乌贼墨对H22癌细胞内Ca2+浓度、核膜Ca2+/Mg2+-ATP 酶活性及c-jun表达的影响

利用荧光探针和免疫组织化学方法,研究了乌贼墨对Ｈ２２癌细胞内ＣＡ＾２＋浓度,核膜Ｃａ＾２＋／Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性及ｃ－ｊｕｎ表达的影响。结果发现,乌贼墨使Ｈ２２癌细胞内Ｃａ＾２＋浓度分别降低了６９％和７９％,核膜Ｃａ＾２＋／Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性分别降低了２１％和３７％,ｃ－ｊｕｎ表达明显减少。     

坦索罗辛联合托特罗定治疗前列腺增生合并膀胱逼尿肌不稳定的效果观察

目的为了探究临床有效治疗前列腺增生合并膀胱逼尿肌不稳定的可靠方法,从而为临床相关研究提供一些借鉴和参考。方法本次研究入选对象均为我院2009年1月—2012年1月期间收治的前列腺增生合并膀胱逼尿肌不稳定患者,共计132例,随机将患者分成两组,分别为观察组和对照组,每组66例,对照组患者服用坦索罗辛治疗,观察组患者服用坦索罗辛和托特罗定联合治疗。观察并且比较两组患者实施不同临床治疗措施前后国际前列腺症状评分结果、最大尿流率以及膀胱残余尿量。结果在国际前列腺症状评分结果[（10.34±5.38）VS（18.32±5.49）分]、最大尿流率[（17.99±3.28）VS（14.02±4.33）mL/s]以及膀胱残余尿量[（22.34±4.32）VS（29.30±4.87）mL]等三项指标上,组间比较,实施治疗后观察组各项指标水平均显著的优于对照组,并且组间数据差异具有统计学意义。结论与单纯采用坦索罗辛治疗的方法相比较,采用坦索罗辛联合托特罗定的治疗方法治疗前列腺增生合并膀胱逼尿肌不稳定患者的临床效果较好,是临床上的可靠选择。     

膀胱颈移动度的变化对妊娠晚期及产后压力性尿失禁的价值

目的探讨膀胱颈移动度的变化对孕产妇妊娠晚期及产后发生压力性尿失禁的诊断价值。方法将2016年3月-2017年3月经上海市第五人民医院临床进行常规产前检查的124例孕产妇选择为临床研究病例,均进行超声检查,根据检查结果不同分为两组。非压力性尿失禁组73例,压力性尿失禁组51例,分别于孕周34周、36周、38周以及产后6周测量膀胱颈移动度,观察并评价不同孕周压力性尿失禁的发病率,并比较两组膀胱颈移动度水平差异。结果于孕34周、36周、38周以及产后6周的压力性尿失禁的发病率分别为12. 90%、23. 39%、43. 55%及5. 65%,各组之间比较差异有统计学意义(P0. 05)。压力性尿失禁组女性膀胱颈移动度的测量值在孕周为34周、36周、38周以及产后6周分别为(3. 78±1. 34) mm、(4. 62±1. 24) mm、(6. 96±1. 22) mm及(2. 23±1. 92) mm明显大于非压力性尿失禁组女性在孕34周、36周、38周以及产后6周的膀胱颈移动度的测量值(2. 42±1. 33) mm、(3. 83±1. 12) mm、(6. 02±1. 76) mm及(1. 28±0. 52) mm,差异有统计学意义(P0. 05)。结论孕产妇妊娠晚期及产后膀胱颈移动度的变化水平与压力性尿失禁疾病的表达相关,随着孕周的增加,膀胱颈移动度逐渐增大,且压力性尿失禁的发病率也增高,膀胱颈移动度的变化水平对于疾病的预防、诊断及治疗有一定的参考价值。     

镰刀菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇对心肌细胞Ca2+通道的阻滞作用

目的观察镰刀菌毒素单端孢霉烯族化合物脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对培养心肌细胞Ca2 通道单通道电活动的影响.方法取新生1～2日龄Wistar大鼠,分离心肌细胞,培养基为80%DMEM与20%小牛血清,于37℃,在含5%CO2与95%空气的培养箱内进行培养,于培养24～48h期间进行实验记录.采用贴附式膜片钳技术,记录心肌细胞B、L、T三型Ca2 通道单通道电活动为加入毒素前对照,然后向培养基中加入1 mg·ml-1DON,以观察DON对心肌细胞Ca2 通道单通道电活动的影响.结果DON浓度为1 mg·ml-1时,心肌细胞B,L,T三型Ca2 通道均受到明显的阻滞.其阻滞作用表现在使B、L、T三型Ca2 通道的开放时间分别缩短47.3%,42.1%和17.1%,关闭时间分别延长283.3%,92.8%和40.7%,使通道的开放概率分别下降77.8%,71.1%和42.8%.而对流过B,L,T三型Ca2 通道的Ba2 流幅值均无明显影响.结论DON能抑制大鼠培养心肌细胞的Ca2 通道.     

2型糖尿病伴感染患者细胞免疫的变化及意义

应用流式细胞术测定32例2型糖尿病伴感染患者细胞免疫参数(CD3、CD4、CD4/CD8、B细胞、NK细胞)并与39例2型糖尿病不伴感染患者及正常对照组36例作比较。结果表明2型糖尿病无论是否伴感染机体内细胞免疫功能已下降,并发感染后机体免疫活性细胞有一定程度升高。     

2型糖尿病患者血清胆红素和尿酸水平变化及意义

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清胆红素、尿酸(UA)和血脂水平变化及意义。方法采用全自动生化分析仪,检测46例T2DM血管病变患者血清胆红素、UA及血脂水平,并与50例对照组比较分析。结果T2DM伴血管病变患者血清总胆红素(TBIL)和间接胆红素(NDBIL)含量明显低于无并发症组(P<0.01),血清UA含量显著高于对照组(P<0.01),大、微血管组TBIL、UA比较均无统计学意义;血管病变组总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量与无并发症组和对照组比较显著升高,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)则降低(P<0.01)。结论低胆红素血症、UA升高及血脂异常与T2DM血管病变密切相关,检测三者含量对判断T2DM伴发血管病变具有重要意义。     

HGF在2型糖尿病大鼠视网膜病变中的变化及意义

目的探讨肝细胞生长因子(Hepatocyte Growth Factor HGF)在糖尿病视网膜病变(Diabetic Retinopathy,DR)发生发展中的作用。方法雄性Wistar大鼠70只,随机分为实验组和对照组:实验组大鼠40只,喂以高糖高脂饲料2月后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg;对照组大鼠30只,喂以普通饲料2月后,腹腔注射等体积的枸橼酸缓冲液。两组分别于注射前、注射后1月、2月、3月和6月每组各处死6只,取血测定血清HGF、胰岛素水平,并制备视网膜病理及电镜切片。结果实验组大鼠血HGF于注射STZ 1月后即明显增高,至2月时达最高值,以后逐渐降低,但始终高于对照组(P<0.01)。结论实验组大鼠血清HGF水平显著高于对照组,提示HGF可能参与了DR的发生发展。     

绝经后2型糖尿病合并肾病患者性激素水平变化及意义

目的:探讨绝经后2型糖尿病患者性激素水平变化与糖尿病肾病的关系。方法:选择42例绝经后2型糖尿病患者,其中合并肾病者20例,无微血管并发症者22例,另选择20例健康绝经妇女为对照组,测定血中促卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)和睾酮(T)水平进行比较分析。结果:绝经后2型糖尿病患者较健康绝经妇女E2降低,T升高(P<),绝经后2型糖尿病合并肾病组比无肾病组E2更为降低(P<),T无显著差异,各组FSH、LH无显著性差异(P<0.05)。结论:绝经后2型糖尿病患者性激素水平的变化可能是促成糖尿病肾病的因素之一。     

纤维蛋白原及血小板参数在2型糖尿病患者中的变化及意义

目的探讨纤维蛋白原及血小板参数在2型糖尿病患者中的变化及意义。方法检测85例2型糖尿病患者（有微血管病变者为DM1组45例,无微血管病变者为DM2组40例）的纤维蛋白原（Fib）、血小板计数（PET）、血小板平均体积（MPV）、血小板平均分布宽度（PDW）、血小板压积（PCT）,并与80例健康对照组比较。结果DM1组、DM2组及对照组间MPV、PDW和Fib均有显著差异（P〈0．01）,而PLT、PCT无显著差异（P〉0．05）。结论检测血小板参数如MPV、PDW和Fib对监测2型糖尿病有无微血管病变发生有一定临床意义。     

胞液型磷脂酶A_2在婴幼儿支气管肺炎中的变化及意义

目的:探讨婴幼儿支气管肺炎血清胞液型磷脂酶A2(cPLA2)的水平变化及意义。方法:运用酶联免疫吸附法(ELISA)测定50例婴幼儿支气管肺炎的cPLA2的水平变化,同时,以同期在门诊健康体检婴幼儿作为对照。结果:肺炎组cPLA2水平明显高于健康对照组,有统计学意义(P<0.01)。结论:cPLA2在婴幼儿肺炎时明显增高,说明了cPLA2参与了肺炎的病理生理过程,如能早期应用cPLA2抑制剂,可对肺炎的转归有一定干预作用。     

大鼠不稳定膀胱逼尿肌间隙连接蛋白43的含量和分布模式的实验研究

目的探讨对实验大鼠不稳定膀胱逼尿肌连接蛋白43的含量和分布模式进行检测的研究方法。方法实验建立大鼠膀胱出口梗阻模型,并采用充盈性膀胱测压方法确定不稳定膀胱组10只,另设正常对照组10只,应用罗丹明麦芽凝集素标记逼尿肌细胞膜,异硫氰酸荧光(FITC)标记间隙连接蛋白43(Cx43),激光扫描共聚焦显微镜检测Cx43和细胞膜,并用激光共聚焦显微镜系统的Im age Analysis程序对结果进行图像分析。结果在激光扫描共聚焦显微镜下,可以清晰地观察Cx43和细胞膜。不稳定膀胱组Cx43象素密度值明显高于正常对照组(P<0.01);Cx43荧光斑面积也较正常对照组明显增大(P<0.01)。结论双重免疫荧光标记和激光扫描共聚焦显微镜技术能对连接蛋白43进行精确的定量和定位研究,为探讨不稳定膀胱的发生机理提供了一种先进科学的研究方法。     

前列腺增生患者膀胱出口梗阻与血清PSA的相关性研究

肺空洞和肺囊肿系由多种不同病因引起肺组织破坏，形成中空无组织结构的区域，其中充满气体或液体，胸部X线有类似表现。肺空洞由肺组织坏死、液化而成，洞壁由坏死组织、肉芽和纤维组织组成。X线表现为肺野内含气体的圆形或不规则空腔，洞壁完整。肺大疱由肺泡壁破裂形成的肺实质含气囊腔，并压迫和推移周围肺组织，X线表现为大小不等含气空腔，较大透光区内有纤细条状间隔影，     

模拟缺血时兔心室肌细胞快钠通道跨壁异质性的变化

目的探讨缺血时心肌细胞钠通道的异质性变化。方法以酶解法分离兔心室肌三层细胞,先后用正常和缺血液灌流模拟正常和缺血状态,并采用膜片钳全细胞记录法观察三层心室肌细胞快钠通道的活性和异质性变化。结果缺血后三层细胞失活曲线均左移,失活加速,三层细胞间INa失活半电压差异发生变化;缺血30 m in时INa灭活后恢复曲线与原来的三层细胞间由差异无统计学意义(P>0.05)变为差异有统计学意义(P<0.05)。各层细胞自身INa灭活后恢复随着缺血时间延长而减慢,但无统计学意义;缺血后三层细胞的钠电流(INa)电压依赖性、I-V曲线的形态轨迹未变,INa峰电流密度减小,三层细胞间峰电流密度差异发生变化。结论缺血时心肌钠通道的活性发生变化,从而影响心室肌三层细胞间INa的异质性及与通道电流平衡,与缺血性心律失常的发生有关,并可部分解释抗心律失常药物在正常和缺血心肌的不同作用。     

小体积前列腺增生膀胱出口梗阻的诊断和治疗

目的:提高小体积前列腺增生(SBPH)膀胱出口梗阻(BOO)的诊断和治疗水平.方法:对 19例 SBPH- BOO患者,采 用开放手术切除增生的前列腺体,同时处理膀胱内病变,所有病例均经病理证实.术后随访 1～ 2年,并对结果进行 回顾性小结.结果:本组患者手术、恢复均顺利,出院时国际前列腺症状评分(IPSS) <7分,生活质量评分(QOL) <2 分,最大尿流率(Qmax) >15 ml/s,膀胱剩余尿量(RUV) <30 ml,术后随访未发现严重并发症.结论: SBPH- BOO 可通过 IPSS、直肠指诊(DRE)、经直肠超声(TRUS)、 RUV、血前列腺特异性抗原(PSA)及尿流动力学检查确定;提倡 早期积极的手术治疗;正确的围手术期处理是预防术后并发症的关键.     

细胞外钙对HepG2细胞内钙浓度的影响

目的 研究不同浓度细胞外钙对HepG2细胞内钙的影响并初步阐明细胞内钙变化的机制.方法 给予不同浓度钙培养液作用24 h后,用Fluo-3/AM染色剂对HepG2细胞进行染色,应用流式细胞仪检测其细胞内钙浓度的变化;利用阻断剂对钙通道进行阻断,寻找细胞内钙变化的原因;应用siRNA干扰对找寻到的钙通道进行沉默,进一步确认引起钙变化的钙通道.结果 细胞内钙浓度随细胞外钙浓度的升高而升高,当细胞外钙浓度为2.75 mmol/L时,细胞内钙钙荧光强度值达到最大为(123.25±12.95);钙池操纵的钙通道(SOC)阻断剂-La3+可显著抑制外钙引起的内钙升高(P＜0.01);应用siRNA沉默TRPC1通道后可显著抑制外钙引起的内钙变化.结论 随细胞外钙浓度升高,肝细胞内钙浓度显著增高;TRPC1参与的钙池操纵的钙通道可能是引起细胞内钙离子升高的主要通道.     

铝对新生大鼠海马细胞内游离钙浓度的影响

目的 探讨铝对新生大鼠海马细胞内游离钙浓度([Ca2 ]i)的影响.方法 采用体外实验的方法,将分离的新生Wistar大鼠海马细胞制成2×106个/ml的细胞悬液,经Fura-2-AM负载后,与氯化铝溶液(Al3 终浓度分别为0、10、100、1 000 μmol/L)一起孵育,分别测定孵育15、30、45 min后海马细胞悬液的荧光强度值(F')、最大荧光强度值(Fmax)、最小荧光强度值(Fmin),并计算海马神经细胞内[Ca2 ]i.结果 孵育15、30和45 min后,1 000 μmol/L Al3 海马细胞中[Ca2 ]i均高于对照组(0 μmol/L Al3 组),差异有统计学意义(P＜0.05).而10、100 μmol/L Al3 组[Ca2 ]i与对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 铝可通过增加新生大鼠海马神经细胞内[Ca2 ]i而发挥神经毒性作用.     

冷应激对大鼠血管平滑肌细胞钙通道表达的影响

目的 观察冷应激对大鼠血管平滑肌细胞钙通道α1C亚基表达的影响.方法 建立冷应激高血压模型.每2周测量大鼠的血压.24只健康成年SD大鼠随机分为对照组(6只)和寒冷暴露组(18只),寒冷暴露组大鼠分别于暴露的第2、4、6周处死,应用半定量反转录-聚合酶链反应(RTPCR)检测主动脉钙离子通道α1C亚基的表达.结果 寒冷暴露组大鼠血压从第2周开始升高,2周时冷应激大鼠模型血压为(102.8±2.25)mm Hg,对照组大鼠血压为(89.2±3.73)mm Hg,差异有统计学意义(P＜0.05);4、6周时冷应激大鼠模型血压分别为(114.5±4.21)、(121.9±3.03)mm Hg,与对照组比,差异有统计学意义(P＜0.01).寒冷暴露组血管平滑肌钙离子通道α1C亚基mRNA水平升高,2、4、6周冷应激大鼠模型钙离子通道α1C亚基mRNA分别为0.21±0.02、0.33±0.05、0.57±0.08,与对照组(0.13±0.02)比,差异有统计学意义(P＜0.01).钙通道α1C亚基mRNA的相对表达量与血压呈高度相关(r=0.86,P＜0.01).结论 反复寒冷暴露能诱发冷应激性高血压,导致血管平滑肌细胞上钙通道α1C亚基表达水平升高.

Abstract：

Objective To observe the expression of vascular smooth muscle cells calcium channel α1C subunit (LTCCα1C) in rats exposed in low temperature. Methods Cold-induced hypertension was established and blood pressure was measured every two weeks. The mRNA expression of L type calcium channel α1C was determined by RT-PCR. Results The blood pressure of the rats exposed to cold environment increased. The blood pressure of experimental groups [( 102.8±2.25)mm Hg] began to increase from the first two weeks, compared with the control group[(89.2±3.73 )mm Hg], there were significant difference (P＜0.05). The blood pressure of experimental groups were ( 114.5 ±4.21 ), ( 121.9±3.03 ) mm Hg respectively at 4, 6 weeks. Compared with the control group, the expression of LTCCα1C mRNA of the cold exposure group increased significantly (P＜0.01). There was a significant correlation between the expression of LTCCα1C mRNA and the blood pressure of the rats (r=0.86,P＜0.01 ). Conclusion Repeated cold exposure can establish cold-induced hypertension, and the level of vascular smooth muscle cells LTCCα1C expression increase.     

汞对大鼠三叉神经节电压依赖性钙通道电流及[Ca2+]i的影响

目的 观察Hg2+对大鼠三叉神经细胞膜电压依赖性钙通道电流(Ica)及胞内游离Ca,2+浓度的影响,探讨汞对三叉神经细胞毒性作用的机制.方法 全细胞膜片钳方法记录不同剂量的H2+作用下三叉神经细胞膜Ica的变化,并用激光共聚焦和Fluo-3/AM荧光探针标记技术,从单个细胞水平检测H2+寸胞内游离Ca2+浓度瞬间动态变化的影响.结果 0.01、0.10、1.00、10.00μmol/L H2+可使三叉神经细胞Ica电流幅值分别减少(1.80±0.32)%、(23.04±9.46)%、(58.20±7.90)%、(82.00±5.77)%,给Hg2+5min之内抑制作用即可达最大效应,洗脱未见明显电流恢复.0.01、0.10、1.00μmol/LH2+可使三叉神经细胞游离Ca2+浓度即时增加(2.500±83)%、(82.81±35.36)%、(222.70±62.48)%;预先用10 μmol/Lnifedipine处理细胞10 min,可在一定程度上减弱Hg2+的升钙作用,并延缓升钙的时间.结论 Hg2+对神经细胞膜Ica幅度的抑制作用与H2+抑制电压依赖性钙通道有关;H2+导致的神经细胞内游离Ca2+度升高与细胞内钙库释放有关.     

动脉粥样硬化兔主动脉平滑肌细胞钙激活钾通道变化及其对钙敏感性的研究

[目的]探讨动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)主动脉平滑肌细胞钙激活钾通道(Calcium-activatedPotas-siumChannel,KCa)变化及其对钙的敏感性。[方法]用酶消化法获取单个主动脉平滑肌细胞,通过膜片钳记录技术检测AS兔主动脉平滑肌细胞KCa通道的活性,并在浴液中分别加入不同浓度的Ca2+,以Pclamp7.0应用软件实时采样记录通道的开放概率(Po)、平均开放时间(To)、平均关闭时间(Tc)和电流幅值(Am),并以加钙前作对照观察上述参数的变化。[结果]AS组KCa通道的活性明显高于对照组;与加Ca2+前比较,对照组Po增加了(22.35±9.43)倍,而AS组仅增加了(5.31±0.42)倍(P<0.01)。[结论]AS兔血管平滑肌细胞KCa通道的活性明显增加,可能是AS血管发生代偿性扩张的机制之一;该通道对Ca2+的敏感性降低,可能是促进AS发展的因素之一。     

溴氰菊酯对大鼠神经细胞胞内游离钙浓度及凋亡的影响

目的　观察溴氰菊酯 (DM )对神经细胞游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)及凋亡的影响。方法　Wistar大鼠随机分为对照组与 3个染毒组 ,染毒组腹腔注射 1 2 .5mg/kg的DM ;以Fura 2 /AM为荧光指示剂 ,RF 530 1PC荧光分光光度计测定染毒后 5、2 4、48h后大鼠神经细胞 [Ca2 + ]i浓度的变化 ;FACS42 0型流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果　PM染毒 5、2 4、48h组大鼠海马及皮层细胞 [Ca2 + ]i分别为 :5h组海马 :(389.94± 43 .64)nmol/L、皮层 :(449.33± 2 3 .2 3)nmol/L ;2 4h组海马 :(340 .47±32 .36)nmol/L、皮层 :(31 1 .62± 2 5 .48)nmol/L ;48h组海马 (2 87.1 3± 2 4 .2 9)nmol/L、皮层 :(346 .55±36 .87)nmol/L ,均高于对照组 [海马 :(2 0 3 .2 4± 1 8.53)nmol/L、皮层 :(2 2 6 .85± 1 4 .81 )nmol/L] ,差异有显著性 (P <0 .0 1 )。染毒 48h组大鼠此二项指标值较 5h组明显下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。染毒 2 4、48h组大鼠神经细胞凋亡率 [海马 :(8.45± 1 .0 2 ) %、(9.44± 1 .1 4 ) % ,皮层 :(7.90± 0 .49) %、(8.0 1± 0 .87) % ]均明显高于对照组 [海马 :(2 .97± 0 .36) %、皮层 :(3 .50± 0 .48) % ] ,差异有显著性 (P<0 .0 1 ) ,且有时间 反应关系 (r=0 .940、0 .893)。结论　DM可影响大鼠神