中医药调控肿瘤相关巨噬细胞抗肺癌研究进展

肺癌是全世界常见的恶性肿瘤之一,其发病率和病死率逐年上升。在肿瘤微环境(tumor microenvironment, TME)中,肿瘤细胞与免疫细胞之间的相互作用将直接影响肿瘤的增殖、浸润和转移。肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages, TAMs)是TME的重要组成部分,对肺癌的恶性进展具有双重调控作用。其中,M2巨噬细胞的数量、活性及功能与肺癌患者预后不良相关,参与肿瘤的血管生成与免疫逃逸。中药及其活性成分已被证实可增强机体的抗肿瘤作用,降低化疗和放疗的毒性,延长癌症患者的生存期。该文旨在总结TAMs在肺癌发生和发展中的作用,依据中医“扶正祛邪”理论探讨中医药调控TAMs募集、极化表型、活性、相关因子和蛋白的表达以及相关信号通路防治肺癌的分子机制,以期为靶向TAMs的免疫治疗提供新思路。     

扶正方对LA795肺癌模型鼠EGFR和PCNA的影响

为研究扶正方(主药：黄芪、当归、黄精等)的抗癌机制，40只T739小鼠接种LA795后，均分为4组：中药组(A，接种24h后灌喂扶正方连续13d，第6d起腹腔注射生理盐水)；化疗组(B，接种24h后灌喂生理盐水，6d后腹腔注射环磷酰胺，连续5d)；中药 化疗组(C，综合A、B组治疗方法)；模型组(D，以生理盐水灌喂并腹腔注射)。13d后处死小鼠，取瘤称重，计算抑瘤率，并以免疫组化和图像分析法，比较各组小鼠肿瘤组织的EGFR和PCNA。结果：三种治疗方法均有一定的抑瘤作用，并均可调低EGFR和PCNA，其中A、B组相仿，C组最佳。提示扶正方具有与环磷酰胺相仿的抑制肿瘤生长的作用，其机理可能与其能调低EGFR和PCNA有关；两种药物问有一定的协同作用。     

中药扶正方抗小鼠Lewis肺癌自发性肺转移及对红细胞免疫影响的实验研究

通过检测红细胞C3b受体花环率，红细胞肿瘤细胞花环率，瘤重及抑瘤率，用采探讨中药扶正方的抗肿瘤作用及其对红细胞免疫系统的影响。方法：本研究运用Leis肺转移癌小鼠模型，采用扶正方中药灌胃并设立化疗组进行比较，差异显著。结果：通过观察发现，中药扶正方治疗小鼠肺转移，能抑制肿瘤生长，稳定病灶，抑制肿瘤转移；能提高红细胞C3b受体活性，提高红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力。结论：中药扶正方对小鼠肺癌转移具有明显疗效，其作用机理与提高荷瘤小鼠红细胞免疫系统功能有关。     

抗癌扶正方对小鼠Lewis肺癌移植瘤抑瘤作用的实验研究

目的:研究抗癌扶正方对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用。方法:建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,随机分成荷瘤对照组,顺铂对照组,抗癌扶正方低、中、高剂量组(14.6、29.2、58.4 g/kg),各组连续给药28 d后,剥离肿瘤组织,称重、计算抑瘤率。结果:与荷瘤对照组比较,顺铂对照组和抗癌扶正方低、中、高剂量组小鼠瘤重极显著降低(P<0.01),且抗癌扶正方的抑瘤率随着剂量的增加而升高。结论:抗癌扶正方对Lewis肺癌移植瘤具有显著的抑制作用。     

肺岩宁方对Lewis荷瘤小鼠肿瘤相关性巨噬细胞极化的调控作用研究

目的:探究肺岩宁方对Lewis荷瘤小鼠肿瘤相关性巨噬细胞极化的调控作用及分子机制.方法:36只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、正常肺岩宁组、模型肺岩宁组,采用Lewis肺癌细胞株皮下注射建立移植瘤模型.实验干预2周后测小鼠瘤质量计算抑瘤率,免疫组化染色后采用Image J图像分析软件计算小鼠皮下瘤...     

自拟益气扶正方治疗晚期结直肠癌研究

目的观察自拟益气扶正方对晚期结直肠癌的治疗作用。方法选择武汉市商业职工医院2006年1月—2007年12月住院的晚期结直肠癌患者50例,随机分为2组,研究组给予益气扶正方,同时给予必要的对症处理;对照组给予最佳支持治疗。观察2组近期疗效、毒副反应、生存质量(QOL)、中位生存期。结果研究组在中医辨证分型疗效方面显著优于对照组(2=5.961,P0.01),QOL较对照组为优(P0.05),2组中位生存时间和总生存时间比较无显著性差异(P0.05)。结论益气扶正方对不适合放化疗的晚期结直肠癌患者有一定治疗效果,且能提高生存质量,具有一定的临床应用价值。     

健脾养正方调控肿瘤相关巨噬细胞极化促进胃癌细胞凋亡的机制

目的:研究健脾养正方重塑肿瘤相关巨噬细胞(TAM)表型对胃癌细胞凋亡的影响及相关机制.方法:构建TAM细胞模型,流式细胞术检测健脾养正方对TAM表面CD86、CD163的表达;实时荧光定量PCR检测TAM中肿瘤坏死因子(TNF)-α、转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-10 mRNA水平;Western B...     

驱铅扶正方治疗慢性铅中毒的实验研究

目的观察驱铅扶正方对慢性铅中毒模型大鼠行为学、血铅（BPb）的影响及对肾脏损害的改善情况。方法采用大鼠经口灌胃染毒法，造模8周后，将造模成功后的大鼠随机分为模型对照组、依地酸二钠钙对照组、驱铅扶正方对照组。用药24天后处死动物，每只大鼠采血后分别检测其BPb含量，并光镜下观察肾组织病理改变。结果治疗后，中药组与西药组血铅水平均明显下降，与治疗前对比具有极显著性差异（P〈0.01）；中药组与西药组血铅水平相比较，无显著性差异（P〉0．05）。结论驱铅扶正方总体疗效与依地酸二钠钙对照组相当，但其改善肾小管形态的作用优于依地酸二钠钙对照组，对慢性铅中毒是有效和安全的。     

补肾解毒方调控肿瘤相关巨噬细胞M2极化对大肠癌转移的影响

目的 探讨补肾解毒方调控肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）极化对大肠癌转移的影响。方法 构建C57BL/6小鼠大肠癌皮下移植瘤模型,随机分为正常组、补肾解毒方低、高剂量（11.2、22.4 g·kg^-1）组,待肿瘤生长至1.5~2.0 cm³时剥离瘤体。剥离瘤体28 d后处死小鼠,观察小鼠肺转移情况。苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠肺组织病理学变化,免疫荧光（IF）染色检测肺转移灶肿瘤细胞缺氧、凋亡变化;流式细胞术检测肿瘤组织中M1型和M2型巨噬细胞分群比;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤组织中M2型巨噬细胞（M2-TAMs）极化相关基因（Arg1、CD206、CD163）的表达。结果 正常组、补肾解毒方低、高剂量组小鼠转移率分别为70%、40%、10%。与正常组比较,补肾解毒方低、高剂量组转移率均降低,证明补肾解毒方抑制小鼠肺转移;HE染色表明,与正常组比较,补肾解毒方低、高剂量组肺转移灶中肿瘤细胞浸润显著减少（P<0.01）;免疫荧光染色结果表明,与正常组比较,补肾解毒方低、高剂量组肺转移灶中肿瘤细胞凋亡增多、缺氧环境改善;Real-time PCR结果显示,与正常组比较,补肾解毒方低、高剂量组肿瘤组织中M2型巨噬细胞极化基因（Arg1、CD206、CD163）表达显著下降（P<0.01）;流式细胞术显示,与正常组M2型巨噬细胞分群率为34.867%,补肾解毒方低、高剂量组M2型巨噬细胞分群率分别为22.033%、11.633%,显著降低（P<0.01）;与补肾解毒方低剂量组比较,补肾解毒方高剂量组M2型巨噬细胞分群率显著降低（P<0.01）, 证明补肾解毒方显著抑制肿瘤组织内M2型巨噬细胞激活,且呈剂量依赖性。结论 补肾解毒方通过抑制肿瘤组织中M2型巨噬细胞激活抑制小鼠大肠癌肺转移。     

双参颗粒对肺癌小鼠肿瘤相关巨噬细胞的抑制作用

目的:验证双参颗粒抑制肺癌的有效性并探讨其机制.方法:构建荷Lewis肺癌小鼠模型,分为双参颗粒组、模型对照组,每组10只;构建KrasG12D自发肺癌小鼠模型,分为双参颗粒组、模型对照组,每组10只.分别给予双参颗粒、纯净水灌胃干预.观察荷Lewis肺癌小鼠的移植瘤质量,脾脏T淋巴细胞、肿瘤相关巨噬细胞(TAM)比例...     

中药单体成分调节肿瘤微环境的研究进展

肿瘤微环境是指肿瘤细胞生长、侵袭和转移的特殊内在环境,分为非免疫和免疫微环境,是一个极其复杂的系统.中药单体成分能够通过改善肿瘤微环境来达到抑制肿瘤的目的,包括抑制血管内皮细胞血管生成、抑制分泌血管内皮生长因子信号的转导、阻止肿瘤相关巨噬细胞的募集和极化、调节自然杀伤细胞的增殖、抑制T细胞中吲哚胺2,3-双加氧酶和成纤...     

齐墩果酸抗肺癌作用及其机制研究进展

肺癌是中国及世界范围内发病率和病死率最高的恶性肿瘤之一,临床上主要以手术、放化疗等西医治疗为主,但中位生存期未见明显延长.多数学者认为,中药在肺癌辅助治疗方面具有独特优势.齐墩果酸(OA)作为中药女贞子的有效成分之一,在治疗肺癌方面具有显著效果,作用机制涉及调控肿瘤细胞增殖、凋亡及周期;影响肿瘤新生血管生成及免疫反应;...     

益气助脉方治疗缓慢性心律失常的临床研究

目的:评价益气助脉方治疗缓慢性心律失常的疗效和安全性。方法:采用随机双盲、安慰剂对照的试验方法,120例受试者按照1:2的比例随机分为试验组80例和对照组40例,试验组服用益气助脉方,对照组服用安慰剂,疗程均为4周。结果:试验组疾病疗效为76.92%,对照组为20.59%,试验组疗效优于对照组(P<0.05);试验组临床症状疗效为91.03%,对照组为17.65%,试验组疗效亦优于对照组(P<0.05)。结论:益气助脉方治疗缓慢性心律失常安全有效,是治疗缓慢性心律失常的良药。     

扶正散结方调控Lewis肺癌小鼠TAMs免疫重塑作用的相关研究

目的:探讨扶正散结方对Lewis肺癌小鼠肿瘤相关巨噬细胞有关细胞因子的调控作用。方法:建立Lewis肺癌小鼠模型,称瘤重,算抑瘤率;应用免疫组化法检测各组肿瘤组织中CD68+浸润程度;采用ELISA法测定小鼠血清中IFN-γ,TGF-β,IL-4,IL-13,IL-6,IL-10,IL-12,TNF-α的含量。结果:与荷瘤模型组相比,其他各组均较高,分别为DDP组(50.28%)、中药预防组(34.37%)、中西结合组(66.76%),差异具有统计学意义(P<0.05)。CD68+浸润程度差异不具统计学意义。各组荷瘤小鼠血清中IFN-γ,IL-6,IL-12含量均较空白对照组低,而IL-4,IL-13,TGF-β含量均较空白对照组高,且在不同药物干预下,部分相关细胞因子含量具有显著性差异(P<0.05),中药预防组、中西医结合组与荷瘤对照组差异亦具有统计学意义(P<0.05),而TNF-α,IL-10含量,与荷瘤对照组比较,不具统计学意义。结论:扶正散结方可以通过下调肺癌免疫微环境中IL-4,IL-13,TGF-β等,上调IFN-γ等细胞因子,从而逆转TAMs的免疫重塑作用,控制肿瘤生长。     

益气化瘀方治疗糖尿病周围神经血管病52例临床研究

目的探讨益气化瘀方治疗糖尿病周围神经血管病的临床疗效。方法将100例糖尿病周围神经血管病患者随机分为2组。对照组（48例）采用常规治疗，治疗组（52例）在对照组治疗基础上加用益气化瘀方内服治疗。2组均30日为1个疗程，3个疗程后评定疗效。结果治疗组总有效率92．9％，对照组总有效率61．1％，2组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。治疗后治疗组糖化血红蛋白、三酰甘油、纤维蛋白原、全血粘度较治疗前明显下降（P〈0．01），与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。治疗组胆固醇下降程度与对照组相似，差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗组治疗后胭动脉及足背动脉内径较治疗前增大（P〈0．01），峰值流速较治疗前减慢（P〈0．01），与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论益气化瘀方能改善糖尿病周围神经血管病变的临床症状，其机制可能与改善血液粘度有关。     

补肾益气类方药延缓骨骼肌线粒体功能退化的研究概况

采用文献综述法,分析线粒体结构、膜通透性、氧化损伤、呼吸功能、酶活性及线粒体生物合成与骨骼肌衰老的关系,探讨补肾益气类方药对衰老骨骼肌线粒体结构和功能的影响,为采取合适中药延缓骨骼肌衰老提供理论依据。研究发现随着机体逐渐衰老,骨骼肌线粒体呈现出结构退化、膜通透性改变、氧化损伤、呼吸功能、酶活性及线粒体生物合成能力下降等改变,补肾益气类方药可通过改善衰老骨骼肌线粒体的结构和功能,延缓骨骼肌的衰老,但其深层作用机制及作用途径尚不明晰。在中医药理论体系指导下,结合现代实验技术,多角度、多层次地探明补肾益气类方药在延缓骨骼肌衰退中的作用机制及构效关系,是开发此类方药过程中亟待解决的问题。     

壮药扶正方对TAMs与肿瘤细胞共培养体系A549细胞生物学行为的影响

目的：探讨壮药扶正方含药血清对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)与肺癌A549细胞共培养体系肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭等生物学行为影响及可能的作用机制。方法：采用氟波酯(PMA)联合白细胞介素-4、白细胞介素-13诱导人急性白血病单核细胞株(THP-1)建立TAMs体外模型,实时定量PCR及酶联免疫吸附试验法分析含药血清(低、中、高剂量组)及药物处理后24、48、72 h对TAMs表型调节;采用共培养体系,以肺癌A549细胞为研究对象,分别采用MTT法、实时细胞分析技术(RTCA)、Transwell法检测不同条件下A549细胞增殖、迁移及侵袭情况。结果：壮药扶正方含药血清能显著上调TMAs中M1型标志物白细胞介素-12、诱导型一氧化氮合酶表达水平,下调M2型标志物白细胞介素-10、CD206表达水平;与空白对照组比较,共培养组A549细胞增殖明显增加,细胞迁移及侵袭能力均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与共培养组比较,壮药扶正方含药血清低、中、高剂量组A549细胞增殖、迁移和侵袭作用受抑制,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论：壮药扶正方含药血清在共培养体系中...     

益气活血解毒方联合化疗对晚期胰腺癌患者的影响

[目的]探究益气活血解毒方联合化疗对晚期胰腺癌的临床效果,分析其对患者血清癌胚抗原(CEA)、胰癌胚抗原(POA)、胰腺癌相关抗原(PCAA)、免疫球蛋白以及半乳糖凝集素-9(Gal-9)水平的影响.[方法]选取2015年2月—2017年5月在本院接受治疗的94例晚期胰腺癌患者,将其随机分为观察组与对照组,各47例.对...     

补肾益气方调控Bcl-2和XIAP蛋白对早孕期人滋养层细胞凋亡的拮抗作用

目的:探讨补肾益气方对正常早孕期人滋养层细胞凋亡的调节作用及机制。方法:体外培养正常早孕期人细胞滋养层细胞,分别加入空白对照组、5%含药血清组、10%含药血清组、20%含药血清组,用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪检测含药血清作用24、48、72h后细胞的增殖活性,Caspase-3活性检测试剂盒检测细胞Caspase-3酶活性,Western blot检测Fas、FasL、Bcl-2和XIAP蛋白表达。结果:含药血清培养24、48、72h后,细胞在490nm波长的吸光度值增加(P<0.01);sub-G1期细胞减少(P<0.01),S期细胞增加(P<0.01),G2/M期细胞明显减少(P<0.01),Caspase-3酶活性降低;含药血清对Fas和FasL表达均有上调作用,呈剂量依赖式诱导(P<0.05);Bcl-2蛋白表达水平上升,随着浓度增加,表达量也增加,同时伴随XIAP水平升高(P<0.05)。结论:补肾益气方通过提高凋亡抑制蛋白Bcl-2水平,从而增强XIAP表达,抑制Caspase-3活性,抑制细胞死亡。FasL表达水平的上调有利于母胎免疫耐受的维持。     

扶正减毒方调控Th1/Th2免疫平衡对晚期肺癌免疫治疗的影响及机制研究

目的:基于Th1/Th2失衡探讨扶正减毒方对晚期肺癌免疫治疗的机制.方法:选取符合纳入标准的40例晚期肺癌患者,随机分为两组各20例.对照组予单纯程序性细胞死亡蛋白-1(programmed death-1,PD-1)抑制剂治疗,治疗组在对照组基础上予扶正减毒方治疗;在入组时及第12周检测患者血清Th1、Th2细胞、I...