槲皮素对小鼠金黄色葡萄球菌肺炎的防治作用及IKK/NF-κB/IκB信号通路机制研究

目的:探讨槲皮素防治金黄色葡萄球菌致小鼠肺炎的IKK/NF-κB/IκB炎症信号通路机制。方法:将60只小鼠随机分为阴性对照组(生理盐水)、模型组、阳性对照组(青霉素)及槲皮素50、100、200 mg/kg剂量组,10只/组,每天给药1次,连续3 d。实验第4 d,除阴性对照组外,其余组采用金黄色葡萄球菌气道滴入法建立小鼠感染性肺炎模型,再继续给药3 d。末次药后3 h,小鼠摘眼球取血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定TNF-α、IL-6及IL-1β含量,然后立即颈椎脱臼处死小鼠,分离肺组织,取肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)进行白细胞分类计数,取左侧肺组织进行病理组织学HE染色检查,取右侧肺组织采用RTPCR及Western blot法检测NF-κB、IKKβ和IκBαmRNA和蛋白表达水平。结果:与阴性对照组比较,模型组BALF中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞计数明显升高,血清TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显升高,肺组织炎性病变加重,肺组织NF-κB、IKKmRNA和蛋白表达明显上调,IκBαmRNA和蛋白明显下调。与模型组比较,槲皮素100、200 mg/kg组小鼠BALF中淋巴细胞、单核细胞及中性粒细胞计数明显减少,血清TNF-α、IL-6及IL-1β含量显著下降;槲皮素200 mg/kg组小鼠肺组织炎性病变明显减轻,肺组织NF-κB、IKKmRNA和蛋白表达水平下调,IκBαmRNA和蛋白表达水平上调。结论:槲皮素抑制金黄色葡萄球菌肺炎小鼠炎症反应与其抑制IKK/NF-κB/IκB炎症信号通路有关。     

基于IKK/IκB/NF-κB信号通路探讨瘀血痹胶囊对动脉粥样硬化免疫与炎症作用机制研究

动脉粥样硬化(AS)相关的免疫与炎症反应是目前医疗研究的热点,在参与AS免疫炎症反应机制的众多通路中IKK/IκB/NF-κB信号通路是二者共同的信号通路。首先探讨了中医“痹病”中“内痹”与“外痹”的关系,又从现代医学角度阐述了免疫、炎症反应与动脉粥样硬化发生发展的关系,进一步深入探讨了IKK/IκB/NF-κB信号通路的作用途径。基于上述理论依据,从NF-κB信号通路入手通过体内实验探讨中药大品种瘀血痹胶囊对动脉粥样硬化免疫与炎症反应的作用机制,旨在为研究中医中药的“异病同治”提供科学依据,为中西医结合防治心血管病提供新思路。     

清瘟败毒饮影响急性肺损伤大鼠肺组织NF-κBp65表达的实验研究

目的:通过观察清瘟败毒饮对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织病理及核因子-κBp65(NF-κBp65)表达的影响,探讨清瘟败毒饮对ALI的治疗作用及干预机制。方法:选取健康雄性SD大鼠144只,随机分为6组,每组24只,分别为正常对照组,模型组,泼尼松组和清瘟败毒饮大、中、小剂量组。脂多糖溶液(2mg/kg)气管内滴注复制ALI大鼠模型,连续两天。各治疗组在第2次滴注完LPS溶液1h后,用生理盐水将相应的药物稀释至4mL灌胃,1天2次。各组分别于灌胃后24h、48h处死6只大鼠,于72h处死余下所有大鼠,并收集所需标本;通过镜下观察肺组织病理变化及采用W estern b lot方法检测肺组织中NF-κBp65的表达水平。结果:LPS致ALI大鼠肺组织肺泡结构破坏或实变,肺间质明显水肿,大量炎性细胞浸润,肺泡腔和肺间质内可见局灶性炎症细胞浸润和大量红细胞渗出,与同时相模型组比较,清瘟败毒饮大、中剂量组大鼠病理学炎症积分均降低非常显著(P<0.01),而小剂量组只有24h、48h有显著性降低或非常显著性降低(P<0.05或P<0.01);清瘟败毒饮各剂量治疗组中48h清瘟败毒饮大、中剂量组和72h各剂量组大鼠肺组织中NF-κBp65的表达均降低,与同时相模型组相比均有显著性差异或非常显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:清瘟败毒饮能减轻LPS致ALI大鼠肺组织的损伤程度,在一定程度上减少炎症细胞在肺部积聚、浸润、渗出,起到比较明确的肺保护作用;清瘟败毒饮能有效减少LPS致ALI大鼠肺组织中NF-κBp65的表达,通过抑制NF-κB的活化和炎性细胞因子的生成,对炎症反应起到抑制作用;在LPS致ALI早期使用清瘟败毒饮,可有效减轻肺组织的损伤程度,减轻肺部的炎症反应。     

氧化槐定碱通过下调IKK/IκB/NF-κB信号通路抑制结直肠癌SW480细胞增殖

目的:探讨氧化槐定碱(Oxysophoridine,OSR)抑制SW480细胞增殖的IKK/IκB/NF-κB信号通路机制。方法:采用MTT法分析2、4、8、16、32、64、128及256 mg/l浓度氧化槐定碱作用72 h对SW480细胞增殖的抑制作用,并计算半数抑制浓度(IC_(50));将25、50及100 mg/l氧化槐定碱作用于SW480细胞,绘制7 d生长曲线;观察细胞集落形成情况;采用RT-PCR和Western blot法检测细胞IKKβ、NF-κB、IκBαmRNA和蛋白表达水平。结果:MTT结果提示氧化槐定碱浓度为2～256 mg/l时,对SW480细胞72 h增殖抑制率为4.76%～81.90%,IC_(50)=(79.04±5.30)mg/l;生长曲线提示氧化槐定碱25、50和100 mg/l对SW480细胞生长具有明显的抑制作用;显著抑制SW480细胞的集落形成;氧化槐定碱25、100 mg/l可下调SW480细胞NF-κB、IKKβmRNA和蛋白表达水平,上调IκBαmRNA和蛋白表达水平。结论:氧化槐定碱对SW480细胞生长、增殖具有抑制作用,其作用机制可能与抑制IKK/IκB/NF-κB信号通路有关。     

固本防哮饮对幼龄小鼠哮喘缓解期模型IKK/IκB/NF-κB信号途径的调节作用

目的观察固本防哮饮对幼龄哮喘缓解期小鼠IKK/IκB/NF-κB信号途径的影响。方法采用幼龄BALB/c小鼠,鸡卵蛋白腹腔注射和雾化吸入致敏,并多次雾化吸入激发的方法建立幼龄哮喘缓解期小鼠模型。造模成功后给药4周,测小鼠气道阻力、HE染色观察小鼠肺组织病理变化、肺泡灌洗液细胞计数和细胞分类、Western blot法检测肺组织和外周血单个核细胞中IκB激酶β(IKKβ)、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、核因子-κB(NF-κB)p65蛋白表达。结果固本防哮饮可以降低幼龄哮喘缓解期小鼠的气道阻力、降低肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数,降低BALF中中性粒细胞和单核细胞比例(P0.05,P0.01),改善支气管周围炎性细胞浸润,减轻气道重塑,并能增加肺组织和外周血单个核细胞中IκBα表达量(P0.01,P0.05),降低肺组织和外周血单个核细胞中IKKβ(P0.05,P0.01)、NF-κB p65(P0.01,P0.05)的高表达。结论固本防哮饮降低气道高反应性,减轻支气管炎性细胞浸润以及调节机体IKK/IκB/NF-κB信号通路的功能失调可能是其防止哮喘复发的作用机制。     

基于TLR4/NF-κB 信号通路研究木犀草素对幼鼠急性肺损伤的作用机制

目的研究木犀草素对幼鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用,并探究其作用机制。方法将50 只SPF 级 SD 幼鼠随机分为5 组：正常组,模型组,地塞米松组,木犀草素高、低剂量组,每组10 只。除正常组外,其 余各组幼鼠雾化吸入脂多糖（LPS）建立急性肺损伤模型,正常组大鼠雾化吸入等量生理盐水。模型复制前3 d 起及模型复制后1 h,木犀草素高、低剂量组大鼠分别灌胃40、20 mg · kg-1 的木犀草素,地塞米松组于模型复 制前2 h 注射5 mg·kg-1 地塞米松,正常组和模型组大鼠灌胃等量0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）。模型复制 后12 h,采用ELISA 法检测血清及肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤 坏死因子α（TNF-α）和肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量;检测大鼠肺组织湿干质量 比（W/D）;HE 染色检测肺组织病理变化;Western Blot 法和qRT-PCR 法检测肺组织Toll 样受体4（TLR4）、核 因子κB（NF-κB）p65 蛋白和mRNA 的表达水平。结果与正常组比较,模型组血清及BALF 中IL-1β、IL-6、 TNF-α 的表达水平明显升高,W/D 值升高,肺组织SOD 活力降低,MDA 含量升高,肺损伤明显,TLR4、 NF-κB p65 蛋白和mRNA 的表达水平增加（P＜0.05）。与模型组比较,木犀草素降低了血清及BALF 中 IL-1β、IL-6、TNF-α 水平和W/D 值,提高了肺组织SOD 活力,降低了MDA 含量,肺损伤得到改善,同时也 降低了肺组织中TLR4、NF-κB p65 蛋白和mRNA 的表达水平（P＜0.05）。结论木犀草素对幼鼠急性肺损伤 具有保护作用,其作用机制与抑制TLR4/NF-κB 信号通路的活化有关。     

清瘟败毒饮对脓毒血症兔不同时相TLR4/NF-κB信号通路及炎症因子的影响

目的:探讨清瘟败毒饮对脓毒血症兔TLR4/NF-κB信号通路及下游炎症因子白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法:40只新西兰大耳白兔,随机选取10只作为空白组,其余30只造模,采用耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素建立脓毒血症模型;将造模成功的30只兔随机分为模型组、清瘟败毒饮组、血必净注射液组,每组10只。分别予以相应药物干预,空白组、模型组予等量生理盐水灌胃,分别于造模24 h和48 h耳缘静脉采血,检测Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)及其下游炎症因子IL-6、TNF-α水平。结果:模型组、清瘟败毒饮组、血必净注射液组TLR4、NF-κB、IL-6、TNF-α水平均高于空白组(P0.05),提示造模成功;给药24 h后,清瘟败毒饮组、血必净注射液组TLR4、NF-κB、IL-6、TNF-α水平均低于模型组(P0.05)。给药48 h后,清瘟败毒饮组TLR4、NF-κB、IL-6、TNF-α水平低于血必净注射液组(P0.05)。结论:清瘟败毒饮可通过TLR4/NF-κB信号通路减轻脓毒血症兔的全身炎症反应。     

中药调节TLRS/NF-κB信号通路研究进展

TLRs/NF-κB信号通路是细胞中广泛存在的信号转导途径,在免疫、炎症、肿瘤等众多疾病的发生发展中起着重要作用。近来有大量研究通过中药对这一通路的调节作用来探讨中药对相关疾病治疗的分子基础。对中药提取物及药对配伍,中药复方及其他中药制剂对TLRs/NF-κB信号通路的调节做了综述。     

电针对溃疡性结肠炎小鼠结肠Notch/NF-κB信号通路的影响

目的:观察电针对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠肠黏膜屏障的保护作用及其对Notch/NF-κB信号通路的影响,探讨电针治疗UC的相关机制。方法:雄性C57BL/6J小鼠采用葡聚糖硫酸钠饮用法复制UC模型,造模成功后随机分为模型组、电针组,每组6只,另设6只为空白组。电针组给予电针“足三里”治疗,每日30 min,连续治疗7 d。观察各组小鼠的一般情况,进行疾病活动指数(DAI)评分,采用HE染色法观察各组小鼠结肠组织形态变化,ELISA法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6含量,免疫荧光法检测结肠组织Claudin-1蛋白表达,免疫组织化学法检测结肠组织黏液蛋白(Muc)-2、Notch-1、基质金属蛋白酶(MMP)-9蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测结肠组织Notch-1、Hes-1、核转录因子(NF)-κB、Toll样受体(TLR)-4、蛋白激酶B(AKT) mRNA含量。结果:与空白组比较,模型组小鼠DAI评分升高(P<0.001),血清中TNF-α、IL-6含量增加(P<0.01,P<0.001),结肠组织中Claudin-1、Mu...     

蚁附超细微粉对RA-MsPGN大鼠模型NF-κB/IκB信号通路的影响

目的:探讨蚁附超细微粉对RA-MsPGN大鼠模型NF-κB/IκB信号通路的影响。方法:建立RA-MsPGN大鼠模型后,给予蚁附超细微粉干预7周,采用ELISA法检测肾脏NF-κB p65、磷酸化IκB-α和IL-1β含量的变化。结果:RA-MsPGN模型大鼠与正常组相比NF-κB p65、磷酸化IκB-α和IL-1β含量均较空白组显著增高,而蚁附超细微粉各剂量组与模型组比较NF-κB p65、磷酸化IκB-α和IL-1β含量均显著降低。结论:RA-MsPGN模型NF-κB/IκB信号通路处于高度活化状态,蚁附超细微粉对高度活化NF-κB/IκB信号通路有显著的抑制和/或阻断作用,提示NF-κB/IκB信号通路可能是蚁附超细微粉发挥肾保护作用的主要机制之一。     

桂枝挥发油对LPS致大鼠急性肺损伤模型核因子κB信号通路的影响

目的:探讨桂枝挥发油对核因子κB信号通路的影响。方法:制作LPS诱导的大鼠急性肺损伤模型,通过桂枝挥发油治疗后,采用ELISA法检测肺组织细胞核蛋白NF-κBP65含量和肺组织溶浆中磷酸化IκB-α、IL-1β的含量。结果:正常大鼠肺组织中NF-κBP65、磷酸化IκB-α和IL-1β仅有微量表达,LPS尾静脉注射后6h各其表达显著增高,桂枝挥发油高、中、低剂量组NF-κBP65、磷酸化IκB-α和IL-1β的含量均较模型组显著降低。结论:桂枝挥发油对急性肺损伤时高度活化的核因子κB信号通路有显著的抑制或拮抗作用,提示核因子κB信号通路是桂枝挥发油抗炎作用的主要靶点之一。     

IKK/NF-κB信号通路与2型糖尿病及中药抗炎治疗

目的：探讨IKK/NF-κB信号通路在2型糖尿病中的作用及以IKK/NF-κB信号通路中相关蛋白及酶为靶点进行2型糖尿病的中药抗炎治疗。方法：介绍并总结了IKK/NF-κB信号通路系统组成及激活途径,以及IKK/NF-κB信号通路与炎症、炎症与T2DM的关系,并探索了以IKK/NF-κB信号通路相关蛋白及酶为靶点,中药进行T2DM的抗炎治疗。结果与结论：IKK/NF-κB信号通路在T2DM和胰岛素抵抗的发生机制中可能发挥着一定的作用,这为治疗T2DM提供了新的治疗靶点。     

癫痫清颗粒对海人藻酸致癫痫大鼠行为学变化及NF-κB信号通路的影响

目的观察癫痫清颗粒对海人藻酸致癫痫大鼠行为学变化及NF-κB信号通路的影响。方法 60只大鼠随机分为假手术组、模型组、苯妥英钠组(0.03 g/kg)及癫痫清颗粒低、中、高剂量组(4.74、9.47、18.94 g/kg),每组10只,灌胃给药7 d,每天1次,末次给药1 h后,假手术组大鼠注射等体积生理盐水,其他各组大鼠左侧海马CA1区单次注射海人藻酸1μg。24 h后,进行行为学检测,免疫蛋白印迹检测NF-κB信号通路中蛋白表达。结果癫痫清颗粒可降低接近反应、响指反应评分,抑制NF-κB p65及p-IκB表达,增加IκB表达。结论癫痫清颗粒可通过调控NF-κB信号通路来改善癫痫大鼠行为学变化,从而发挥抗癫痫作用。     

疏肝温胆汤对代谢综合征大鼠TLR4/IKKβ/NF-κB通路的影响

目的 观察疏肝温胆汤对代谢综合征(MS)大鼠TLR4/IKKβ/NF-κB通路、炎症因子、血糖、血脂的影响,探讨其改善糖脂代谢的作用机制。方法 采用高脂高糖高盐饲料喂养方法诱导MS模型,将成模大鼠随机分为模型组、二甲双胍组、疏肝温胆汤组。另取正常大鼠为对照组。二甲双胍组和疏肝温胆汤组大鼠分别给予盐酸二甲双胍片和疏肝温胆汤灌胃,模型组和对照组大鼠给予生理盐水灌胃,时间为8周。检测大鼠体质量、体长、腹围、空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(PG2h)、胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),并计算葡萄糖曲线下面积(OGTT-AUC)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、Lee’s指数、肥胖指数;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定肝脏游离脂肪酸(FFA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的含量;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)和聚合酶链式反应(PCR)检测肝脏Toll样...     

加味香连丸对急性放射性肠炎大鼠NF-κB信号通路的影响

目的 探究加味香连丸对急性放射性肠炎大鼠核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 将40只SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、加味香连丸组、思密达组。对除正常组外的3组大鼠予直线加速器6-MV的X射线单次全腹部照射,总剂量12 Gy,剂量率200 cGy/min,建立急性放射性肠炎模型。照射后12 h开始灌胃,观察各组大鼠形态学、体质量变化;利用光学显微镜下观察及图像分析软件对比各组肠组织病理改变,并用ELISA法测定肠组织Toll样受体4(TLR-4)、NF-κB p65、白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果 模型大鼠均出现急性放射性肠炎症状,小肠组织不同程度地出血、坏死。加味香连丸组TLR-4、NF-κB p65及相关炎症因子IL-6、TNF-α含量与正常组比较未见明显差异（P> 0.05）。结论 加味香连丸对急性放射性肠炎大鼠NF-κB信号通路存在影响,能改善相关炎症指标,阻止炎症信号放大,对肠道黏膜起到一定的保护作用。     

生姜通过TLR4/NF-κB信号通路对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用

目的：探讨生姜醇提液对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及作用机制。方法：将Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、生姜低、高剂量组，每组10只，正常组小鼠经鼻滴入生理盐水，其余各组经鼻滴入含LPS(50μg)的生理盐水。造模30 min后，地塞米松组灌胃5 mg·kg^-1醋酸地塞米松溶液，生姜低、高剂量组分别灌胃不同剂量(7、14 g·kg^-1)的生姜醇提液，正常组及模型组灌胃等体积纯水。造模24 h后取材，细胞计数仪检测肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数，酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)水平，苏木素-伊红(HE)染色法观察各组肺组织病理学变化，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、磷酸化(p)-NF-κB p65及Toll样受体4(TLR4)蛋白表达。结果：与正常组比较，模型组小鼠BALF白细胞...     

连花清瘟胶囊对小鼠病毒感染后肺指数的影响

目的:观察连花清瘟胶囊对流感病毒FM1、副流感病毒仙台株感染小鼠肺指数的影响。方法:用流感病毒FM1、副流感病毒仙台株滴鼻感染小鼠建立模型,随机分为正常对照组、模型对照组、利巴韦林组、连花清瘟高、中、低剂量组,观察小鼠的一般情况、肺指数。结果:连花清瘟中剂量对流感病毒FM1、副流感病毒仙台株感染后小鼠的肺指数增高均有显著的降低作用(P<0.05,P<0.01);低剂量仅对流感病毒FM1感染后小鼠的肺指数有降低作用(P<0.05)。结论:连花清瘟胶囊对流感病毒FM1、副流感病毒仙台株感染小鼠的肺损害有抑制作用。     

黄芩苷对血栓栓塞致急性肺栓塞大鼠NF-κB信号通路抑制作用的实验研究

目的:研究黄芩苷对血栓栓塞致急性肺栓塞(acute pulmonary embolism,APE)大鼠NF-κB信号通路的调控作用.方法:选取60只雄性SD大鼠随机分为Sham组、APE组、APE+黄芩苷低剂量组(1 mL/kg)、APE+黄芩苷中剂量组(2 mL/kg)、APE+黄芩苷高剂量组(4 mL/kg).除S...     

连花清瘟胶囊治疗肺部感染30例疗效观察

目的：观察连花清瘟胶囊治疗肺部感染的疗效。方法：将临床确诊为肺部感染的60例患者随机分为2组。对照组30例采用头孢曲松钠或乳酸左氧氟沙星治疗,治疗组在对照组的基础上加用连花清瘟胶囊口服,疗程7d。疗程结束后观察2组细菌学疗效、临床症状及体征的变化和总有效率,并观察药物不良反应。结果：治疗后细菌清除率治疗组为80.0%,而对照组为50.0%;临床总有效率治疗组为96.7%,而对照组为83.3%,2组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）;不良反应发生率治疗组为33.3%,对照组为26.7%,2组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：连花清瘟胶囊治疗肺部感染疗效显著,药物安全性好。