柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞环氧化酶2mRNA及蛋白表达水平的影响

目的：研究中药柚皮苷对人卵巢癌SK—OV3细胞环氧化酶2（CoX-2）tuRNA及蛋白表达水平的影响。方法：常规培养人卵巢癌sK—OV3细胞,分为空白对照组、柚皮苷10umol／L组、柚皮苷20tzmol／L组、柚皮苷40umol／L组、阳性对照组（塞来昔布80tLmol／L）。MTT法测定柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响,运用Real—timePCR和WesternBlot法测定培养48h后各组细胞中COX_2mRNA和蛋白表达水平的变化。结果：MTT检测法显示,柚皮苷各浓度处理组,时间依赖性和剂量依赖性地抑制人卵巢癌SKOV3细胞生长。经药物处理48h后,Real-timePCR结果显示,与空白对照组（1．094±0．053）比较,10、20umol／L柚皮苷即对SK—OV3细胞COX_2mRNA表达抑制作用（O．828±0．006,0．753±0．011,P〈0．05）,而40gmol／L柚皮苷则明显下调COX-2mRNA的表达（0．412±0．216,P〈0．01）,与塞来昔布组（0．321±0．017）的抑制程度相近。WesternBlot法检测结果显示,与空白对照组（1．7325±0．0826）相比,10umol／L柚皮苷组相对表达量（1．7925±0．0880）虽略有上调,但无统计学差异,20、40／umol／L柚皮苷组均可明显下调SKOV3细胞COX-2蛋白的表达（1．2225±0．0822,1．2725±0．0763,P〈0．05）,塞来昔布组也明显抑制CoX-2蛋白的表达。结论：柚皮苷可抑制人卵巢癌SKOV3细胞体外增殖并抑制COX-2mRNA和蛋白的表达。     

黄芩素对胰腺癌细胞的生长抑制和促凋亡作用

目的 研究黄芩素对胰腺癌细胞的生长抑制及诱导凋亡作用.方法 用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察黄芩素及塞来昔布对胰腺癌细胞株SW1990增殖的影响;用流式细胞术法观察药物处理后细胞凋亡和细胞周期的变化;应用免疫组织化学法观察细胞株经药物处理后Bax及Bcl-2蛋白表达情况.结果 50、100、200、400μmol/L塞来昔布作用24 h后对胰腺癌细胞的杀伤率分别为24.6%、37.2%、59.8%、72.6%,48 h后分别为15.8%、34.0%、75.1%、81.9%.5、10、20、40 μmol/L.黄芩素作用24 h后对胰腺癌细胞的杀伤率分别为11.9%、21.2%、33.1%、51.6%,48 h后分别为16.0%、28.0%、38.6%、55.2%.随着干预药物浓度的升高,2种药物对胰腺癌细胞的杀伤率亦逐渐升高,且差异有统计学意义(P<0.05).20 μmol/L黄芩素作用于SW1990细胞24 h时出现凋亡峰,凋亡细胞占3.6%,48 h时凋亡细胞占4.3%;100 μmol/L塞来昔布组是48 h后出现凋亡峰,凋亡细胞占8.5%;空白对照组未见凋亡峰.100 μmol/L塞来昔布组48 h时的凋亡率高于20 μmol/L黄芩素组(P<0.05).20μmol/L黄芩素组24、48 h对SW1990细胞周期的阻滞率均高于100μmol/L塞来昔布组[72.3%比57.0%,74.2%比66.1%,均P<0.05].20μmoL/L黄芩素组和100μmol/L塞来昔布组Bax蛋白表达分别为+++、++,较空白对照组(+)均有所上调,但塞来昔布组弱于黄芩素.20 μmol/L.黄芩素组和100 μmol/L塞来昔布组Bcl-2蛋白表达分别为+、++,较空白对照组(+++)均减少20 μmol/L黄芩素组较100 μmoL/L塞来昔布组亦减少.结论 黄芩素可抑制胰腺癌细胞增殖,促进胰腺癌细胞凋亡并能将胰腺癌细胞周期阻滞于G1期.黄芩素诱导胰腺癌细胞凋亡可能是通过上调促凋亡蛋白和下调抑制凋亡蛋白实现的.     

柚皮苷通过P38 MAPK/NF-κB通路抑制脂多糖致HaCaT细胞炎症反应

目的 探讨柚皮苷通过P38 MAPK/NF-κB通路对脂多糖（LPS）致HaCaT细胞炎症损伤的抑制作用。方法 LPS（0、0.1、1.0、10.0、20.0 μg/mL）孵育24 h刺激人永生化角质细胞HaCaT,模拟银屑病模型,MTT法观察细胞存活率变化,Western bloting法检测白介素（IL）-6和NF-κB蛋白表达;MTT法观察柚皮苷（0、5、10、20、40、80、160、320μmol/L）作用24 h对HaCaT存活率的影响;选择LPS、柚皮苷最佳作用浓度。柚皮苷（20和40 μmol/L）作用银屑病模型HaCaT细胞24 h,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测IL-6、IL-1β、IL-17和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的mRNA表达水平变化;Western blotting法检测细胞核内转录因子NF-κB p65、P38 MAPK磷酸化蛋白水平以及炎症因子IL-6蛋白水平。结果 LPS增加HaCaT细胞存活率,并上调NF-κB p65和IL-6蛋白表达,呈剂量相关性,炎症反应在20 μg/mL达到高峰;5~160 μmol/L柚皮苷对HaCaT细胞无明显毒性作用。与模型组比较,柚皮苷能够显著抑制炎症因子IL-6、IL-1β、IL-17和TNF-α的转录水平（P<0.05）;同时能够显著抑制LPS诱导的NF-κB p65和P38 MAPK磷酸化蛋白水平、抑制IL-6蛋白的表达（P<0.05）。结论 柚皮苷抑制脂多糖致HaCaT细胞炎症反应,发挥改善银屑病的作用,机制可能与抑制P38 MAPK/NF-κB信号通路有关。     

下调TMEM97对卵巢癌细胞SKOV3增殖、凋亡的影响及其相关机制探讨

目的　观察下调跨膜蛋白97（TMEM97）对卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响,并探讨其相关机制。方法　将卵巢癌细胞SKOV3分为转染组（si-TMEM97组）、阴性对照组（siNC组）和空白对照组（Control组）。采用实时荧光定量PCR（qPCR）及Western blot法分别在mRNA和蛋白表达水平评估转染siRNA-TMEM97后TMEM97的沉默效果;分别在转染后采用CCK-8法、PI染色法、Annexin V-FITC/PI染色法和流式细胞术检测下调TMEM97对细胞的增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响,并检测B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白质（Bax）及P38丝裂原活化蛋白激酶（P38 MAPK）通路相关蛋白（P38/MAPK、p-P38/MAPK）的表达变化。结果　si-TMEM97组细胞的增殖能力相比Control组和siNC组降低,而早期凋亡率增高（均P＜0.01）。si-TMEM97组细胞Bcl-2的蛋白相对表达量较Control组和siNC组降低,而Bax、p-P38/MAPK的蛋白相对表达量较Control组和siNC组增高（均P＜0.05）。结论　下调TMEM97的表达使卵巢癌细胞SKOV3增殖减少,凋亡增加,这可能与调节凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达及P38/MAPK信号通路的激活有关。     

lncRNA HOST2通过PI3K/Akt途径调控卵巢癌SKOV3 细胞对顺铂的敏感性

摘要：目的 探讨下调长链非编码RNA（lncRNA）上皮性卵巢癌转录因子2（HOST2）表达对人卵巢癌SKOV3细 胞顺铂敏感性的影响及其作用机制。方法 体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,取对数生长期细胞分为空白对照组、阴 性对照组和siRNA干扰组,其中阴性对照组和siRNA干扰组SKOV3细胞应用Lipofectamine 2000分别转染阴性对照 siRNA 和 lncRNA HOST2-siRNA,空白对照组未进行转染。采用 qPCR 法检测各组细胞 lncRNA HOST2 的表达; Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶（Akt）信号通路相关蛋白Akt、p-Akt （S473）、pAkt（S380）及Bcl-2的表达;CCK-8法检测经不同浓度（0、20、40、60、80、100 μmol/L）顺铂作用后细胞的存活情况,并计算半抑制浓度（IC50）;流式细胞术检测经20 μmol/L顺铂作用后的细胞凋亡率。结果 与空白对照组和阴性对照组 比较,siRNA 干扰组细胞 lncRNA HOST2 表达及 p-Akt（S473）、p-Akt（S380）和 Bcl-2 蛋白表达水平均降低（均 P＜ 0.05）;3组Akt蛋白表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）。空白对照组、阴性对照组和siRNA干扰组细胞存活率均 随顺铂药物浓度的增加而降低,IC50分别为（59.58±5.97）、（51.42±5.22）和（39.75±5.31）μmol/L。siRNA干扰组细胞凋 亡率（12.42%±1.46%）明显高于空白对照组（7.53%±1.25%）和阴性对照组（8.16%±1.31%）。结论 下调 lncRNA HOST2表达可增强人卵巢癌SKOV3细胞对顺铂的敏感性,其机制与抑制PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达有关     

丝裂霉素联合塞来昔布对膀胱癌T24细胞增殖的影响研究

目的:研究体外丝裂霉素(MMC)联合塞来昔布对浅表性膀胱癌T24细胞增殖的影响及其可能机制。方法:体外培养浅表性膀胱癌T24细胞,分为MMC[0(对照组)、2、5、10、25、50μmol/L]组及其与塞来昔布(50μmol/L)混合组,每个浓度5个复孔,采用MTT法检测作用24h后细胞的增殖抑制率。采用免疫组化法、实时定量聚合酶链式反应法、酶联免疫吸附测定法检测对照组、MMC(50μmol/L)组和混合[塞来昔布+MMC(50μmol/L)]组作用48h细胞中Bcl-2蛋白、作用24h细胞血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达及作用96h内VEGF蛋白浓度。结果:MMC能明显抑制细胞增殖(P<0.05),且呈浓度依赖性;塞来昔布能明显增强MMC对细胞的增殖抑制作用(P<0.05);与对照组比较,MMC组和塞来昔布+MMC组细胞中Bcl-2蛋白、VEGF mRNA表达均明显降低(P<0.05),且后2组组间比较有统计学差异(P<0.05);塞来昔布+MMC组细胞中VEGF蛋白浓度随作用时间延长明显降低(P<0.01)。结论:塞来昔布可协同增强MMC抑制T24细胞增殖的作用,其机制可能与降低Bcl-2、VEGFmRNA表达水平和抑制细胞分泌VEGF蛋白作用有关。     

重楼皂苷 Ⅶ通过 p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路对肝癌细胞恶性生物学行为的影响

目的观察重楼皂苷 Ⅶ对肝癌细胞恶性生物学行为的影响,并探讨相关机制。方法于 2021年 6月至 2022年 6月,对数期人肝癌 HepG2细胞,分为对照组(常规培养)、重楼皂苷 Ⅶ组(重楼皂苷 Ⅶ 0.8 μmol/L)、SB203580［p38丝裂原活化蛋白激取酶( p38 MAPK)信号通路抑制剂］组( SB203580 10 μmol/L)、联合组(重楼皂苷 Ⅶ 0.8 μmol/L、SB203580 10 μmol/L)。噻唑蓝法检测细胞增殖能力;膜联蛋白 Ⅴ(Annexin Ⅴ)/碘化丙啶( PI)双染法检测细胞凋亡率;划痕实验检测细胞迁移能力;小室实验检测细胞侵袭能力;蛋白质印迹法检测细胞 p38 MAPK、磷酸化 p38丝裂原活化蛋白激酶( p-p38 MAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2、磷酸化细胞外信号调节激酶( p-ERK1/2)蛋白表达。结果与对照组 24、48、72 h吸光度值,迁移率( 74.33±9.37)%,凋亡率( 3.25±0.78)%,p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2及侵袭细胞数( 364.92±47.99)个比较,重楼皂苷 Ⅶ组 24、48、 72 h吸光度值,迁移率( 11.21±3.35)%降低,凋亡率( 39.87±8.94)%,p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2升高,侵袭细胞数( 54.84±7.41)个减少( P<0.05); SB203580组 24、48、72 h吸光度值,迁移率( 89.30±14.56)%升高,凋亡率( 1.05±0.15)%,p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2降低,侵袭细胞数( 617.04±75.34)个增加( P<0.05)。与重楼皂苷 Ⅶ组比较,联合组 24、48、 72 h吸光度值,迁移率( 40.52±8.18)%升高,凋亡率( 11.30±2.80)%,p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2降低,侵袭细胞数( 141.36±16.75)个增加( P<0.05);与 SB203580组比较,联合组 24、48、72 h吸光度值、迁移率降低,凋亡率、 p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2升高,侵袭细胞数减少( P<0.05)。结论重楼皂苷 Ⅶ可抑制肝癌 HepG2细胞增殖、迁移及侵袭等恶性生物学行为,并诱导其凋亡,作用机制可能与激活 p38 MAPK信号通路相关。     

塞来昔布对人骨肉瘤细胞株HOS-8603 P53表达的影响

目的:研究塞来昔布(Celecoxib)对人骨肉瘤细胞株HOS-8603 P53表达的影响,探讨其抗肿瘤作用机制。方法将培养HOS-8603细胞分为两组实验组(分别以20μmol/L和40μmol/L不同浓度塞来昔布处理)和对照组,采用RT-PCR检测各组的P53 mRNA表达。结果:20μmol/L塞来昔布组P53 mRNA的表达与对照组相比无差异(P>0.05);40μmol/L塞来昔布组P53mRNA表达与对照组相比有显著差异(P<0.05)。结论:塞来昔布可能通过促进人骨肉瘤细胞株HOS-8603 P53的表达发挥抗肿瘤作用。     

塞来昔布对结肠癌HT-29细胞生长及骨桥蛋白表达的影响

目的 观察塞来昔布对结肠癌HT-29细胞的生长、凋亡和骨桥蛋白(OPN)表达的影响.方法 体外培养结肠癌HT-29细胞分为对照组和不同浓度塞来昔布干预组.MTT法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞术分析细胞的凋亡,RT-PCR和免疫组化分析细胞中的OPN mRNA与OPN蛋白表达变化.结果 塞来昔布对HT-29细胞增殖有明显的时间与浓度依赖性抑制作用(P＜0.01).塞来昔布能诱导HT-29细胞凋亡,塞来昔布15、30和50μmol/L的细胞凋亡率分别为28.2％、32.8％和33.1％,均明显高于对照组的26.0％ (P＜0.05).药物干预组OPN mRNA及OPN蛋白表达明显低于对照组(P＜0.01).结论 塞来昔布可能通过抑制OPN表达而抑制结肠癌HT-29细胞的增殖,诱导其凋亡.     

野黄芩苷对血管紧张素Ⅱ诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞的增殖及ERK1/2、p38 MAPK信号通路的影响

目的:研究野黄芩苷对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞(CFs)的增殖及细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的影响。方法:体外分离培养新生大鼠CFs,将细胞分为空白组(空白培养基)、AngⅡ组(10~(-7)μmol/L)、50μmol/L野黄芩苷组和AngⅡ(10~(-7)μmol/L)+5、10、20、50μmol/L野黄芩苷组,培养48 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖能力。另取细胞分为空白组(空白培养基)、AngⅡ组(10~(-7)μmol/L)和AngⅡ(10~(-7)μmol/L)+5、10、20、50μmol/L野黄芩苷组,培养48 h后,检测细胞中Ⅰ型胶原(ColⅠ)、ColⅢ、α-平滑肌肌蛋白(α-SMA)m RNA表达和细胞培养液中羟脯氨酸(HYP)含量,以及细胞中ERK1/2、p38 MAPK磷酸化水平。结果:5、10、20、50μmol/L的野黄芩苷均能显著抑制AngⅡ诱导的CFs的增殖(P<0.05),显著下调AngⅡ刺激的CFs中ColⅠ、ColⅢ和α-SMA m RNA的表达(P<0.05),显著抑制AngⅡ刺激后细胞培养液中HYP含量的增加和细胞中ERK1/2、p38 MAPK的磷酸化(P<0.05),且具有一定的浓度依赖性。结论:野黄芩苷对AngⅡ诱导的CFs的增殖具有一定的抑制作用,其机制可能与抑制ERK1/2、p38 MAPK的磷酸化有关。     

姜黄素固体脂质纳米粒单用或与顺铂联用对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用研究

目的:研究姜黄素固体脂质纳米粒(Cur-SLN)单用或与顺铂(DDP)联用对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用。方法:单用试验,分组为空白对照组、Cur组、Cur-SLN组(均以Cur计,终浓度为10、20、40、60、80μmo·lL-1);联用试验,分组为空白对照组、DDP组、DDP+Cur组及DDP+Cur-SLN组,各组DDP终浓度为1、2、3、4、5μmo·lL-1,Cur终浓度均为10μmo·lL-1,检测上述各组分别对SKOV3细胞作用24、48、72h后细胞的生长抑制率。另设立空白对照组、DDP组、Cur组、Cur-SLN组、DDP+Cur组及DDP+Cur-SLN组(DDP终浓度均为2.5μmo·lL-1,Cur终浓度均为10μmo·lL-1),检测各组对SKOV3细胞作用24h后细胞凋亡率及细胞周期调控因子Cyclin E、CDK2的表达。结果:相同浓度下,与Cur组比较,Cur-SLN组作用不同时间后细胞生长抑制率均明显升高(P<0.05);与DDP组比较,DDP+Cur组和DDP+Cur-SLN组细胞生长抑制率均明显升高(P<0.05),且DDP+Cur-SLN组明显高于DDP+Cur组(P<0.05);与空白对照组比较,5个药物组细胞阻滞主要发生在G2期,细胞凋亡率和Cyclin E、CDK2表达均明显升高(P<0.05或P<0.01),且DDP+Cur-SLN组明显高于其他组(P<0.05)。结论:Cur-SLN对人卵巢癌SKOV3细胞有明显的生长抑制及促凋亡作用,且与DDP联用有协同效果。     

柚皮苷对糖尿病心肌病大鼠心肌组织核因子KB炎症信号通路的影响

目的探讨柚皮苷对糖尿病心肌病大鼠心肌组织核因子KB（NF—KB）炎症信号通路的影响,初步阐明柚皮苷对糖尿病心肌病的防护作用机制。方法高脂高糖喂养和-次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病心肌病大鼠模型,完全随机分为模型对照组（糖尿病心肌病组,9只）、柚皮苷治疗组（9只）和正常对照组（10只）。糖尿病大鼠模型成功后,柚皮苷治疗组予Naringin粉末40mg／kg灌胃,正常对照组和糖尿病心肌病组则按体重予蒸馏水灌胃。通过免疫组织化学法测定心肌组织NF—KB蛋白的表达,放射免疫分析法分别检测外周血肿瘤坏死因子仪（TNF-a）、白细胞介素6（IL-6）、IL-1p含量,透射电镜观察心肌组织超微结构。结果与正常对照组比较,糖尿病心肌病组大鼠心肌组织NF—KB蛋白的阳性平均光密度以及外周血TNF-a、IL-6、IL-1p分泌明显增加（均P〈0．05）,柚皮苷治疗后,NF—KB蛋白、TNF-a、IL-6和IL．1B水平明显下降[（0．162±0．013）μg／L比（0．222±0．018）μg／L,（1．35±1．02）μg／L比（1．98±1．37）μg／L,（15．8±14．6）μg／L比（35．8±21．1）μg／L,（0．14±0．15）μg／L比（0．27±0．23）μg／L,均P〈0．05]。与正常对照组比较,糖尿病心肌病组大鼠心肌超微结构损伤明显;柚皮苷治疗组心肌超微结构损伤减轻。结论柚皮苷可减轻糖尿病心肌病心肌的损伤,其机制可能与其抑制糖尿病心肌病大鼠心肌组织的NF—KB信号炎症通路有关。     

硼替佐米对人卵巢癌耐顺铂细胞株的生长抑制作用

目的探讨硼替佐米对人卵巢癌耐顺铂细胞株（SKOV3／DDP）的逆转作用及其可能机制。方法体外培养人卵巢癌细胞株（SKOV3）和SKOV3／DDP,空白对照组加RPMI-1640完全培养基;硼替佐米组浓度分别为0．0625、0．1250、0．2500、0．5000、1．0000、2．0000μmol／L,检测不同作用时间对SKOV3／DDP的生长抑制情况;采用流式细胞术检测0．5000μmol／L硼替佐米作用后细胞周期及凋亡率的变化。结果①硼替佐米对SKOV3／DDP细胞生长抑制情况：0．0625、0．1250、0．2500、0．5000、1．0000、2．0000μmol／L的硼替佐米作用SKOV3／DDP细胞24h的生长抑制率依次为（1．19±0．07）％、（2．24±0．08）％、（3．47±0．20）％、（4．61±0．07）％、（5．80±0．17）％、（6．43±0．10）％;作用48h的生长抑制率依次为（9．39±0．08）％、（12．17±0．23）％、（18．08±0．25）％、（41．11±0．10）％、（55．45±0．41）％、（64．91±0．18）％;作用72h的生长抑制率依次为（13．21±0．32）％、（20．18±0．23）％、（22．91±0．35）％、（52．08±0．10）％、（76．59±0．39）％、（83．23±0．38）％。空白对照组抑制率为0,各实验组与空白对照组之间两两比较,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。②细胞周期及凋亡率的变化情况：0．5000μmol／L硼替佐米作用SKOV3／DDP细胞48h,细胞周期G2／M期的比例为22．8％,空白对照组为10．1％,差异有统计学意义（P〈0．05）;凋亡率分别为11．7％和2．2％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论硼替佐米能够逆转SKOV3／DDP细胞的耐药作用;并将SKOV3／DDP的细胞周期阻滞于Gz／M期。     

氟伐他汀对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞CTGF mRNA的影响及其作用机制的研究

目的探讨高糖状态下肾小球系膜细胞中结缔组织生长因子（CTGF）mRNA的表达以及HMG-CoA还原酶抑制剂氟伐他汀对其的影响及作用机制。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,实验分为4组：低糖组（LG组,5.5 mmol/L葡萄糖）;低糖＋甘露醇组（LG＋M组,5.5 mmol/L葡萄糖＋24.5 mmol/L甘露醇）;高糖组（HG组,30 mmol/L葡萄糖）;高糖＋氟伐他汀组（HG＋Flu组,30 mmol/L葡萄糖＋10μmol/L氟伐他汀）。采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测CTGF和纤维粘连蛋白（FN）mRNA的表达,Western印迹检测磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 MAPK）及其下游因子cAMP反应元件结合蛋白1（p-CREB1）。结果与LG＋M组相比,HG组系膜细胞增殖明显,p-p38 MAPK、p-CREB1表达明显上调,CTGF和FN mRNA的表达增加。与HG组比较,HG＋Flu组可抑制系膜细胞增殖,p-p38 MAPK、p-CREB1的表达明显下调,CTGF和FN mRNA的表达降低。结论高糖状态下肾小球系膜细胞CTGF mRNA表达增强,p-p38 MAPK和p-CREB1表达明显升高,氟伐他汀抑制肾小球系膜细胞CTGF mRNA和细胞外基质的分泌可能部分是通过影响p38 MAPK及其下游核因子CREB1的激活而实现。     

人参皂苷Rh2与P13K/AKT信号通路抑制剂LY294002对乳腺癌细胞转移和侵袭的影响

目的：研究人参皂苷Rh2（GensenosideRh。）与磷脂酰肌醇-3-激酶／丝苏氨酸蛋白激酶（P13K／AKT）信号通路抑制剂LY294002对乳腺癌细胞转移和侵袭的影响。方法：试验分为对照（空白培养液）组、人参皂苷Rh2（80μmol／L）组、LY294002（50gmol／L）组与人参皂苷Rh2（80gmol／L）＋LY294002（50gmol／L）组。人参皂苷Rh：与LY294002体外作用于人乳腺癌细胞MCF7／Adr,Westernblot法检测细胞基质金属蛋白酶（MMP）2、P-糖蛋白（P-gP）、丝苏氨酸蛋白激酶（AKT）、磷酸化丝苏氨酸蛋白激酶（p-AKT）蛋白表达;黏附试验观察细胞与基底膜的黏附力,Transwell法观察细胞侵袭能力和迁移能力。结果：与对照纽比较,人参皂苷Rh2组、LY294002组与人参皂苷Rh2＋LY294002组p—AKT、P—gP、MMP．2蛋白表达显著减弱,细胞与基底膜的黏附力、细胞迁移能力与侵袭能力显著减弱（P〈0．05）;人参皂苷Rh2＋LY294002组与人参皂苷Rh2组、LY294002组比较以上指标差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：抑制P13K／AKT信号通路可有效降低MCF7／Adr侵袭迁移能力,P13K／AKT通路是调控乳腺癌侵袭迁移的重要信号通路之一。     

苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞MAPK/ERK信号通路的影响

目的探讨苦参碱对人横纹肌肉瘤（RMS）RD细胞ERK通路的影响。方法取对数生长期的细胞,随机分为对照组（含细胞无药物）及3个药物干预组（分别为U0126 10μmol组、苦参碱1.0 mg/mL组和U0126 10μmol与苦参碱1.0 mg/mL共同作用组）。蛋白质印迹法（Western blotting）检测p44/p42MAPK（ERK1/2）及Phospho-p44/p42MAPK（p-ERK1/2）的表达;反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测erk m RNA的表达。最后采用SPSS 16.0统计软件进行单因素方差分析。结果 Western blotting法检测ERK1/2、p-ERK1/2的表达,对照组（U0126 10μmol组,苦参碱1.0 mg/mL组及U0126 10μmol与苦参碱1.0 mg/mL共同作用组）的灰度值分别为：2.84±0.03、2.64±0.03、2.14±0.01、2.10±0.02及1.76±0.15、1.37±0.19、1.21±0.24、1.19±0.22。与对照组比较,苦参碱1.0 mg/mL组及苦参碱与U0126共同作用组对ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达量明显降低,差异均有统计学意义（P〈0.01）;RT-PCR方法检测erk m RNA的表达,对照组（U0126 10μmol组,苦参碱1.0 mg/mL组及U0126 10μmol与苦参碱1.0 mg/mL共同作用组）的灰度比值分别为0.59±0.04、0.57±0.04、0.25±0.02和0.18±0.01,苦参碱1.0 mg/mL组及苦参碱与U0126共同作用组erk m RNA的表达量较对照组明显降低,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论苦参碱在体外环境下作用RMS-RD细胞,可抑制erk m RNA的表达及ERK1/2蛋白磷酸化的活性。     

辛二酰苯胺异羟肟酸对人卵巢癌细胞恶性表型的抑制作用

目的 探讨辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)对人卵巢癌细胞恶性表型的作用及其可能的分子作用机制。方法 （1）选取 2 组人卵巢癌细胞(SKOV3 和 SKOV3/DDP; HO8910 和 HO8910-PM)后, 设置对照组和终浓度为 1、 3、 5 及 7 μmol/L SAHA 组(SAHA 1~4 组), 采用 CCK-8 法分别检测 SAHA 对细胞增殖的影响。（2） 设置对照组和 SAHA 1、 2 组(2 和 5 μmol/L), Annexin V-FITC/PI 双标记流式细胞术分别检测 SAHA 对细胞凋亡及周期的影响。（3） RT-PCR 和 Western blot 检测 SAHA 1~4 组表型相关蛋白的表达水平。结果 （1）随着 SAHA 浓度的增加, SKOV3 细胞株 SKOV3/DDP 及 HO8910 细胞株 48 h 光密度 （OD） 值均呈逐渐降低趋势(均 P＜0.05)。（2） 48 h SAHA 1、 SAHA 2 组凋亡率高于对照组(均 P＜0.05); SAHA 作用 48 h, 细胞周期发生阻滞, 与对照组比较, SAHA 1 组和 SAHA 2 组 SKOV3 和 SKOV3/DDP 细胞 S 期和 G2/M 期比例增高, HO8910 和 HO8910-PM 细胞 G0/G1期比例增高(P＜0.05)。（3） SAHA 1、 2 组 CyclinB1 和 Cdc2(p34)的 mRNA 表达水平均低于对照组, Caspase-3、 p21 和 p53 的 mRNA 表达水平明显高于对照组(P < 0.05); SAHA 1~4 组 Ac-Histone H3 和 Ac-Histone H4 和 p53 蛋白的表达较对照组明显增强, CyclinB1、 Cdc2 (p34)蛋白的表达减弱。结论 SAHA 通过调节恶性表型相关蛋白 Caspase-3、 p53、 CyclinB1 和 Cdc2(p34)的表达水平, 促进组蛋白乙酰化, 抑制卵巢癌细胞增殖, 阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡。