基于SPOC平台的《血液病学》在线开放课程分析与评价

目的　探索采用量化手段开展基于小规模在线课程（small private online course,SPOC）平台的血液病学在线开放课程的教学评价。方法　选择临床医学专业（本科）四年级学生,采用视频观看、富文本浏览、随堂测验、专题讨论等形式,开展血液病学在线课程学习。教学内容涵盖血液病基础、贫血性疾病、血液肿瘤、出凝血疾病。通过教学行为的评估、单元测验、课程考试、SPOC成绩的评定进行教学评价。采用线性回归分析教学视频的时长与学生学习行为之间的相关关系,视频观看数量和观看时间与课程考试成绩、SPOC成绩的相关关系。采用Kruskal-Wallis检验比较课程学习行为（参与率）的差异。采用t检验比较单元测验两次答题成绩的差异,测算复本信度。采用卡方检验比较血液病学不同亚专业试题得分率的差异和血液肿瘤不同考点得分率的差异。结果　教学视频观看率明显高于富文本浏览和随堂测验的参与率（P<0.001;P<0.001）;视频时长与视频观看、富文本浏览、随堂测验之间无明显相关性（R=0.168,F=0.81,P=0.376;R=0.057,F=0.07,P=0.802;R=0.124,F=0.37,P=0.546）;视频观看与富文本浏览、随堂测验的参与率呈显著正相关（R=0.890,F=76.41,P<0.001;R=0.934,F=163.67,P<0.001）。贫血性疾病单元测验参与率明显高于血液肿瘤（χ²=49.08,P<0.001）、出凝血疾病（χ²=25.97,P<0.001）,第二次答题成绩有明显提高（t=-2.09,P=0.040）,试题复本信度0.750。不同亚专业课程考核得分率差异无统计学意义（χ²=5.20,P=0.074）;视频观看数量与SPOC成绩呈显著正相关（R=0.523,F=196.22,P<0.001）;血液肿瘤分子遗传学、分子生物学试题得分率明显低于一般临床资料试题（P<0.05）。结论　教学视频是在线课程的基础,增加视频观看个数,提高视频观看率,可以有效调动学生富文本浏览、随堂测验等延伸学习的积极性,提高对课程学习的参与度,有利于学生学习成绩的提高。视频观看时间等单纯行为因素不推荐成为成绩评定指标。单元测验采用两次答题取最高分,有利于通过学习行为提高专业学习水平,而不影响成绩评价的可靠性。基于SPOC平台的在线开放课程有利于《血液病学》课程教学的均衡开展。     

Fe2O3着色对牙科纳米氧化锆机械性能及透明度影响的研究

目的 观察Fe₂O₃通过气氛着色法对氧化锆的着色效果、力学性能和透明度的影响。方法 含不同比例Fe₂O₃的氧化锆粉末,对预烧结的牙科用氧化锆瓷块进行包埋后烧结至1450℃。采用分光光度计测量瓷块颜色及透明度,万能测力仪测试力学性能。结果 随着Fe₂O₃在包埋粉中的比例增加,烧结后的氧化锆瓷块的色泽出现淡黄至黄褐色转变。色度值L^*为64.91~90.94,a^*值范围为-1.27~12.70,b^*值范围为1.02~38.66,基本覆盖天然牙的牙色范围。瓷块的透明值范围为14.23~10.15。着色前后瓷块的3点抗弯强度无显著改变（P>0.05）。结论 采用Fe₂O₃的气氛着色法,对牙科氧化锆瓷块的机械性能及透明度无显著影响,具临床应用前景。     

半夏及近缘种叶绿体非编码区序列分析

目的 通过测定半夏及近缘种的DNA叶绿体的非编码区序列,为半夏的分子鉴别和遗传多样性研究提供依据。方法 在我国半夏主要分布区收集到43份半夏及滴水珠和虎掌半夏2个近缘种,采用PCR法克隆叶片基因组DNA中psbK-psbI和atpF-atpH两段序列,借助生物信息学软件进行比对分析。结果 半夏atpF-atpH序列长为337～342 bp,较为保守,仅含变异位点7个,其中信息位点1个,遗传距离为0～0.024。半夏psbK-psbI序列长为432～435 bp,变异位点37个,其中信息位点17个,遗传距离为0～0.069。聚类分析结果均显示出与表型以及地理居群的不一致。结论 psbK-psbI序列较atpF-atpH有更好的鉴别能力,在半夏种内具有较丰富的变异位点。     

应用改良下三角瓣法修复单侧唇裂术后继发畸形临床研究

目的 单侧唇裂术后继发畸形常表现为可见的瘢痕,不对称的解剖外观,唇红缘不齐等。因此设计一套完整的修复多个缺陷,重建解剖标志的方法是必要的。本研究通过人体测量方法来评估采用改良下三角瓣法修复唇裂术后继发畸形的结果。方法 回顾性分析使用改良下三角瓣法修复唇裂术后继发畸形的患者的临床疗效。采集标准的术前和术后照片,并测量各解剖点。结果由两个独立的,双盲的人员评估比较,采用配对t检验。结果 本研究纳入对象共18例（患者平均年龄9.27岁,女性,n=8）,随访时间最长24个月。术前PCH、HL、HL''差异有统计学意义（P<0.05）。术后PCH、HL、HL''差异无统计学意义（P>0.05）。手术侧的△PCH、△HL和△HL''与健侧的△PCH、△HL和△HL''之间有显著变化（P<0.05）。术后人中高度有显著变化（P<0.05）。PCW及MW有显著变化（P<0.05）。结论 使用改良下三角瓣法修复唇裂术后继发畸形,解剖测量有明显变化,可显著改善唇部外观。     

地耳草黄酮类成分UPLC-MS分析

目的 建立超高效液相色谱-质谱仪联用技术（UPLC-MS）对地耳草中黄酮类成分分析的方法。方法 采用Alltima C₁₈色谱柱(5 μm,250 mm×4.6 mm,i.d.),以乙腈-0.8%醋酸为流动相,梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为30 ℃。在电喷雾负离子模式下监测采集数据。结果 初步鉴定8种黄酮类化合物,并同时测定其中6种黄酮的含量。6种黄酮类化合物的浓度与峰面积的线性关系良好(r²>0.998 2);加样回收率为97.6%~99.7%。结论 该方法准确可靠,重现性好,可作为地耳草内在质量评价的依据。     

PPARγ1基因转染对缺血再灌注心肌细胞凋亡的作用和影响

 摘要：目的  探讨心肌细胞过表达过氧化物酶体增殖物激活受体γ1（PPARγ1）基因对缺血再灌注损伤导致细胞凋亡的作用和影响。方法  30只SD大鼠随机分为SHAM组、MIRI组、PPARγ1组,每组10只。SHAM组和MIRI组经冠状动脉转染携带绿色荧光蛋白的腺病毒载体（Ad-EGFP）,PPARγ1组转染携带PPARγ1基因的腺病毒载体（Ad-PPARγ1）至心肌组织。稳定3 d后,SHAM组只过线,不接扎;MIRI组和PPARγ1组行心肌缺血再灌注损伤（缺血30 min,再灌注120 min）。电镜下观察各组心肌的超微结构变化,Western blot检测B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl2）和Bcl2相关X蛋白（Bax）,DNA断裂的原位末端标记法观察心肌细胞凋亡情况。结果  缺血再灌注后,电镜下MIRI组心肌细胞结构损伤最严重,心肌纤维排列紊乱,有断裂和溶解现象,线粒体肿胀,结构模糊,部分嵴断裂溶解;PPARγ1组结构损伤较MIRI组减轻。与SHAM组比较,MIRI组Bcl2/Bax比值下降（P <0.05）,PPARγ1组无明显变化（P >0.05）;与MIRI组比较,PPARγ1组Bcl2/Bax比值上升（P <0.05）。MIRI组和PPARγ1组的心肌细胞凋亡数目较SHAM组升高（P <0.05）;MIRI组高于PPARγ1组（P <0.05）。结论  过表达PPARγ1基因能通过抗氧化应激、减少细胞凋亡来保护缺血再灌注心肌。

     

72例克罗恩病患者中血清同型半胱氨酸、叶酸和维生素B12水平分析

目的 探讨血清同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）、叶酸和维生素B₁₂水平与克罗恩病（Crohn''s disease,CD）的关系。方法 收集72例CD患者和128名性别、年龄相匹配的健康对照者,采用简化克罗恩病活动指数（CDAI）评估CD疾病活动度。采用循环酶法检测Hcy水平,化学发光免疫法检测叶酸和维生素B₁₂水平。采用Pearson相关性分析和多元线性回归分析探讨CD组中Hcy水平与CDAI评分及叶酸、维生素B₁₂、白蛋白等血清学指标的关系。最后采用Logistic回归分析评估CD的独立危险因素。结果 与对照组相比较,CD组中Hcy平均水平显著增高（P=0.002）,而叶酸和维生素B₁₂平均水平显著降低（P均=0.000）。CD组中高同型半胱氨酸血症（>15.0μmol/L）、叶酸缺乏（<4.0ng/ml）和维生素B₁₂缺乏（<203.0pg/ml）比例均显著高于对照组（P均<0.01）。与缓解期患者（CDAI<5）比较,活动期CD患者（CDAI≥5）中Hcy平均水平显著增高（P=0.001）,而叶酸和维生素B₁₂平均水平显著降低（P均=0.000）。经性别、年龄因素校正后,多元线性回归分析显示CD组中Hcy水平与叶酸和维生素B₁₂呈独立负相关（β=-0.262,P=0.037;β=-0.293,P=0.020）。Logistic回归分析结果提示叶酸缺乏和维生素B₁₂缺乏为CD的独立危险因素（OR=4.421,P=0.006;OR=9.036,P=0.000）。结论 浙江籍汉族CD患者中可能普遍存在高同型半胱氨酸血症、叶酸缺乏和维生素B₁₂缺乏,血清Hcy、叶酸和维生素B₁₂水平与CD疾病活动度密切相关,叶酸缺乏和维生素B₁₂缺乏是CD的独立危险因素。     

慢性皮质酮处理对小鼠学习记忆和突触相关蛋白的影响

目的 建立饮入方式,慢性给予皮质酮,观察皮质酮对学习记忆和突触相关蛋白的影响。方法 c57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组和皮质酮组,每组10只。皮质酮组饮用含皮质酮的0.45%羟丙基-β-环糊精溶液,5 mg/(kg·d)。正常组动物给予0.45%羟丙基-β-环糊精溶液。造模35 d后,进行社会识别实验和水迷宫实验。行为学实验结束后,动物断头取海马,应用western blot进行突触相关蛋白测定。结果 社会识别实验显示,正常组和皮质酮组对刺激鼠笼的嗅闻时间均比空鼠笼长(P < 0.05)。对照组对刺激鼠2的嗅闻时间比刺激鼠1长(P < 0.05)。皮质酮组对刺激鼠2的嗅闻时间与对刺激鼠1的嗅闻时间差异无显著性。水迷宫实验定位航行结果显示,皮质酮组学习能力下降,寻台潜伏期延长(P< 0.05)。空间探索结果显示,皮质酮组穿台次数、进入实台象限的次数和实台象限路程均明显减少(P < 0.05,P < 0.05,P < 0.05)。Western blot结果显示,皮质酮组突触后致密物质(postsynaptic density,PSD-95)、突触素(synapsin-1,Syn-1)和磷酸化细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)表达明显下降(P < 0.01,P < 0.01,P < 0.05)。结论 通过饮入方式,慢性给予皮质酮,动物出现社会记忆和空间学习记忆障碍,可能与海马突触相关蛋白表达下降,突触功能受损有关。     

18F-FDG PET-CT与乳腺癌新辅助化疗疗效中的关联性分析

目的 本研究旨在探讨¹⁸F-FDG PET-CT与乳腺癌新辅助化疗疗效的关联性。方法 2014年1月~2015年12月,收集笔者医院收治的行新辅助化疗的乳腺癌患者98例。前瞻性分析¹⁸F-FDG PET-CT与乳腺癌新辅助化疗疗效的关联性。结果 与病理无效组相比,病理有效组患者SUV_max0显著增加（9.54±3.11 vs 6.12±3.21,P=0.015）;SUV_max1变化率显著增加（53%±17% vs 29%±11%,P=0.000）;SUV_max2变化率显著增加（61%±21% vs 34%±12%,P=0.000）。与未pCR组相比,pCR组患者SUV_max0显著增加（10.54±4.11 vs 5.87±2.21,P=0.000）;SUV_max1变化率显著增加（57%±17% vs 28%±10%,P=0.000）;SUV_max2变化率显著增加（64%±23% vs 33%±11%,P=0.000）。结论 ¹⁸F-FDG PET-CT可作为评价乳腺癌新辅助化疗效果的一种影像学方式,值得临床进一步推广。     

实验大鼠动脉粥样硬化模型升主动脉力学特性研究

目的比较正常和老龄动脉粥样硬化动物模型升主动脉的蠕变特性,确定动脉粥样硬化对升主动脉拉伸力学特性的影响。方法在日本岛津电子万能试验机上对正常组和模型组各15个试样进行拉伸实验。拉伸实验的加速度为5mm/min。结果正常组拉伸最大载荷为1.38&#177;0.16N,最大应力1.99&#177;0.23MPa,最大位移2.59&#177;0.27mm,最大应变52.1%&#177;5.4%;模型组拉伸最大载荷为0.99&#177;0.16N,最大应力1.39&#177;0.19MPa,最大位移2.06&#177;0.22mm,最大应变41.14%&#177;4.37%。结论动脉粥样硬化对升主动脉力学特性具有一定影响。     

我国分级诊疗制度的研究热点与演化历程分析

背景　目前,分级诊疗制度成为深化医改的重中之重,了解其研究热点和研究演化显得尤为重要。目的　系统地梳理我国分级诊疗制度研究的发展趋势和演变进程,把握其知识基础、研究热点及发展方向,为后续研究提供科学的参考依据。方法　于2019年1-7月,以中国知网数据库为数据来源,以“分级诊疗”“分级医疗”“阶梯医疗预防网”“划区分级分工医疗制”“划区分级分工医疗服务制”“分级分工医疗制”“社区首诊”“基层首诊”“急慢分治”“双向转诊”“上下联动”“分工诊疗”“分工医疗”“有序医疗”“有序诊疗”“医疗服务体系+整合”“医疗服务体系+分级”“医疗机构+分工协作”为关键词系统检索与我国分级诊疗制度有关的文献,检索时间为1949-01-01至2019-07-31。采用Excel保留并分析数据,对纳入文献的作者、题名、文献来源、发表机构、发文量等信息进行描述性统计分析,运用CiteSpace获取我国分级诊疗制度研究成果的期刊、机构合作、作者分布;通过高频关键词分析,确定研究的热点领域;通过时区图、聚类词和突现词确定研究的前沿领域与发展趋势变化。结果　最终纳入文献1 233篇,发文量最多的期刊为《中国全科医学》（287篇,23.28%）,发文量前5位的期刊均来源于北京大学《中文核心要目总览》（合计729篇）,超过总发文量的一半。研究成果高产机构主要围绕以华中科技大学、首都医科大学和原国家卫生计生委、复旦大学、北京大学为核心的4个机构合作群;核心作者共有68位,共发文457篇,占文献总数的37.28%;“社区卫生服务”“医联体”“影响因素”“全科医生”一直是分级诊疗研究领域的热点名词。1949-1978年出现了“爱国卫生运动”“床位”“门诊病人”聚类标签和“效果评价”“影响因素”“医疗”关键词;1979-2008年出现了“医疗”“医疗保险制度”聚类标签和“社区卫生服务”“双向转诊”“社区卫生服务机构”等关键词;2009-2018年出现了“基层医疗卫生机构”“医养结合”“医疗服务体系”“医疗保险”聚类标签和“医疗服务体系”“分级诊疗”等关键词。结论　我国分级诊疗制度研究文献数量增加速度加快,但研究成果有待进一步提升。机构间合作较多,但作者间的合作交流较局限,未形成稳定的核心作者群。研究热点逐渐多元化,研究方向不断细化;如何通过更紧密的交流协作,从制度层面寻找一个另辟蹊径的创新之路是值得研究的问题。     

血液透析合并慢性乙型肝炎患者血清β2-微球蛋白水平及其影响因素

目的  观察血液透析合并慢性乙型肝炎（简称慢性乙肝）患者血清β2-微球蛋白（β2-MG）水平,并探讨血清β2-MG的影响因素。方法  按照“慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）”筛选行血液透析治疗的慢性乙肝患者,30例纳入研究。选择30例乙肝病毒（HBV）阴性的血液透析患者作为对照组;用t检验比较两组实验室指标,用多元线性回归分析法分析影响血清β2-MG的因素。结果  HBV阳性组血清β2-MG水平为（65.64±10.18）μg/ml,较HBV阴性组（44.90±12.81）μg/ml显著升高（P <0.010）。多元线性回归分析显示,血清β2-MG水平与血清清蛋白呈负相关（B=-0.001,P =0.015）,与HBV感染、透析龄及谷丙转氨酶呈正相关（B=14.127,P =0.000;B=0.421,P =0.001;B=0.077,P =0.032）。结论  血液透析合并慢性乙肝患者血清β2-MG水平较HBV阴性的血液透析患者显著升高,且与血清清蛋白、谷丙转氨酶、HBV感染及透析龄有关。

     

甘肃道地药材掌叶大黄药材的HPLC指纹图谱研究

目的 建立甘肃礼县掌叶大黄的高效液相色谱指纹图谱,可为科学评价和有效控制其质量提供可靠的方法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Agela Venusil XBP-C₁₈柱（4.6 mm×250 mm, 5 μm）;流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为254 nm;柱温为40 ℃。结果 掌叶大黄中所含主要成分的色谱峰均得到了有效的分离,在指纹图谱中共有峰有26个,并指认了5个色谱峰。结论 该方法对掌叶大黄质量控制以及实现规范化种植提供了参考依据。     

Nb2O5掺杂对SrTiO3陶瓷显微结构和微波介电损耗的影响

采用无压烧结工艺制备了Nb₂O₅掺杂SrTiO₃陶瓷,研究了Nb₂O₅掺杂量对SrTiO₃陶瓷相组成、显微结构和微波介电损耗的影响。结果表明：Nb₂O₅掺杂对SrTiO₃陶瓷的相结构没有产生明显的影响,但会在一定程度上阻碍样品的致密化,同时促进晶粒的生长。随着Nb₂O₅掺杂量的增加,SrTiO₃陶瓷的介电常数从296逐渐下降至230左右,温度系数从1.714×10^-3℃^-1逐渐下降至1.629×10^-3℃^-1,Q×f值则先急剧升高,之后又慢慢下降。当Nb₂O₅掺杂量为0.15%（质量分数,下同）时,SrTiO₃陶瓷样品的介电损耗最低,Q×f可达6 281 GHz,大约是纯SrTiO₃（1 145 GHz）陶瓷样品的5.5倍（此时介电常数约为270,温度系数约为1.684×10^-3℃^-1）。此外,对材料显微结构、介电常数、温度系数特别是介电损耗变化的原因进行了分析。     

大鼠认知障碍对糖代谢的影响及其与肝脏和骨骼肌糖原合成酶激酶-3β表达水平的关系

目的  探讨大鼠认知障碍对糖代谢的影响及其与肝脏和骨骼肌;糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）表达的关系,为糖代谢的神经调节机制研究提供新的实验依据。方法  Aβ1-42大鼠海马内注射构建认知障碍模型,血糖仪检测大鼠空腹血糖（FPG）,半定量反转录-聚合酶链反应法（RT-PCR）检测肝脏与骨骼肌GSK-3β mRNA的表达,蛋白印迹法（Western blot）检测肝脏与骨骼肌GSK-3β的表达。结果  ①实验组大鼠FPG为（7.99±0.15）mmol/L,与假手术组和对照组比较显著升高（P <0.05）。②实验组大鼠肝脏和骨骼肌GSK-3β mRNA表达水平分别为（0.47±0.03）和（0.26±0.02）,与假手术组和对照组比较均明显升高（P < 0.05）。③实验组大鼠肝脏和骨骼肌GSK-3β表达水平分别为（0.47±0.04）和（0.26±0.03）,均显著高于假手术组与对照组（P <0.05）。结论  大鼠认知障碍可引起血糖水平的升高,其机制可能与认知障碍大鼠肝脏和骨骼肌GSK-3β表达升高有关。

     

膝关节半月板热身运动前后磁共振T2时间变化研究

目的 通过比较分析热身运动前后膝关节半月板磁共振T₂时间的变化,探讨利用T₂时间变化反映热身运动前后半月板变化的可行性。方法 选择40例无膝关节相关症状的志愿者,其中男性15例,女性25例;患者年龄22~30岁,平均年龄26.32±2.1岁。在同等强度的热身运动前后对每位志愿者行右膝关节的MR T₂ mapping序列成像,分别测量内、外侧半月板前角、后角、体部的T₂时间,采用配对t检验比较热身运动前后膝关节半月板T₂时间变化。结果 热身运动后膝关节半月板各个部位的T₂值均增高（P=0.000）;外侧半月板体部T₂值增高幅度小于内侧半月板前角（P<0.05）、内侧半月板后角（P<0.05）及外侧半月板前角（P<0.05）。结论 热身运动可以增加膝关节半月板T₂时间,提示可以增加半月板内含水量,改善半月板的生理活性,对半月板起到一定的保护作用;MR T₂ mapping成像技术可以评价运动前后半月板T₂时间,是评估半月板的1项可靠手段。     

硬膜外分娩镇痛产间发热的危险因素及对宫缩的影响分析

目的 探讨硬膜外分娩镇痛产妇产间发热的危险因素及产间发热对宫缩的影响。方法 选取2018年1月—2018年12月江苏大学附属四院产科行无痛分娩的285例初产妇,按是否有产间发热分为发热组157例和对照组128例（不发热）。回顾性分析两组的基本临床资料及产程中的相关指标,包括：是否胎膜早破,是否人工破膜,产程时间,产后出血量,缩宫素用量,宫颈检查次数,产钳使用情况,镇痛用局部麻醉药浓度,宫口开2 cm即镇痛前（T₁）、宫口开4 cm（T₂）、宫口开全（T₃）时的宫缩,产间发热,是否中转剖宫产等。再将两组合并按局部麻醉药浓度的高低重新分为高浓度组（0.150%罗哌卡因）和低浓度组（0.075%罗哌卡因）,分析硬膜外镇痛产妇产间发热的危险因素及产间发热对产妇宫缩的影响。结果 与对照组比较,发热组产妇中转剖宫产率升高（P <0.05）,T₂及T₃时的宫缩持续时间缩短（P <0.05）、间隔时间延长（P <0.05）。发热组分娩镇痛时使用高浓度罗哌卡因的比例高于对照组（P <0.05）。与低浓度组比较,高浓度组的发热率升高（P <0.05）,且高浓度组T₂及T₃时的宫缩持续时间缩短（P <0.05）、宫缩间隔时间延长（P <0.05）。在硬膜外局部麻醉药浓度相同的情况下,发热组和对照组产妇T₂及T₃时的宫缩持续时间和间隔时间比较,差异无统计学意义（P >0.05）。Logistic回归分析显示,分娩镇痛使用高浓度局部麻醉药［R=0.224（95% CI：0.130,0.384）］是产妇产间发热的危险因素（P <0.05）。结论 产间发热不会导致产妇宫缩减弱,高浓度的硬膜外局部麻醉药是分娩镇痛产妇产间发热的独立危险因素,并对宫缩有抑制作用。     

羟胺促进柠檬酸-Fe2+活化过碳酸钠降解三氯乙烯

研究了柠檬酸（CA）螯合Fe²⁺活化过碳酸盐体系中投加盐酸羟胺（HAH）对三氯乙烯（TCE）的去除效果。结果发现,HAH能有效将Fe³⁺还原为Fe²⁺,强化TCE的去除效果。当TCE初始浓度为0.15 mmol/L时,n_SPC：n_Fe²⁺：n_TCE=5：3：1时,在CA浓度为0.5 mmol/L条件下,HAH最佳投加浓度为1.5 mmol/L,此时TCE去除率为99.6%。·OH对TCE降解的贡献度为79.2%,O₂^-·的贡献度为21.9%。HAH可减轻HCO₃^-对TCE降解的抑制效应,中间产物为甲酸、NO₂^-和NO₃^-。HAH利于SPC/Fe²⁺/CA体系降解TCE,该结果可为实际TCE污染地下水修复提供技术支撑。     

我国仙茅属植物遗传关系的RAPD分析

目的 从分子水平研究我国仙茅属（Curculigo Gaertn.）植物的遗传关系。方法 对我国仙茅属植物7个国产种30个单株进行RAPD分析。运用Popgene Version1.31软件计算相关参数,采用UPGMA聚类法进行聚类分析。结果 11个RAPD引物共扩增出157条带,其中有145条呈多态性。我国仙茅属植物的遗传多样性极为丰富,在物种水平上,多态位点百分率（PPB）为92.36%,平均每个位点的有效等位基因数（N_e）为1.493 7, Nei’s基因多样性指数（H）为0.300 1,Shannon’s多样性信息指数H_sp为0.457 7。在种内水平上,PPB＝5.09%,N_e＝1.036 6,H＝0.020 4,种内Shannon’s多样性信息指数（H_pop）为0.029 8。Nei’s 基因多样性指数计算的种间遗传分化系数（G_st＝0.931 3）与Shannon’s分化系数（0.934 9）基本一致,均说明大部分遗传变异存在于种间。种间基因流（N_m）为0.036 9,说明种间基因流动较少,遗传分化程度较高。两种间的Nei’s遗传一致度（I）的范围为0.520 8～0.823 7。根据Nei’s遗传距离进行UPGMA聚类,基于RAPD分子标记的聚类结果与传统分类一致。结论 我国仙茅属植物的遗传多样性十分丰富,且种间的遗传差异大于种内的遗传差异。     

铁皮石斛磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及表达分析

目的 克隆铁皮石斛Dendrobium officinale磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（pepc）基因,并对其在F型和H型铁皮石斛中的表达进行分析,为研究铁皮石斛pepc基因的结构、功能提供依据。方法 基于GenBank上已知的pepc基因的同源序列设计引物,应用RT-PCR和RACE等方法,克隆铁皮石斛pepc基因全长。采用荧光定量PCR方法研究pepc基因在2种铁皮石斛中的表达。结果 成功克隆了铁皮石斛pepc基因,登录号为JF423930,该基因全长为3 560 bp,其中cds序列为2 895 bp,与兰科植物的同源性为80%左右,与其他科属植物的同源性达到70%以上,编码964个氨基酸。pepc基因在F型铁皮石斛中的表达量为H型的5.55倍。结论 成功克隆了铁皮石斛pepc基因,且F型铁皮石斛pepc基因的表达量高于H型。