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骨髓来源成骨细胞复合纳米晶羟基磷灰石胶原材料培养的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨纳米材料作为组织工程骨基质材料的可行性。方法 分离培养兔骨髓间充质干细胞,诱导为成骨细胞后作为种子细胞,与纳米晶羟基磷灰石胶原材料于体外联合培养,通过对复合物光镜、免疫组织化学染色及扫描电镜观察,了解细胞在材料中生长情况。结果 兔骨髓间充质干细胞可以诱导为成骨细胞,体外复合培养8天,分布于支架材料上的细胞大量分化增殖、分泌细胞外基质。结论 纳米晶羟基磷灰石胶原材料是一种构建组织工程骨的较好的支架材料。 相似文献
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羟基磷灰石纳米粒子对Hela细胞凋亡作用的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:观察不同浓度的羟基磷灰石纳米粒子对人宫颈癌Hela细胞作用的影响。方法:将羟基磷灰石纳米粒子以不同浓度和时间作用于人宫颈癌Hela细胞,采用MTT比色法观察细胞毒性;电镜技术观察细胞凋亡的形态;原位末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡率。结果:羟基磷灰石纳米粒子以剂量依赖和时间依赖的方式抑制人宫颈癌Hela细胞的生长,作用48h后的半数有效抑制浓度IC50值为211.8μg/ml。透射电镜观察到凋亡特性的形态学改变。结论:HAP抑制人宫颈癌Hela细胞细胞的增殖,诱导Hela细胞凋亡,为临床治疗肿瘤提供依据。 相似文献
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随着科学技术的发展,生物材料在口腔领域引起了人们的广泛关注,羟基磷灰石因与生物体硬组织如骨、牙中的无机成份相似而具有良好的生物相容性,已被广泛用于植骨和盖髓研究。而纳米仿生材料的出现为盖髓剂的研究开拓了一个全新的领域。nHA—PA66作为新型纳米仿生材料的代表成为研究的热点,它已通过前期实验表明具有较好的生物安全性、生物相容性和生物活性其有机物和无机物的组成比例及力学性能与牙本质相似,本实验通过对比纳米羟基磷灰石和纳米羟基磷灰石聚酰胺66作狗牙直接盖髓术的组织学反应,为临床筛选理想的盖髓材料提供组织学依据。 相似文献
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目的探讨壳聚糖-纳米羟基磷灰石复合材料(CTS-nHA)植入动物体内修复骨缺损时,观察成骨效果和材料吸收速度。方法新西兰大白兔18只,随机分为3组,实验组(A组):复合材料;实验对照组(B组):纳米羟基磷灰石(N-HA);空白对照组(C组):不植入任何材料,于兔双侧后肢胫骨制造约直径0.5 cm大小的骨缺损,分别植入相应的材料或不植入任何材料,于术后2、4、6、10周取骨缺损标本,进行大体和组织学观察。结果在各时间段CTS-nHA组新的骨基质生成量均明显高于n-HA组和空白组,其中n-HA组又高于空白组,只有在2周时n-HA组和空白组相似。同时复合材料在体内吸收速度比n-HA组快,复合材料的吸收与新骨生成速度协调性似乎欠佳。结论复合材料植入的缺损区具有较强的成骨活性,但在体内吸收速度比较快。 相似文献
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纳米羟基磷灰石修复牙槽骨缺损的动物实验研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:探讨纳米羟基磷灰石(Nano—HA)的生物学性质和在牙槽骨缺损修复中的成骨机制,为进一步的动物和临床实验提供理论依据。方法:在兔牙槽骨颊侧骨板做人为骨开窗,实验组填入纳米羟基磷灰石,空白对照组不做充填,羟基磷灰石对照组充填普通羟基磷灰石(HA)。于4周、8周、12周分别处死动物做组织学切片。结果:实验组无异物排斥反应,Nano—HA参与骨形成最终被降解。骨修复显著,大量新骨形成,与空白对照组的骨修复比较快速而且活跃。结论:Nano—HA具有良好的生物相容性、生物降解性、骨引导性,能加速牙槽骨的修复,为应用Nano—HA修复牙周病引起的牙槽骨缺损提供了理论依据。 相似文献
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目的 观察茶多酚对脂多糖(LPS)诱导下人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)增殖的影响.方法 采用组织块培养法培养原代HPDLFs并传代、免疫组化检测,取第5代细胞用于实验.将LPS及茶多酚分组,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法分别于24、48、72 h检测HPDLFs增殖活力.结果 免疫组化染色结果显示,所培养细胞的波形丝蛋白染色呈阳性表现,阳性部位位于胞质,角蛋白染色呈阴性表现.各浓度LPS组在24、48、72 h的光密度(OD)值(4 mg/L LPS组:0.323±0.007、0.345±0.010、0.437±0.007;20 mg/L LPS组:0.270±0.004、0.283±0.009、0.367±0.007; 100 mg/L LPS组:0.175±0.006、0.187±0.006、0.248±0.005;500 mg/L LPS组:0.088±0.004、0.091±0.006、0.153±0.009)与同时段空白对照组(0.306±0.008、0.333±0.007、0.399±0.007)组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05).100 mg/L LPS组和各浓度茶多酚组在24、48、72 h的OD值(100 mg/L LPS组:0.216±0.010、0.260±0.010、0.352±0.012; 100 mg/L LPS组+0.125 g/L茶多酚组:0.300±0.010、0.408±0.013、0.490±0.014;100 mg/L LPS组+0.25 g/L茶多酚组:0.333±0.012、0.416±0.010、0.532±0.012;100 mg/L LPS组+0.5 g/L茶多酚组:0.390±0.012、0.485±0.011、0.642±0.013;100 mg/L LPS组+1 g/L茶多酚组:0.368±0.010、0.481±0.006、0.621±0.007)与同时段空白对照组(0.450±0.012、0.528±0.011、0.687±0.010)组间比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);各浓度茶多酚组在24、48、72 h的OD值均低于同时段100 mg/L LPS组(均P<0.05).结论 LPS抑制HPDLFs的增殖,茶多酚明显促进LPS诱导下HPDLFs的增殖,这提示茶多酚可应用于牙周炎的预防及治疗. 相似文献
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目的 研究微小RNA-218-5p(miR-218-5p)对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)活性和骨向分化的影响并探讨其机制,为牙周炎的治疗提供研究基础.方法 将anti-miR-218-5p组(转染anti-miR-218-5p)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-JAG1组(转染pcDNA-JAG1)、anti-miR-218-5p+si-NC组(共转染anti-miR-218-5p和si-NC)、anti-miR-218-5p+si-JAG1组(共转染anti-miR-218-5p和si-JAG1),用脂质体法转染至hPDLSCs细胞;运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中miR-218-5p、Ⅰ型胶原蛋白(Col-1)、骨钙素、Runt相关转录因子2(Runx2)的表达;蛋白质印迹法(Westrn blotting)检测细胞中Jagged 1(JAG1)的蛋白表达;MTT法检测细胞活性;茜素红染色实验检测细胞的矿化结节;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性.结果 与anti-miR-NC组相比,anti-miR-218-5p组hPDLSCs细胞培养48、72 h时,细胞活性升高[48 h:(0.44±0.04)比(0.62±0.06);72 h:(0.53±0.05)比(0.83±0.08);P<0.001],细胞的矿化结节明显升高,Col-1[(0.26±0.03)比(0.74±0.07)]、骨钙素[(0.21±0.02)比(0.54±0.05)]、Runx-2[(0.29±0.03)比(0.61±0.06)]蛋白相对表达量均显著升高(均P<0.001).与pcDNA组相比,pcDNA-JAG1组hPDLSCs细胞培养48、72 h时,细胞活性显著升高[48 h:(0.42±0.04)比(0.59±0.05);72 h:(0.55±0.05)比(0.81±0.08);P<0.001],Col-1[(0.34±0.03)比(0.71±0.07)]、骨钙素[(0.23±0.02)比(0.48±0.04)]、Runx-2[(0.25±0.03)比(0.56±0.05)]蛋白表达量均显著升高(均P<0.001).miR-218-5p可靶向调控JAG1的表达.抑制JAG1可逆转抑制miR-218-5p对hPDLSCs的活性和骨向分化作用.结论 抑制miR-218-5p可促进人牙周膜干细胞活性和骨向分化,其机制与靶向JAG1有关. 相似文献
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Gil-Saeng Jeong Seoung-Hoon Lee Seong-Nyum Jeong Youn-Chul Kim Eun-Cheol Kim 《International immunopharmacology》2009,9(12):1374-1380
Background and objectivesAlthough apigenin exhibits various biological effects, its anti-inflammatory role in the periodontal field remains unknown. We examined the anti-inflammatory effects of apigenin and the underlying mechanism in nicotine- and lipopolysaccharide (LPS)-stimulated human periodontal ligament (hPDL) cells.Materials and methodsWestern blotting was used to examine the effect of apigenin (10–40 µM) on the LPS- and nicotine-induced expression of cyclooxygenase-2 (COX-2), inducible nitric oxide synthase (iNOS), and heme oxygenase-1 (HO-1), as well as the phosphorylation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs), in hPDL cells. Pro-inflammatory mediators, including nitric oxide (NO), prostaglandin E2 (PGE2), interleukin-1β (IL-1β), tumor necrosis factor-α (TNF-α), IL-6, and IL-12 were monitored using Griess reagents and ELISA.ResultsIncubation of hPDL cells with apigenin decreased LPS- and nicotine-induced HO-1 protein expression and activity. Apigenin significantly inhibited the nicotine- and LPS-induced production of NO, PGE2, IL-1β, TNF-α, IL-6, and IL-12, and the upregulation of iNOS and COX-2 in hPDL cells. Hemin, a selective HO-1 inducer, reversed the apigenin-mediated suppression of nicotine- and LPS-induced NO, PGE2 and cytokine production. Treatment with inhibitors of the phosphoinositide 3-kinase, MAPKs, p38, and JNK, as well as a protein kinase C inhibitor, blocked the anti-inflammatory effects of apigenin in nicotine- and LPS-treated cells.ConclusionsApigenin possesses anti-inflammatory activity in hPDL cells and works through a novel mechanism involving the action of HO-1. Thus, apigenin may have potential benefits as a host modulatory agent in the prevention and treatment of periodontal disease associated with smoking and dental plaque. 相似文献
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目的比较2种不同的灭菌方法对人牙周膜成纤维细胞原代培养成活率的影响,寻找较为合适的灭菌方法,旨在提高人牙周膜成纤维细胞原代培养的成活率。方法28例牙齿标本分为5倍抗生素溶液灭菌组15例和次氯酸钠溶液灭菌组13例,2组分别采用5倍抗生素溶液与次氯酸钠溶液对取得的人牙周膜组织进行灭菌后,均采用组织块法培养人牙周膜成纤维细胞,并对细胞进行形态学和免疫组织化学染色鉴定,比较2种不同灭菌方法细胞培养的成活率。结果次氯酸钠溶液灭菌组无1例细胞成功传代,5倍抗生素溶液灭茵组细胞培养成活率为46.7%,且符合人牙周膜成纤维细胞的形态学和免疫学特征。结论利用舍5倍抗生素溶液灭菌效果与次氯酸钠溶液无差别,但相对更利于人牙周膜成纤维细胞的成活。 相似文献
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甲壳胺对人牙周膜细胞增殖和分化的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨甲壳胺对人牙周膜细胞增殖和分化功能的影响。方法用原代培养的人牙周膜细胞,采用MTT法、酶动力学法和放射免疫法检测不同浓度甲壳胺(Chitosan,Chi,0.05,0.1,0.2g·L-1)对人牙周膜细胞增殖、碱性磷酸酶活性和骨钙素分泌的影响。结果与对照组比较,(1)Chi(0.05g·L-1)和Chi(0.1g·L-1)2组在3,5,7d时A570值均明显升高(P<0.05),Chi(0.2g·L-1)组仅在3d时明显升高(P<0.01);(2)不论是细胞裂解液还是细胞培养液中,甲壳胺均能明显增强牙周膜细胞碱性磷酸酶活性(P<0.05);(3)不同浓度的甲壳胺刺激牙周膜细胞骨钙素分泌量均较对照组高,但只有Chi(0.1g·L-1)组比较有显著性差异(P<0.05)。结论甲壳胺对人牙周膜细胞的增殖和分化功能有明显的促进作用。 相似文献
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L. Capretto S. Mazzitelli G. Colombo R. Piva L. Penolazzi R. Vecchiatini X. Zhang C. Nastruzzi 《International journal of pharmaceutics》2013
The current paper reports the production of polymeric micelles (PMs), based on pluronic block-copolymers, as drug carriers, precisely controlling the cellular delivery of drugs with various physico-chemical characteristics. PMs were produced with a microfluidic platform to exploit further control on the size characteristic of the PMs. 相似文献
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目的 以体外培养的人牙周膜成纤维细胞(hPDLCs)为实验对象,探讨绿原酸对高糖环境下hPDLCs凋亡及蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法 体外培养hPDLCs,分别用正常糖(5.5 mmol/L)、高糖(25.0 mmol/L)或高糖联合绿原酸(高糖,25.0 mg/ml;绿原酸,1 mg/ml)处理hPDLCs。细胞凋亡试验检测不同组hPDLCs凋亡情况,同时蛋白免疫印迹法检测各组泛AKT及磷酸化AKT(p-AKT)蛋白的表达情况。符合正态分布的计量资料以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用独立样本t检验。结果 与正常糖组相比,高糖可显著促进hPDLCs的凋亡,凋亡率从(6.66±0.18)%提高至(16.72±0.50)%,差异有统计学意义(t=32.789,P<0.001),同时p-AKT蛋白的表达水平显著降低。而与高糖组相比,绿原酸能抑制高糖环境下hPDLCs的凋亡,凋亡率从(16.72±0.50)% 降低至(11.32±0.17)%,差异有统计学意义(t=17.710,P<0.001),同时回救高糖环境下下调的p-AKT蛋白的表达水平。结论 绿原酸能抵抗高糖诱导的hPDLCs凋亡,可能是通过激活AKT信号通路实现的。 相似文献
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人牙周膜成纤维细胞的原代培养及鉴定 总被引:11,自引:1,他引:11
目的体外分离培养人牙周膜成纤维细胞,进一步研究细胞因子对牙周膜细胞功能的调控作用。方法利用组织块法原代培养牙周膜成纤维细胞并传代,通过形态学及免疫细胞化学方法对其进行鉴定。结果牙周膜成纤维细胞培养成功传代,5代后细胞生长旺盛,表现为长梭形细胞,免疫细胞化学鉴定细胞抗波形丝蛋白阳性,抗角蛋白阴性,为中胚层来源的成纤维细胞。结论组织块法培养出的细胞符合牙周膜成纤维细胞的形态学及免疫学特征,生长状态良好,可作为体外的细胞模型为研究细胞因子对其功能的调控作用奠定基础。 相似文献
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目的 体外培养人牙周膜韧带细胞 (HPDLCs) 和人牙龈成纤维细胞 (HGFs), 对比两者成骨、 成软骨以及成脂的多向分化潜能的差异。方法 运用酶消化结合组织块法体外培养 HPDLCs 和 HGFs, 选择生长状态良好的 3~4 代 HPDLCs 和 HGFs, 进行成骨、 成软骨、 成脂诱导, 未分化诱导的细胞作为对照组。分别用茜素红染色、 油红 O 染色以及阿利新蓝染色分别检测两种细胞的成骨、 成软骨及成脂分化能力。半定量逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR) 检测 HPDLCs 和 HGFs 中相关标志基因骨钙素(OCN)、 Ⅰ型胶原蛋白 (Col 1)、 runt 相关转录因子 2 (RUNX2)、 过氧化物酶体增殖物激活受体γ2 (PPARγ2)、 X 型胶原蛋白 (Col 10) mRNA 的表达。结果 成骨诱导两种细胞培养至 28 d 时, 细胞周围均有红染钙结节形成, HPDLCs 形成的钙结节明显多于 HGFs; 成软骨诱导两种细胞 14 d 时均可见胞质蓝染的细胞, HGFs 较 HPDLCs 明显; 成脂诱导两种细胞 21 d 时, 可见红色脂肪滴形成, HPDLCs 形成的脂肪颗粒明显少于 HGFs。HGFs 和 HPDLCs 分化培养 7 d 和 14 d 后, 均有 OCN、 Col 1、 RUNX2、 PPARγ2 和 Col 10 的表达, 在 14 d 时的表达均高于 7 d; HPDLCs 中 OCN、 Col 1、 RUNX2 的表达高于 HGFs, PPARγ2、 Col 10 的表达低于 HGFs(均 P< 0.05)。结论 HPDLCs 的成骨能力较 HGFs 强, 成软骨和成脂能力较 HGFs 弱。 相似文献