自拟消斑通脉合剂对血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

[目的]观察中药复方消斑通脉合剂药物血清对体外培养的VSMCs凋亡的影响。[方法]体外培养VSMCs,取对数生长期细胞用于实验,MTT方法观察VSMCs增殖活性;流式细胞仪检测体外培养的VSMCs的凋亡率;透射电镜观察VSMCs形态变化;免疫组织化学方法检测药物血清对VSMCs中P21蛋白表达。[结果]流式法细胞仪显示药物血清可明显诱导VSMCs凋亡,与对照组比较有统计学差异(P<0.01);免疫组化结果提示药物血清可提高VSMCs中P21蛋白表达,与对照组比较有统计学差异(P<0.01)。[结论]中药复方消斑通脉合剂药物血清通过促进VSMCs中P21~(wafl/cipl)蛋白表达而达到抑制VSMCs增殖与诱导凋亡作用。     

消斑通脉合剂对血管平滑肌细胞P21表达的影响

目的：观察中药复方消斑通脉合剂药物血清对体外培养的VSMCs增殖的作用。方法：体外培养VSMCs,取对数生长期细胞用作实验,MTT法检测不同浓度药物血清对体外培养的VSMCs增殖活力,免疫组织化学方法检测各组药物血清对VSMCs中P21表达的影响。结果：MTT法显示药物血清呈剂量依赖性抑制VSMCs增值,高剂量与低剂量比较有统计学差异（P〈0.05）,免疫组化显示药物血清可明显促进VSMCs中P21表达,高剂量与低剂量比较有统计学差异（P〈0.05）。结论：中药复方消斑通脉合剂药物血清通过促进VSMCs中P21表达抑制VSMCs增殖。     

消斑通脉合剂对血管平滑肌细胞增殖和P21waf1/cip1蛋白表达的影响

目的：探讨中药复方消斑通脉合荆药物血清对血小板源性生长因子（PDGF—BB）诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖与细胞周期分布的影响及相关作用机制。方法：体外培养VSMCs,PDGF—BB刺激VsMCs,采用MTr法检测药物血清对VSMCs增殖的影响;流式细胞仪分析各组细胞周期分布情况;应用Western印迹法检测药物血清对VSMcs中P21waf1/cip1蛋白的表达变化。结果：MTT法显示药物血清呈剂量依赖性抑制VSMCs增值,高剂量与低剂量比较有显著差异（P〈0．05）;流式细胞仪分析结果显示与模型组比较,低剂量与高剂量组明显提高G0／G1期百分率（P〈0．01）、减少s期百分率（P〈0．01）,低剂量与高剂量组比较有显著差异（P〈0．05）;Western印迹法显示与模型组比较,高剂量与低剂量可明显提高VSMCs中P21waf1/cip1蛋白表达（P〈0．01）,低剂量与高剂量比较有统计学差异（P〈0．01）。结论：中药复方消斑通脉合剂药物血清通过促进VSMCs中P21waf1/cip1。蛋白表达,阻滞VsMcs细胞周期进程,起到抑制VsMcs增殖作用。     

莪术瓜蒌汤含药血清抑制PGLH7细胞增殖的实验研究

目的:探讨莪术瓜蒌汤含药血清对体外培养的PGLH7细胞增生、细胞周期和凋亡的影响.方法:不同剂量莪术瓜蒌汤含药血清处理体外培养的PGLH7细胞后,采用MTT法观察血清对细胞增殖的作用;PI染色、流式细胞仪进行细胞周期时相分析;Annexin V-FITC/PI双染色、流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:高剂量莪术瓜蒌汤血清组能明显抑制PGLH7细胞增生;流式细胞仪分析表明:中、高剂量莪术瓜蒌汤血清组处理PGLH7细胞24h、48h后,S期细胞百分率下降;细胞凋亡率上升,呈剂量依赖性.结论:本实验提示莪术瓜蒌汤含药血清可能是通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡而抑制肺癌细胞的增殖.     

莪术瓜萎汤含药血清抑制PGLH7细胞增殖的实验研究

目的：探讨莪术瓜蒌汤含药血清对体外培养的PGLH7细胞增生、细胞周期和凋亡的影响。方法：不同剂量莪术瓜蒌汤含药血清处理体外培养的PGLH7细胞后，采用MTT法观察血清对细胞增殖的作用；PI染色、流式细胞仪进行细胞周期时相分析：Annexin V—FITC／PI双染色、流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：高剂量莪术瓜蒌汤血清组能明显抑制PGLH7细胞增生；流式细胞仪分析表明：中、高剂量莪术瓜蒌汤血清组处理PGLH7细胞24h、48h后。S期细胞百分率下降；细胞凋亡率上升．呈剂量依赖性。结论：本实验提示莪术瓜蒌汤含药血清可能是通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡而抑制肺癌细胞的增殖。     

苦参碱抑制人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1体外增殖的研究

目的探讨苦参碱(matrine,MAT)对人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1体外增殖的影响。方法体外培养人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1,分组予不同浓度苦参碱作用。MTT法检测0.25、0.50、1.0 mg/mL不同浓度苦参碱对细胞增殖的抑制作用以及药物作用的量效和时效关系;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;半定量RT-PCR检测bcl-2/bax mRNA表达水平的变化。结果MTT法显示药物作用后,细胞有明显的抑制增殖作用,且呈时间依赖性和剂量依赖性;流式细胞仪检测不同浓度的苦参碱作用后PA-1细胞的凋亡率依次上升,并与作用时间正相关;细胞周期结果显示苦参碱对PA-1细胞具有明显的G_1期阻滞作用,且具有剂量依赖性。结论苦参碱能使PA-1细胞bcl-2 mRNA和bax mRNA的比值下调,产生G_1期阻滞,从而调节细胞周期,最终导致PA-1细胞在体外的增殖受到明显抑制。     

消癥丸含药血清对胶质瘤C6细胞增殖与凋亡的影响

[目的]观察消癥丸含药血清对胶质瘤C6细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用及其对Bcl-2表达的影响。[方法]运用血清药理学方法,选择不同浓度的消癥丸含药血清与胶质瘤C6细胞共同孵育,用MTT法计算增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫组织化学法检测C6细胞中的Bcl-2的表达情况。[结果]MTT法结果显示大、中剂量组消癥丸含药血清可显著抑制胶质瘤C6细胞的增殖,且呈现含药血清浓度-时间依赖性的特点。流式细胞仪检测可见各组消癥丸含药血清作用下C6细胞凋亡率呈含药血清浓度依赖性特点,大、中剂量组凋亡率较高。免疫组化学检测Bcl-2表达显示消癥丸能显著降低其表达。[结论]消癥丸可通过抑制胶质瘤细胞的增殖,降低Bcl-2表达,从而诱导肿瘤细胞凋亡,发挥其临床抗肿瘤,抑制脑瘤的作用。     

消瘕丸含药血清对胶质瘤C6细胞增殖与凋亡的影响

[目的]观察消瘕丸含药血清对胶质瘤C6细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用及其对Bcl-2表迭的影响。[方法]运用血清药理学方法，选择不同浓度的消癓丸含药血清与胶质瘤C6细胞共同孵育，用MTT法计算增殖抑制率；流式细胞仪检测细胞凋亡率；免疫组织化学法检测C6细胞中的Bcl-2的表达情况。[结果]MTT法结果显示大、中剂量组消癓丸含药血清可显著抑制胶质瘤C6细胞的增殖，且呈现含药血清浓度-时间依赖性的特点。流式细胞仪检测可见各组消癓丸含药血清作用下C6细胞凋亡率呈含药血清浓度依赖性特点，大、中剂量组凋亡率较高。免疫组化学检测Bcl-2表达显示消癓丸能显著降低其表达。[结论]消癓丸可通过抑制胶质瘤细胞的增殖，降低Bcl-2表达，从而诱导肿瘤细胞凋亡，发挥其临床抗肿瘤，抑制脑瘤的作用。     

白花蛇舌草对人喉癌细胞凋亡及增殖的影响

[目的]研究中药白花蛇舌草(Hedyotis diffusa HD)对人喉癌Hep-2细胞凋亡、周期及增殖的影响,以探讨其在喉癌肿瘤治疗方面的作用机制。[方法]分别用不同浓度的HD作用于体外培养的Hep-2细胞,MTT法检测药物对细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化。[结果]HD浓度为80mg/mL时,MTT 48h和72h细胞抑制率分别为43.80%和55.00%,与对照组比较有显著性差异(P<0.01);细胞周期结果显示随着药物浓度增加和作用时间延长,G0/G1期细胞减少,S期细胞显著性增加,细胞阻滞在S期;细胞早期凋亡率明显增加,48h和72h凋亡率分别为7.10%和19.47%,与对照组1.49%和2.75%比较结果有显著性差异(P<0.01)。[结论]HD浓度为80mg/mL时对体外培养的Hep-2细胞具有明显增殖抑制作用,使细胞阻滞在S期,并诱导细胞发生凋亡。     

肾炎灵对大鼠肾系膜细胞增殖影响的实验研究

目的:研究治疗慢性肾炎有效的中药复方肾炎灵对大鼠肾系膜细胞增殖的影响。方法:取SD大鼠肾脏进行肾系膜细胞体外培养,用肾炎灵浸膏喂服系膜增生性肾炎大鼠,将含药大鼠血清、模型组大鼠血清、正常大鼠血清加入到体外培养的大鼠系膜细胞中,应用MTT法、流式细胞仪检测方法研究肾炎灵对系膜细胞的增殖和细胞周期的影响。结果:喂服中药肾炎灵浸膏大鼠的血清与正常组、模型组大鼠血清相比,显著抑制体外培养系膜细胞的增殖,且将系膜细胞增殖阻滞在G0-G1期。结论:肾炎灵临床治疗有效的机制可能与抑制肾系膜细胞增殖有关。     

固本化痰通脉方含药血清对大鼠血管平滑肌细胞增殖及细胞周期素D1的影响

目的：观察固本化痰通脉方对大鼠血管平滑肌细胞生长增殖、细胞周期及细胞周期素D1表达的影响，以探讨其作用机制。方法：血小板源生长因子BB（PDGF-BB）刺激体外培养的大鼠血管平滑肌细胞使其快速增殖生长，加入不同浓度的固本化痰通脉方含药血清作用一定时间后，通过MTT法测定其对血管平滑肌细胞生长的抑制率，流式细胞技术测定细胞周期及细胞周期素D1的表达。结果：固本化痰通脉方能明显抑制PDGF-BB刺激的血管平滑肌细胞增殖，还以浓度依赖方式减少S期细胞、阻滞细胞于G0／G1期，并下调细胞周期素D1的表达。结论：固本化痰通脉方能抑制血管平滑肌细胞的增殖生长，阻滞细胞周期的进行，因而可能具有抗动脉粥样硬化的作用，其作用机理可能与调控血管平滑肌细胞细胞周期素D1的活性有关。     

雷公藤内酯醇对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的　探讨雷公藤内酯醇对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响及作用机制。方法　体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞 ,通过3 H -TdR掺入试验 ,观察雷公藤内酯醇对血清诱导的细胞增殖的影响 ;采用流式细胞技术 ,观察该药对细胞增殖周期的影响。结果　雷公藤内酯醇在 (0 .5～ 4 )× 10 -5g/L的浓度范围内 ,以一种剂量依赖性的方式抑制了血清诱导的VSMC增殖 ;雷公藤内酯醇可显著增加细胞周期中G0 /G1期细胞百分含量 ,减少S期细胞的百分含量 ,阻断细胞由G0 /G1期向DNA合成的S期转化 ,作用呈剂量依赖性。结论　雷公藤内酯醇可能通过影响细胞周期的转化而抑制VSMC的增殖。     

血府逐瘀胶囊、血塞通胶囊对溶血磷脂酸诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察血府逐瘀胶囊及血塞通胶囊含药血清对溶血磷脂酸（LPA）诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖效应的影响。方法采用贴块法培养大鼠主动脉VSMC并分为7组：空白血清组,血府逐瘀胶囊含药血清组,血塞通胶囊含药血清组,3组分别＋LPA组,卡托普利含药血清＋LPA组。以四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察不同含药血清对细胞增殖的影响;采用流式细胞仪分析细胞周期和DNA含量。结果空白血清＋LPA组、血府逐瘀胶囊含药血清组较空白血清组0D值升高（P〈0．05）,S期指数升高（P〈0．01）。血府逐瘀胶囊含药血清＋LPA组、血塞通胶囊含药血清＋LPA组较卡托普利含药血清＋LPA组0D值降低（P〉0．05,P〈0．01）;S期指数升高（P〈0．01,P〉0．05）。结论LPA、血府逐瘀胶囊对体外培养的VSMC有促增殖作用,血塞通胶囊无促增殖作用。血府逐瘀胶囊、血塞通胶囊对LPA诱导的VSMC增殖有拮抗作用,血塞通胶囊作用更强。其作用机制部分与抑制DNA合成、阻止细胞进入S期有关。     

2,3,4',5-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside inhibits proliferation of vascular smooth muscle cells: involvement of NO/cGMP/PKG pathway

The proliferation of vascular smooth muscle cells (VSMCs) induced by injury to the intima of arteries is an important etiologic factor in vascular proliferative disorders such as atherosclerosis and restenosis. 2,3,4',5-Tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside (TSG), an active component extracted from Polygonum multiflorum, has been found to have an antiatherosclerotic effect. The aim of this study was to investigate the effects of TSG on platelet derived growth factor (PDGF)-BB induced VSMCs proliferation and to explore the possible mechanisms of such effects. Pretreatment of VSMCs with TSG significantly inhibited PDGF-BB-induced cell proliferation in a concentration-dependent but not time-dependent manner. In addition, flow cytometry analysis of the DNA content revealed blocking of the PDGF-BB-inducible cell cycle progression by TSG. On the contrary, an inhibitory effect of TSG on VSMCs proliferation and expression of cell cycle regulators were markedly attenuated by addition of an nitric oxide (NO) synthase inhibitor, a soluble guanylate cyclase inhibitor and a cyclic GMP (cGMP)-dependent protein kinase (PKG) inhibitor: N(G)-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME), 1H-[1,2,4] oxadiazolo [4,3-α] quinoxalin-1-one (ODQ) and KT5823, respectively. It was also demonstrated that TSG enhanced NO and cGMP formation through up-regulating endothelial NO synthase expression in VSMCs. The findings indicate that TSG inhibited VSMCs proliferation induced by PDGF-BB may involve the NO/cGMP/PKG signal pathway.     

番茄红素对牛胸主动脉平滑肌细胞增殖的作用及作用机制

目的：研究番茄红素对牛胸主动脉平滑肌细胞增殖的作用及作用机制。方法：采用组织块法体外培养牛胸主动脉平滑肌细胞,以含10%小牛血清的培养基制备牛胸主动脉平滑肌细胞增殖模型。细胞分为正常组、阴性对照组、模型组及1、0.1和0.01μmol·L^-1三个不同浓度的番茄红素实验组。实验采用MTT法测定牛胸主动脉平滑肌细胞的增殖活性,采用流式细胞术测定细胞周期分布,并测定了细胞内的SOD活性和MDA含量。结果：番茄红素在三个实验浓度下都能显著抑制血管平滑肌细胞的增殖。一方面,番茄红素抑制了G1期细胞进入S期;另一方面,番茄红素在1和0.1μmol·L^-1的浓度下,能明显增强细胞中的SOD活性,同时,在三个给药浓度下,细胞内的MDA含量都显著降低。这些作用都具有浓度依赖性,并且与模型组比较均有统计学差异。结论：番茄红素对牛胸主动脉平滑肌细胞的增殖有抑制作用,并且这种抑制作用可能与它能够抑制细胞进程和它的强抗氧化性能够抑制细胞中的脂质过氧化和氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）的形成有关。它有望成为防治动脉粥样硬化的一种新的药物。     

Tanshinone: an inhibitor of proliferation of vascular smooth muscle cells

Tanshinone (Tan) is one of the active components of Radix Salvia miltiorrhiza (Lamiaceae), which is clinically used to treat cardiovascular diseases in China. The aim of this study was to estimate the effect of Tan on the proliferation of cultured vascular smooth muscle cells (VSMCs) induced by fatal bovine serum (FBS). It was shown that various concentrations of Tan inhibited the VSMCs proliferation in a dose-dependent manner. Tan significantly blocked VSMCs cell cycle in G(0)/G(1) phase. The anti-proliferative effect of Tan was associated with the inhibition of the extracellular signal-regulated kinase1/2 (ERK1/2). On the other hand, the decrement of Tan on the cyclin D1 protein may be related to the high expression of p21(waf/cip1). The data suggest that the anti-proliferative effect of Tan on VSMCs proliferation was associated with ERK1/2 signaling pathway.     

茶多酚对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的　探讨茶多酚对离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。方法　体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞 ,应用不同剂量的茶多酚作用 2 4 h后 ,采用 MTS/ PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。应用流式细胞术测定细胞周期。结果　与对照组相比 ,茶多酚对血管平滑肌细胞增殖具有明显的抑制作用 (P<0 .0 0 1)。流式细胞术检测结果表明 ,茶多酚可以使血管平滑肌细胞大部分处于 G0 / G1 期 ,与对照组相比有明显差异 (P<0 .0 5 ) ,并且可以诱导其凋亡。结论　茶多酚可明显抑制离体大鼠血管平滑肌细胞的增殖。