,CD4~+百分比和CD4~+/CD8~+值下降,胸腺指数明显降低,但对脾指数无明显影响。升降散(4.55g/kg)能显著提升支气管肺泡、大小肠灌洗液中sIgA含量,降低血清IL-1βIL-6,TNF-α含量,升高IL-10、IL-lrα、sTNFR的含量、全血CD4~+百分比、CD4~+/CD8~+值及胸腺指数,升降散组对这些指标的改善作用优于拆方组而逊于合方组。结论:升降散增加黏膜分泌IgA,调控炎性因子和抗炎因子的平衡及提高T细胞亚群的比值,是其改善肺部炎症的机制之一,也是升降散治疗病毒性肺炎效用机制的初步阐明。     

人参皂苷Rg_1对D-半乳糖所致衰老小鼠海马的保护机制

目的探讨人参皂苷Rg_1对D-半乳糖(D-gal)所致衰老小鼠海马的保护机制。方法 6~8周龄雄性C57BL/6J巢蛋白(Nestin)-绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠随机分为4组,每组10只,分别为对照组、人参皂苷Rg_1对照组、人参皂苷Rg_1治疗组、模型组。衰老模型建立与给药完成后第2天,水迷宫实验检测小鼠空间学习记忆能力;取小鼠海马制备冷冻组织切片,观察海马区神经干细胞Nestin荧光强度;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法检测海马细胞衰老;酶标比色法检测海马组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)的量;ELISA检测海马组织匀浆中白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的量;蛋白印迹法检测海马组织中p53、p21蛋白表达。结果与模型组比较,人参皂苷Rg_1对照组和人参皂苷Rg_1治疗组小鼠空间学习记忆能力明显增强;海马齿状回(DG区)Nestin荧光强度增高;海马齿状回(CA3区)SA-β-gal染色阳性细胞百分比显著降低;海马组织匀浆中SOD活性与T-AOC显著增加、MDA量下降;IL-1β、IL-6和TNF-α量减少;p53、p21蛋白表达降低。结论人参皂苷Rg_1具有拮抗D-gal所致衰老小鼠海马损伤和延缓海马衰老的作用,其机制可能与抑制氧化应激及下调其下游p53-p21信号通路有关。     

蒙药古日古木-13对小鼠CCl4肝损伤模型的影响

目的:探讨古日古木复方对小鼠CCL4肝损伤模型的保护作用.方法:连续9d给予小鼠受试药物后,腹腔注射四氯化碳(CCl4)制作肝脏损伤模型,通过测定小鼠血清中ALT、AST、总蛋白、白蛋白、白球蛋白比和肝脏组织中SOD、MDA、NO等指标,以及肝脏的组织病理学检查,研究古日古木-13对小鼠CC14肝损伤模型的保护作用.结果:古日古木-13可抑制CC l4损伤后血浆中ALT和AST的异常增高,提高血清和肝脏中SOD活性,减少MDA形成,降低小鼠肝脏MDA含量,并降低肝组织的NO,升高血浆中总蛋白、白蛋白水平,减轻肝脏疏松化及脂肪变性.结论:古日古木-13具有明显的保护肝脏的作用.