全反式维甲酸在眼表疾病中应用的研究进展

全反式维甲酸(all-trans retinoid acid,ATRA)是维生素A的重要中间代谢物,其在调节眼部组织多种细胞的增生、分化以及维持上皮组织的正常角化等过程中均发挥重要作用.ATRA在角结膜瘢痕性病变如Stevens-Johnson综合征以及角膜损伤性疾病中可能具有独特的疗效,同时ATRA在抑制角膜移植术后的免疫排斥反应和治疗局部角膜缘干细胞缺乏症也具有良好的应用前景.     

全反式维甲酸对翼状胬肉成纤维细胞增殖的影响

目的:观察全反式维甲酸(ATRA)对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞(HPF)增殖的影响,寻找治疗和预防翼状胬肉复发的新途径。方法:体外培养翼状胬肉患者成纤维细胞;将不同浓度的ATRA作用于成纤维细胞分别达24,48h和72h后,MTT法检测ATRA对HPF的影响,免疫组织化学染色增生细胞核抗原(PCNA)检测细胞生长活性。结果:MTT法显示10-8mmol/LATRA作用24h后能抑制HPF的增殖(P<0.05),呈剂量和时间依赖性。ATRA能浓度依赖性地抑制细胞表达PCNA(P<0.05)。结论:ATRA能够显著抑制HPF的增殖。     

全反式维甲酸缓释系统防治后囊膜混浊的实验研究

目的观察兔眼晶状体超声乳化吸出术后全反式维甲酸缓释系统(atRA DDS)植入对后囊膜混浊(PCO)的抑制作用,探讨其作用机理及应用的可行性。设计随机对照实验性研究。研究对象 34只新西兰大耳白兔。方法将实验动物随机分为5组,除正常组外,其余各组均行双眼晶状体超声乳化吸出术,对照组不植入DDS,其余三组囊袋内分别植入不同的DDS。主要指标术后不同时期房水中的atRA浓度,不同的DDS植入对兔残留晶状体上皮细胞(RLEC)增生细胞核抗原(PCNA)表达的影响,晶状体后囊膜情况及眼内其他组织情况。结果 75μg和150μg atRA DDS植入组在术后7-15天内保持较稳定的房水atRA浓度,术后2-30天PCNA呈低表达(P<0．05);电镜观察75μg和150μg atRA DDS植入组RLEC移行不明显。各DDS 植入组术后未见毒性反应。结论 atRA DDS可在晶状体摘除术后长期维持较高的房水中atRA浓度,有效抑制RLEC的增生、移行,无明显的毒副作用,有可能成为防治后囊膜混浊的有效方法而应用于临床。     

全反式维甲酸对Rb细胞的生长及Cx43蛋白分子表达的影响

目的研究全反式维甲酸（ATRA）对视网膜母细胞瘤（Rb）细胞的生长及细胞间隙连接蛋白（Cx）43分子表达的影响，探讨其作用机制。方法设立3种浓度（10^-3mol／L、10^-6mol／L和10^-7mol／L）ATRA分别作用于Rb细胞，采用四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）比色法检测细胞生长抑制率，流式细胞术检测细胞周期改变及凋亡率，免疫组织化学方法检测细胞Cx43蛋白的表达。结果经ATRA作用后，Rb细胞增生率下降，G0／G1期细胞比例增高而S期比例相对下降，细胞凋亡率升高，Cx43蛋白表达上调。上述效应均呈药物浓度及作用时间依赖性。结论ATRA通过将Rb细胞生长周期阻滞于G0／G1期并促进凋亡而抑制其生长，同时可诱导细胞Cx43分子表达上调。     

全反式维甲酸增强HSV-tk/GCV系统对晶状体上皮细胞的旁观者效应

目的：体外观察兔晶状体上皮细胞N/N1003A经全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导后,2型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus 2, rAAV2)介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase, HSV-tk)/丙氧鸟苷(ganciclovir, GCV)自杀基因系统对细胞旁观者效应的影响。

方法：应用RT-PCR法检测rAAV2介导HSV-tk基因转染N/N1003A细胞后TK基因的表达,MTT 法观察经ATRA诱导后HSV-tk/GCV系统对N/N1003A细胞旁观者效应的变化,流式细胞术检测经ATRA诱导后HSV-tk/GCV系统对N/N1003A细胞凋亡的影响。

结果：rAAV2介导HSV-tk基因成功转染N/N1003A细胞并稳定表达。与对照组比较,ATRA诱导组可显著提高HSV-tk/GCV系统对兔晶状体上皮细胞N/N1003A的旁观者效应(P<0.01),且ATRA诱导组细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。

结论：ATRA可显著增强rAAV2介导的HSV-tk/GCV系统对体外培养兔晶状体上皮细胞的旁观者效应。     

全反式维甲酸诱导的Cx43基因在RB细胞中的过表达及其对RB生长的抑制作用

背景诱导细胞间隙连接蛋白（＆）基因在瘤细胞中过表达是全反式维甲酸（ATRA）抑制肿瘤细胞生长的重要机制。我们先前的研究已证实,ATRA抑制视网膜母细胞瘤（RB）细胞增生、分化作用的机制与诱导Cx43过表达有关,但药物作用位点及其对在体肿瘤组织生长的影响尚未明确。目的研究ATRA对RB细胞中Cx43基因及其蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法用无水乙醇将ATRA溶解并配制成浓度为1×10^-2mol／L的溶液,使用前再用细胞培养液配制成不同浓度ATRA液。用含体积分数10％热灭活胎牛血清（FBS）的RPMI-1640培养液常规培养人RB细胞株HXO—RB44,将1×10^5-×10“和1×10^-2mol／L的ATRA分别加至培养基中,分别于添加后2、4、6d采集细胞,分别采用Westernblot法和逆转录PCR法检测细胞中Cx43蛋白及mRNA的表达变化。选取15只BALB／c裸鼠,将RB细胞悬液1恤l（含5×10^5个细胞）进行裸鼠右眼前房注射,建立裸鼠眼前房RB模型。将造模成功的11只裸鼠随机分为空白对照组、阴性对照组和1X10。mol／LATRA组,阴性对照组和1×10^-5mol／LATRA组裸鼠分别行0．5％无水乙醇的生理盐水或1×10^-5mol／LATRA前房注射,每3天1次,共注射3周,裂隙灯显微镜下观察各组裸鼠肿瘤生长情况;实验结束时摘除实验眼,用苏木精-伊红染色法进行组织病理学检查。结果Westernblot法检测结果显示,随ATRA作用时间的延长,各组Cx43蛋白表达量（Acx43／AGPDH）均逐渐增加,总体比较差异有统计学意义（F时间=71．31,P=0．00;F分组7．66,P=0．00）;药物作用后2d1×10^-5mol／LATRA组、作用后4d1×10^-6mol／LATRA组、作用后6d1×10^-7mol／LATRA组Cx43蛋白表达量均明显高于空白对照组,差异均有统计学意义（t=3．34,P〈0．叭;t=2．33,P〈0．05;t=3．12,P〈0．01）。逆转录PCR检测结果显示,随ATRA作用时间的延长,各组Cx43 m     

顺铂联合全反式维甲酸对OCM-1裸鼠移植瘤模型作用的研究

目的 观察顺铂(CDDP)和全反式维甲酸(ATRA)对脉络膜恶性黑色素瘤细胞株OCM-1裸鼠移植瘤的作用.方法采用体外细胞培养法培养OCM-1,20只4周龄雄性裸鼠随机分为4组,将细胞接种至裸鼠皮下,建立异位移植瘤模型.CDDP、ATRA及两药联合分别处理移植瘤模型,TUNEL法检测肿瘤组织.结果 CDDP组抑瘤率为43.20%;ATRA组抑瘤率为37.65%;联合组抑瘤率为65.94%,经金氏公式计算得出q值为1.02(1.153>q>0.85).结论CDDP和ATRA对OCM-1裸鼠移植瘤的抑制具有相加作用.CDDP和ATRA联合应用可抑制肿瘤生长,其机制可能和诱导肿瘤细胞凋亡有关.     

全反式维甲酸对Tenon囊成纤维细胞超微结构的影响

目的观察全反式维甲酸(ATRA)对体外培养的人Tenon囊成纤维细胞(HTCFs)超微结构的影响。方法取第3～6代HTCFs细胞,用1×10-5mol/L的ATRA处理细胞3d后,于扫描电镜下观察细胞表面结构,透射电镜下观察细胞超微结构的变化。结果扫描电镜下经ATRA作用后人Tenon囊成纤维细胞趋于变圆,表面微绒毛几乎消失,可见起泡现象;透射电镜下细胞微绒毛消失,胞内大量空泡形成,胞质浓缩,核仁消失,核染色质固缩、边集,呈境界分明的新月形、块形,聚集于核膜下,线粒体肿胀、内质网扩张呈空泡状,但胞膜、核膜及各细胞器膜均保持完整,呈典型的凋亡特征。结论ATRA可明显影响HTCFs的超微结构,并出现细胞凋亡的特征性改变。     

28例急性非淋巴细胞白血病免疫表型分析

我们用间接免疫荧光方法检测了２８例急性非淋巴细胞白血病免疫表型，结果表明，常用髓系单抗中，ＣＤ１５阳性检出率最高，ＣＤ３４ＡＮＬＬ常表达ＣＤ３６、ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＣＤ７阳性是ＡＮＬＬ预后不良的重要指征，而ＤＲ表达与ＡＮＬＬ预后无关，这表明：白血病细胞起源愈早，恶性程度愈高，预后愈差。     

无照射预处理自体骨髓移植治疗急性白血病7例报道

本文报道了无照射预处理自体骨髓移植（ＡＢＭＴ）治疗急性白血病７例的结果。其中急淋５例，急粒２例。预处理用无照射联合化学药物方案。急淋用ＣＴＸ及马法兰；急粒用环磷酰胺，ＣＣＮＵ，ＶＰ１６；移植均在层流室中进行，施行严格的逆向了。用多市民力互预防感染，输血以悬液预防出血，第１例急淋在ＣＲ、后７个月髓外复发，ＣＲ２后进行ＡＢＭＴ１移植获得成功，但于出院后２个月患重症肝炎死亡；第２例急性ＣＲ后１１个月进行     

小儿急性白血病眼部并发症25例报告

急性白血病是儿童最常见恶性肿瘤，眼部是常被累及的组织器官之一，有时以眼部病变为首发表现。本文报告２５例眼部受累的急性白血病患儿，以高危急淋和急单发病最多，出现眼部合并症时间多在急白发病后１～１年半，主要症状有眼部疼痛、结膜充血、流泪、视力减退，白血病...     

全反式维甲酸对视网膜母细胞瘤细胞增殖和分化影响的实验研究

目的 观察全反式维甲酸(ATRA)对视网膜母细胞瘤SO-Rb 50细胞生长及分化的作用.方法 为实验研究.将不同浓度的ATRA作用于SO-Rb 50细胞,绘制生长曲线;MTT法检测ATRA的IC50值;流式细胞仪测定用药前后的细胞周期;用药前及用药后20 d观察活体细胞和HE染色后的细胞形态;免疫组织化学法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、波形蛋白(Vimentin)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况.结果 0、1×10-7、1×10-6、1×10-5mol/L的ATRA作用于SO-Rb 50细胞后细胞生长曲线随药物浓度增加而逐渐变得低平;ATRA作用于细胞的IC50值约为14.05 μmol/L;用1×10=3mol/L的ATRA作用细胞后,G0/G1期细胞从用药前的56.5%升至用药后的66.6%～81.O%,S期细胞则从33.1%降至22.3%～15.9%.细胞在包被0.25%多聚赖氨酸溶液的载玻片上可贴壁牛长,用药后细胞生长集落明显减小,20 d后部分细胞呈椭圆形或梭形,胞核与胞质比值减小,并伸出细长或较短的突起;用药前NSE、Vimentin、GFAP染色分别旱中等阳性、强阳性和弱阳性;用药20 d后三者染色分别呈强阳性、强阳性和中等阳性.结论 ATRA对SO-Rb 50细胞的生长有明显抑制作用,使细胞停滞于细胞周期的G0/G1期.ATRA可诱导SO-Rb 50细胞向神经元和胶质细胞方向分化.(中华眼科杂志,2008,44:549-553)     

全反式视黄酸对视网膜色素上皮细胞内质网应激反应的诱导作用及途径

目的：从分子水平探讨全反式视黄酸(ATRA)诱导ARPE-19细胞的内质网应激反应(ERS)。

方法：应用免疫荧光法、实时定量-聚合酶链反应和蛋白印记法等方法，检测ATRA诱导ARPE-19细胞产生ERS过程中相关信号通路蛋白及mRNA表达水平的变化。

结果：检测结果显示，随着ATRA浓度的累积，ERS标记蛋白CHOP及BIP的蛋白及mRNA水平显著上升(P<0.001)； 下游信号通路中，PERK、EIF2α、ATF4、IRE1α及XBP1表达上调(P<0.001)，ATF6表达无变化(P>0.05)。

结论：过度累积的ATRA诱导ARPE-19细胞产生ERS，并激活其中PERK-EIF2α-ATF4及IRE1α-XBP1信号途径。     

全反式视黄酸诱导ARPE-19细胞凋亡的信号途径

目的:探讨全反式视黄酸(ATRA)体外诱导人视网膜色素上皮(ARPE)-19细胞凋亡的信号途径。方法:采用不同浓度的ATRA处理ARPE-19细胞24 h、48 h,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测其细胞活性;分别采用0、2.5、5、10、15和20 μmol/L ATRA处理ARPE-19细胞24 h,通过...