两种方法测定血清蛋白的探讨

<正> 将考马斯亮蓝G-250(CBG)染料结合蛋白比色法,应用于尿蛋白和脑脊液蛋白定量,其优点为灵敏度高,能测出微克水平的蛋白质,标本用量少,染料与蛋白的结合反应快,显色稳定,重现性好,操作方便。用双缩脲法测定血清蛋白是公认的经典法。目前国内应用较广。为了探讨上述两种方法,在测定血清蛋白方面有无差异,本文进行了如下试验。方法:     

双试剂双缩脲法对脂浊标本血清总蛋白的测定

目的探讨双试剂双缩脲法在全自动生化仪中直接测定脂肪乳浊标本血清总蛋白。方法将单试剂双缩脲法改成双试剂,在全自动生化仪上采用二点终点法直接测定。结果双试剂双缩脲法测定脂浊血清标本的总蛋白为(74.27±5.65)mmol/L与手工标化法测定的(74.46±5.77)mmol/L差异无显著性(P>0.05)。结论双试剂双缩脲法能有效地消除脂肪的干扰,无需另进行手工除脂测定,大大地提高工作效率。     

微量考马斯亮蓝G－250显色法测定尿蛋白

微量考马斯亮蓝Ｇ－２５０显色法测定尿蛋白侯林浦，施为红（检验科）以９６孔聚苯乙烯微孔板作容器将考马斯亮兰Ｇ－２５０检测尿蛋白法改进为微量法，不仅操作简单、快速、节省试剂，而且解决了比色过程中染料挂杯现象，与常规法相比其结果呈高度相关，可替代常规法，有...     

Dimension AR专用通道微量蛋白测定试剂的研制

尿液中微量蛋白测定常用的方法有三氯乙酸沉淀-双缩脲法、丽春红Ｓ法、三氯乙酸比浊法等,此类方法准确性差,操作繁复,不宜自动化。能用于自动化仪器的方法如考马斯亮蓝染料结合法〔1,2〕,由于染料会吸附管道和比色皿,使该法应用受到限止。据文献〔3〕报告,邻苯三酚红-钼酸复合物测定尿微量蛋白,不污染仪器,且具有更多的优点,为了使该法能用于ＤｉｍｅｎｓｉｏｎＡＲ分析仪,代替价格昂贵的进口试剂,我们作了实验。材料和方法1.仪器　自动分析仪ＤｉｍｅｎｓｉｏｎＡＲ(ＤａｄｅＢｅｈｒｉｎｇ公司产品),分光光度计ＤＵ-640(Ｂｅｃｋｍａｎ公…     

BECKMAN CX3 DELTA检测脑脊液和尿液总蛋白的应用与评价

目的:评价BECKMAN CX3 DELTA测定脑脊液和尿液总蛋白的优缺点.方法:BECKMAN CX3 DELTA(以下简称CX3)改良双缩脲法测定脑脊液和尿液总蛋白,与磺基水杨酸法相比较.结果:CX3改良双缩脲法和磺基水杨酸法测定脑脊液总蛋白结果(-x±s)分别为303.85±80.44mg/L和297.3±79.43mg/L,两法测定结果无显著性差异(P>0.05);尿液标本无论是正常对照组或病人组,两法的测定结果均有显著性差异(P＜0.01).其中维生素C、尿酸对尿蛋白测定有正干扰;加入30%H2O2可消除一部分尿酸等还原物质的干扰,但不甚理想.结论:BECKMAN CX3 DELTA能快速准确地测定脑脊液蛋白,但由于尿液成份复杂,在测定尿蛋白时存在较大偏差,不适合临床采用.     

三种方法测定血浆纤维蛋白原的方法学评价

作者对血浆纤维蛋白原测定的三种方法进行了方法学评价和对照试验。结果表明：双缩脲法各项指标均较好，可做为参考方法；考马斯亮蓝微量比色法呈色稳定，线性好，准确度较高，与双缩脲法比较Y=0.48x 0.082,r=0.9784,Syx=0.58g.L^-，此法可作为临床常规测定血浆纤维蛋白原较好的方法；相比之下热沉淀法各项指标均不如以上两法。     

改良双缩脲双试剂与单试剂法测定脂浊标本血清总蛋白比较分析

目的对改良双缩脲双试剂与单试剂法测定脂浊标本血清总蛋白比较分析。方法选取2017年2月至2018年2月我院就诊患者的脂浊标本112例作为观察组,另选68例正常血清标本作为对照组,对所有标本血清总蛋白进行测定。采用酒石酸作为络合剂,避免出现氢氧化铜沉淀,血清空白增加的敏感性,尽可能地降低脂血症对光谱造成的干扰。结果改良式双缩脲双试剂法与单试剂对正常血清标本血清总蛋白直接测定比较(P0.05);对脂浊标本进行直接测定,两种方法比较(P0.05)。结论改良式双缩脲双试剂法能够有效的消除脂肪的干扰,其精密度与准确度较高,能够适用于自动分析,有利于提高工作效率,值得进一步推广应用。     

蜂毒素脂质体质量评价方法的研究

目的考察蜂毒素脂质体包封率的测定方法和游离药物的含量测定方法,对蜂毒素脂质体进行质量评价.方法对于游离蜂毒素的含量测定,比较了单波长考马斯亮蓝法、双波长考马斯亮蓝法、福林-酚法、二喹啉甲酸法及高效液相色谱法等5种含量测定方法.对于蜂毒素脂质体包封率测定,筛选了透析法及超滤-离心法.结果在吸收度及线性均良好的情况下,双波长考马斯亮蓝法可用于测定蜂毒素脂质体包封率时游离蜂毒素的含量,检测范围为0.5～25.0μg/mL,范围内线性良好,相关系数为0.9996.脂质体包封率测定采用超滤离心法,游离药物的平均回收率在95.75%～98.30%之间,脂质体不能透过截留相对分子质量为105的超滤膜.采用超滤离心法结合双波长考马斯亮蓝法测定3批蜂毒素脂质体的包封率为(91.45±0.83)%,RSD小于1%.结论该方法可用于蜂毒素脂质体的质量评价.     

PAGE一步性低背景CBBR_（250）染色方法的探讨

传统的考马斯亮蓝Ｒ２５０（ＣＢＢＲ２５０）染色方法存在背景深，耗时长，试剂耗用多的缺点，考马斯亮蓝Ｇ２５０（ＣＢＢＧ２５０）虽然需时短，但其灵敏度效低。本文探讨了一步性低背景ＣＢＢＲ２５０染色方法在蛋白质ＰＡＧＥ中的应用，结果表明使用乙醇－乙酸－水染色系统，ＣＢＢＲ２５０的最佳工作浓度为０．００４‰～０．００８‰，染色时间为８～１０ｈ，灵敏度为０．５μｇ／带。一步性ＣＢＢＲ２５０染色方法与传统的ＣＢＢＲ２５０染色方法相比，有需时短，背景浅，试剂用量少的优点，可用于蛋白质的定性和定量研究。     

尿总蛋白邻苯三酚红钼法测定的实验研究

尿蛋白测定是诊断肾脏疾病的重要检查项目,亦是判断肾小球或肾小管损伤程度的一项良好指标.尿蛋白增高可见于肾小球滤过膜通透性亢进、肾小管重吸收能力降低以及进入尿道的蛋白质非正常代谢.白蛋白尿还可以作为糖尿病患者的肾脏损坏的指标,如及早诊断和治疗可以避免这些病变.尿总蛋白测定方法有三氯乙酸法、双缩脲比色法、考马斯亮蓝法、邻苯三酚红钼法等,其中邻苯三酚红钼法是近年来应用较多的方法,本室在应用前对该法进行了实验研究,现将结果报告如下.     

不同方法检测尿、脑脊液蛋白结果比较

①目的 探讨不同方法,测尿/脑脊液蛋白的效果并进行比较,观察用PRM法测尿/脑脊液蛋白的特点.②方法 用双缩脲法与PRM法测定196份门诊及住院患者的24小时尿蛋白,用磺柳酸法与PRM法测定89份脑系科患者脑脊液蛋白.③结果 两种方法测尿蛋白,结果均无明显差异(P＞0.05).④结论 用PRM法同时测尿/脑脊液蛋白,试剂单一,操作简便易行,结果与双缩脲法测尿蛋白,磺柳酸法测脑脊液蛋白比较无差异,但更有利于生化室测尿/脑脊液蛋白.     

钨酸比浊法与双缩脲法测定尿蛋白定量的比较

我院采用钨酸比浊法与双缩脲法测定尿蛋白定量的比较，现报告如下：一、取材：分析留取34例病人24小时尿液。二、方法：1．双缩脲法：原理以钨酸沉淀尿中蛋白质，用双缩豚法进行定量测定。试剂：（1）0，075rnmol／L硫酸；（2）159／L钨酸钠溶液。（3）双缩脲试剂，硫酸铜1．5g．滴石酸钾纳6.0g，100m／L氢氧化钠溶液300ml，蒸留水加至1000ml。（4）蛋白标准液．用双缩服法较准的混合人血历，其总蛋白509／L，应用时再稀释20倍。操作：（l）量24小时尿液总量，混匀，取尿液1011，以200O转／分离心3分钟，（2）取上清尿液作蛋白定性（磺基…     

不同方法检测尿、脑脊液蛋白结果的比较

①目的探讨不同方法，测尿／脑脊液蛋白的效果并进行比较，观察用PRM法测尿／脑脊液蛋白的特点。②方法用双缩脲法与PRM法测定196份门诊及住院患者的24小时尿蛋白，用磺柳酸法与PRM法测定89份脑系科患者脑脊液蛋白。③结果两种方法测尿蛋白。结果均无明显差异（P〉0．05）。④结论用PRM法同时测尿／脑脊液蛋白，试剂单一，操作简便易行，结果与双缩脲法测尿蛋白，磺柳酸法测脑脊液蛋白比较无差异，但更有利于生化室测尿／脑脊液蛋白。     

不同方法对苦瓜核糖体失活蛋白的 PEG化学修饰后蛋白浓度测定的差异?

目的：探究 PEG 化学修饰对4种常用蛋白浓度测定方法的影响。方法采用福林-酚试剂法(Lowry 法)、二喹啉甲酸法(BCA 法)、考马斯亮蓝法(Bradford 法)和紫外分光光度法(UV 法)分别测定样品中α-苦瓜素和抗人类免疫缺陷病毒植物蛋白 MAP30经 PEG 修饰前、后的蛋白含量;并用 Lowry 法和 BCA 法对低浓度游离 PEG 修饰前、后的样品蛋白含量进行测定。结果发现考马斯亮蓝不与样品发生颜色反应,PEG 修饰后会使UV 法测定值变大,Lowry 法测定值略有变大,BCA 法基本不受影响;低浓度的游离 PEG 对测定方法无影响,但高浓度的 PEG 会吸附 Folin-酚,形成黄色絮状物。结论PEG 化学修饰对蛋白浓度测定方法影响最小的为 BCA 法, Lowry 法最灵敏,Bradford 法不适用;而 PEG 化学修饰会使 UV 法测定值增大20%~30%,可作为快速测定时的校准参考。     

N-V蛋白酶含量检测方法的准确度评价

目的：采用多种方法测定N-V蛋白酶含量,并比较实验结果,选择出最适合N-V蛋白酶含量测定的方法。方法：从沙蚕体内提取的N-V蛋白酶,以凯氏定氮法为基准方法,采用考马斯亮蓝法、Lowry法和紫外吸收法测定N-V蛋白酶的含量。结果：考马斯亮蓝法得到N-V蛋白酶含量为(5.150±0.028)g·L^-1,紫外吸收法A₂₈₀-A₂₆₀)测得蛋白酶含量为(5.202±0.001)g·L^-1,这两种方法均与凯氏定氮法测得的结果(5.164±0.013)g·L^-1存在较小差异; Lowry法测得的结果为(1.12±0.014)g·L^-1,明显偏低,存在较大差异。结论：凯氏定氮法、考马斯亮蓝法和紫外吸收法(A₂₈₀-A₂₆₀)均可测定N-V蛋白酶含量。但N-V蛋白酶不适合采用Lowry法进行测定。     

改良双缩脲试剂检测血清总蛋白的观察

<正> NaOH-BR(氢氧化钠双缩脲试剂)在测定高脂血标本时常出现混浊,况且通常所用的乙醚抽提法手续烦琐。我们用 KOH-BR(氢氧比钾双缩脲试剂)代替NaOH-BR可有效消除干扰,效果满意。     

Folin—酚试剂法测定蛋白质含量中两种试剂的配制

Ｆｏｌｉｎ－酚试剂法测定蛋白质含量中两种试剂的配制生物化学教研室姜玉梅杨歌德范业鹏蛋白质含量的测定方法有以下几种，如总氮量测定即凯氏定氮法、双缩脲法、Ｆｏｌｉｎ－酚试剂法（Ｌｏｗｒｙ氏法）、紫外线吸收法等。目前，实验室多采用Ｆｏｌｉｎ－酚试剂法测定，...     

埃尔玛折射仪在鉴别胸腹水性质中的应用

本文使用埃尔玛折射检测胸腹水中的蛋白及比重,以鉴别其性质并与双缩脲法蛋白定量进行比较,结果如下。一、材料与方法: 1.材料:明确诊断的住院患者胸腹水标本28例,其中渗出液20例,漏出液8例。埃尔玛(ERMA)折射仪辽宁无线电七厂组装。 2.方法:每份标本同时用埃尔玛折射仪法(按说明书操作)、双缩脲(蛋白定量测定)及常规法分别测定蛋白定量与比重。     

饮食中晚期糖基化终产物对糖尿病肾病大鼠肾脏的损害作用

目的 观察饮食中晚期糖基化终产物(AGEs)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的影响,探讨其作用机制.方法 SD大鼠40只,随机选取10只为空白对照组,30只大鼠DN模型建立成功,随机分为3组:高AGEs饲料组、低AGEs饲料组及普通饲料组,每组10只.分别于第9周及第13周对各组大鼠进行检测:考马斯亮蓝法测定24 h尿蛋白...     

肾病综合征患儿血脂,载脂蛋白检测及其意义

原发性肾病综合征（以下简称肾病），常伴发高脂血症，可引起脂代谢异常，导致心血管疾病。近年来国内外学者对肾病血脂的研究作了大量工作，但有关小儿病例报告较少。本文对我院 2 0例肾病患儿的ＴＣ、ＴＧ、ａｐｏＡ1、ａｐｏＢ、ＡＬＢ进行了检测并分析如下：资料与方法　本组病例系我院门诊及住院肾病患儿，其中男 14例，女 6例，年龄 4～ 14岁，平均年龄9岁，同时以 2 0例同龄健康儿童作为对照组。取空腹静脉血，ＴＣ、ＴＧ用酶法测定，酶试剂用长征，东欧产品。ａｐｏＡ1、ａｐｏＢ用免疫比浊法，试剂用长征产品。ＡＬＢ用双缩脲法，…