浸透限制固定相高压液相色谱法和荧光偏振免疫法测定人血中卡马西平浓度的比较

目的:比较浸透限制固定相高效液相色谱法(RAM-HPLC)与荧光偏振免疫法(FPIA)测定人血中的卡马西平(CBZ)浓度.方法:建立一种直接进样RAM-HPLC法测定病人静脉和指端血浆的CBZ浓度.结果:两种测定方法都不需样品前处理,有好的重现性和近100％的回收率.FPIA测定静脉血样CBZ的结果与RAM-HPLC分别测定静脉和指端血样CBZ的结果有良好的相关性(R=0.989,0.995),但相差显著(P<0.05);而RAM-HPLC法测定静脉和指端血样两组数据间相差不显著(P>0.05).结论:RAM-HPLC和FPIA法均可测定CBZ浓度.在治疗药物监测中,FPIA更适合常规的监测;RAM-HPLC法更适用于相关研究和特殊病例监测,这里我们成功地应用于测定人外周微量血样中CBZ的浓度.     

单克隆荧光偏振免疫法和高效液相色谱法测定环孢素A全血浓度的相关性

目的比较单克隆荧光偏振免疫法（FPIA—m法）和高效液相色谱（HPLC）法测定环孢素A（CsA）全血浓度的相关性。方法分别采用HPLC法和FPIA—m法测定42份肾移植患者的CsA血样，测定值用t检验和线性回归方法进行分析。结果FPIA—m法与HPLC法测定值之间相关性好；回归方程为CF=78．12＋1．21CH，r=0．9893（P〈0．001）。结论FPIA—m法和HPLC法同属于特异性分析法，FPIA—m法测定值均高手HPLC法。     

高效液相色谱法与荧光偏振免疫法在抗癫痫药血清浓度测定中的相关性比较分析

目的探究HPLC与FPIA两种方法在抗癫痫药血清浓度测定中的相关性。方法采集本院收治的经苯妥英钠（PT）、苯巴比妥（PB）、卡马西平（CBZ）治疗的103例癫痫患者血清,分别采用高效液相色谱法、荧光偏振免疫法测定其血药浓度并进行线性回归分析。结果所得的线性回归方程为YPV=-1．421＋1．141X（r=O．963）;YPB=-0．128＋0．956）（（r=0．949）;YcBz=0．183＋0．954X（r=0．944）,且两种方法测得的值呈线性相关;经配对t检验后,两者差异有统计学意义（P〉0．05）。结论高效液相色谱法与荧光偏振免疫法两种方法测定抗癫痫药血清浓度具有相关性。采用HPLC法和FPIA法进行CBZ、PT、PB的血清浓度测定各有利弊,须结合检测药物种类数目、受检人数等合理选择监测方式     

FPIA法与HPLC法测定苯妥英钠血药浓度的对比

目的比较荧光偏振免疫法（FPIA）与高效液相色谱法（HPLc）测定血浆中苯妥英钠的浓度。方法收集服用苯妥英钠的患者稳态浓度的血浆样品,分别以荧光偏振免疫法和高效液相色谱法进行测定,用回归法考察两种方法测定结果的相关性,比较测定结果。结果2种方法在统计学上无显著性差异,具有良好的相关性（P〉0．05）。以荧光偏振免疫法测定结果（X）与高效液相色谱法测定结果（Y）所作线性回归方程如下：Y=-0．1093＋0．9812x,相关性分析：r=0．9517。结论荧光偏振免疫法与高效液相色谱法测定苯妥英钠血药浓度具有相关性．2种方法均可用于血药浓度的常规监测。     

用HPLC法测定大鼠血浆和胆汁中芹菜素的浓度

目的：建立HPLC法测定静脉给药后大鼠体内的芹菜素浓度。方法：采用HPLC法,色谱柱为Dikma C18柱,流动相为甲醇：0．2％（V／V）磷酸水溶液-66．5：33．5,检测波长350nm。用该方法测定5只大鼠静脉给药后不同时间点的血浆及胆汁中芹菜素浓度,计算主要药动学参数及胆汁排泄率。结果：血浆药物浓度的标准曲线在0．04～8μg／mL范围内线性关系良好（r=0．9998）,胆汁药物浓度标准曲线在0．25～8μg／mL范围内线性关系良好（r=0．9998）,血浆和胆汁的精密度和方法回收率均良好。芹菜素静脉给药后符合二室模型,消除半衰期为95．2min,胆汁排泄率为5．64％。结论：该方法灵敏、快速、准确,能够用于芹菜素的药动学研究。芹菜素静脉给药后,血浆浓度迅速下降,部分通过胆汁排泄。     

色谱法测定人血浆中万古霉素的浓度

目的：建立HPLC法和液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法检测人血浆中万古霉素的浓度,并分别与FPIA法进行比较。方法：HPLC法：100μL血浆样品加入等体积10%的高氯酸沉淀,振荡离心后取上清液进样。采用Agilent Eclipse XDB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,柱温为35℃,流动相为0.05 mol·L-1 KH2PO4（pH=3.2）-甲醇（74∶26,v/v）,流速为1 mL·min-1,检测波长为230 nm。 LC-MS/MS法：100μL血浆样品用300μL乙腈沉淀,振荡离心后取上清液进样。色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18（100 mm ×2.1 mm,3.5μm）,柱温为40℃,流动相为水（含0.1%甲酸）-乙腈（90∶10,v/v）,流速为0.20 mL·min-1。采用电喷雾化离子源（ESI）,多离子反应模式（MRM）检测,万古霉素和内标去甲万古霉素的监测离子对分别为m/z 725.0→144.0和718.5→144.0。采用建立的HPLC法和LC-MS/MS法测定95份临床样本,并与FPIA法进行相关性和测定方法的偏倚分析。结果：HPLC法和LC-MS/MS法测定万古霉素的线性范围分别为1.2~96μg·mL-1和0.4~96μg·mL-1,低、中、高三种浓度质控品日内和日间相对标准差（RSD）均〈15%。两种方法与FPIA法有很强的相关性（r=0.9621,P〈0.0001和r=0.9466,P〈0.0001）,无明显偏倚。结论：建立的HPLC和LC-MS/MS法快速、灵敏、准确,样本测定结果与FPIA法无显著差异,适用于万古霉素的常规血药浓度监测及人体药物代谢动力学研究。     

反相高效液相色谱法测定六味补血颗粒中芍药苷含量

目的建立反相高效液相色谱（RP—HPLC）法测定六味补血颗粒中芍药苷含量。方法色谱柱为Alhima C18柱（150mm×4．6mm，5um），以乙腈-0．05mol／L磷酸二氢钾（40：60）为流动相，流速为0．8mL／min，检测波长为230nm，柱温为30℃。结果芍药苷质量浓度在10．36～103．6mg／L范围内与峰面积线性关系良好（r=0．9997），平均回收率为99．85％，RSD=0．55％（n=6）。结论RP—HPLC法准确、简便、重现性好，可作为六味补血颗粒质量控制的有效方法。     

夏桑菊泡腾片含量测定方法研究

目的建立夏桑菊泡腾片中熊果酸的含量测定方法。方法采用高效液相色谱（HPLC）法测定,色谱柱为Hypersil BDS C18 柱（200mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-水-冰乙酸-三乙胺（95：5：0．3：0．02）,检测波长215nm。结果熊果酸质量浓度在0．0103—0．5128g／L范围内与峰面积线性关系良好,r=0．997,平均加样回收率为101．64％,RSD为1．78％（n=9）。结论HPLC法简单易行,测定结果准确、重现性好。     

高效液相色谱法测定跌打活血胶囊中血竭素含量

目的高效液相色谱（HPLC）法测定跌打活血胶囊的血竭素含量。方法采用Thermo Hypersil—Keystone C18色谱柱（150mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-0．05mol／L磷酸二氢钠（50：50），检测波长为440nm，柱温为40℃，流速为1mL／min。结果血竭素进样量在0．01464-0．30744μg范围内与峰面积线性关系良好，r=0．9999，平均加样回收率为98．66％，RSD=1．65％（n=6）。结论HPLC法准确、简便，可用于跌打活血胶囊的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定大鼠血浆中白术内酯Ⅱ和Ⅲ含量

目的建立大鼠血浆中白术内酯Ⅱ和Ⅲ的HPLC检测方法。方法血浆样品经液-液革取后,以乙腈-水（60：40）为流动相,流速1．0mL·min^-1,采用SHIMADZUODS柱（150mm×4．6mm;i．d．,5μm）色谱柱分离,同时测定大鼠口服白术内酯Ⅱ和Ⅲ后血浆中两种有效成分的浓度。结果标准曲线线性范围为0．05--10．0mg·L^-1,线性关系良好（r〉0．99）,定量限为0．05mg·L^-1,回收率90％以上,日内和日问变异系数均低于10％。结论该法操作简便、灵敏、准确,适合于临床前药物动力学研究。     

LC-MS/MS法测定癫痫患者血清中卡马西平的浓度

目的:建立以高效液相色谱-电喷雾串联质谱(LC-MS/MS)法测定癫痫患者血清中卡马西平浓度的方法。方法:色谱柱为Zorbax Extend-C18,流动相为甲醇-0.01mmol.L-1乙酸铵溶液(80:20),流速为0.3mL.min-1,进样量为10μL;离子源为电喷雾离子化源,正离子方式检测,扫描方式为正离子监测,卡马西平的碰撞诱导解离电压为30V,用于定量分析的离子反应为m/z237.2→m/z194.2。结果:卡马西平血药浓度在2.0～40.0ng.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9974);平均提取回收率为101.1%,日内、日间RSD分别为3.39%、4.11%。10名患者血清中卡马西平的平均浓度为5.69ng.mL-1(RSD=4.75%),比荧光偏振免疫法测定结果的RSD小。结论:本方法专属性强,灵敏度和准确度、重现性好,易于操作,可用于癫痫患者血清中卡马西平浓度的测定。     

HPLC法测定人血浆中阿奇霉素浓度及其药动学研究

目的:建立测定人血浆中阿奇霉素浓度的方法并研究其药动学行为。方法:血样采用二氯甲烷处理后以高效液相色谱法进样测定。色谱柱为Kromasil C18,流动相为甲醇-乙腈-水-0.1 mol/L乙酸(39∶15∶46∶0.2),检测波长为210 nm,内标为罗红霉素。结果:阿奇霉素血药浓度在0.40¹8.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 6);回收率>80%,日内和日间RSD均<10%。结论:本方法简便、快速、准确,适用于阿奇霉素药动学研究及血药浓度监测。     

人血浆中右酮洛芬浓度的HPLC法测定

目的：建立 HPLC 法测定人血浆中右酮洛芬的浓度。方法：血浆样品用乙醚作为萃取剂萃取,以萘普生为内标;采用 DiamonsiL C18 色谱柱（5 μm,4.6 mm×200 mm）;流动相为乙腈-5 mol/L 磷酸盐缓冲液（27∶73）,pH 值为 6.9,流速为 1.0 mL/min;检测波长为 260 nm。结果：右酮洛芬血浆样品的线性范围为 0.078-5.000 μg/mL（r＝0.999 6）;方法回收率和萃取回收率分别为 99.5%-101.9% 和 70.8%-73.8%（n＝5）,日内、日间 RSD 分别为 5.5%-10.8% 和 6.4%-9.4%（n＝5）。结论：本法简便、准确、灵敏度高、专属性强,适用于人血浆中右酮洛芬浓度的测定。     

HPLC法测定大鼠血浆中奥拉西坦的浓度

目的:建立大鼠血浆中奥拉西坦浓度的检测方法。方法:取大鼠8只,一次性灌胃给予奥拉西坦200 mg.kg-1,给药2 h后取血,采用高效液相色谱法检测其血药浓度。色谱柱:Symmetry shiedTMRP18;流动相:乙腈-水(3.2∶96.8,V/V),流速:0.8 mL.min-1;检测波长:210 nm;柱温:40℃;进样量:20μL。结果:奥拉西坦的保留时间为3.65 min;其检测浓度的线性范围为2～100 mg.L-1(r=0.999 8);低、中、高浓度血浆样品的绝对回收率分别为(91.1±5.17)%、(97.9±3.22)%、(98.4±1.99)%,方法回收率分别为(96.35±3.01)%、(101.40±3.41)%、(102.23±1.37)%;日内RSD分别为2.86%、4.38%、3.54%,日间RSD分别为3.25%、3.17%、3.14%;奥拉西坦血浆样品-40℃保存30 d及反复冻融3次后性质稳定,血浆样品处理后放置4 h对测定无影响。8只大鼠血浆样品中奥拉西坦的平均浓度为(35.58±10.83)mg.L-1。结论:本方法简便、准确、灵敏度高、重现性好,可用于大鼠血浆中奥拉西坦浓度的测定。     

样品处理对肺移植术后患者全血中环孢素A浓度测定的影响

目的:考察荧光偏振免疫(FPIA)法测定肺移植术后患者全血中环孢素A(CsA)浓度时样品的保存温度、时间和不同稀释方法对测定结果的影响。方法:将肺移植术后患者的全血标本分别置室温((22±2)℃)和冰箱(2～8℃)保存1周或2周,考察其稳定性;采用不同溶剂(灭菌注射用水、空白全血)稀释后与不经稀释的标本进行测定、对比,考察稀释条件。结果:室温或冷藏下的标本测定结果均与保存前无统计学差异(P>0.05),但冷藏者变异小;2种方法稀释后测定结果与未稀释者无统计学差异(P>0.05),用空白全血稀释的结果最接近不稀释的值。结论:全血标本在室温下至少可稳定保存2周,冷藏仍是最佳保存方法;空白全血稀释标本最好。     

伏立康唑血药浓度的测定与方法学考察

目的：建立人血浆中伏立康唑HPLC测定法,为人体药动学和药效学研究提供方法学基础。方法：取血浆0.5 mL,以劳拉西泮为内标,用乙腈-水（1∶9）2 mL以及乙腈洗脱,收集1 mL洗脱液,进样为20μL;色谱柱为Semmetry C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（50∶50）,流速为0.8 mL/min,在激发波长为256 nm和发射波长为372 nm处进行检测。结果：伏立康唑浓度在0.208~20.8μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系（Y=0.2517ρ-0.0144,r2=0.999 8）;高、中、低3种浓度质控样品的日内和日间RSD均小于5%,相对回收率均在98%~103%范围内,将其室温放置24 h以及在-20℃反复冻融3次后,检测其回收率在83%~102%。结论：该方法操作简便、快速,准确灵敏,适用于临床药动学研究。     

HPLC法测定人血浆中5-氟尿嘧啶的浓度

目的：建立测定人血浆中5-氟尿嘧啶（5-FU）浓度的方法。方法：血浆采用乙酸乙酯二次提取处理后以高效液相色谱法进样测定,其中,色谱柱为Ultimate C18,流动相为10mmol·L-1 KH2PO4溶液,流速为1．0mL·min-1,检测波长为265nm,柱温为40℃。结果：5-Fu血药浓度在0．48-61．4μg·mL。范围内线性关系良好（r=0．9998）,最低检测浓度样品在为0．48μg·mL-1,日内和日间RSD分别为5．12％～9．98％、5．28％～10．95％（n=5）,高、中、低3种浓度的方法回收率均高于85％。样品在室温放置、冷冻保存、反复冻融条件下稳定性良好。结论：该方法具有操作简便可靠、准确、稳定性高等特点,适用于人血浆中5-Fu浓度的测定。