生长抑素对鼠大部肝切除术后肝再生的影响

目的　探讨生长抑素对肝切除术后肝再生的影响。　方法　 6 0只SD大鼠随机分为对照组及生长抑素组 ,按Higgins方法行 70 %肝切除术 ,术后给药并分批于术后 6、2 4、48、72、96h处死 ,作如下比较 :①残肝肝重 ;②增殖细胞核抗原 (PCNA)标记指数 ;③图像定量分析测量PCNA阳性产物面积。　结果　与对照组比较 ,生长抑素组残肝肝重在术后 48、72、 96h显著降低 (P <0 .0 5 ) ,PCNA标记指数、PCNA阳性产物面积在术后 2 4、48、72h显著降低 (P <0 .0 5 ) ,且以 2 4、 48h最为明显 (P <0 .0 1)。　结论　生长抑素能抑制肝再生 ,且肝再生程度越强 ,抑制效应越明显     

肝星状细胞对大鼠肝部分切除术后肝再生修复的影响

目的 探讨肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSCs）在大鼠肝部分切除术后对肝损伤修复的影响.方法 体外实验部分：将大鼠肝星状细胞（HSCs）与大鼠肝细胞系（BRL-3A）共培养,CCK-8比色法检测细胞增殖情况;ELISA法检测培养肝星状细胞上清液中细胞因子,即肝细胞生长因子（hepatic growth factor,HGF）、胰岛素样生长因子（insulin growth factor,IGF）、表皮细胞生长因子（epidermal growth factor,EGF）、转化生长因子-α（transfactor growth factor-α,TGF-α）含量.体内实验部分;将45只260 ～330 g健康雄性SD大鼠随机分为三组：正常组（生理盐水组）、对照组（肝星状细胞培养液组）、实验组（肝星状细胞培养上清液组）.各组分别于肝大部切除术后第3、7、12天取血清检测肝功能情况并计算肝再生指数;HE染色切片显微镜下观察肝脏病理结构改变情况;免疫组织化学染色法检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nucleus antigen,PCNA）、平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、甲胎蛋白（a1pha feta1 protein,AFP）及白蛋白（albumin,ALB）的表达情况.结果 ①CCK-8法检测肝星状细胞能促进肝细胞增殖（P＜0.05）;②上清液较培养液中细胞因子HGF、TGF-α含量多,差别有统计学意义（P＜ 0.05）;③实验组肝再生指数比对照组大,差别具有统计学意义（P＜0.05）;④实验组大鼠AST随着时间的推移,较对照组下降明显,差别有统计学意义（P＜0.05）;⑤实验组PCNA表达量较正常组、对照组增多,差别有统计学意义（P＜ 0.05）;⑥平滑肌肌动蛋白、白蛋白、甲胎蛋白三组间差别不显著（P＞ 0.05）.结论 ①体外肝星状细胞能促进肝细胞增殖;②肝星状细胞培养上清液能促进大鼠肝部分切除术后肝再生,其分泌的多种细胞因子在肝损伤再生修复中起了重要作用.     

门静脉营养对大鼠肝切除后肝脏再生的影响

目的 探讨门静脉营养对肝切除后肝脏再生的影响。方法 将Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只随机分为３组：Ⅰ组不手术，自由摄食；Ⅱ组６５％肝切除后用中心静脉营养治疗；Ⅲ组术后门静脉营养治疗。实验第３，６日观察肝脏再生反应。结果 Ⅲ组肝重／体重、肝脏再生率、肝细胞有丝分裂率和ＤＮＡ合成与Ⅱ组比差异有显著意义；Ⅱ，Ⅲ组术后胰岛素水平与Ⅰ组差异无显著意义，而胰高糖素水平明显升高，且Ⅲ组明显高于Ⅱ组，致使Ⅲ组胰岛素／胰高     

大鼠肝移植后肝切除-肝再生功能的探讨

目的 探讨肝移植后肝细胞的再生功能。方法 从肝左静脉根部到肝脏面的肝右叶和肝中叶交叉点进行肝切除。肝切除后定时屠杀,标本行苏木素-伊红(HE)、增殖细胞核抗原(PC-NA)染色检查。血液行动脉血酮体比(AKBR)测定、血清白蛋白测定。结果 术后第3天对照组的再生肝对残肝重量比为(2.19±0.18)倍,3、6、12个月实验组分别为(1.66±1.11、1.66±0.17、1.17±0.31)倍,与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。对照组术后 1 d的 PCNA染色阳性细胞总数达最高值(459.2±21.5)个,7 d为(35.7±7.2)个。3、6、12个月实验组术后7 d分别为(356.2±40.8)个、(341.2±17.6)个、(359.7±23.0)个,与对照组相比差异有显著性(P<0.001)。实验组第3、7天的血清白蛋白值比对照组降低。对照组术后 1、3 d的 AKBR值分别是 0.56±0.26和0.79±0.12,全部实验组的 NBR值术后显低值,3、6、12个月实验组术后 1 d的 AKBR值分别为0.33±0.12、0.31±0.12、0.30±0.05,3 d分别为 0.29±0.09、0.28±0.09、0.26±0.15,与对照组相比差异均有非常显著性(P<0.01)。结论 移植肝脏肝切除后的再生功能,比正常肝组织缓慢。肝移植后肝脏的预备能减弱,再生延缓。     

大鼠肝切除术后肝损伤程度与肝再生状态的动态对比研究

目的：探讨肝切除术后肝损伤程度与肝再生状态的关系。方法：Wistar大鼠随机分为三组：（1）假手术组；（2）正常大鼠肝切除组；（3）肝硬化大鼠肝切除组，建立大鼠肝切除模型，观察围手术期血清和肝组织匀浆液中丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平、肝重／体重、肝再生率，以及应用免疫组化方法（SABC法）检测肝组织中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果：与正常大鼠相比，肝切除后肝硬化大鼠血清ALT和AST水平升高显著，持续时间较长（P＜0．05）；PCNA在肝切除后肝组织的表达显著延迟（P＜0．05），血清ALT和AST水平与肝再生率呈显著负相关（P＜0．05）。结论：肝损伤程度和肝再生状态呈负相关，肝损伤的程度影响肝再生状态，肝切除后检测血清ALT、AST水平的变化可以间接的了解肝再生情况。     

血红素加氧酶-1对肝窦内皮细胞增殖及促肝再生表型的影响

目的研究血红素加氧酶-1(HO-1)对肝窦内皮细胞(LSECs)增殖、迁移及促肝细胞增殖作用的影响。方法雄性6～8周龄无特定病原体级C57BL/6小鼠18只, 行部分肝切除, 组织免疫荧光检测术后0、2、4 d残肝内细胞增殖及HO-1表达。以携带HO-1基因的腺病毒转染LSECs细胞系(HO-1组), 同时以空载体腺病毒转染和未转染细胞为对照。另外建立不同转染组LSECs与肝细胞系非接触共培养模型, 评价HO-1表达对肝细胞的促增殖作用。Western印迹及实时定量聚合酶链反应检测各组细胞HO-1、分化抑制因子1(Id1)、肝细胞生长因子(HGF)、Wnt2蛋白和mRNA表达水平变化, EdU法检测各组细胞增殖, Transwell迁移实验检测细胞迁移能力变化。结果相比小鼠肝切除术后0 d, 术后4 d再生肝内LSECs开始大量增殖并伴随LSECs内HO-1表达明显升高。HO-1组LSECs的EdU阳性率(27.20±4.80)%高于空载体组(12.47±3.30)%和未转染对照组(15.97±2.50)%, HO-1组LSECs迁移数量(258.70±36.56)个高于空载体组(12...     

增殖细胞核抗原在判断肝再生中的作用及奥美拉唑的促肝再生作用

目的　研究增殖细胞核抗原 (PCNA)计数在判断肝组织再生过程中的作用以及质子泵抑制剂奥美拉唑在肝部分切除术中对肝再生的促进作用。方法　取成年SD大鼠 5 0只 ,制备成肝硬化模型 ,随机分为对照组及处理组 ,全身麻醉下行 70 %肝切除术 ,术后按组给予生理盐水 1ml/kg·d及奥美拉唑 0 2mg/kg·d皮下注射共 1周。 1周后每组取 8只大鼠抽取静脉血样、取下肝脏称重 ,并制备肝组织光学显微镜、电子显微镜及PCNA染色标本。两周后 ,余下 6只大鼠同样处理。结果　在治疗 1周后 ,奥美拉唑组血清胃泌素水平为 (415± 2 2 )ng/L ,而治疗前为 (312± 7)ng/L ;而对照组治疗前后差异有显著意义 (P <0 0 5 )。在 1周后 ,奥美拉唑组的再生肝相对肝重量为 (6 4± 7) % ,对照组为(5 5± 6 ) % (P <0 0 5 )。治疗 2周后 ,奥美拉唑组的再生肝相对肝重量 (RLW)为 (6 9± 6 ) % ,对照组为(6 2± 5 ) % ,同样差异有显著意义 (P <0 0 5 )。肝细胞有丝分裂指数 (MI)在奥美拉唑组与对照组分别为 (2 0± 0 3) %及 (1 1± 0 2 ) %。PCNA阳性计数奥美拉唑组及对照组分别为 9 2 %及 4 1%(P <0 0 5 )。结论　PCNA在判断肝再生时与RLW及MI等指标一致 ,奥美拉唑可促进肝硬化肝部分切除术后肝脏的再生。     

短时间缺血诱导亚铁血红素氧化酶-1对大鼠80%肝切除的影响

目的：观察短时间缺血对大鼠80％肝切除术后肝功能的影响，并对其作用机制进行探讨。方法：12只大鼠分成两组，缺血组肝右叶缺血15min,24h后行缺血肝叶亚铁血红素氧化酶－1免疫组化染色和ATP酶活性测定，同时行肝左叶和尾状叶切除，观察肝切除前，肝切除后1d,2d,3d和第5d肝功能指标GOT，GPT和LDH变化，第5d测定肝再生指数。结果：缺血组缺血后24h，肝细胞亚铁血红素氧化酶－1染色强阳性，并由中央小静脉周围向汇管区逐渐减弱，两组肝ATP酶活性无差异；80％肝切除后第5d,缺血组血清GOT，GPT和LDH明显低于对照组（P＜0．05），肝功能恢复较对照组快，两组肝再生指数无明显差异（P＞0．05），结论：肝缺血15min后24h，肝细胞亚铁血红素氧化酶－1被大量诱导产生，短时间缺血可以改善肝切除术后肝功能，缺血组肝切除术后肝功能的迅速改善可能与亚铁血红素氧化酶－1的诱生有关。     

Effects of TVE application during 70% hepatectomy on regeneration capacity of rats

BACKGROUND: For adequate control of excess bleeding during liver resection, total vascular exclusion (TVE) is preferred by surgeons, especially when the tumor is located in the posterior liver lobes or near the cava. To the authors' knowledge, the effects of TVE technique on the postoperative liver regeneration process have not thus far been evaluated yet in the literature. This study was planned to compare the effects of liver resections performed either with portal pedicle clamping or with TVE on the regeneration process. MATERIALS AND METHODS: Seventy percent hepatectomy was performed with portal pedicle clamping (n=10, Group A) or with TVE (n=10, Group B) in rats. At 48 h after resection, sampling was performed for the measurement of serum transaminase, alkaline phosphatase (ALP), tissue malondialdehyde (MDA), and glutathione (GSH) levels. Liver regeneration rate, proliferating cell nuclear antigen (PCNA) labeling, and mitotic indices were also evaluated. RESULTS: Liver injury determinants (serum transaminases, ALP, and tissue MDA levels) were found significantly higher in group B than in group A. Liver regeneration rate, liver GSH levels, PCNA labeling index, and mitotic index were significantly lower in group B than in group A. CONCLUSIONS: The injury during TVE seems to be greater than during resection with portal pedicle clamping. The negative effect of this oxidative damage may influence the regenerative capacity of the remnant liver tissue.     

rhALR在大鼠部分肝移植术后肝再生中的作用及其机制研究

目的 探讨大鼠部分肝移植术后腹腔注射重组人肝再生增强因子(recombinant human augmenter ofliver regeneration,rhALR)促进肝移植术后肝细胞再生的作用及其机制.方法 建立大鼠原位60% 肝脏移植模型,部分肝移植术后腹腔注射rhALR 40 μg/kg 2 次/d(实验组,对照组注射等体积的注射用水);取术后第1、2、3、5、7 天大鼠血清及肝组织,检测血清谷丙转氨酶(ALT),测定肝细胞PCNA LI 的变化,RT-PCR 检测肝组织IL-6 mRNA Cyclin-D1 mRNA 的表达.结果 实验组(A 组)与对照组(B 组)比较,术后第1、2 天A 组血清ALT 显著低于B 组.A 组术后第1、2、3、5 天的PCNA LI 均明显高于B 组同一时点的PCNA LI(P<0.05).A 组术后第2 天的肝细胞AI 明显低于B 组同一时点的肝细胞AI(P<0.05);A 组术后肝组织IL-6 mRNA 的表达与B 组在各观察时点间比较均无统计学差异(P>0.05);A 组术后第1 天肝组织Cyclin D1 mRNA 的表达明显高于B 组同时点的表达(P<0.05),其余观察时点无明显差异.结论 大鼠部分肝移植术后应用rhALR 可以明显促进肝细胞的再生,降低血清ALT,稳定肝细胞膜,保护肝细胞功能.rhALR 促进大鼠部分肝移植术后的肝再生可能并不是通过上调启动阶段重要因子IL-6 mRNA 的表达发挥作用,而是通过上调增殖阶段重要因子CyclinD1mRNA 的表达发挥作用.     

Increased intraabdominal pressure impairs liver regeneration after partial hepatectomy in rats

BACKGROUND: There are many experimental studies showing that increased intraabdominal pressure (IAP) reduces liver blood flow, leading to ischemia and portal venous congestion. But, there is no study evaluating the effect of increased IAP on liver regeneration. It is well known that acute liver ischemia and portal venous congestion impair liver regeneration. We, therefore, aimed to determine the effect of increased IAP on liver regeneration in this study. METHODS: Sprague-Dawley rats underwent partial hepatectomy with or without IAP of 12-14 mm Hg for 24 h or sham operation. Rats were randomly divided into six groups: two sham-operated groups, two hepatectomy groups, and two hepatectomy with increased IAP groups. Mitotic index, proliferating cell nuclear antigen (PCNA)-labeling index, and liver regeneration rate as liver regeneration parameters were studied on day 1 or on day 4 after operation. Additionally, serum aspartate transaminase (AST) level and histopathological changes in intestinal mucosa were studied. RESULTS: Hepatectomy with/without increased IAP groups had significantly higher serum AST levels than the sham-operated group on day 1. Serum AST level was found to be significantly higher in the hepatectomy with increased IAP group than in the other groups on day 4. Intestinal mucosal injury was found in the hepatectomy with increased IAP groups on days 1 and 4. Mitotic index and PCNA-labeling index were markedly higher in all hepatectomy with/without increased IAP groups than in the sham-operated groups. However, together with liver regeneration rate, both indices were significantly less in the hepatectomy with increased IAP groups than in the hepatectomy groups both on day 1 and on day 4. CONCLUSION: Maintenance of IAP between 12 and 14 mm Hg for 24 h impaired liver regeneration after partial hepatectomy in rats.     

肝脏类器官构建及其对小鼠部分肝切除术后肝再生的作用#br#

目的 观察肝脏类器官对小鼠部分肝切除术后肝再生的作用。方法 体外构建肝脏类器官,通过形态学、PCR和免疫荧光对类器官进行初步鉴定。C57BL/6小鼠随机等分为对照组和治疗组,每组18只。对照组进行肝左叶、中叶切除术+肝包膜注射200 μL PBS;治疗组进行肝左叶、中叶切除术+肝包膜移植200 μL类器官悬液。建模成功后分别于术后第1、4、7天收集标本。通过血清生化检测、免疫组化和Western blotting评估肝脏类器官对小鼠肝部分切除术后肝再生的作用。结果 类器官体外培养3 d,从直径20 μm的囊性结构扩增到约125 μm的细胞团（P＜0.05）,直径扩增近6 倍。肝脏干细胞标志基因EPCAM、SOX9和CK19明显上调（P＜0.05）,传代前后基因保持稳定。免疫荧光显示CK8、Desmin、AFP和PCNA呈阳性。HE显示术后第4天,治疗组肝细胞形态大小基本恢复正常,形态较清晰,无炎症细胞浸润,无脂肪或气球样变。对照组小鼠肝细胞核仁染色加深,仍有炎性细胞浸润,部分区域存在肝细胞坏死区。免疫组化Ki67和Western blotting对增殖水平进行检测,结果显示治疗组增殖能力是对照组的3 倍。肝功能检测发现治疗组在术后第4天ALT、AST、TBIL和DBIL明显下降,ALB合成增加（P＜0.05）。结论 具有肝脏干细胞属性和增殖能力的肝脏类器官,能通过保护肝细胞、改善部分肝切除术后小鼠肝功能,发挥促进肝再生作用。     

异甘草酸镁对肝硬化大鼠肝部分切除术后肝功能及肝再生的影响

目的 研究异甘草酸镁对肝硬化大鼠部分肝切除术后肝功能和肝再生的影响.方法 45只肝硬化Wistar大鼠行2/3肝部分切除,并随机分为对照组(A组)、治疗组(B组)、术前3 d治疗组(C组).手术当天起,B组给予腹腔注射异甘草酸镁(60mg·kg-1·d-1),A组给予同等剂量生理盐水,C组在手术前3 d即给药(60 mg·kg-1·d-1).各组大鼠分别于术后1、2、7 d处死,检测肝功、血清肝细胞生长因子(HGF)及磷脂酶A2(PLA2)、5-溴脱氧尿苷(BrdU)标记指数、肝再生率.结果 A组在术后第1天,BrdU标记指数及HGF均低于C组(分别t=2.831,3.427,均P＜0.05),而PLA2高于B、C组(分别t=2.794,2.902,均P＜0.05);在术后第2天A组BrdU标记指数均低于B、C组(分别t=2.736,3.083,均P＜0.05),HGF水平与其他两组比较,差异均无统计学意义,PLA2仍高于B、C组(分别t=2.794,2.902,均P＜0.05);A组术后第1、2天ALT、AST、TP水平及肝再生率与B、C组比较,差异均无统计学意义;术后第7天A组AST高于其他两组(A组与B组比较t=4.508,P＜0.05;A组与C组比较t=2.967,P＜0.05),TP水平及肝再生率则均低于B、C组(TP:A组与B组比较t=2.838,P＜0.05;A组与C组比较t=2.743,P＜0.05);肝再生率:(A组与B组比较t=3.316,P＜0.05;A组与C组比较t=4.093,P＜0.05),而BrdU标记指数、HGF、PLA2三组间比较,差异均无统计学意义.B组术后第1天BrdU标记指数及HGF均低于C组(t=2.831,P＜0.05;t=2.836,P＜0.05).结论 异甘草酸镁可降低肝硬化大鼠部分肝切除术后转氨酶水平,改善肝脏功能,促进肝细胞增生.     

VEGF is important for early liver regeneration after partial hepatectomy

BACKGROUND: The aim of the study was to determine the role of Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) on the microvasculature and on angiogenetic gene expression after partial hepatectomy (PH) in the rat model. METHODS: To determine the effect of exogenous and endogenous VEGF after PH, rats were subjected to 70% PH and treated either with VEGF, anti-VEGF or NaCl. Postoperatively (3-168 h), vessel density (VD), vessel diameter (VDi), and intersinusoidal space, liver body weight ratio (LBR), hepatic proliferation and biochemical markers were assessed. To further elucidate the underlying molecular mechanisms hepatic gene expression was determined by customized cDNA arrays and quantitative RT-PCR. RESULTS: In the VEGF group, VD, VDi, and LBR were significantly increased compared with anti-VEGF or controls. Blockage of endogenous VEGF led to a marked increase of biochemical markers. Anti-VEGF almost completely suppressed and VEGF markedly enhanced hepatic proliferation in the first 24 h after surgery. This was associated with a modulation of cell cycle control genes (PC4, Gadd45a, Tis21/BTG2), v-jun, and CD14 by VEGF. CONCLUSIONS: VEGF plays an important role in liver regeneration and this may be due in part through its effects on neovascularization. Whether it may, when given therapeutically, represent a strategy to optimize liver regeneration in problematic patients needs to be clarified.