聚合酶链反应检测幽门螺杆菌

本文应用与幽门螺杆菌染色体ＤＮＡ高保守区序列互补的引物对，建立聚合链反应检测技术，对２８种非ＨＰ菌及１６株ＨＰ进行检测，特异性１００％，敏感性达到能检出１ｐｇ染色体ＤＮＡ（相当于１００个菌细胞）水平，对３６例接受胃镜检查病人的胃活检组织进行检测，ＨＰ阳性率４７．２％（１７／３６），而对照方法中细菌培养ＨＰ阳性率３３．３％（１２／３６），快速尿素酶试验ＨＰ阳性４１．６％（１５／３６）。结果提示ＰＣＲ     

聚合酶链反应和尿素酶试验检测幽门螺杆菌

近年来随着大量研究资料表明,幽门螺杆菌（ＨＰ）与慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌的发生均有着十分密切的关系［１、２］。目前检测 ＨＰ感染的方法较多,分为入侵性和非入侵性两类,如细菌涂片。培养,尿素酶试验（ＲＵＴ）,聚合酶链反应（ＰＣＲ）和血清ＨＰ抗体检测及１３Ｃ或１４Ｃ,尿素呼吸试验（ＵＢＴ）等。我们通过对２ １６例患者胃镜活检同部位粘膜标本,分别作ＰＣＲ反应和ＲＵＴ试验检测对照,以了解各自优缺点。１资料和方法 本组２１６例,男１３６例,女８０例,年龄１７～８２岁,平均５２．１岁。慢性萎缩性胃炎８２例,…     

聚合酶链反应检测幽门螺旋杆菌

自从1983年Marshall和Warren报道胃粘膜活检标本中成功地分离出幽门螺杆菌（HelicobacterPylori，HP）以来，国内外学者对此进行了广泛深入的研究，在检测技术上有很大发展。分子生物学方法中的聚合酶链反应（PCR）技术为HP的快速检测提供了全新手段。本文对冒镜确诊的362例胃炎、胃十二指肠溃疡等病例作PCR技术确定HP检出率，并以病理检查作对照，结果报告如下。1材料与方法1．1材料：标本采自本院1995年3月～1997年10月经胃镜检查确诊的胃、十二指肠溃疡、各类胃炎及溃疡合并胃炎362例，每例在距幽门口5cm内钳取胃粘膜2份（每例检…     

聚合酶链反应结合探针杂交检测幽门螺杆菌

建立特异，灵敏的聚合酶链反应结合长臂光敏生物素探针杂交检测幽门螺杆菌的方法。用ＰＣＲ产物直接克隆并测序，以含ＨＰ ＤＮＡ序列的重组质粒外源片段为探针。用细菌培养，单纯ＰＣＲ和ＰＣＲ结合杂交检测经胃镜诊断为慢性炎，胃溃疡，十二指肠球部溃疡的胃活检组织，唾液和粪便标本中的ＨＰ。     

竞争性定量聚合酶链反应检测幽门螺杆菌cagA基因

目的 建立竞争性聚合酶链反应（ＰＣＲ）定量检测幽门螺杆菌（Ｈｐ）细胞毒素相关蛋白基因Ａ（ｃａｇＡ）的方法。方法 以重组ＰＣＲ将乳糖操纵子中乳糖调节蛋白（ＬａｃＩ）的特异性结合序列（２１ｂｐ）插入ｃａｇＡ基因的一段序列（４００ｂｐ）中得到重组ｃａｇＡ基因片段（ｒｆｃａｇＡ）。体外克隆并表达谷胱甘肽转硫酶－ＬａｃＩ（ＧＳＴ－ＬａｃＩ）的融合蛋白,其一端具有ＣＳＴ活性,另一端可特异性地与ｒｆｃａｇＡ结合     

聚合酶链反应结合探针杂交检测幽门螺杆菌

目的建立特异、灵敏的聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合长臂光敏生物素探针杂交检测幽门螺杆菌（ＨＰ）的方法。方法用ＰＣＲ产物直接克隆并测序，以含ＨＰＤＮＡ序列的重组质粒外源片段为探针。用细菌培养、单纯ＰＣＲ和ＰＣＲ结合杂交（ＰＣＲ－Ｓｂ）检测经胃镜诊断为慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠球部炎症、十二指肠溃疡的胃活检组织、唾液和粪便标本中的ＨＰ。结果检测胃活检标本７９份，ＰＣＲ－Ｓｂ阳性率为９９％，单纯ＰＣＲ及细菌培养的阳性率分别为９５％和６５％，ＰＣＲ－Ｓｂ的灵敏度达到１ｆｇ。唾液标本的检测阳性率为３５％，粪便标本的检测结果均为阴性。结论测序证实了ＰＣＲ扩增的正确性。ＰＣＲ结合长臂光敏生物素探针杂交是特异、灵敏、简便和对人体无害的检测ＨＰ的方法。     

荧光定量聚合酶链反应检测唾液中幽门螺杆菌的研究

幽门螺杆菌 ( Hp)感染与胃炎、胃溃疡甚至胃肿瘤等的发病关系密切 ,国际癌研究协会已于 1 994年将 Hp感染列为人的 类致癌因子。检测 Hp感染发展迅速 ,然而其中大多属于有创性 ,荧光定量 -聚合酶链反应 ( FQ- PCR)法能从唾液中直接检测 Hp并具有无创、简便、可准确定量等优点。我们用 FQ- PCR法检测唾液中 Hp,对诊断儿童 Hp感染进行探讨。对象与方法一、研究对象　 1 999年 1 1月至 2 0 0 0年 8月我院门诊患儿 72 8例 ,男 40 5例 ,女 32 3例 ,年龄 3个月～ 1 4岁。其中 ,3个月～ 1岁 5例 ;1～ 3岁 2 8例 ;3～ 6岁 1 96例 ;6～ 1 0岁…     

聚合酶链反应(PCR)检测幽门螺杆菌cag A基因

目的　探讨应用PCR直接测定胃粘膜标本中幽门螺杆菌cagA基因。方法　不需细菌培养 ,直接从胃粘膜标本中提取幽门螺杆菌DNA ,选择合适的引物及条件进行PCR ,通过琼脂糖电泳来确定标本中的cagA基因。结果　每例cagA阳性的标本在 191bp的位置有一条清晰的电泳带。 19例胃溃疡患者中cagA阳性 16例 ,阴性 3例。 15例健康人血清对照 ,cagA阳性 3例 ,阴性 12例。该法敏感性 84 .2 % ,特异性 80 %。同时进行快速尿素酶实验 ,发现 17例阳性标本中PCR方法 16例阳性 (94 .1% ) ,2例快速尿素酶实验阴性标本PCR阴性。二者没有显著差异 (χ2 =0 ,P >0 .0 5 )。结论　应用PCR直接测定胃粘膜标本中幽门螺杆菌cagA基因方法简单 ,快速 ,灵敏度和特异性较高。     

聚合酶链反应法测定幽门螺杆菌的vacA基因型

以幽门螺杆菌ＤＮＡ为模板,采用聚合酶链反应设计了５个特异性寡核苷酸引物的一个共引物,分析检测了６２株幽门螺杆菌空泡形成细胞毒素基因Ｓ１ａ、Ｓ１ｂ、Ｍ１型和Ｍ２型,检测结果均为Ｓ１ａ／Ｍ２实验显示胃十二指肠疾病与空泡形成细胞毒素基因无相关关系。     

用套式PCR检测幽门螺杆菌

用互补于幽门螺杆菌（ＨＰ）脲酶Ｃ基因序列的两组寡核苷酸引物，建立了检测ＨＰ的套式聚合酶链反应方法，两轮ＰＣＲ扩增分别在产生６６４ｂｐ和３０１ｂｐ的特异ＤＮＡ片段，灵敏度分别可达１００ｆｇ和１ｆｇ细菌ＤＮＡ，此方法可快速，灵敏，特异地检出各种临床样品中的ＨＰ，是一种非常有用的分子流行病学研究工具。     

聚合酶链反应检测120例胃粘膜中产毒素幽门螺杆菌核酸

临床上将幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ）分为细胞毒素菌株（Ⅰ型）和不产细胞毒素菌株（Ⅱ型）。本文应用ＰＣＲ检测不同胃粘膜病变组织中产毒素Ｈｐ的感染情况，以探讨其在胃疾病发生中的作用。１材料和方法１．１标本来源胃粘膜标本来自本院病理室...     

荧光定量聚合酶链反应检测唾液中幽门螺杆菌的研究

幽门螺杆菌(Hp)感染与胃炎、胃溃疡甚至胃肿瘤等的发病关系密切,国际癌研究协会已于1994年将Hp感染列为人的Ⅰ类致癌因子.检测Hp感染发展迅速,然而其中大多属于有创性,荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)法能从唾液中直接检测H p并具有无创、简便、可准确定量等优点.我们用FQ-PCR法检测唾液中Hp,对诊断儿童Hp感染进行探讨.     

幽门螺杆菌的核酸杂交和PCR检测进展

幽门螺杆菌的核酸杂交和ＰＣＲ检测进展王继德综述杨海涛张万岱校自１９８３年Ｍａｒｓｈａｌｌ［１］首次从人胃粘膜分离出幽门螺杆菌（Ｈｐ）以来，大量的临床和流行病学资料均提示该菌是慢性活动性胃炎的病原菌，并与消化性溃疡的发生和复发有密切关系。但该菌的流行病...     

聚合酶链反应法测定幽门螺杆菌的vacA基因型

以幽门螺杆菌DNA为模板,采用聚合酶链反应设计了5个特异性寡核苷酸引物和一个公共引物,分析检测了62株幽门螺杆菌空泡形成细胞毒素基因S1a、S1b、M1型和M2型,检测结果均为S1a/M2型.实验显示胃十二指肠疾病与空泡形成细胞毒素基因无相关关系.     

原位PCR检测幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A

幽门螺杆菌细胞毒素相关基因Ａ (ＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉｃｙｔｏｔｏｘｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｇｅｎｅＡ ,Ｈｐ ｃａｇＡ)与胃部疾病关系的研究已成为当前热点。本文采用原位聚合酶链反应、常规ＰＣＲ及原位杂交等检测方法对胃病患者中胃粘膜Ｈｐ ｃａｇＡ进     

荧光定量聚合酶链反应在胃黏膜幽门螺杆菌感染诊断中的应用研究

幽门螺杆菌(Hp)感染是慢性胃炎、消化性溃疡的最主要病因之一,与胃癌和胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤的发生密切相关[1].     

斑点—酶联免疫吸附法检测幽门螺杆菌抗体IgG及其临床意义

以幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ，ＨＰ）超声粉碎物作包被抗原，以硝酸纤维素膜为载体，借助于酶标ＳＰＡ建立了检测ＨＰ ＩｇＧ抗体的斑点－酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。并用此法对１８例慢性胃炎、消化性溃疡患者（患者组），１９例儿童（儿童组）和２２例正常成人（成人组）进行了血清中ＨＰ ＩｇＧ抗体的测定。结果显示，患者组抗体检出率为７２．２％，与快速尿素酶法相比，符合率为８３     

PCR检测儿童胃液中的幽门螺杆菌DNA

幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,HP)是一种微需氧G-螺旋棒状杆菌,多隐伏在消化性溃疡和慢性活动性胃炎病变局部,是近年来发现的人类胃炎和消化性溃疡的重要致病因子。在此,我们采用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测了50例儿童胃液中HP-DNA,以探讨儿童胃液中HP感染与浅表性胃炎(简称胃炎)的关系及临床诊断的价值。 1 对象和方法 1.1 研究对象 50例检测对象,胃炎组24例,年龄2个月～12岁,平均8.5岁;非胃炎组26例,年龄4个月～13岁,平均8.6岁。均系小儿科1993年12月～1994年7月门诊和住院患者。以OLYMPUS100型电子胃镜及病理活检确诊为表浅性胃炎和非胃炎为金标准。以胃镜取胃底部胃液标本用于PCR检测。