石棉致癌机理的研究

石棉致癌机理的研究华西医科大学公共卫生学院（６１００４１）杨青（综述）刘学泽詹承烈（审校）１概述石棉纤维在人和动物体内可导致两种肿瘤：间皮瘤和肺癌。接触石棉而引发肿瘤的机理仍在继续研究。石棉纤维可被炎细胞吞噬引起各种炎性介质的释放，介导细胞的生长和分...     

中国地鼠的细胞接触石棉所致染色体的改变

实验证明吸入石棉纤维引起胸膜或腹膜的间皮瘤。一些研究者认为石棉能促使细胞结构发生紊乱,导致染色体异常。本文作者培养中国地鼠的细胞以进一步证实此现象,所用细胞为CHO-K1种。此种细胞适用于观察染色体的改变。在培养细胞的瓶中分别加入温石棉、青石棉、玻璃纤维及玻璃粉。摇动培养瓶并使细胞与粉尘充分混匀。培养48小时后,收集一部分细胞。5天后,再收集余下的细胞,观察其存活率。只有接触石棉粉尘的细胞表现核的改变。当接触时间从48小时增至5天,出现的细胞异常情况并不增多。只看到接触温石棉者细胞带有碎片的趋势增多。如果事先将石棉纤维放在培养基中     

凋亡相关基因FAS-1377和FAS-670及其配体FASL-844位点基因多态性与中国汉族煤工尘肺的关系

目的探讨FAS／FASL基因多态性在煤工尘肺患者发病遗传易感性中的作用及其与煤工尘肺纤维化程度的联系。方法选择340例汉族煤工尘肺为观察对象，312例汉族煤尘接触者为对照组，应用多聚酶链反应-限制片段多态性（PCR—RFLP）技术检测FAS-1377G〉A、FAS-670A〉G位点及FASL-844T〉C位点的基因多态性。结果煤工尘肺组FAS．1377、FAS-670及FASL-844各基因及等位基因分布频率与对照组比较，差异无统计学意义（乃0．05）。以接尘工龄／〉25年为对照，工龄〈25年的煤工尘肺患者FAS-1377GA／AA型者发生尘肺的危险性是GG型的1．463倍（P=0．098，95％CI：0．932～2．298）；FAS-670AG型发生尘肺的危险性是GG型者的1．494倍（P=0．098，95％C／：0．928～2．404）：FASL-844TT型和TC型发生尘肺的危险性分别是CC型的5,455倍（P=0．039，95％CI：1,088-27．358）及1,338倍（P=0．098，95％CI：0．852-2．101）。接尘工龄〈25年FASL-844基因分布频率和工龄≥25年比较，差异有统计学意义（P〈0．05），FASL-844Tr型发生煤工尘肺的危险性是CC／TC型的4．810倍（P=O．054，95％CI：0．971-23．833）；接尘工龄≥25年为对照，工龄〈25年组FASL-844TT／CT＋FAS-1377GA型发生煤工尘肺的危险性是FASL-844CC＋FAS-1377GG型的1．810倍；FASL-844TT／CT＋FAS．670AG型是FASL-844CC＋FAS-670AA型的2．117倍；FASL-8TT／CT＋FAS-1377GA／AA＋FAS-670AG／GG型发生煤工尘肺的危险性是FASL-844CC＋FAS-1377GG＋FAS-670AA型的2．043倍。结论FAS．1377G〉A、FAS-670A〉G及FASL-844T〉C3个位点的基因多态性在中国汉族煤工尘肺发病的遗传易感性中不起主要作用，但这3个多态性位点及位点的联合作用对病变的发展有影响。     

肺活检及支气管镜检查在弥漫性肺疾患和尘肺诊断中的价值

目的：探讨对弥漫性肺疾患和尘肺的较好的诊断方法。方法：通过纤维支气管镜检查,BALF分析及肺活体组织检查,综合分析诊断。结果：纤维支气管镜检查,BALF分析检出尘颗粒、石棉纤维、石棉小体以及在肺活体组织检查中发现石英,氧化铝粉尘颗粒,石棉纤维或石棉小体,肺间质纤维化及肺组织破坏等改变而明确了矽肺,氧化铝尘肺和石棉肺的诊断。结论：在BALF及肺组织中检出病源性粉尘颗粒或石棉小体,肺间质纤维化或矽结节,肺泡结构破坏等改变可确立尘肺或其它弥漫性肺疾患的诊断。     

HIV感染人CD4+T细胞生物学特性的实验研究

目的观察人免疫缺陷病毒（HIV）-1SF33感染后MT4细胞超微结构、细胞周期、细胞内钙离子浓度改变，为寻找艾滋病发病机制提供研究基础。方法以HIV-1SF33实验株感染MT4细胞，72h后用P24试剂盒双抗体夹心法检测HIV抗原表达情况以验证感染是否成功。设正常MT4细胞组与HIV感染MT4细胞组，用倒置显微镜观察细胞形态，透射电镜观察细胞超微结构，激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度，流式细胞仪检测细胞周期。结果染毒成功。染毒组细胞多散在排列，可见多核巨细胞和空泡状细胞形成；胞浆内可见大量大小均一的HIV颗粒堆积，细胞器肿胀，内质网、线粒体扩张，溶酶体体积增大，数量增多，部分细胞融合，胞浆内形成多个空泡；细胞内钙离子含量增高；HIV感染与未感染MT4细胞相比，G2-M-S期细胞比例减少，G0-G1期细胞比例增多。结论HIV感染CD4^＋T细胞后，可直接导致CD4^＋T细胞病变，如细胞肿胀，细胞内钙离子含量增高，细胞增殖减慢。     

实用临床诊疗规范——肾脏内科疾病（四）第四节水、电解质、酸碱平衡紊乱

血清钾〉5．5nmol／L时称为高钾血症。人体内钾98％分布在细胞内，2％分布在细胞外液中。细胞内液的钾主要在肌肉中。细胞内虽然含钾高，但有一部分与蛋白、磷酸盐、糖原等结合，因此细胞内钾并不具有维护晶体渗透压的作用。血清钾的正常值为4．1～5．5mmol／L（16～22mg／dL），是细胞内钾浓度的1／28。     

柠檬酸铝处理后温石棉某些表面性质的改变

柠檬酸铝处理后温石棉某些表面性质的改变吴卫东，刘世杰，尹宏近年来大量研究资料表明，石棉纤维的表面性质在石棉致病过程中发挥重要作用［１］．柠檬酸铝可有效地抑制石英的致病性及细胞毒性，且该效应与柠檬酸铝致石英表面理化性质改变有关。考虑到石棉与石英在表面性...     

人造矿物纤维对肺泡巨噬细胞的毒作用研究

目的比较１０种人造矿物纤维对肺泡巨噬细胞毒作用的差异。方法选用日本纤维状物质研究协会提供的１０种标准人造矿物纤维（ＪＦＭ纤维），在体外用豚鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）作为靶细胞，分别对ＪＦＭ纤维作用于ＡＭ后超氧阴离子自由基（Ｏ－２）、过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）的产生，谷胱甘肽（ＧＳＨ）及细胞内游离Ｃａ２＋浓度的变化进行了测定。结果１０种ＪＦＭ纤维中，大多数都可引起Ｏ－２和Ｈ２Ｏ２的产生增多、ＧＳＨ含量下降及细胞内游离Ｃａ２＋浓度升高，但其作用均低于温石棉。结论ＪＦＭ纤维的一般细胞毒性均低于温石棉。这些人造矿物纤维虽然作为石棉的代用品使用，但对机体仍会产生一定的有害作用。     

青石棉与苯并（a）芘联合气管内染尘大鼠肺SOD的研究

青石棉与苯并（ａ）芘联合气管内染尘大鼠肺ＳＯＤ的研究杨青罗素琼刘学泽詹承烈作者对大鼠气管内注入青石棉与苯并（ａ）芘，动态观察肺组织超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性变化，报告如下。一、材料与方法１．实验用粉尘：选用云南某地青石棉，经本室研制成染尘用纤维粉尘...     

磷脂抑制石棉的溶血作用

Macnab 等通过体外实验证明石棉能引起溶血和巨噬细胞释放乳酸脱氢酶;并指出温石棉能与细胞膜的糖蛋白发生相互作用。本文研究红细胞膜或脂质体处理温石棉纤维之后,使其溶血速率减慢;温石棉与脂质相互作用能显著地改变细胞膜或肺表面活性物质的完整性和稳定性,改变它们的物理特性。作者实验采用 UICC 温石棉和青石棉样品。温石棉纤维长<5μm,青石棉纤维长<4μm。蒸馏水溶解红细胞获得红细胞膜。二棕榈酰卵磷脂或以7:2:1克分子比率的二棕榈酰卵磷     

IARC公布的职业性致肺癌物

肺癌是人类常见的恶性肿瘤，在职业性肿瘤中也属多见。1974～1993年的近20年间由国际癌症研究机构（IARC）公布的职业性致肺癌物有十几种，其中已确认致人类肺癌的化学物有石棉、砷、镍、铬（6价）、镉、钦和氢子体、双氯甲醚及焦炉逸散物等；可疑致人类肺癌物有二氧化硅、柴油机废气和丙烯睛。本文概括总结了上述职业性致肺癌物的动物实验资料和流行病学依据。确认职业性致肺癌物1．石棉石棉分为蛇纹石类（即温石棉）和闪石类（铁石棉、透闪石等）。大鼠吸入实验表明，两类纤维均可引起纤维化、肺癌和间皮瘤，所有类型的石棉纤维都可引起…     

超声雾化石棉纤维悬液致大鼠肺损伤的观察

目的探讨用超声雾化石棉悬液建立大鼠石棉肺模型的可行性。方法选取体重在180-200 g的雄性健康SD大鼠40只,随机分为正常对照组5只和实验组35只（实验组分为7个亚组,分别为1、3天和1、2、4、8、10周亚组,每亚组5只）。将石棉纤维制成石棉纤维悬液,超声雾化让动物吸入,每天雾化吸入2 h,每周吸入7 d,最长染尘10周。以肺组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、组织羟脯氨酸（Hyp）、肺脏指数、肺组织病理改变为观察指标。结果实验组肺脏指数实验初2周内较正常对照组高,而2周以后体重变化增长较正常对照组慢;MDA与SOD变化规律相似,均为先增高后减低,MDA 2周达峰值,而SOD 1周达峰值;Hyp于1周以后逐渐升高。肺组织早期以充血为主,中后期则以慢性炎症为主,随时间延长,纤维化逐渐加重,纤维化呈弥散性,但以血管周围及细支气管周围最为严重。结论采用超声雾化染尘方法可以方便地建立大鼠石棉肺模型。     

细胞表面分子在间充质干细胞对T细胞调节机制中的作用

目的探索细胞表面免疫分子在间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSC）对T细胞的免疫调节机制中的作用。方法分离、培养和鉴定MSC和T细胞；电镜观察MSC和T细胞共同培养时的相互作用；检测MSC对T细胞表面分子CD54，程序性死亡受体（programmed cell death ligand，PDL）-1，组织相容性复合物（major histocompatibility complex，MHC）-I，MHC—II表达的影响。结果MSC与T细胞共培养时，大量MSC和T细胞连接在一起：T细胞表面分子的表达率：离体实验一买验组：CD54：（66．0±1．3）％；PDL-1：（61．0±19）％，MHC－I：（23．4±3．4）％，MHC－II：（27．5±1．2）％；对照组：CD54：（52．1±2．0）％，PDL-1：（42．1±2．0）％，MHC－I：（19．5±3．0）％，MHC－II：（9．2±0．8）％；在体实验一实验组：CD54：（59．0±2．6）％；PDL－l：（57．4±2．4）％；MHC－I：（22．6±2．7）％；MHC-II：（22．4±2．0）％；对照组：CD54：（51．5±1．0）％，PDL-1：（50．0±3．3）％，MHC－I：（18．1±1．5）％，MHC－II：（9．7±0．6）％。结论MSC与T细胞相互接触后促进T细胞表达CD54，PDL-1，MHc－I，MHC－II，这可能在MSC对T细胞免疫调节作用中发挥重要作用。     

1，2－二氯乙烷对大鼠神经细胞内钙离子浓度的影响

[目的]用体外实验方法研究1,2-二氯乙烷（1,2-DCE）染毒后大鼠神经细胞内钙离子（Ca^2＋）浓度的变化。[方法]体外培养新生SD大乳鼠脑皮质细胞,分别用0．5、1．0、2．0mL/L1,2-DCE染毒,另设对照组,观察各组神经细胞形态学变化。同时应用激光共聚焦显微镜测定各组细胞内Ca^2＋浓度,探讨1,2-DCE对大鼠神经细胞内Ca^2＋浓度的影响。[结果]神经细胞染毒后,神经细胞形态发生明显改变：胞体肿胀崩解、胞核模糊不清、突触变短变粗、细胞间连接减少、细胞膜不完整;随着染毒剂量的增高,神经细胞损伤的严重程度呈上升趋势。各染毒组神经细胞活力较对照组有所下降,差异有统计学意义（P〈0．01）;染毒2h后随着染毒剂量的增加,各组神经细胞内Ca^2＋浓度呈上升趋势,各染毒组细胞与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）;染毒24h后,低、中剂量组与对照组细胞内Ca^2＋浓度比较差异有统计学意义（P〈0．01）,高剂量组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。[结论]1,2-DCE可以导致神经细胞水肿坏死,有剂量依赖关系,神经细胞内Ca^2＋浓度亦见升高,提示Ca^2＋可能与1,2-DCE致神经细胞中毒性脑水肿有关。     

尘肺患者生存年限的COX比例风险模型分析

目的探讨影响尘肺病患者生存年限的因素。方法以尘肺患者的死亡风险函数为应变量，生存年限为暴露时间变量，发病工龄、工种、是否并发肺结核、Ⅱ期晋升为Ⅲ期的年限及尘肺种类为方程自变量，运用STATA统计分析软件进行尘肺病例生存年限的COX比例风险模型分析。结果COX比例风险模型方程为：λ（t）=λ0（ε）exp（-0．0249×fb＋0．0344×gz＋0．2059×tb-0．0215×nx2—0．0280×cf），矽肺相对于煤工尘肺的COX比例风险模型方程为：λ（t）=λ0（t）exp（0．5289×cf）。由COX模型方程可得出各自变量的相对危险度（RR）值分别为1．025、1．035、1．229、1．022、1．697，提示，发病工龄对患者死亡的影响呈递减的形式，发病工龄每减少1年，尘肺病例在某时刻死亡的RR增加1．025倍；井下采矿工尘肺病例在某时刻死亡的RR值是非井下采矿工尘肺病例的1．035倍；尘肺并发肺结核在某时刻死亡的RR值是单纯尘肺的1．229倍；Ⅱ期尘肺晋升为Ⅲ期的年限每减少1年，尘肺病例在某时刻死亡的RR值增加1．022倍；矽肺病例在某时刻死亡的RR值是煤工尘肺的1．697倍。结论影响尘肺病例生存年限的因素有发病工龄、工种、是否并发肺结核、Ⅱ期尘肺晋升为Ⅲ期的年限及尘肺种类。     

石棉致肺损伤的细胞和分子机制

石棉不仅能导致肺纤维化，也能致胸膜间皮瘤和肺癌。由于目前尚无合适的代用品，所以全世界石棉及其产品的用量仍相当可观。为预防和减少石棉危害，寻找有效防治途径，近几年来，国外不少学者在石棉致病机制方面进行了深入的研究。本文就这方面的进展作一概述。1．石棉对肺巨噬细胞的作用肺巨噬细胞有气道巨噬细胞、肺泡巨噬细胞（AM）、间质巨噬细胞（IM）、血管外巨噬细胞和胸膜巨噬细胞，它们都是肺防御外源性因子致肺损伤的重要细胞[1]。研究认为[2,3]，石棉纤维的机械刺激作用及表面电荷能影响股通透性，致细胞死亡。石棉对巨噬细胞…     

国产石棉致癌作用与间皮瘤阻断效果的实验研究

1．不同产地温石棉诱发火鼠胸膜间皮瘤的实验研究本实验目的在于探讨我国不同产地温石棉的致癌作用，比较其致癌强度大小，为进一步研究石棉的致癌机理和预防对策提供实验依据。选用金州、来源、芒岩、川矿和新帝五大产区温石棉，与UICC加拿人“A”温石棉比较，用能谱(EDXA)分析了我国温石棉的化学元素构成，并用相差显微镜测定了石棉纤维的长径和直径分散度。实验结果表明，我国五大产区温。     

锌对HL-60细胞凋亡及p53等基因表达影响

目的研究微量元素锌在体外对HL-60细胞凋亡的作用机制。方法HL-60细胞常规培养24h，分为对照组、四吡啶甲基乙二胺N，N，N＇，N＇-tetrakis（2-pyridylmethyl）ethylenediamine（TPEN）处理组、TPEN＋ZnSO4组。以细胞形态学改变、流式细胞仪和DNA凝胶电泳分析为凋亡观察指标，并用mRNA狭缝杂交和Western-blot测定细胞凋亡相关基因的改变。结果细胞内Zn^2＋减少可诱导人髓性细胞白血病细胞系HL-60凋亡，引起bcl-2、c-myc mRNA及蛋白的表达降低，补充ZnSO4（终浓度为20μmol／L）可改善上述现象。结论细胞内Zn^2＋减少诱导HL-60细胞凋亡过程与细胞内下调bcl-2、c-mvc基因的表达有关。     

纤维水镁石与经铝剂处理的温石棉对巨噬细胞毒性比较

应用体外试验，比较了水镁石与经氯化铝处理后的两种温石棉（新康温石棉和四川温石棉）对豚鼠肺泡巨噬细胞的毒性作用。结果显示，经氯化铝处理后的温石棉所引起巨噬细胞产生的Ｏ２＾－、细胞膜脂流动性增加及细胞钾外漏等毒性指标变化，明显低于相同剂量的水镁石组（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）；引起肺泡巨噬细胞释放乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶及致细胞死亡率等指标变化与水镁石组相近似。表明氯化铝拮抗温石棉的致病生物学活性有实     

1，25-二羟基维生素D3对K562细胞周期及凋亡的影响

目的观察1，25-二羟基维生素D3[1，25（OH）2D3]对白血病细胞株K562细胞周期及细胞凋亡的作用。方法Western印迹检测维生素D受体（VDR）在K562细胞的表达；四噻唑蓝法（MTT）、AO／EB、流式细胞仪分析细胞生长抑制率、细胞凋亡率及细胞周期。结果（1）K562细胞核阳性表达VDR；（2）0-10^-6mol／L浓度的1，25（OH）2D3呈浓度依赖性抑制K562细胞增殖，10^-8mol／L 1，25（OH）2D3明显抑制K562细胞增殖，促进凋亡，细胞周期阻滞主要发生在G2期或M早期，凋亡率从4．1％（对照组）增至26．5％（P〈0．01）。结论1，25（OH）2D3可明显抑制K562细胞增殖，促进细胞凋亡。