脑利钠肽临床应用的研究进展

脑利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)是利钠肽家族成员之一。利钠肽家族是由心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、BNP、C型利钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)、D型利钠肽(D-type natriuretic peptide,DNP)和尿利钠肽(uro natriuretic peptide,UNP)等组成,其中ANP和BNP来源于心     

吡格列酮体外对大鼠心肌肥大的改善作用

目的　探讨噻唑烷二酮 (TZD)类药物吡格列酮在体外对心肌肥大的影响。方法　新生大鼠的原代培养心肌细胞和非心肌细胞 ,以血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激建立体外心肌肥大模型 ,并用不同浓度的吡格列酮作用细胞。采用RT PCR法检测心肌肥大特征性基因心钠肽 (ANP)和脑钠肽(BNP)的mRNA表达 ,以MTT比色法和3 H TdR参入实验检测非心肌细胞增殖情况 ,以3 H 亮氨酸参入实验检测心肌细胞蛋白合成速率 ,并用软件分析心肌细胞表面积。结果　肥大模型出现后 ,心肌细胞表面积、ANP和BNP的mRNA表达以及蛋白合成速率增加 ;非心肌细胞增殖活跃 ,但ANP和BNP的mRNA表达没有变化。吡格列酮可以逆转这些变化 ,同时下调非心肌细胞的ANP和BNP的mRNA表达 ,并呈一定的剂量依赖性。结论　吡格列酮体外对大鼠心肌肥大有改善作用 ,预示着TZD类药物具有防治心肌肥大等心血管疾病的药理作用     

脑利钠肽水平与心房颤动相关性研究进展

<正>利钠肽家族包括心房利钠肽(Atrial natriuretic peptide,ANP)、脑利钠肽(Brain atriuretic peptide,BNP)、C型利钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)等。     

穿心莲内酯对苯肾上腺素诱导的H9C2细胞肥大和氧化应激的作用及机制

摘 要 目的：探讨穿心莲内酯对苯肾上腺素诱导的H9C2心肌细胞肥大和氧化应激的作用及机制。方法: 用苯肾上腺素和穿心莲内酯共同孵育H9C2心肌细胞24 h后采用细胞计数检测H9C2心肌细胞活性,采用α-Actin免疫荧光染色观察H9c2细胞表面积,RT-PCR检测H9c2细胞中心房利钠肽（ANP）、B型尿钠肽（BNP）和β 肌球蛋白重链（α-MHC）mRNA的表达水平,免疫印迹法（Western blot）检测H9c2细胞中氧化应激相关蛋白的表达情况。此外,用不同浓度穿心莲内酯和苯肾上腺素共同孵育H9C2心肌细胞24 h后,采用DCFH DA荧光探针检测活性氧簇（ROS）水平,实时定量PCR（RT-PCR）检测各组H9c2细胞中的GP91、NOX4、P67phox、SOD2、NQO1和Gpx的mRNA表达水平。 结果: 穿心莲内酯可以显著缓解苯肾上腺素诱导的心肌细胞肥大,抑制肥大标志物ANP、BNP、β-MHC的mRNA表达水平。此外,穿心莲内酯以剂量依赖的方式抑制促氧化因子GP91、NOX4和P67phox的mRNA表达水平,促进抗氧化因子SOD2、NQO1和Gpx的mRNA表达水平。以上作用与苯肾上腺素组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。同时,免疫印迹分析证实了穿心莲内酯主要通过活化细胞内Nrf2/HO-1信号通路拮抗苯肾上腺素诱导的氧化应激。 结论: 穿心莲内酯可缓解苯肾上腺素诱导的心肌细胞肥大,并通过激活Nrf2/HO-1信号通路改善苯肾上腺素诱导的H9C2细胞氧化应激。     

23-羟基白桦酸对阿霉素所致H9c2心肌细胞损伤的保护作用及抗氧化机制研究

目的:基于细胞水平研究23-羟基白桦酸(23-HBA)对阿霉素(DOX)心肌损伤的保护作用并探讨其抗氧化机制.方法:采用H9c2心肌细胞,考察对照组、DOX组、23-HBA组及23-HBA联合DOX组给药后心肌细胞形态学变化,测定细胞体积及蛋白含量,Real time-PCR测定心钠素(ANP)、脑钠素(BNP)的mRNA水平.考察心肌细胞内Caspase-3活性及Hoechst荧光染色后细胞核形态从而评价细胞凋亡水平.利用DCFH荧光探针测定细胞ROS水平,同时检测细胞内脂质过氧化物(MDA)生成量,评价细胞氧化损伤水平,寻找23-HBA心肌保护的可能机制.结果:5 μmol/L DOX诱导心肌细胞肥大,表现为细胞体积增大,蛋白含量增多,并显著上调细胞内ANP与BNP的mRNA水平,提高细胞内Caspase-3活性,导致细胞凋亡.23-HBA与DOX联合用药后,浓度依赖地降低DOX给药后心肌细胞内ROS水平,清除脂质过氧化物MDA,逆转DOX诱导的心肌肥大、心肌损伤标志物上调、心肌细胞凋亡等过程.结论:23-HBA可通过其抗氧化作用降低DOX所致的心肌损伤.     

基于转录组学和HDAC2慢病毒过表达载体探究附子治疗心肌肥大的分子机制

目的：探究附子治疗心肌肥大体外细胞模型的分子机制。方法：通过慢病毒载体pLVX-TetOne-Puro-HDAC2转染H9C2心肌细胞建立稳定表达外源性HDAC2基因的体外心肌肥大模型。采用qRT-PCR检测转染后的H9C2细胞中HDAC2mRNA水平,WB检测ANP以及BNP蛋白表达水平;选用附子水溶性生物碱以及水煎液对建立的体外心肌肥大模型进行给药处理,最后采用转录组学解析附子对其治疗的分子机制。结果：与对照组相比,重组慢病毒组中细胞的HDAC2 mRNA水平相对表达量显著升高（P<0.05）。转染后H9C2细胞表面积显著增加（P<0.05）,ANP和BNP蛋白的表达水平也显著提高（P<0.05）。表明HDAC2上调表达可能影响H9C2细胞表面积的增加和心肌肥大标志物的重新表达,心肌肥大体外模型构建成功。转录组分析显示附子主要通过激活ABC transporters和PI3K-Akt信号通路,抑制mTOR、JAKSTAT、MAPK、TNF、Calcium、Wnt、Ras以及p53等信号通路基因的表达从而缓解心肌肥大症状。结论：附子治疗心肌肥大的分子机制可能主要通过...     

脑钠肽在心血管疾病中的应用

自de Bold等^[1]于1981年在鼠的心肌细胞提取物中发现A-型钠尿肽（ANP）后,1988年Sudoh首次报道了脑型利钠肽（brain natriuretic peptide,BNP）,1990年首次报道了的C型利钠肽（C type natriuretic peptide,CNP）。     

脑钠肽和氨基末端脑钠肽在慢性阻塞性肺疾病所致肺动脉高压评估中的价值

<正>钠尿肽(natriuretic peptide,NP)是一组具有利钠利尿作用的内源性肽,包括A型钠尿肽(ANP)、B型钠尿肽(BNP)、C型钠尿肽(CNP)和D型钠尿肽(DNP)。日本学者Sudoh等首先于1988年从猪脑中分离出BNP,因而得名脑钠钛,实际上主要来源于心脏。BNP是一个很好的反映心功能的指标,它     

BNP/NT-proBNP在心力衰竭诊断治疗中的应用进展

<正>B型利钠肽亦称为脑钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP),是利钠肽家庭成员之一,自1984年心房肽(ANP)的结构被证实后,1988年Sudoh等[1]从猪脑中分离出的一种与ANP结构类似的并能引起临床钠排泄和利尿反应的化合物,故称之为BNP。1990年Sudoh等[2]又在猪脑中发现了利钠肽的第三个家庭成员,称之为C型的利钠肽(CNP)。自此,ANP、BNP和CNP三种主要利钠肽逐一得到了鉴定,其中应     

H2S减少H2O2诱发H9c2心肌细胞内质网应激的机制研究

目的 探讨硫化氢(H2S)减少过氧化氢(H2O2)诱发H9c2心肌细胞内质网应激的作用机制.方法 H2O2 150 μmol/L诱发制备H9c2心肌细胞内质网应激模型后分为三组,A组为模型对照组,B组和C组分别采用硫氢化钠25 μmol/L和S-炔丙基半胱氨酸25 μmol/L处理;另设空白对照(D)组.CCK-8法检测细胞生存率,Hoechst染色法检测凋亡细胞,荧光分析法检测Caspase-12活性,Western blot检测转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)、免疫球蛋白结合蛋白(BiP)、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMK Ⅱ)、受磷蛋白(PLN)和心肌肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)表达,免疫共沉淀法检测CaMK Ⅱ与PLN以及SERCA2a与PLN的结合.结果 A组细胞存活率低于D组,而B组和C组高于A组(P＜0.05).A组凋亡细胞数多于D组,而B组和C组均少于A组(P＜0.05).A组 Caspase-12活性、PLN 磷酸化水平、CHOP、BiP、CaMK Ⅱ 以及 CaMK Ⅱ与PLN结合表达均高于D组,B组和C组则均低于A组(P＜0.05).A组SERCA2a与PLN结合的表达低于D组,B组和C组则均高于A组(P＜0.05).结论 H2S可以通过CaMK Ⅱ/PLN/SERCA2a途径减少内质网应激,对H2O2诱导的心肌细胞损伤发挥保护作用.     

Ubiquitin-protein ligase E3a (UBE3A) as a new biomarker of cardiac hypertrophy in cell models

Cardiac hypertrophy is widely diagnosed in clinical cardiac disorders. The pathophysiology of hypertrophy is complex and multifactorial, a series of molecular and cellular changes are participated, such as activation of different signaling pathways, a switch of fetal gene program in the myocardium, and apoptosis. Some biomarkers have been applied to assess cardiac hypertrophy including atrial natriuretic peptides (ANP), brain/B-type natriuretic peptides (BNP), and α- or β- Myosin Heavy Chain (MHC) in addition to others. Recently, ubiquitin-protein ligase E3A (UBE3A) has been observed to increase in cardiac hypertrophy. Therefore, UBE3A as a new biomarker seems valuable in the clinic. The cardiac hypertrophy is induced in rat-derived heart cell line H9c2 cells by potassium bromate (KBrO3), high glucose (HG), or isoproterenol (Iso), respectively. As an oxidizing agent, KBrO3 increased cell size at concentrations less than 250 μM. Similarly, HG and Iso also induced cardiac hypertrophy in H9c2 cells. Interestingly, each kind of the cell models promoted the gene expression of the well-known biomarkers of cardiac hypertrophy including atrial natriuretic peptides (ANP) and brain/B-type natriuretic peptides (BNP). Additionally, UBE3A is also raised with the signals involved in cardiac hypertrophy such as calcineurin and nuclear factor of activated T-cells (NFAT) determined using Western blots. KBrO3 increased the protein levels of these signals and the specific inhibitor, such as cyclosporine A and tacrolimus, attenuated the signaling in H9c2 cells at concentrations sufficient to inhibit calcineurin in addition to the reduction of mRNA levels of UBE3A, similar to ANP or BNP. Moreover, HG or Iso also significantly increased protein levels of UBE3A in H9c2 cells. Taken together, we provided a new view that UBE3A is markedly raised in cardiac hypertrophy using various cell models, mainly through the activation of the calcineurin/NFAT signaling pathway in H9c2 cells. Therefore, UBE3A could be developed as a new biomarker in the diagnosis of cardiac hypertrophy.     

Cytochrome P450 epoxygenase metabolite, 14,15-EET,protects against isoproterenol-induced cellular hypertrophy in H9c2 rat cell line

We have previously shown that isoproterenol-induced cardiac hypertrophy causes significant changes to cytochromes P450 (CYPs) and soluble epoxide hydrolase (sEH) gene expression. Therefore, in this study, we examined the effect of isoproterenol in H9c2 cells, and the protective effects of 14,15-EET against isoproterenol-induced cellular hypertrophy. Isoproterenol was incubated with H9c2 cells for 24 and 48 h. To determine the protective effects of 14,15-EET, H9c2 cells were incubated with isoproterenol in the absence and presence of 14,15-EET. Thereafter, the expression of hypertrophic markers and different CYP genes were determined by real time-PCR. Our results demonstrated that isoproterenol significantly increased the expression of hypertrophic marker, atrial natriuretic peptide (ANP) and brain natriuretic peptide (BNP), parallel to a significant increase in cell surface area. Also, isoproterenol increased the mRNA expression of CYP1A1, CYP1B1, CYP2J3, CYP4F4 and CYP4F5, as well as the gene encoding sEH, EPHX2. On other hand, 14,15-EET significantly attenuated the isoproterenol-mediated induction of ANP, BNP, CYP1A1, CYP2J3, CYP4F4, CYP4F5 and EPHX2. Moreover 14,15-EET prevented the isoproterenol-mediated increase in cell surface area. Interestingly, 20-hydroxyeicosatetraenoic acid (20-HETE) treatment caused similar effects to that of isoproterenol treatment and induced cellular hypertrophy in H9c2 cells. In conclusion, isoproterenol induces cellular hypertrophy and modulates the expression of CYPs and EPHX2 in H9c2 cells. Furthermore, 14,15-EET exerts a protective effect against isoproterenol-induced cellular hypertrophy whereas, 20-HETE induced cellular hypertrophy in H9c2 cells.     

Autocamtide 2-相关抑制肽对心肌成纤维细胞分泌细胞因子及基质金属蛋白酶表达的抑制研究

目的：观察钙-钙调素依赖性蛋白激酶（CaMK）Ⅱ抑制剂（autocamtide 2-相关抑制肽,AIP）在大鼠心肌成纤维细胞增殖中的作用及其分子机制。方法：培养新生1～3 d乳鼠心肌成纤维细胞（3代）,分为正常对照组（CON）,血管紧张素Ⅱ（AngⅡ,0.1 umol/L）组,AngⅡ（0.1μmol/L）＋AIP（0.2μmol/L）组,AngⅡ（0.1μmol/L）＋AIP（0.5μmol/L）组,AngⅡ（0.1μmol/L）＋AIP组（1.0μmol/L）;MTT法及细胞记数法分别测定心肌成纤维细胞增殖;ELISA法测定细胞因子（TGF-β1,TNF-a）;RTPCR检测基质金属蛋白酶-2,9（MMP-2,9）mRNA水平;免疫印记法检测MMP-2,9的蛋白表达。结果：AIP（0.5μmol/L,1.0μmol/L）抑制AngⅡ引起的心肌成纤维细胞增殖,并呈剂量依赖;AIP（0.5μmol/L,1.0μmol/L）抑制AngⅡ引起的细胞因子分泌,并呈剂量依赖AIP（0.5μmol/L,1.0μmol/L）预防0.1μmol/LAngⅡ引起的MMP-2,9 mRNA及蛋白的表达增加。结论：AIP（0.5μmol/L,1.0μmol/L）对AngⅡ诱导的心肌纤维化具有保护作用,其机制可能与AIP预防心肌成纤维细胞增殖、细胞因子分泌以及对基质金属蛋白酶的调节有关。     

H2O2预处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响

摘要 目的 探讨H2O2预处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧引起H9C2细胞凋亡的影响。方法 大鼠心肌细胞系（H9C2）经体外培养扩增,使用对数生长期细胞做实验处理。分别使用0、5、10、20、50、100μmol/L浓度 H2O2处理H9C2细胞,流式细胞仪（FCM）、MTT法和免疫印迹法（Western blot法）检测不同浓度H2O2处理对H9C2细胞凋亡率、增殖活性和STAT3磷酸化水平的影响,以确定最佳H2O2预处理浓度。观察低浓度H2O2预处理对缺氧/复氧所引起细胞损伤的影响,细胞随机分为4组,①对照组：常规培养;②缺氧／复氧组：预先在 5％CO2,95%N2培养箱中培养 120min,复氧30min ;③H2O2预处理组：给予H2O2处理90min换液,24h后缺氧/复氧处理;④AG490+ H202组：在H2O2预处理前10min给予10μmol/L AG490处理,其余处理同H2O2预处理组。AnnexinV-FITC/PI双染法及流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡,MTT法检测H9C2细胞增殖活性,免疫印迹法（Western blot法）检测STAT3磷酸化水平。结果20μmol/L组的STAT3磷酸化水平明显高于其他各浓度组（P<0.01）,心肌细胞凋亡率亦明显低于50μmol/L及100μmol/L浓度组（P<0.01）,而其心肌细胞增殖活性及细胞凋亡率与5μmol/L及10μmol/L浓度组无明显差异; H2O2预处理能降低大鼠心肌细胞凋亡率（P<0.05）,增加心肌细胞活性（P<0.05）上调P- STAT3水平（P<0.05）。缺氧损伤后给予AG490处理可使H2O2预处理保护作用消失。结论20μmol/L H2O2预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤具有适应性保护作用。可能机制是激活 JAK2-STAT3通路发挥抑制细胞凋亡作用。     

脑钠素对急性心肌梗死的疗效及预后的影响

目的 观察脑钠素对急性心肌梗死的疗效及对预后的影响.方法 将急性心肌梗死患者随机分为脑钠素组和对照组,分别给予静脉点滴脑钠素和单硝酸异山梨酯治疗,观察两组患者的心肌酶峰值,左室壁运动情况,左室射血分数及NT-proBNP水平变化,随诊3个月,观察两组患者的预后.结果 脑钠素组的心肌酶峰值低于对照组[CK：（1234.76±812.34）μ/L vs（1678.67±958.36）μ/L;CK-MB：（118.49±74.6） μ/L vs（176.41±93.63） μ/L] （P＜0.05）;随访3个月后,NT-ProBNP水平明显低于对照组[（256±126）ng/L vs（432.1±138）ng/L] （P＜0.05）;室壁运动积分指数优于对照组（1.16±0.11vs 1.31±0.16）（P＜0.05）,左室射血分数高于对照组[（57±0.09）％ vs （49±0.06）％];3个月后,脑钠素组的主要心脏不良事件（MACE）的发生率明显低于对照组（P＜0.05）.结论 脑钠素可以限制梗死面积扩大,保护心功能及改善近期与远期预后.     

DIFFERENTIAL REGULATION OF NATRIURETIC PEPTIDE GENES IN INFARCTED RAT HEARTS

1. We investigated the regulation of the atrial natriuretic peptide and brain natriuretic peptide genes in a rat model of myocardial infarction induced by isoproterenol (IP rat) and in a rat model of cardiac hypertrophy induced by aorto-caval shunt (AC shunt rat). 2. Brain natriuretic peptide (BNP) mRNA levels in atria were significantly higher in IP rats than in controls at 18 h after the administration of isoproterenol, but no significant increases were observed in atrial natriuretic peptide (ANP) mRNA expression levels at any time point examined. In the ventricles, the BNP mRNA levels peaked at 18 h after isoproterenol administration, whereas ANP mRNA levels gradually increased until 3 days after isoproterenol administration. 3. The BNP mRNA levels in both atria and ventricles were significantly increased at 1 day after the introduction of aorto-caval shunt, while the ANP mRNA levels were not. 4. Plasma BNP levels were closely correlated with left ventricular weight per bodyweight, in both IP rats and AC shunt rats. 5. These results suggest the differential regulation of ANP and BNP genes in both the atria and ventricles in these two pathological models.     

螺内酯对急性心肌梗死患者血浆可溶性SICAM-1和IL-6及BNP的影响

目的观察螺内酯对急性心肌梗死（AMI）患者血浆可溶性黏附因子-1（sICAM-1）、白介素-6（IL-6）和B型利钠肽（BNP）的影响。方法按有无高血压采用分层随机设计将60例AMI患者分为常规组与螺内酯组,用酶联免疫吸附法（EUSA）测定sICAM-1含量,用放射免疫法测定IL-6含量,用Triage千式快速定量心脏标志物监测BNP含量。结果常规组与螺内酯组第2天sICAM-1分别为（648±153）νg/L、（6794±171）μg／L,与我院正常值（189±69）pg／L比较差异有统计学意义（P均〈0．01）。螺内酯组第28天sICAM-1含量为（266±98）μg/L,较常规组同时间点含量（355±123）μg／L均显著下降（P均〈0．01）。第7天、第28天螺内酯组IL-6含量为（28±10）μg/L、（19±7）μg／L与常规组（39±12）μg／L、（23±9）μg/L比较均显著下降（P均〈0．01）。螺内酯组第28天BNP含量为（89±47）ns／L较常规组同时间点含量（123±39）ng／L均显著下降（P均〈0．01）。结论螺内酯可降低AMI患者血浆SICAM-1、IL-6和BNP含量,抑制炎症反应．阻抑心室重构。