HPLC测定人血清中甲氨蝶呤浓度

目的 建立高效液相色谱法测定人血清中甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）浓度的方法。方法 以茶碱为内标,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为磷酸盐缓冲液（pH 6.6）-甲醇（82∶18）,检测波长为MTX 306 nm和茶碱254 nm,流速为1.0 mL·min^-1,柱温为30 ℃。结果 MTX浓度分别在0.03～1.65 μmol·L^-1（r=0.999 9）和1.65～66.08 μmol·L^-1（r=0.995 8）内线性关系良好,平均方法回收率97.6%。平均萃取回收率68.5%,日内、日间RSD均〈5%,血清最低检测浓度为0.03 μmol·L^-1。结论 该方法灵敏、准确,线性范围宽,适用于临床甲氨蝶呤的血药浓度监测。     

人血清中甲氨蝶呤血药浓度的HPLC法测定及其应用

目的建立HPLC法测定人血清中甲氨蝶呤(MTX)的浓度并应用于临床。方法采用HPLC法,血清用70%高氯酸沉淀蛋白后,旋涡混匀2 min,离心10 min,取上清液进行分析。色谱柱ZORBAX XDB C18,柱温30℃,流动相:乙腈-H2O(30∶70),流速1.0 m L·min-1,检测波长225 nm。结果血清中MTX保留时间为4.92 min,内标保留时间为9.42 min,最低检测浓度为0.03 mg·L-1,样品稳定性较好。相对回收率为100.15%~102.62%,日内、日间RSD≤10%。结论本法检测MTX血浓度简单、快速、灵敏。通过对大剂量MTX化疗的白血病患儿的血药浓度进行常规检测,可掌握甲酰四氢叶酸钙解救剂量,以提高疗效,减少不良反应的发生。     

优化的HPLC法测定人血清中甲氨蝶呤的浓度及临床应用

目的:建立及优化测定人血清中甲氨蝶呤(MTX)浓度的方法。方法:血样采用15%高氯酸溶液处理后采用高效液相色谱法(HPLC)进样测定。色谱柱为大连依利特ODS C18,流动相为甲醇-10 mmol/L磷酸二氢钾(20∶80,用氢氧化钠调pH 6.5),流速为1.0 ml/min,柱温为35℃,紫外检测波长为303 nm。结果:MTX血药浓度在0.1⁶4μmol/L范围内线性关系良好(r=0.999 5)。MTX低、中、高3种浓度的日内RSD分别为2.70%、1.08%、0.94%,日间RSD分别为4.36%、2.71%、1.95%(n=5),提取回收率分别为70.9%、78.3%、75.4%,最低检测限为0.03μmol/L。结论:优化后的方法准确可靠、灵敏度高、重现性好,适用于大剂量MTX血药浓度监测。     

HPLC法测定患者血浆中甲氨蝶呤的浓度

目的建立高效液相色谱法实时监测患者血浆中甲氨蝶呤浓度,为临床合理用药提供参考。方法以Agilent Eclipse XDB-C18柱（4.6×150mm,5μm）为色谱柱,流动相为醋酸（pH=2.86）-甲醇（82.5：17.5,v/v）,流速：0.8ml/min,检测波长306nm,柱温柱温：40℃,样品经高氯酸沉淀蛋白后直接进样。结果表明血浆中甲氨蝶呤的质量0.3～10.20μg/ml内线性关系良好,r=1（n=3）,检测限为0.03μg/ml。方法回收率为96.43%～99.49%,提取回收率为：77.04%～85.61%。日内和日间RSD均〈5%。结论该方法简便、准确、重复性好,适用于甲氨蝶呤血药浓度监测。     

HPLC法测定宫外孕患者血清中甲氨蝶呤的浓度

目的建立高效液相色谱法实时监测宫外孕患者血清中甲氨蝶呤浓度。方法以ZorbaxSB-C18g（4．6×250mm,5μm）为色谱柱,流动相为0．05mol·L^-1磷酸盐缓冲液（pH6．8）．甲醇（78：22）．流速1．0mL·min^-1,检测波长306nm。以高氯酸为蛋白沉淀剂。结果甲氨蝶呤在0．61～19．52μg·mL^-1内线性关系良好,r=0．9997（n=5）,检测限为0．15μg·mL^-1高、中、低3浓度的方法回收率为97．54％～99．80％,提取回收率为81．15％～85．47％。日内和日间RSD均小于7％。结论该方法简便、准确、重复性好．适用于临床甲氨蝾呤血药浓度监测。     

HPLC法测定人血清中万古霉素的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度的方法。方法:血清样品以20%偏磷酸溶液沉淀蛋白,离心后取上清液直接进样测定。其中,色谱柱为Hypersil C18,流动相为乙腈-0.0125mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(10∶90),流速为0.8mL·min-1,柱温为25℃,检测波长为236nm。结果:万古霉素血药浓度在2.0～170.0mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9998),最低检测浓度为2.0mg·L-1;低、中、高(2.5、30.8、150.4mg·L-1)3种浓度的平均相对回收率分别为99.8%、101.1%、98.9%,日内及日间RSD均<2.5%(n=5)。结论:本方法简便、准确、快速,适用于人血清万古霉素浓度的监测和药动学研究。     

HPLC法测定人血清中5-氟尿嘧啶浓度

目的建立人血清中5氟尿嘧啶(5FU)浓度的HPLC测定法。方法色谱柱为C18ODS柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相为甲醇-水(15∶85),流速为1.0mL/min,紫外检测波长为267nm,内标为替加氟。血清样品用乙酸乙酯提取,氮气吹干,残留物用流动相溶解后进样测定。结果以5FU峰和内标峰的面积比为纵坐标,5FU浓度为横坐标,5FU在2～30mg/L浓度范围线性关系良好(r=0.9991),日内和日间RSD分别小于3.0%和6.0%,日内和日间的平均回收率分别为95.6%～103.6%和95.9%～102.5%。血清杂质对样品测定无干扰。结论该法简便、快速,但有待进一步确证。     

HPLC法测定人血清中奈达铂浓度

目的:建立高效液相色谱法测定奈达铂的血清浓度。方法:采用色谱柱为Spherisorb NH2柱(4.0 mm×300 mm,10μm);流动相:40 mmol·L-1磷酸二氢钾-乙腈(8∶2);流速:0.8 mL·min-1;检测波长:210 nm。结果:奈达铂浓度在5～50μg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9995),奈达铂浓度为5、20、40μg·mL-1时日内和日间平均回收率结果分别为:96.7%、97.2%、97.8%和98.4%、98.2%、99.6%,日内、日间RSD分别为2.09%、1.98%、3.19%和2.27%、2.13%、1.92%(n=5)。结论:该方法具有样品处理简单、稳定性高等特点,适用于奈达铂的药动学研究和治疗药物监测。     

HPLC法测定人血浆中甲氨蝶呤的浓度

目的:建立一种快速、灵敏及检测范围大的高效液相色谱测定人血浆中甲氨蝶呤（MTX）浓度的方法。方法:以氨蝶呤（aminopterin）为内标,采用HP1100型高效液相色谱仪,以HP Hypersil ODS column（12 mm×4mm,5μm）为分析柱,前加HPLichrosphere　C18保护柱;流动相为乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液（10:90）,流速为0.8mL·min-1进样量20μL;检测波长为313nm;室温25℃。血浆样品经甲醇沉淀蛋白、氯仿除脂后进样。结果:色谱峰分离良好,无干扰。测定数据分2段进行回归,线性方程为:低浓度时,Y=939.5X-0.04049,r=0.999 9（10～200ng·mL-1）;高浓度时,Y=543.3X 40.77,r=1.000（200～10 000 ng·mL-1）。检测范围:10～10 000 ng·mL-1。结论:本法是一种可靠的。快速灵敏的检测方法,适用于包含MTX的化疗方案的监测及药动学的研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中甲氨蝶呤浓度

目的:建立高效液相色谱测定人血浆中甲氨蝶呤（MTX）浓度的方法。方法:以茶碱（Theophyline）为内标,色谱柱为Nova-pak C₁₈柱（150 mm×3.9 mm,4μm）,流动相:乙腈-甲醇-0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液pH 6.5（6:2:92）,流速:1.0 ml·min^-1,检测波长303 nm及254 nm,柱温25℃。结果:甲氨蝶呤浓度在0.05～10.0 mg·L^-1范围内线性良好,r=0.999 6。绝对回收率为66.72%,相对回收率为98.35%,日内、日间RSD均<10%。结论:该法快速,简便,灵敏度高,适用于临床常规血药浓度监测。     

HPLC法测定急性淋巴细胞白血病患儿血清中甲氨蝶呤浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定急性淋巴细胞白血病患儿血清中甲氨蝶呤浓度的方法。方法:急性淋巴细胞白血病患儿在开始静脉滴注大剂量甲氨蝶呤后24、44、68h时采集血样。血清经高氯酸沉淀蛋白高速离心后,取上清液进样分析。色谱柱为Synergi-4u Fusion-RP80A,流动相为磷酸盐缓冲液(pH6·8)-甲醇(78∶22),流速为0·8mL·min-1,紫外检测波长为306nm,柱温为30℃。结果:甲氨蝶呤检测浓度在0·05~2·50μmol·L-1(r=0·9991)和2·50~100·0μmol·L-1(r=0·9998)范围内线性关系良好。日内、日间RSD分别为(4·09±1·69)%、(4·21±1·27)%;平均方法回收率为(99·86±1·38)%,平均提取回收率为(68·85±1·46)%;最低定量限为0·05μmol·L-1。20例患儿24、44、68h时血清甲氨蝶呤平均浓度分别为(38·2±10·7)、(0·46±0·36)、(0·10±0·07)μmol·L-1。结论:本方法采样量小,操作简便,测定结果准确可靠,适用于临床甲氨蝶呤的血药浓度监测。     

高效液相色谱法测定咪唑立宾的血药浓度

目的：建立人血清中咪唑立宾（MZR）的高效液相色谱测定方法,为临床MZR的个体化用药提供方法学参考。方法：采用10%高氯酸直接沉淀血清蛋白,色谱柱为Megres C18（4.6 mm ×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-40 mmol·L-1磷酸盐缓冲液（pH=3.5,2∶98,v/v）,流速为0.9 mL· min-1,检测波长为280 nm。结果：MZR在0.05~10μg·mL-1范围内线性关系良好（r=0.9998）,批内、批间准确度偏差小于4.6%,批内、批间精密度RSD＜7.9%,在室温放置、冰冻、反复冻融条件下考察样品稳定性,MZR均保持稳定,偏差小于4.9%。结论：高效液相色谱法测定MZR血药浓度的方法快速、准确、灵敏度高,适合在治疗药物监测中常规应用。     

外标一点法在人体甲氨蝶呤血浆浓度测定中的应用

目的：建立甲氨蝶呤（ MTX）血浆浓度的高效液相色谱测定方法。方法：利用外标一点法检测甲氨蝶呤血浆浓度,并与标准曲线法进行对比。结果：使用高效液相色谱法测定甲氨蝶呤血浆浓度时,标准曲线法在0.05～5.00μg／ml范围内药物浓度与峰面积呈现良好的线性关系,回收率、相对标准偏差符合测定要求;外标一点法在0.36～0.65μg／ml范围内药物浓度与峰面积呈现良好的线性关系,回收率、相对标准偏差符合要求。2种方法对患者服药44 h后甲氨蝶呤血浆浓度测定结果一致,差异无统计学意义（ P＞0.05）。结论：外标一点法简单、快速,精密度和重复性较好,适用于临床甲氨蝶呤血浆浓度测定。     

HPLC法测定人血清中头孢噻利的浓度

目的:建立并优化一种简单、快速、高灵敏和高选择性测定人体血清中头孢噻利浓度的方法。方法:以万古霉素为内标,血清样品用20%硫酸锌沉淀蛋白后取上层水相直接进样,以高效液相色谱(HPLC)法测定,色谱柱为AgilentTC-C18(2)和填充相同材料的预柱AgilentTC-C18柱,流动相为乙腈-0.05 mg/L磷酸二氢钾(10∶90),流速为1.0 ml/min,紫外检测波长为254 nm。结果:头孢噻利血药浓度在1²00 mg/L范围内线性关系良好(r=0.999 8);平均方法回收率、平均提取回收率分别为99.67%和76.17%,日内、日间RSD均小于9%。结论:本法简便、快速、准确可靠、灵敏度高,适合临床常规血药浓度的监测和实验课题的研究。     

HPLC法测定人血清中丙戊酸钠的浓度

目的:建立测定人血清中丙戊酸钠浓度的方法。方法:血样采用2-溴-对硝基苯乙酮衍生化,以高效液相色谱法进行测定。色谱柱为Shimpack C18,流动相为甲醇-水(80∶20),流速为0.9 mL·min-1,检测波长为265 nm,柱温为30 ℃,内标为环己烷羧酸。结果:丙戊酸钠血药浓度在10～150 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.999 7,n=6),最低检测浓度为1 mg·L-1;方法回收率为99.45%～103.24%,萃取回收率为98.12%～100.37%,日内与日间RSD均<8%(n=5)。结论:本方法快速、简便、准确,适用于临床丙戊酸钠的血药浓度监测。     

高效液相色谱外标法快速测定苯巴比妥血药浓度

目的:建立高效液相色谱(HPLC)外标法快速测定人血清中苯巴比妥的浓度。方法:血清样品经甲醇沉淀后,以甲醇-水(40∶60,V∶V)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,色谱柱为Inertsil ODS-SP(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃,紫外检测波长为214 nm。结果:血清内源性杂质不干扰待测物的测定,苯巴比妥的线性范围为4.5～72.8μg·mL-1,日内、日间精密度(RSD)均<5%,样品稳定性良好。结论:该法灵敏、快速、准确、操作简便、线性范围宽,可用于苯巴比妥的血药浓度监测。