叠氮钠对ELISA的影响

在抗原、抗体和酶标记抗体中加入不同量的叠氮钠（ＮａＮ３），用不加ＮａＮ３的组作对照，观察ＮａＮ３在酶标记免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）中的影响，用斜率比值法计算相对抑制率，经两标本直线回归方程比较，用ｔ检验，结果证明ＮａＮ３对酶标记抗体的抑制作用最强，含０．０２％ＮａＮ３的酶标记抗体即丧失４７．９％的活性（Ｐ＜０．０１）；其次是对抗原的抑制作用，含０．１％ＮａＮ３时抗原活性被抑制１８．３％（０．０５     

叠氮钠对心肌细胞活力影响的研究

目的：观察叠氮钠对原代培养大鼠心肌细胞活力的影响。方法：研究不同浓度叠氮钠在不同时间内对原代培养的大鼠心肌细胞活力的影响。结果：叠氮钠对心肌细胞活力的抑制作用随浓度增加以及作用时间延长明显增加。1mmol／L叠氮钠孵育细胞3h，细胞发生可逆的早期凋亡，大于6h，细胞发生不可逆的死亡。结论：低剂量叠氮钠可诱导原代培养的大鼠心肌细胞发生可逆的早期凋亡。     

微泵恒速灌注叠氮钠对大鼠学习记忆的影响

目的　利用线粒体细胞色素C氧化酶抑制剂叠氮钠，观察其对模型大鼠学习记忆能力的影响。方法　SD大鼠皮下埋植Alzet微泵，连续恒速给予叠氮钠共30天，给药1mg.kg     

微泵恒速灌注叠氮钠对大鼠学习记忆的影响

目的　利用线粒体细胞色素C氧化酶抑制剂叠氮钠,观察其对模型大鼠学习记忆能力的影响。方法　SD大鼠皮下埋植Alzet微泵,连续恒速给予叠氮钠共30天,给药1mg.kg-1.h-1 和2mg.kg-1.h-1两个剂量组。Morris水迷宫、避暗实验检测动物学习记忆能力,旷场分析检测空间探索能力及兴奋性,攀网实验检测肌力。结果　微泵恒速灌注叠氮钠导致模型大鼠水迷宫游出时间及距离延长、错误次数增加,避暗潜伏期缩短、错误次数增加,旷场分析中对外界的空间探索能力、适应性及兴奋性均降低,但肌力无明显异常。结论　线粒体细胞色素C氧化酶活性下降可以导致动物学习记忆能力下降,微泵恒速灌注叠氮钠大鼠可作为一种拟痴呆模型,应用于发病机理及药理学等方面的研究。     

PAP─ELISA法测定乙型肝炎病毒X基因

ＰＡＰ┐ＥＬＩＳＡ法测定乙型肝炎病毒Ｘ基因冯志华周永兴姚志强李光玉焦建中（第四军医大学唐都医院传染科西安７１００３８）关键词乙肝病毒Ｘ抗原ＥＬＩＳＡ辣根过氧化物酶抗体测定中图号Ｒ５１２．６我们用乙型肝炎病毒Ｘ基因抗体（ＨＢｘＡｂ）和辣根过氧化物酶抗体...     

单态氧猝灭剂叠氮钠治疗角膜碱烧伤实验研究

为研究叠氮钠对角膜碱烧伤的治疗作用,在家兔的角膜碱烧伤模型中,用1 g/L NaN3及10 g/L NaN3+100g/L枸橼酸钠滴眼剂治疗.同时用硫代巴比妥酸(TBA)反应法检测过氧化脂质(LPO),用组织培养人角膜上皮细胞检测NaN3毒性,发现角膜烧伤后LPO逐渐减少.治疗组病情较轻,且NaN3毒性低,认为角膜碱烧伤后,用NaN3治疗有一定效果.     

血清HBV标志的ELISA技术的建立与发展

本文介绍本室10年来在检测血清乙型肝炎病毒(HBV)标志的ELISA技术的建立与发展。对HBV的3个抗原抗体系统的检测,主要的研究发展方向是:建立与应用单克隆抗体作为试剂材料;改进与发展一步培育法ELISA技术原理;更新底物的应用。应用情况表明,这整套ELISA检测技术是可行的,达到了预期的目的,符合当前我国的实际需要,能够在各级医疗,预防与研究机构推广应用。     

叠氮钠对SH—SY5Y人神经母细胞瘤细胞线粒体跨膜电位 …

目的 观察线粒体呼吸链复合体ＩＶ（即细胞色素Ｃ氧化酶）抑制剂叠氮钠（ＮａＮ３）对人神经母细胞瘤细胞能量代身的影响,探讨线粒体缺陷在神经退行性疾病发病中的作用。方法 将叠氮钠与培养的人神经母细胞瘤细胞系ＳＨ－ＳＹ５Ｙ细胞共同孵育,用微测量法测定线粒体复合体ＩＶ活性,噻唑兰（ＭＴＴ）法测定细胞存活率,激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测线粒体跨膜电位变化。结果 １６￣６４ｍｍｏｌ／Ｌ叠氮钠与培养的ＳＨ－Ｓ     

荧光定量PCR测定HCV RNA对分片段ELISA法检测抗HCV可疑样本的分析

目的利用荧光定量PCR法对分片段检测抗HCV的可疑样品进行检测，确认可疑样本的结果。方法采用分片段检测法对ELISA法检测抗HCV总抗体阳性或可疑阳性的275份样本进行检测，并对其中26份可疑阳性（只有一项阳性）的样本．采用荧光定量PCR法来进行HCVRNA确认分析。结果荧光定量PCR阳性率为26．9％（7／26），7例阳性样本的分片段结果均为NS3及C片段阳性，其含量与HCVRNA含量一致。结论对于NS3及C片段阳性的结果，在条件允许下，应利用PCR法或进口试剂进行确认。而对于单片段阳性而HCVRNA阴性的结果，也不能否定HCV感染，应结合流行病学及临床表现给予确认．     

抗精子抗体ELISA检测法及其应用

建立了用精子可溶性抗原包被的ELISA法,检测了100例处女血清,均为阴性,17例有生育能力者和1000例不育患者血清的阳性率分别为5.9％和22％,抗体检出率符合国外多数学者的结果。重复性试验定性符合率达97％。表明用该法检测抗精子抗体具有敏感、特异、稳定等特点,可获较为满意的结果。     

单克隆抗体双夹心ELISA检测血吸虫循环抗原对抗血吸虫药疗效考核的价值

应用日本血吸虫抗３１／３２ｋＤ（１Ｄ＝０．９９２１ｕ）单克隆抗体双夹心酶联免疫吸附试验（双夹心ＥＬＩＳＡ）检测血吸虫循环抗原，用于城市急性血吸虫病经吡喹酮治疗５年后无再次感染患者的疗效考核，阳性率为１２．２０％。与快速法ＥＬＩＳＡ检测循环抗原的符合率为９６．３４％。与常用检测抗体的ＩＨＡ、ＥＬＩＳＡ法平行对照，阳性率基本一致。与改进的粪便孵化法比较，两法的符合率为８５．３６％。无疫水接触史健康人未见阳性反应。对肝病患者无交叉反应。结果显示双夹心ＥＬＩＳＡ法检测循环抗原敏感性高，特异性强，具有良好的抗血吸虫药物疗效考核价值。     

基于酶促反应动力学的无标准品ELISA抗体滴度定量方法

目的 建立无标准品的酶联免疫吸附测定(ELISA)抗体滴度定量方法.方法 对血清抗体ELISA检测设置非特异、阴性对照、特异和总抗体检测组.显色早期的时间-吸光度数据经线性拟合的斜率即吸光度变化速度 ,分别记为ν0 、νC 、νS 、νT .基于底物过量时ν值与待测抗体浓度(C)呈直线关系 ,设计ν值函数计算待测样本与阴性对照样本的抗体浓度倍比.以鱼胶原蛋白免疫昆明小鼠的血清特异Ig G抗体检测进行实例分析.结果 函数C/CC = (ν-ν0 )/(νC -ν0 )可计算待测样本与阴性对照样本的特异抗体浓度倍比(滴度).结论 该动力学ELISA抗体滴度检测方法适用于无标准品半定量分析.     

亚硒酸钠对树突状细胞体外增强CTL杀伤K562细胞作用的研究

目的探讨经亚硒酸钠(Na2SeO3,Se)处理、K562细胞裂解物(又称为抗原细胞裂解物:ACL)冲击致敏的外周血单个核细胞(PBMNC)衍生的树突状细胞(DCs)体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤白血病细胞的能力。方法1)DCs培养:用含3种细胞因子重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素-4(rhIL-4)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的RPMI-1640(10%FBS)培养体系,培养健康人的PBMNC 4d,收获贴壁细胞;2)DCs分4组:Ⅰ组:单独DC培养组;Ⅱ组:加入0.5μmol/LSe的DC组;Ⅲ组:加入ACL的DC组;Ⅳ组:同时加入0.5μmol/LSe和ACL的DC组;3)效应细胞-CTL的诱导培养:用含细胞因子IL-2的1640(10%FBS)培养体系,将非贴壁细胞(淋巴细胞)作为效应细胞,单独或与各组DC共同孵育5d;4)CTL活性测定:用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验,靶细胞为K562细胞。结果效应细胞与K562细胞按不同效靶比混合培养时,DC-Ⅳ组、Ⅲ组及Ⅱ组刺激后的T细胞比DC-Ⅰ组刺激后的T细胞及单纯T细胞对K562细胞的杀伤作用更显著,杀伤率随效靶比的增加而增加。其中E∶T=25∶1时,T细胞组及T-DC-Ⅰ、T-DC-Ⅱ、T-DC-Ⅲ、T-DC-Ⅳ组对K562细胞的杀伤率分别为:5.9%±2.4%、15.3%±2.3%、26.3%±3.7%、28.2%±4.5%、36.2%±3.7%。T-DC-Ⅳ组杀伤活性高于其他各组(P值均<0.01)。结论用含GM-CSF、IL-4和TNF-α的体外培养体系可从健康人PBMNC获得成熟的DCs,小剂量亚硒酸钠和K562细胞裂解液负载均可诱导出特异性杀伤靶细胞的CTL,且两者具有协同作用。     

电化学发光与酶免疫分析检测HBsAg的比较

目的: 比较电化学发光(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg的结果。方法: 选择HBsAg阳性标准品和99例4种模式样本[①HBsAg(+)/HBeAg(+)/HBcAb(+);②HBsAg(+)/HBeAb(+)/HBcAb(+);③HBsAg(+)/HBcAb(+);④HBeAg(+) HBcAb(+)],分别采用ECLIA和ELISA一步法、二步法检测HBsAg。结果: ECLIA的日内CV比ELISA一步法、二步法分别提高3.3%和3.2%,日间CV分别提高3.5%和3.3%,敏感度各为0.063、0.5和0.25ng/ml。①②③模式3种方法HBsAg100%阳性率。④模式2例ECLIA1:50稀释和ELISA二步法为阳性,而ECLIA原倍和ELISA一步法为阴性。①模式1:50稀释后的HBsAgCOI值比原倍血清高。结论: ELISA一步法检测HBsAg,简便快速,标本的含量较低或浓度过高可出现假阴性。为避免一步法Hook效应造成的假阴性,可采用经典的两步法。ECLIA灵敏度高,但也存在Hook效应,必要时应稀释标本进行检测或进行中和确证试验。     

竞争性ELISA方法检测小鼠血清中的P53蛋白

目的建立动物组织内P53蛋白的免疫检测分析方法,为P53生物药物的代谢分布研究提供检测手段.方法辣根过氧化物酶(HRP)标记抗P53蛋白单克隆抗体3P40,应用标记后的抗体及重组P53蛋白的检测,建立竞争性ELISA检测方法;应用此方法建立血清样品中P53蛋白标准曲线,测定腹腔注射P53后不同时间小鼠血清中P53浓度....     

日本血吸虫成虫表皮膜蛋白的研究——Ⅲ.ELISA法在疗效考核中的价值

用吡喹酮(100mg/kg)治疗感染日本血吸虫42d后的家兔,1周后用相同剂量的吡喹酮重复治疗1次。用成虫表皮膜抗原-酶联免疫吸附试验(TA-ELISA)和虫卵可溶性抗原-酶联免疫吸附试验(SEA-ELISA)分别检测治愈后的家兔血清中特异性IgG下降水平。结果发现家兔血清中抗TA的特异性IgG在治愈后5个月降至正常水平(OD 492nm<0.2),而抗SEA的特异性IgG仍维持在一个较高的水平(ODx=0.57),二者相比,差异有显著性意义,提示疗效考核时,TA-ELISA法优于SEA-ELISA法。     

酶联法测定脑脊液白血病相关抗原CD9及其应用

应用酶联免疫吸附技术（ＥＬＩＳＡ），建立了脑脊液白血病细胞相关抗原ＣＤ９检测方法，并对白血病患儿脑脊液ＣＤ９含量进行了初步测定。结果表明：ＣＤ９（＋）白血病患儿发生中枢神经系统白血病（ｃｅｎｔｒａｌｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｒｎｌｅｕｋｅｍｉａ，ＣＮＳＬ）时脑脊液ＣＤ９含量明显升高，其含量变化有助于临床疗效监测。初步随访结果表明：脑脊液白血病相关抗原检测能早期特异诊断ＣＮＳＬ敏感性优于常规检测方法。     

快速抑制性ELISA法检测人血清抗dsDNA抗体及其临床意义

应用一种快速改良ＥＬＩＳＡ法检测２４４例人血清抗ｄｓＤＮＡ抗体（包括ＩｇＧ、ＩｇＡ及ＩｇＭ类）。结果示，本法特异性及阳性率优于目前常规ＥＬＩＳＡ法及间接免疫荧光法。ＳＬＥ患者血清中抗ｄｓＤＮＡ抗体阳性率为８６．２％（１１２／１３０），活动期ＳＬＥ患者阳性率为９４．７％（５４／５７）。抗上ＤＮＡ抗体主要见于ＳＬＥ（占９５．０％），也见于ＤＬＥ、ＳＣＬＥ、ＲＤ及ＭＣＴＤ患者血清中。８９例非ＣＴＤ的其它患者或健康人中有３例假阳性。本法优，久之一是避免了抗ｓｓＤＮＡ或ＲＮＡ抗体影响，结果更为准确，阳性率大为提高，有利于ＳＬＥ诊断及疗效判断。