液质联用法同时测定埃罗替尼及其活性代谢产物OSI-420在BALB/c裸鼠体内的浓度及其药代动力学研究(英文)

本试验建立了一种简单快速灵敏的液质联用方法, 用以同时测定裸鼠血浆内埃罗替尼及其活性代谢物OSI-420的浓度。采用液液萃取法从血浆中提取埃罗替尼, OSI-420和内标普萘洛, 用C18反相柱进行分离, 流动相为乙腈-5 mM甲酸铵 (35:65, v/v, pH = 3.0)。所有化合物均采用电喷雾电离源, 正离子方式检测。埃罗替尼和OSI-420的最低定量下限均为0.5 ng/mL。埃罗替尼的准确度在0.07%-8.00%范围内, OSI-420准确度在-2.83%-6.67%范围内; 埃罗替尼精密度在2.28%-15.12%范围内, OSI-420精密度在1.96%-11.50%范围内。此方法应用于BALB/c裸鼠口服12.5 mg/kg埃罗替尼的药代动力学研究中, 并用二室模型拟合埃罗替尼的药代动力学, 一室模型拟合OSI-420的药代动力学。代谢为OSI-420的埃罗替尼占埃罗替尼总量的10%, 比文献中的这一比值大一倍, 表明种属间埃罗替尼的代谢存在差异。     

LC/MS/MS法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪的浓度

目的 建立一种快速、灵敏地测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪(1amotrigine,LTG)的LC/MS/MS方法.方法 采用高效液相色谱串联质谱电喷雾检测(LC/MS/MS)法,色谱柱为Welch Materials XB-C18柱,流动相甲醇-水(95:5,V/V,含5 mmol/L甲酸铵),流速0.3ml/min,柱温...     

Simultaneous Determination and Pharmacokinetic Study of Losartan,Losartan Carboxylic Acid,Ramipril, Ramiprilat,and Hydrochlorothiazide in Rat Plasma by a Liquid Chromatography/Tandem Mass Spectrometry Method

The monitoring of the plasmatic concentrations of cardiovascular drugs is crucial for understanding their pharmacokinetics and pharmacodynamics. A simple, sensitive, specific, and high-throughput liquid chromatography/tandem mass spectrometry (LC–MS/MS) method was developed and validated for the simultaneous estimation and pharmacokinetic study of losartan (LOS), losartan carboxylic acid (LCA), ramipril (RAM), ramiprilate (RPT), and hydrochlorothiazide (HCZ) in rat plasma using irbesartan (IBS) and metolazone (MET) as internal standards (ISs). After solid phase extraction (SPE), analytes and ISs were separated on an Agilent Poroshell 120, EC-C18 (50 mm × 4.6 mm, i.d., 2.7 μm) column with a mobile phase consisting of methanol/water (85:15, v/v) containing 5 mmol/L ammonium formate and 0.1% formic acid at a flow rate of 0.4 mL/min. The precursor → product ion transitions for the analytes and ISs were monitored on a triple quadrupole mass spectrometer, operating in the multiple reaction monitoring (MRM) mode and switching the electrospray ionization (ESI) mode during chromatography from positive (to detect LOS, LCA, RAM, RPT, and IBS) to negative (to detect HCZ and MET). The method was validated as per the FDA guidelines and it exhibited sufficient specificity, accuracy, and precision. The method was found to be linear in the range of 3–3000 ng/mL for LOS and LCA, 0.1–200 ng/mL for RAM and RPT, and 1–1500 ng/mL for HCZ. The described method was successfully applied to the preclinical pharmacokinetic study of analytes after oral administration of a mixture of LOS (10 mg/kg), RAM (1 mg/kg), and HCZ (2.5 mg/kg) in rats.     

LC/MS/MS法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪的浓度

目的建立一种快速、灵敏地测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪(lamotrigine,LTG)的LC/MS/MS方法。方法采用高效液相色谱串联质谱电喷雾检测(LC/MS/MS)法,色谱柱为Welch Materials XB-C18柱,流动相甲醇-水(95∶5,V/V,含5 mmol/L甲酸铵),流速0.3ml/min,柱温40℃,以碱化的醋酸乙酯:二氯甲烷(4∶1)为提取剂。提取的样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对LTG(m/z 256.0→145.0)和内标阿普唑仑(m/z 309.3→281.1)进行测定。结果 LTG血药浓度在0.05~25μg/ml范围内线性关系良好(r=0.998 9),分析方法的最低检测限为5 ng/ml,其高、中、低(12.5、1.25、0.125μg/ml)3个浓度的平均提取回收率分别为82.97%、80.68%和83.33%,日内(n=5)、日间(n=15)RSD均<15%。结论本方法简单快捷、灵敏、准确、重现性好,可用于癫痫患儿LTG的临床血药浓度监测和药动学研究。     

HPLC-MS／MS测定血浆中丁丙诺啡的浓度

目的建立人血浆中丁丙诺啡浓度的HPLC-MS/ MS 测定法。方法以曲马多为内标,将待测血浆样品经氢氧化钠碱化后,加正己烷提取,上清液经Agilent Eclipse plus C18 （4. 6 mm ×150 mm,3. 5 μm）色谱柱分离,甲醇- 水（80∶20,v∶v,含0. 005 mol/ L 甲酸铵和0.25%甲酸）为流动相,流速0. 5 mL/ min,进行洗脱,采用电喷雾电离源（ESI）,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测。用于定量分析的离子分别为m/ z 468. 3→55. 2 和m/ z 264. 2→58. 1（内标）。结果血浆中丁丙诺啡的浓度与峰面积比在50-20 000 ng/ L 的范围内线性关系良好,定量下限为50 ng/ L;提取回收率大于67%,日内日间精密度小于11%。结论该法简单、灵敏、快速,分离效果良好,可用于人体血药浓度测定和药动学研究。     

LC-MS／MS法测定全血中他克莫司浓度的方法学研究

目的：建立测定人全血中他克莫司液相色谱-串联质谱联用（LC-MS／MS）方法,并与微粒子免疫分析（MEIA）方法测定的结果进行了比较。方法：运用LC-MS／MS方法,血样经乙腈沉淀蛋白,上清液氮气吹干流动相复溶进样。色谱柱：Zorbax Extend—C18柱（150mm×4．6mm,5μm）;流动相：甲醇-乙腈-20mmol·L^-1醋酸胺溶液（80：15：5）;流速：0．4ml·min^-1。采用电喷雾离子化四极杆串联质谱,多反应检测方式测定样品的浓度。检测离子对分别为m／z821．7→m／z 768．4和m／z 821．7→m／z 786．5。结果：他克莫司在0．5～128ng·ml^-1浓度范围内,峰面积与浓度线性关系良好（r=0．9991,／2=5）,最低定量限为0．5ng·ml^-1,平均回收率为99．0％,日内精密度、日间精密度的RSD分别为3．38％和4．16％。MEIA分析采用标准IMX测定方法。两种方法比较,其标准差小于3．0,表明相关性好。结论：本方法具有良好的灵敏度、准确度、精确度及专属性,可用于他克莫司血药浓度监测和人体药药动力学研究。     

犬血浆中右旋布洛芬和左西替利嗪的正负离子切换LC-MS/MS法测定

建立了液相色谱-串联质谱法同时测定Beagle犬血浆中的右旋布洛芬和左西替利嗪.使用C18色谱柱,以乙腈-甲醇-5mmol/L乙酸铵溶液(25∶56.25∶18.75)为流动相,采用电喷雾电离源、多反应监测模式,正负离子切换扫描,右旋布洛芬和左西替利嗪在0.2～100μg/ml和0.008～4μg/ml范围内线性关系良好,日内和日间RSD小于8.7％,提取回收率大于80.9％.     

LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中甘草酸和甘草次酸

目的：建立一种同时测定大鼠血浆中甘草酸和其代谢产物甘草次酸的高效液相色谱一串联质谱的（LC-MS／MS）分析方法。方法：采用汉邦VP—ODS（150min×2．1nun,5μm）色谱柱,流动相为甲醇和1％的甲酸水,梯度洗脱：21％水相（0-3．5min）,2％水相（3．5-8．2min）。简单的乙腈沉淀蛋白法处理血浆样品。以格列喹酮为内标,采用ESI源负离子模式、多反应检测进行测定。检测离子对分别为m／z821．4→350．9（甘草酸）、m／z526→401．1（格列喹酮）和m／z469．2→425．2（甘草次酸）。结果：甘草酸和甘草次酸的检测浓度分别在50－2000ng·mL-1、10-500ng·mL-1范围内线性关系良好。相关系数为0.9989和0．9981。日内及日间精密度RSD均小于15％。结论：方法专属性强．准确度好．适用于同时监测甘草酸和甘草次酸的浓度及进行药动学研究。     

高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中氨溴索浓度

目的：建立测定人血浆中氨溴索浓度的高效液相色谱串联质谱法,以用于氨溴索人体药动学研究。方法：以西替利嗪为内标,血浆样品经乙腈沉淀后,经HPLC—MS／MS分离-分析。采用Waters ODS C18柱（50mm×2．1mm,3．5μm）,以甲醇：5mmol·L^-1乙酸铵（72．5：27．5）为流动相,流速：0．20ml·min^-1,采用电喷雾离子源（ESI）,以多离子反应监测方式（MRM）进行正离子监测,氨溴索和内标西替利嗪的定量分析离子对分别为m／z 379．0→263．9和m／z 389．1→201．3。结果：氨溴索血浆浓度测定方法线性范围为1．99～398ng·ml^-1,r=0．9990。定量下限为1．99ng·ml^-1,方法回收率在85％～115％之间。日内和日间RSD〈15％。结论：本法灵敏、准确、可靠,适用于盐酸氨溴索人体药动学研究。     

LC-MS/MS法测定浸润麻醉豚鼠血浆中罗哌卡因浓度

目的 建立测定豚鼠血浆中罗哌卡因浓度的液相三重四极杆串联质谱(LC-MS/MS)法,用以测定豚鼠局部浸润麻醉皮内注射后血浆中罗哌卡因浓度,并考察罗哌卡因药动学.方法 血浆样品用蛋白沉淀法进行预处理后HPLC-MS/MS法测定罗哌卡因含量.色谱系统:ZORBAX SB-C18 (3.0 mm×150 mm,3.5 μm ),甲醇-水 (80:20,内含5mmol·L-1 甲酸铵 )为流动相,流速0.4 mL·min -1,柱温25 ℃.通过电喷雾离子源(ESI)三重四极杆串联质谱,在正离子模式下以多重反应选择离子检测(MRM).色谱分析时间为4 min.药动学研究中豚鼠皮内浸润麻醉给药0.5%罗哌卡因注射液,按时测定血浆药物浓度.采用TOPFIT软件计算药动学参数.结果 罗哌卡因在6.58～6 580 ng·mL-1内线性良好 (r=0.999 1),方法的最低检测浓度为1 ng·mL-1,方法回收率在95.6%～96.6%之间,日内、日间精密度(RSD)均小于6%.豚鼠皮内注射0.5%罗哌卡因后,主要药动学参数:T1/2α (0.13±0.01) h,T1/ 2β (1.20±0.08) h,Cmax (4 960±13) ng·mL-1,AUC0→9 (11.3±1.6) mg·h·L-1,AUC0→∞ (13.1±2.3) mg·h· L-1,MRT(1.74±0.13) h.结论 建立的LC-MS/MS法快速、准确、灵敏,可用于罗哌卡因豚鼠浸润麻醉的药动学研究.     

A Novel and Rapid Method to Determine Doxycycline in Human Plasma by Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry

A simple, rapid, specific and sensitive liquid chromatography tandem mass spectrometric method has been developed and validated for the determination of doxycycline from the human plasma. Doxycycline is extracted from human plasma by solid phase extraction. Demeclocycline was used as an internal standard. Detection was performed at transitions of 444.800→428.200 for doxycycline and 464.700→448.100 for demeclocycline using mass spectrometry. Chromatographic separation of analyte and internal standard were carried out using a reverse phase C18, column at 0.500 ml/min flow. The assay of doxycycline is linear over the range of 0.055-7.612 μg/ml, with a precision <14.83%, regression coefficient (r²)=0.9961 and the limit of quantification in plasma for doxycycline was 0.055 μg/ml. Mean extraction recovery obtained was 95.55%. Samples are stable at room temperature for 6 h, processed samples were stable at least for 30.20 h and also stable at three freeze-thaw cycles. The method has been used to perform pharmacokinetic and bioequivalence studies in human plasma.     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中沃替西汀及其羧基代谢产物

本试验建立了大鼠血浆中沃替西汀及其体内羧基代谢物的LC-MS/MS测定方法,并用该法研究其在SD大鼠体内的药动学特征。以氘代沃替西汀为内标,血浆样品经蛋白沉淀法处理后进样测定,色谱柱为Kromasil■C18柱,以含0.1%甲酸的10 mmol/L甲酸铵水溶液(A)∶甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 ml/min,分析时间5 min。采用电喷雾离子源(ESI)、正离子检测、多反应监测模式,沃替西汀及其羧基代谢产物定量离子对分别为m/z 299.1→150.1和m/z329.2→286.3,内标氘代沃替西汀离子对为m/z 302.3→150.0。沃替西汀线性范围为0.3~100.0 ng/ml(r=0.998 6),羧基代谢物线性范围为0.9~300.0 ng/ml(r=0.999 2)。沃替西汀及其羧基代谢物的批内和批间RSD均小于15%。SD大鼠单次口服6 mg/kg沃替西汀后,沃替西汀及其羧基代谢物的t1/2为(2.66±0.35)和(1.76±0.19)h,cmax为(18.60±5.34)和(309.00±84.10)μg/L,AUC0→t为(123.0±28.9)和(1 165.0±236.0)μg·h·L-1。本法快速简便、灵敏准确,适用于沃替西汀及其羧基代谢物的血药浓度测定及药动学研究。     

低剂量甲氨蝶呤给药类风湿性关节炎病人血浆浓度的测定

目的 建立一种快速、灵敏地测定类风湿性关节炎病人血浆中低浓度甲氨蝶呤(MTX)的方法.方法 采用高效液相色谱(HLPC)串联质谱电喷雾检测(LC/MS/MS)法,色谱柱为Ultimate XB-C18柱,流动相为乙腈(1%甲酸):甲酸铵水溶液(20 mmol/L)＝30 ︰ 70,流速为0.2 ml/min,柱温为25℃.样品提取采用液-液萃取的方法,即先用三氟乙酸沉淀蛋白,再用乙酸乙酯提取.提取的样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用多反应监测(MRM)对甲氨蝶呤(m/z 455.2→308.2)和内标多索茶碱(m/z 267.1→181.1)进行测定.结果 甲氨蝶呤血药浓度在1～100 ng/ml范围内线性关系良好(r =0.9998),分析方法的最低检测限为0.5 ng/ml,其高、中、低(50、10、2 ng/ml)3 个浓度的平均提取回收率分别为41.2%、49.2%和43.4%, 日内(n = 5)、日间(n = 3)相对标准偏差值(RSD)均<15 %.结论 本方法简单快捷、灵敏、准确、重现性好,可用于低剂量给药的类风湿性关节炎病人的临床血药浓度监测和药动学研究.     

液相色谱-串联质谱法测定血清中硫酸头孢噻利浓度

目的：建立一种灵敏、可靠的检测血清中硫酸头孢噻利含量的高效液相色谱-串联质谱法。方法：血清样品经酸化甲醇蛋白沉淀后,采用ExtendC18柱（250mm×4．6mm,5μm）0．02mol·L^-1乙酸铵-甲醇（65：35）为流动相,头孢唑啉为内标,应用高效液相色谱／大气压化学电离串联质谱法在多反应监测模式（MRM）下测定,硫酸头孢噻利和内标的定量离子对分别为m/z 523→396和m／z455→323。结果：硫酸头孢噻利的回收率在94．0％-101．9％之间,硫酸头孢噻利在2．0～1000．0μg·L^-1范围内呈良好线性,日内RSD〈9．2％,日间RSD〈10．6％,定量检出限为2．0μg·L^-1。结论：本方法简便、灵敏、干扰少、特异性好,可用于硫酸头孢噻利的临床药动学研究及临床特殊人群的血药浓度测定。     

超高效液相串联质谱法检测人血浆中华法林及其代谢产物的浓度

摘 要 目的： 建立快速检测人血浆中华法林及其代谢产物7-羟基华法林浓度的UPLC-MS/MS方法。方法: 用乙腈沉淀血浆蛋白的方法处理,运用Waters XEVO TQD三重四级杆液质联用仪, 色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C₁₈柱(50 mm ×2.1 mm, 1.7 μm) ;流动相为乙腈-水（含0.1%甲酸）,梯度洗脱,流速为0.4 ml·min^-1,柱温为40℃,内标为华法林 d5;质谱条件：电喷雾离子化源(ESI),正离子检测模式。结果:华法林和代谢产物7-羟基华法林的保留时间分别为1.8 min和1.5 min,线性范围分别为25～2 000 ng·ml^-1(r=0.999 3)和5～500 ng· ml^-1(r= 0.999 6),最低定量限分别为5,2.5 ng·ml^-1,回收率分别为96.9%～105.3%,97.1% ～103.3%,日内、日间RSD均<10%。结论: 该法准确可靠,操作简便,重复性好,适于检测人血浆中华法林及其代谢产物7-羟基华法林的浓度。     

高效液相色谱-质谱联用法同时测定盐酸金刚烷胺和马来酸氯苯那敏的血药浓度

目的 建立灵敏、快速的高效液相色谱-质谱联用法同时测定盐酸金刚烷胺和马来酸氯苯那敏的血药浓度.方法 以非那雄胺为内标物,采用C18柱,水(舍0.5‰甲酸)-乙腈-甲醇(18:32:50)为流动相,1 mL血浆样品经液液萃取后,电喷雾离子化源,选择性正离子反应监测.结果 盐酸金刚烷胺和马来酸氯苯那敏分别在3.9~375.0 ng/mL和0.2~19.2 ng/mL时线性关系良好.盐酸金刚烷胺低、中、高浓度测定的相对回收率分别为106.4%,94.9%和93.1%;日内RSD分别为2.6%,3.2%和4.1%;日间RSD分别为4.3%,5.4%和5.6%;最低定量限为3.9 ng/mL,RSD为3.1%.马来酸氯苯那敏低、中、高浓度测定的相对回收率分别为98.9%,97.9%和101.8%;日内RSD分别为8.5%,8.0%和4.1%;日间RSD分别为6.9%,5.5%和5.6%;最低定量限为0.2 ng/mL,RSD为1.7%.结论 所建方法简便、准确、灵敏度高,适合测定盐酸金刚烷胺和马来酸氯苯那敏的血药浓度,可用于临床药物代谢动力学研究.     

LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中5种银杏酸浓度及其药动学研究

目的 建立LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中5种银杏酸的浓度,并进行药动学研究。方法 大鼠血浆样品用乙酸乙酯萃取后,以水杨酸为内标,选用ZORBAX Eclipse XDB C₁₈（2.1 mm×100 mm,3.5 μm）色谱柱,以乙腈-水（均含0.1%甲酸）为流动相梯度洗脱,梯度流速恒定为0.25 mL·min^-1,柱温为30℃,进样量为10 μL,总分析时间为5.0 min,采用电喷雾离子化源,负离子方式,多反应监测（MRM）扫描方式进行监测。结果 血浆中5种银杏酸浓度线性范围为2.0~1 000 μg·L^-1（r>0.99）,定量下限为2.0 μg·L^-1;质控样品准确度为92.8%~108.5%;日内、日间RSD均<15%;提取回收率为73.3%~86.2%。结论 该方法快速、灵敏、准确,专属性强,重复性好,适用于同时测定大鼠血浆中5种银杏酸浓度。     

柱前衍生化LC-MS/MS法同时测定人血浆中炔雌醇和 依托孕烯及其药动学研究

目的:应用柱前衍生化的LC-MS/MS方法,同时测定人血浆中炔雌醇和依托孕烯的含量,并研究中国健康女性受试者口服去氧孕烯炔雌醇片[炔雌醇(EE)和依托孕烯(ENG)]后的药代动力学特征.方法:血浆样品经过甲基叔丁基醚-正己烷(50:50)液液萃取吹干后,固体物溶解在碳酸钠溶液中,并与丹磺酰氯丙酮溶液在60℃水浴反应10 min,以水-乙腈-甲酸(50∶50∶0.2)复溶进行LC-MS/MS分析.以ZORBAX SB C18(Narrow Bore RR2.1mm×100 mm,3.5μm)为分析柱,流动相为含0.1％甲酸水溶液-含0.1％甲酸乙腈溶液,梯度洗脱.炔雌醇衍生物和依托孕烯的检测离子分别为m/z 530.2→171.1和m/z 325.2→257.3,炔雌醇-2,4,16,16-d4和依托孕烯-d6作为内标辅助定量.结果 与结论:炔雌醇在2～500 pg·mL-1,依托孕烯在50～10000 pg· mL-1范围内线性关系良好.受试者口服受试制剂后炔雌醇Cmax为(400.3+5.1)pg·mL-1,tmax为(2.5±0.5)h,AUC0-t(1998±830)pg·h·mL-1;依托孕烯Cmax为(4790.1±10.1)pg·mL-1,tmax为(3.0±0.5)h,AUC0-t(42593.9±1570.9)Pg·h·mL-1.此为所得炔雌醇与依托孕烯的药动学特征参数.本方法精密度好(＜9％),灵敏度高,炔雌醇达到2 pg· mL-1,依托孕烯达到50pg·mL-1,所测依托孕烯的LOQ浓度很低.     

人血浆中痕量炔雌醇衍生化LC-MS/MS测定方法的建立及其药动学研究

目的：建立柱前衍生化测定人血浆中痕量炔雌醇的LC-MS/MS方法,并研究中国健康女性受试者空腹口服左炔诺孕酮炔雌醇片（每片含0.02 mg炔雌醇和0.1 mg左炔诺孕酮）后炔雌醇的药动学特征。方法：血浆样品经过环己烷-乙醚（7∶1）提取吹干后,残渣溶解于pH 10.5的碳酸氢钠溶液中,并用丹酰氯丙酮溶液在60℃反应6 min 后进行 LC-MS/MS 分析。以Hedera ODS-2（2.1 mm×150 mm,5μm）为分析柱,流动相为含0.1%甲酸的水溶液-甲醇（13∶87）,梯度洗脱。炔雌醇丹酰氯衍生物和内标米非司酮的检测离子分别为m/z 530.2→171.1和m/z 430.1→372.2,对中国健康女性受试者空腹口服左炔诺孕酮炔雌醇片后,血浆中炔雌醇的浓度进行测定,并计算主要药代动力学参数。结果与结论：炔雌醇的血药浓度在1.059~211.7 pg·mL-1范围内线性良好,中国健康女性受试者单次和连续21 d口服左炔诺孕酮炔雌醇片后炔雌醇的cmax分别为（58.1±25.1） pg·mL-1和（76.5±19.7） pg·mL-1,tmax分别为（1.8±0.6） h和（1.9±0.9） h,AUC分别为（611±223） pg·h·mL-1和（762±189） pg·h·mL-1,t1/2分别为（12.36±4.42） h和（15.44±3.81） h。以上炔雌醇的药动学特征为首次报道。     

Quantitative Analysis of Staphylococcal Enterotoxins A and B in Food Matrices Using Ultra High-Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry (UPLC-MS/MS)

A method that uses mass spectrometry (MS) for identification and quantification of protein toxins, staphylococcal enterotoxins A and B (SEA and SEB), in milk and shrimp is described. The analysis was performed using a tryptic peptide, from each of the toxins, as the target analyte together with the corresponding ¹³C-labeled synthetic internal standard peptide. The performance of the method was evaluated by analyzing spiked samples in the quantification range 2.5–30 ng/g (R² = 0.92–0.99). The limit of quantification (LOQ) in milk and the limit of detection (LOD) in shrimp was 2.5 ng/g, for both SEA and SEB toxins. The in-house reproducibility (RSD) was 8%–30% and 5%–41% at different concentrations for milk and shrimp, respectively. The method was compared to the ELISA method, used at the EU-RL (France), for milk samples spiked with SEA at low levels, in the quantification range of 2.5 to 5 ng/g. The comparison showed good coherence for the two methods: 2.9 (MS)/1.8 (ELISA) and 3.6 (MS)/3.8 (ELISA) ng/g. The major advantage of the developed method is that it allows direct confirmation of the molecular identity and quantitative analysis of SEA and SEB at low nanogram levels using a label and antibody free approach. Therefore, this method is an important step in the development of alternatives to the immune-assay tests currently used for staphylococcal enterotoxin analysis.