组织因子途径抑制物-2影响人前列腺癌细胞凋亡的实验研究

目的：将人组织因子途径抑制物-2（TFPF2）基因转染人人前列腺癌细胞株PC3M，探讨TFPb2对PC3M凋亡的影响。方法：应用脂质体介导的基因转移技术将人TFPF2基因真核表达载体pBos—Cite-neo／TFPI2导人人前列腺癌细胞株PC3M中，并分别通过RT-PCR和Western blot技术检测TFPb2在人前列腺癌细胞中的表达，然后采用AnnexinV／PI法，通过流式细胞仪分别对稳定转染的PC3M—TFPI-2组细胞和未转染的PC3M组细胞进行双参数分析，检测两组细胞的凋亡情况。结果：转染成功的PC3M-TFPb2组细胞中证实有TFPF2mRNA和相应蛋白质的表达，转染TFPF2的PC3M—TFPI-2组细胞有部分发生凋亡，凋亡率为25．17％，而未转染TFPI-2的PC3M组细胞仅有极小部分发生了凋亡，其凋亡率为4．13％。结论：人TFPb2基因真核表达载体成功转染人PC3M并可以在PC3M中得到表达，TFPF2表达可以促进人前列腺癌细胞发生凋亡，这可为将来前列腺癌的基因治疗提供一个新的靶向。     

重组组织因子途径抑制物-2对人胰腺癌细胞体外侵袭能力的影响

我们通过脂质体法将组织因子途径抑制物-2（TFPI-2）基因转染人胰腺癌细胞株Pane-1，观察其对胰腺癌细胞体外侵袭、转移能力的影响。     

组织因子途径抑制物2在肿瘤发生转移和侵袭中的作用

细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)降解是肿瘤发生浸润转移过程中的关键一步,肿瘤细胞分泌的多种丝氨酸蛋白酶包括基质金属蛋白酶(matrixmetallopoteinases,MMPs)参与细胞外ECM降解。组织因子途径抑制物2(tissuefactorpathwayinhibitor-2,TFPI-2)是一种具有32000丝氨酸蛋白酶抑制物,可抑制包括纤溶酶、胰蛋白酶、MMPs在内的多种蛋白酶。越来越多的研究表明,TFPI-2通过降解MMPs等抑制肿瘤转移、降低肿瘤的侵袭转移能力。TFPI-2在抑制肿瘤细胞迁徙及浸润转移过程中发挥重要作用,可作为一种潜在的基因治疗靶点。     

组织因子途径抑制物2基因对Panc-1细胞裸鼠成瘤及转移的影响

目的观察组织因子途径抑制物2（TFPI-2）对胰腺癌细胞系Pane-1细胞裸鼠成瘤及转移的影响。方法将Pane-1-TFPI-2细胞接种到裸鼠皮下作为实验组，观察肿瘤生长情况并测量其大小；取皮下新生肿瘤组织进行原位胰腺接种，观察其对周围组织浸润及远处转移能力的影响。同时以Pane-1-V和Pane-1-P细胞作为对照组。结果实验组和对照组裸鼠皮下均成瘤，但实验组肿瘤体积小于对照组，分别为（438．0±69．8）、（852．0±102．9）和（831．0±78．1）mm’，差异有统计学意义（P〈0．05）。原位胰腺接种，对照组移植瘤浸润胰腺组织，有肝、肺、淋巴结及腹膜转移灶形成，免疫染色显示转移灶CEA阳性，证实其为胰腺肿瘤转移而来。实验组移植瘤包膜完整，无明显浸润及转移现象。结论TFPI-2能抑制肿瘤细胞生长、周围组织浸润及远处转移，为胰腺癌的基因治疗奠定了实验基础。     

组织因子途径抑制物-2在肾癌组织中的表达及甲基化

目的 探讨组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)对肾癌侵袭性及细胞凋亡的影响,TFPI-2在肾癌组织中的表达与基因启动子甲基化关系.方法 免疫组织化学、蛋白质印迹、荧光定量RT-PCR检测37例肾癌及11例正常肾脏组织TFPI-2基因表达;TUNEL法检测细胞凋亡;荧光定量甲基化特异性PCR检测TFPI-2基因启动子甲基化.结果肾癌与正常肾脏组TFPI-2蛋白质印迹条带吸光度(A)值分别为0.92±0.36、1.61±0.13;2组TFPI-2 mRNA相对表达量为0.0019±0.0011、0.0065±0.0008.随肾癌分期增加,TFPI-2表达下降.肾癌TFPI-2表达1～4级细胞凋亡指数分别为2.41%、3.90%、6.78%、9.57%.随TFPI-2表达增加,肾癌细胞凋亡指数上升.肾癌TFPI-2基因启动子甲基化阳性组与阴性组TFPI-2 mRNA相对表达量分别为0.0015±0.0011、0.0024±0.0009,2组蛋白质印迹条带A值为0.82±0.35、1.04±0.34.基因启动子甲基化阳性组TFPI-2表达低于阴性组.结论 肾癌TFPI-2基因表达与侵袭性呈负相关,促进细胞凋亡;启动子高甲基化是肾癌TFPI-2基因低表达机制之一.     

组织因子途径抑制物2抑制胰腺癌血管生成的研究

目的研究组织因子途径抑制物2（TFPI-2）对胰腺癌血管生成的影响，探讨其抑制胰腺癌生长及侵袭、转移的机制。方法建立裸鼠角膜微囊移植模型，将3组细胞Pane-1TFPI-2、Pane-1-P和Pane-1-V分别接种裸鼠角膜微囊，观察角膜新生血管的形成；再将上述3组细胞接种于裸鼠皮下，观察裸鼠皮下肿瘤生长及转移情况，并采用抗CD34抗体进行血管免疫组织化学染色检测皮下肿瘤的微血管密度（MVD）。Pane-1-TFPI-2组为实验组，Panc-1-P和Pane-1-V组作为对照组。结果实验组角膜新生血管积分比对照组明显减少（P〈0．05），实验组和对照组裸鼠皮下均成瘤，实验组肿瘤体积（438．0±69．8）mm^3，对照组分别为（852．0±102．9）mm^3和（831．0±78．1）mm^3（P〈0．05）；同对照组比较，实验组未见明显远处转移，其肿瘤微血管密度（9．68±1．12），对照组分别为（18．69±2．51）和（20．32±2．08），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论组织因子途径抑制物2能抑制肿瘤血管的形成，抑制胰腺癌生长。     

组织因子、组织因子途径抑制物与肾脏病

组织因子(TF)及组织因子途径抑制物(TFPI)是外源性凝血系统中的重要物质。肾脏病变时,机体存在高凝状态和出血倾向,而TF和TFPI的平衡对保持机体出、凝血机制的稳定是十分重要的。本文就TF、TFPI在肾脏疾病外周血、尿及肾组织中含量、活性的变化及其意义进行综述。     

组织因子、组织因子途径抑制物与肾脏病

组织因子(TF)及组织因子途径抑制物(TFPI)是外源性凝血系统中的重要物质。肾脏病变时，机体存在高凝状态和出血倾向，而TF和TFPI的平衡对保持机体出、凝血机制的稳定是十分重要的。本文就TF、TFPI在肾脏疾病外周血、尿及肾组织中含量、活性的变化及其意义进行综述。     

体外循环心内直视手术围术期组织因子途径抑制物的变化

组织因子途径抑制物(ｔｉｓｓｕｅｆａｃｔｏｒｐａｔｈｗａｙｉｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＴＦＰＩ),又称外源性凝血途径抑制物,是正常生理条件下血液中存在的天然抗凝物质,主要作用于依赖组织因子的外源性凝血途径,有重要的调节机体凝血系统作用。体外循环心脏手术过程对机体凝血系统将产生一系列变化,我们对体外循环心脏手术围术期血液中ＴＦＰＩ及激活凝血时间(ＡＣＴ)的变化进行了初步观察。资料与方法选择1996年3～5月住院心脏手术病人20例,男13例,女7例。年龄4～37岁,平均(142±86)岁。包括室间隔缺损11例,二尖瓣置换6例,房间隔缺损、肺动脉…     

中国汉族深静脉血栓形成患者与组织因子途径抑制物基因多态性的关系

目的探讨组织因子途径抑制物(TFPI)基因变异与中国汉族深静脉血栓形成(DVT)患者的相关性。方法采用聚合酶链反应单链构象多态性分析及DNA测序,对62例DVT患者和50例正常汉族人进行TFPI基因序列分析。结果8号内含子中发现一个C/T多态位点,等位基因频率为86.6%和13.4%,病例组与对照组比较无统计学差异;5号内含子41位发现一个单碱基“G”插入,病例组中有4例(6.5%)与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论TFPI基因可能不是中国汉族人DVT的主易感基因;5号内含子中单核苷酸“G”插入有深入研究价值。     

组织因子在肿瘤侵袭中的作用和实验性靶向治疗进展

组织因子(TF)是生理性凝血过程中最重要的启动因子.TF除了参与凝血过程外,还可与凝血凼子Ⅶ结合通过多种信号传导,在肿瘤生长、血管生成及侵袭、转移过程中发挥重要作用.近年来,针对TF的靶向治疗取得了令人瞩目的进展,显示出对肿瘤组织及转移灶的明显抑制作用.     

Integrated analysis reveals prognostic value and progression-related role of AMIGO2 in prostate cancer

BackgroundEven though emerging studies supplied evidence that Adhesion Molecule with Ig Like Domain family 2 (AMIGO2) plays a critical role in numerous cancers, comprehensive analysis of the prognostic value and significant role of AMIGO2 in prostate cancer (PCa) have not been described.MethodsDifferentially expressed analysis, survival analysis and univariate cox regression analysis were first performed to explore the diagnostic and prognostic role of AMIGO2 in various cancers, especially in PCa. Tissue microarray were used to examined the association between AMGIO2 and clinical features. Multivariate cox regression analysis, concordance index, nomogram construction, the receiver operator characteristic curve and calibration curves were further used to discover the effects of AMIGO2 on recurrence-free survival (RFS) and clinicopathological characteristics, including age, Gleason score (GS) and tumor stage. Genetic and Epigenetic Alterations analysis were further conducted to explore the potential effect of AMIGO2 in PCa and examined by biological function analysis and in vitro experiments.ResultsAMIGO2 was associated with poor RFS (P<0.05) and differentially expressed (P<0.05) in multiple cancer type, especially in PCa. Besides, decreasing the expression of AMIGO2 inhibited PCa cell proliferation and colony formation in vitro. In addition, AMIGO2 was a reliable prognostic marker providing additional information (C-index: 0.7) that supplement the currently used prognosis evaluation system, e.g., T stage (C-index: 0.62) and GS (C-index: 0.65). A novel nomogram was established based on AMIGO2, tumor stage and GS with accuracies (areas under curve) of 0.70, 0.78 and 0.82 for predicting 3-, 5- and 7-year RFS, respectively. Bioinformatic analysis and in vitro examination also suggested that AMIGO2 might involve in the progression of PCa tumors inducing epithelial mesenchymal transition (EMT).ConclusionsWe identified AMIGO2 as a pan-cancer gene that could not only be a prognostic biomarker in various cancers, especially in PCa, but may functionally promoting PCa progression via EMT and mediating docetaxel resistance, suggesting AMIGO2 as a potential target for future treatment of PCa.     

血管生成素-2在前列腺癌中的表达及意义

目的 :初步探讨血管生成素 2 (Ang 2 )在前列腺癌组织中的表达及其与临床分期的关系。 方法 :使用免疫组织化学S P法检测 2 2例前列腺癌及 10例正常前列腺组织中的Ang 2表达水平 ,并对照临床分期进行分析。结果 :正常前列腺组织未见Ang 2阳性染色 ;前列腺癌组织中Ang 2阳性染色 18例 ;Ang 2在许多前列腺癌细胞和癌组织中微血管内皮上呈强阳性染色 ,其阳性染色水平随前列腺癌临床分期上升而升高 (P <0 .0 5 )。结论 :Ang 2主要引起肿瘤新生血管形成 ,参与前列腺癌的发生和发展。Ang 2与前列腺癌的临床分期呈正相关。     

鱼藤素诱导人前列腺癌细胞凋亡及其机制研究

目的 观察鱼藤素对于激素抵抗型前列腺癌(HRPC)细胞PC3和DU145增殖、细胞周期和凋亡的影响并探讨其机制.方法 设阴性对照组(有细胞但不加药),空白对照组(无细胞仅有培养液),阳性对照组(渥曼青霉素100 nmoL/L),及鱼藤素分别10、100、1 ìmol/L共6组.CCK-8法进行细胞毒性实验,检测细胞生长抑制率.流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Westem-blot检测Akt、MAPK及其磷酸化蛋白表达,探讨药物作用机制.结果 10 nmol/L～1 ìmol/L鱼藤素对PC3细胞均有生长抑制作用,呈现明显的时间、浓度依赖性,对DU145细胞则无此作用.鱼藤素使PC3细胞出现G2/M期阻滞现象并引起浓度依赖性的凋亡,而未改变DU145细胞的周期分布也不能诱导其凋亡.鱼藤素能够阻断P13K/AKT通路而对MAPK通路无影响.结论 鱼藤素通过阻断PI3K/AKT通路实现抑制PC3细胞增殖、诱导凋亡的作用.两株细胞间实验结果 的差异是因为其PI3K/AKT通路活化状态的差异造成的.     

EN2蛋白在前列腺癌组织的表达及其意义

目的 探讨同源异型盒蛋白EN2在前列腺癌的表达差异及其意义.方法 选取48例前列腺癌、22例高级别前列腺内瘤病(HGPIN)及48例前列腺增生症(BPH),采用免疫组织化学法检测上述组织中的EN2蛋白表达差异.选取其中14例前列腺癌及15例BPH,采用Western blot法检测EN2蛋白表达差异.结果 免疫组织化学法显示EN2蛋白在前列腺癌中表达增高,主要见于前列腺腺上皮细胞质内及部分细胞核.前列腺癌、HGPIN和BPH组织中EN2蛋白表达阳性率分别为87.50％、31.81％和27.08％,采用Kruskal-Wallis H检验,差异有统计学意义(P＜0.05).EN2在高、中、低分化前列腺癌患者中阳性率分别为75.00％、88.24％和88.90％.Western blot法检测显示EN2蛋白在前列腺癌组织的表达比BPH组织增高3倍.结论 同源异型盒蛋白EN2在前列腺癌表达增高,其中以中、低分化腺癌中明显,并能为前列腺上皮细胞分泌.     

The correlation of epidermal growth factor with invasion and metastasis in human gastric cancer

We examined the localization of epidermal growth factor (EGF) in 185 specimens of primary human gastric cancer using the avidinbiotin peroxidase complex immunohistochemical method on formalin-fixed paraffin-embedded sections. Thirty-four per cent of the gastric cancer specimens were positive for EGF, which was mainly located in the cytoplasm of the cancer cells and occasionally in the stromal cells, but was not detected in non-cancerous gastric epithelium. Moreover, the presence of EGF in gastric cancer was correlated with gastric wall invasion and lymph node metastasis. EGF was found more often in advanced cancers than in early ones (p<0.01), and also more often in cancers with lymph node metastasis than in those without (p<0.05). The five-year survival of patients with EGF-positive tumors was worse than that of patients with EGF-negative tumors (p<0.05). The presence of EGF in human gastric cancer may thus represent higher malignant potential.