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1.
PCR检测水中致病微生物的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
李凤义 《工业卫生与职业病》1996,22(6):379-382
PCR检测水中致病微生物的研究进展军事医学科学院卫生学环境医学研究所李凤义综述张符光审校PCR(polymerasechainreaction,多聚酶链反应)是一种体外核酸扩增技术,由美国学者Mullis等人于1985年在Cetus公司发明并命名。P... 相似文献
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应用聚合酶链反应(polymerasechainReaction,PCR)检测108例乙型肝炎患者血清中HBV一DNA,在不同类型的HBV感染标志物(HBVM)的血清中结果有所不同:(1)在HBsAg、HBeAg和抗HBc阳性血清中,PCR阳性率86.11%(31/36);(2)在HBsAg、抗HBe和抗HBc阳性血清中,PCR阳性率55.88%(19/34);(3)在抗HBs、抗HBe和HBc阳性血清中,PCR阳性率为20%(2/10);(4)在抗HBe和抗HBc阳性血清中,PCR阳性率为25%(2/8);文中就PCR检测的结果及临床意义作了扼要的讨论。 相似文献
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利用半抗原地高辛配基(digixigenin)制备非同位素标记探针技术,分别标记乙型肝炎病毒全基因作者单位:110006沈阳市传染病院中心研究室(孙峥嵘、郑志红、刘桂荣、胥婧、鲁润铭);中国医科大学微生物教研室(刘兵、王桂珍)探针(DIG-HBVDNA)及乙型肝炎病毒PCR产物C区探针〔DIG-HBV(C/preC)〕,经斑点杂交检测血清HBVDNA及血清聚合酶链反应(PCR)产物,与PCR平行检测122份血清标本。实验中以DIG-HBV(C/preC)为探针,即PCR-斑点杂交方法直接标记纯化… 相似文献
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应用聚合酶链反应(polymerase chain Reaction,PCR)检测103例乙型肝炎患者血清中HBV-DNA,在不同类型的HBV感染标志物(HBVM)的血清中结果有所不同:(1)在HBsAg、HBeAg和抗HBc阳性血清中,PCR阳性率86.11%(31/36);(2)在HBsAg、抗HBe和抗HBc阳性血清中,PCR阳性率55.88%(19/34);(3)在抗HBe和HBc阳性血清 相似文献
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多聚酶链反应(简称PCR)技术检测血清中HBV-DNA的活动性具有很高的敏感性,但因自身的特点,应用受到限制.结合乙肝三系检测结果,用Logistic回归模型配合PCR检测结果具有较好的配合适度,在没有条件开展PCR检测项目的情况下根据乙肝三系检测结果用Logistic回归模型预测血清中HBV-DNA的活动性。 相似文献
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为探讨巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)感染与动脉粥样硬化的相关性,应用聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)技术及二次PCR法对病例组26例动脉粥样硬化血管组织石蜡标本和对照组23例正常血管组织石蜡标本进行检测。结果:应用传统PCR技术检测到病例组17例CMVDNA阳性,阳性率为654%(17/26),对照组5例阳性,阳性率为217%(5/23);应用二次PCR法检测到病例组20例阳性,阳性率769%(20/26),对照组8例阳性,阳性率348%(8/23)。结果表明,CMV潜伏感染与动脉粥样硬化具有密切联系 相似文献
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PCR技术在卫生微生物检测中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
PCR技术在卫生微生物检测中的应用叶怀庄,吴丽丽浙江医科大学公卫学院卫生检测中心杭州多聚酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR)[1]是近年来分子生物学领域中一项具有革命性的技术突破,是基于天然DNA复制的规律而设计的一种... 相似文献
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随机引物多聚酶链反应对革兰氏阴性分型的影响因素研究高瞻KathyJacksonDavidE.Leslie江苏省卫生防疫站(210009南京)随机引物多聚酶链反应(RandomAmplifiedPolymorphicDNAPCR,简称RAPDPCR)是... 相似文献
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为克服常规反转录PCR(RT-PCR)检测肠道病毒的缺点和不足,在实验基础上建立了一步单管RT-PCR检测水中的脊灰病毒,采用热裂解法提取样品中脊灰病毒的总RNA,反转录(cDNA)与PCR反应在PCR仪上一步进行,操作方法简单,中间可能污染的环节少,最大限度地减少了由环境造成的可能污染。设计合成的引物E1-E2取自多种肠病毒保守的5′非编码区核酸序列,可用于多种肠道病毒的扩增;P1-P2为脊灰病毒3个血清型的共用引物,只扩增脊灰病毒,具有较强的特异性。改进后的RT-PCR的敏感性与常规RT-PCR比有所提高,可检测到细胞培养悬液或水中10个PFU的脊灰病毒。 相似文献
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陈志清 《中国卫生检验杂志》1999,9(2):153-154
多聚酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)是近几年发展起来的先进的快速体外基因扩增技术,已经在很多医学领域得到应用,目前PCR技术已逐渐推广至病毒性疾病的诊断和研究中。为了寻找比目前常用的EIA技术更敏感更有效的检测方法,... 相似文献
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应用聚合酶链反应(PCR)方法对4株肾综合征出血热(HFRS)病毒进行了分型。HFRS病毒的RNA经逆转录为CDNA后用NTN(野鼠型)、SEO(家鼠型)两种引物进行体外扩增,经琼脂糖凝胶电泳,PCR产物的NDA片段与Mark对照,证实扩增出的产物为HFRS病毒DNA片段。PCR分型与物异性单克隆抗体(McAb)间接免疫荧光法分型作比较,结果相符合。 相似文献
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根据肾综合征出血热病毒(HFRSV)抗原检测、分型和流行病学目前还存在许多待解决的问题,研制了HFRSV的核衣壳基因工程抗原,建立了逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和逆转录-聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(RT-PCR-RFLP)分型方法。根据HFRSV汉滩型(HTN)代表株76-118S片段cDNA序列,用引物1(5’-atgcatgcggccgctaccatggNcoⅠcaactatggagg-3’)与引物2(5’-gatcgtcgacSalⅠttagatctagagtttcaa… 相似文献
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聚合酶链反应检测HBV DNA在HBV不同血清免疫学标志组合中的应用价值 总被引:3,自引:0,他引:3
乙型肝炎病毒(HBV)感染是一种世界性传染病,我国为高流行区,约1亿人口为乙型肝炎表面抗原携带者。随着聚合酶链反应(PCR)技术的推广应用,对患者体内HBV复制及传染性有了更深刻的认识,现将本研究应用PCR检测HBVDNA在HBV不同血清免疫学标志中的分布结果报告如下。一、材料与方法:(1)标本来源:135份血清均来自本站实验室门诊,凡采用聚合酶链反应检测HBVDNA且同时检查HBV血清免疫学标志者,静脉采血2ml,分离血清置-20℃备用。(2)试剂及方法:HBVDNA(PCR法)购自复旦大学希格尔有限公… 相似文献
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庚型肝炎病毒PCR产物直接序列测定方法的建立及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
以PCR产物为测序模板,γ32PATP标记的PCR扩增引物为测序引物,用TaqDNA聚合酶为测序酶,建立了庚型肝炎病毒(HGV)cDNA序列分析方法。应用本法测定1份PCR阳性产物的HGVcDNA序列,图谱呈清晰的序列梯,其序列与GBVC(U36380)和HGV(U44402)的相应片段序列比较,同源性分别为8565%(191/223)和852%(190/223)。与用荧光法测定的另一株HGV序列有高度一致性。对同一样品两端测序,重叠部分序列完全一致。表明PCR产物直接测序法可用于HGV核酸序列分析。 相似文献
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PCR扩增16s~23s rRNA区间序列在细菌检测与鉴定领域的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
传统的细菌学检验与鉴定需要进行细菌培养及一系列生化反应或免疫学检测,环境样品中的细菌检测与鉴定还需要前增菌培养、选择性培养及生化鉴定等程序,既费时又费力,对有些细菌尚不能给出理想的鉴定结果。随着分子生物学技术的发展,1985年产生了聚合酶链式反应(PolymerasechainreactionPCR),该技术以快速、敏感和特异等优点迅速地应用到微生物检测领域。90年代初建立了PCR扩增16s~23srRNA区间多态性分析的技术,尤其是近两年,这一技术在细菌学检测与鉴定等研究领域得到长足发展,已涉… 相似文献
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高瞻 《中国公共卫生学报》1996,15(6):365-366
随机引物多聚酶链反应对细菌分型的价值及影响因素探讨高瞻,KathyJackson,DavidE.Leslie’踌机引物多聚酶链反应(RandomAmplifiedpoly-morphicDNAPCR,简称RAPDPCR)是在对所扩增基因一无所知的情况... 相似文献
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乙型肝炎病毒(HBV)感染是慢性肝炎、肝细胞癌发生的主要原因之一[1]。长期以来一直采用血清学指标判断HBV的感染状态。近年发展起来的聚合酶链反应技术(PCR)能敏感有效地检测病人血清中的HBVDNA[2]。我们用PCR法检测了在各型肝炎、肝硬化和肝... 相似文献
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用双重式聚合酶链反应技术检测鼠疫菌的实验研究 总被引:14,自引:1,他引:13
近几年来,随着分子生物技术的迅猛发展,国内外学者对聚合酶链反应(PCR)用于鼠疫的检测十分关注。Hinnebusch等〔1〕(1993)用Pla基因序列,以特异性片段为引物,建立了检测印鼠客蚤体内鼠疫菌的PCR方法。Hiroko氏等〔2〕(1996)... 相似文献
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多聚合酶链反应(PCR)技术检测无菌源(血液、脑脊液、腹腔液)标本诊断念 球菌病方面局长迅速。本文阐述了念球功物引物设计、破和DNA技术,PCR及其产物检测方法,PCR的注意事项等方面的研究进展。 相似文献