广州管圆线虫感染引起视神经炎的研究现状

广州管圆线虫病（angiostrongyliasis cantonensis）又称嗜酸粒细胞增多性脑膜脑炎或脑脊髓膜炎,主要是食生或半生的感染广州管圆线虫Ⅲ期幼虫的福寿螺螺肉而感染,幼虫寄生在中枢神经系统,引起脑膜炎、脊髓膜炎、脑炎、脊髓炎等。     

广州管圆线虫感染福寿螺模型的建立

目的建立具有足够感染度的感染有广州管圆线虫的福寿螺模型。方法将福寿螺随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,每组16只。分别用每只螺0条、1500条、2500条、3500条一期幼虫感染福寿螺。感染24h后以相同感染数量相同时间重复感染一次。35—40d后,使用酶消化法查找三期幼虫,观察螺的死亡率、感染率、感染度等指标。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组死亡率分别为0、31．25％、31．25％、62．5％;Ⅰ组各螺无三期幼虫感染,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组感染率均为100％;感染度Ⅲ组和Ⅳ组明显高于Ⅱ组（P〈0．05）,Ⅲ组与Ⅳ组之间感染度差异无统计学意义（P〉0．05）。结论无广州管圆线虫感染时,Ⅰ组螺可正常生存,无死亡;Ⅱ组螺死亡率较低．但感染度亦不高：Ⅳ组螺感染度较高死亡率亦高;Ⅲ组福寿螺死亡率较低、感染度较高、感染虫数较均衡,最适宜作为模型。     

广州大学城广州管圆线虫疫源地调查

目的捕捉广州大学城褐云玛瑙螺（Achatina fulica）检查广州管圆线虫（Angiostrongylus cantonensis）第Ⅲ期幼虫的感染情况。方法采集大学城10所高校生活区和教学区褐云玛瑙螺，人工消化酶消化分离第Ⅲ期幼虫，计算感染率和感染度并与广州其他地区进行比较。结果除广东外语外贸大学、华南理工大学2个校园内未捕捉到褐云玛瑙螺外，其他8所高校均发现有褐云玛瑙螺；广州大学城广州管圆线虫总体感染率为11．8％（76／642），平均感染度为872条／螺，阳性螺中最高15725条，最低17条；中山大学校园内感染率和感染度比其他校园高，分别为22．0％（56／255），1007条／螺。结论广州大学城广州管圆线虫感染率低于广州其他地区。     

广州管圆线虫致大白鼠心脏病变的形态学观察

目的：探讨广州管圆线虫所致大白鼠心脏的病理变化。方法：大白鼠感染管圆线虫后,用光镜与电镜观察其心脏的形态改变。结果：感染30天后的大白鼠右心房室及肺动脉可见成虫寄生,心肌纤维变性,嗜酸粒细胞浸润,内膜细胞脱落,外膜有纤维渗出。电镜下肌膜高度水肿,肌丝溶解,线粒体空泡变等。结论：广州管圆线虫所致大白鼠的心脏病变,主要表现为成虫寄生于右心室,并可致心内膜,心肌及心外膜炎症性改变。     

广州管圆线虫生活史的实验研究进展

广州管圆线虫是一种鼠源性寄生虫,其幼虫侵入人体后,可引起嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎或嗜酸性粒细胞增多性脑膜脑炎。本文综述了近年来有关广州管圆线虫生活史的实验研究进展,以加深对广州管圆线虫病的认识。     

广东省罗定市广州管圆线虫疫源地调查

目的了解广东山丘区广州管圆线虫疫源地的分布及宿主种类，为制定广东山丘区广州管圆线虫病防治策略提供科学依据。方法各种螺类均采用匀浆法把螺肉打碎，置室温下自然沉淀，取沉渣图片镜检。结果在褐云玛瑙螺、福寿螺和石螺体内发现广州管圆线虫，阳性率分别为13．21％（14／106）、2．00％（2／100）和1．43％（1／70）；10只中华圆田螺未发现阳性。结论山丘区的罗定市为广州管圆线虫病疫源地，褐云玛瑙螺、福寿螺和石螺均可为广州管圆线虫的中间宿主。     

广州及其周边地区福寿螺体内广州管圆线虫感染的现状调查

目的了解广州及其周边地区福寿螺感染广州管圆线虫的情况，为防治提供依据。方法．人式消化174只福寿螺。显微镜下检查消化液中有无广州管圆线虫幼虫。结果广东省广州市花都区、广州市越秀区、兴宁、化州、蕉岭、茂名等六地的福寿螺感染率分别为25．0％、23．1％、24．2％、18．5％、14．3％、13．3％，广东省东莞采集的福寿螺未发现感染广州管圆线虫。结论广东省广州市花都区、广州市越秀区、兴宁、化州、蕉岭、茂名等六地存在广州管圆线虫的自然疫源地。     

清远市广州管圆线虫宿主动物感染情况调查

目的了解清远市广州管圆线虫宿主的感染情况,为防治工作提供依据。方法按照不同地理位置,选佛冈、连州和清新3个县进行调查,调查当地鼠类及螺类广州管圆线虫的感染情况。结果共检查鼠类387只,感染率9.56%,检出广州管圆线虫成虫总计139条,平均感染度为3.76条/只;共检查福寿螺223只,感染率为2.69%,平均感染度为241.17条/螺;检查褐云玛瑙螺102只,感染率为2.94%,平均感染度为1条/螺。结论清远市鼠类和螺类中普遍存在广州管圆线虫感染,说明清远地区为广州管圆线虫的疫源地。     

广州管圆线虫幼虫死活快速鉴别的实验研究

目的寻找快速鉴别广州管圆线虫死活的染色方法。方法用中性红、台盼蓝和美蓝三种染液对活或死广州管圆线虫幼虫进行染色。结果中性红染液和美蓝染液可以使死亡的广州管圆线虫幼虫染色,活虫不染色且活力不受染色剂影响;台盼蓝染液对广州管圆线虫死、活幼虫均不染色。结论中性红和美蓝染液可快速鉴别广州管圆线虫幼虫的死活。     

茂名市区和电白县鼠类广州管圆线虫感染调查

目的了解茂名市区和电白县鼠类广州管圆线虫感染情况,为该地区广州管圆线虫防治工作提供参考依据。方法在村内和野外采用鼠夹和捕鼠笼等方法捕捉鼠类,在确定种类后,取其心肺组织检查广州管圆线虫成虫。结果共检查鼠148只,阳性15只,鼠广州管圆线虫的总感染率为10.14%。褐家鼠、黄胸鼠和小家鼠的感染率分别为12.87%、4.76%和0。野栖鼠和家栖鼠感染率分别为17.14%（12/70）和3.85%（3/78）。结论茂名市区和电白县鼠类中存在广州管圆线虫的感染,褐家鼠是最主要的终末宿主。同时,野栖鼠的感染率明显高于家栖鼠。     

Eosinophilic meningitis due to Angiostrongylus cantonensis

Angiostrongylus cantonensis is a nematode parasite that inhabits the pulmonary arteries and heart of rodents. It is one of the causative agents of fatal eosinophilic meningoencephalitis in man. We present five cases of eosinophilic meningitis presumably due to infection with Angiostrongylus cantonensis . All the five patients gave history of ingestion of monitor lizard within ten days of onset of symptoms.     

Molecular cloning and characterization of cystatin, a cysteine protease inhibitor, from Angiostrongylus cantonensis

Cystatins are thiol proteinase inhibitors ubiquitously present in mammalian body and serve various important physiological functions. In the present study, a novel cystatin molecule (AcCystatin) was cloned from a cDNA library of Angiostrongylus cantonensis fourth-stage larvae. The putative 14-kDa protein contained 120 residues with cystatin-conserved motifs known to interact with the active site of cysteine peptidases and showed high identities with cystatins from other nematodes. RT-PCR analysis revealed that the expression pattern of AcCystatin was equal at the time points of third-stage larvae, fourth-stage larvae, and adults of the parasite life cycle. The recombinant AcCystatin (rAcCystatin) expressed and purified from Escherichia coli has been demonstrated to possess an obvious inhibitory activity against cathepsin B and could significantly upregulate nitric oxide production from IFN-γ activated RAW 264.7 macrophages. Sera from mice (non-permissive host) infected with A. cantonensis detected rAcCystatin by Western blot, while the sera from infected rats (permissive host) could not. The results implied that AcCystatin might be an immunoregulator in A. cantonensis infection.     

广州管圆线虫一期幼虫的分离纯化及其抗原分析

目的建立广州管圆线虫一期幼虫的分离纯化方法，分析其抗原特性及血清学诊断价值。方法分别用贝尔曼漏斗法、蔗糖离心浮选法及改良贝尔曼法联合胰酶消化法从大鼠粪便中分离纯化一期幼虫；用SDS—PAGE和Western blotting进行蛋白谱与抗原谱分析：分别用一期幼虫和成虫抗原包被ELISA反应板．问接法检测不同样本中相应抗体。结果3种方法分离效率分别为50．1％、33．6％和19．7％：联合法获得的纯度最高．且90％以上的幼虫有活力；贝尔曼漏斗法分离的幼虫99％以上具有活力但纯度低：蔗糖离心浮选法分离的绝大多数虫体失去活力。一期幼虫104000Mr与广州管圆线虫感染2周的大鼠血清出现强反应，32000Mr和31000Mr与感染6周的大鼠血清、32000Mr与广州管圆线虫病患者血清均出现较强反应．与对照血清均未出现明显的反应；在ELISA检测中，一期幼虫抗原对广州管圆线虫病患者血清和感染大鼠血清的检出率与成虫抗原无统计学差异。结论改良贝尔曼法联合胰酶消化法可从大鼠的粪便中分离高纯度且具有活力的一期幼虫．一期幼虫104000Mr、32000Mr和31000Mr具有潜在的诊断价值，可望从大鼠粪便中分离一期幼虫开发诊断性抗原。     

广州管圆线虫Asp-1基因的克隆表达及各虫期转录水平研究

目的构建广州管圆线虫天冬氨酰蛋白酶（Asp-1）基因的原核表达系统,研究该基因在各虫期的转录水平。方法构建重组质粒pET-30a（＋）-Asp-1,并转化至大肠杆菌BL21（DE3）表达载体,经IPTG诱导表达后,Ni-IDA亲和层析纯化表达产物。通过以β-肌动蛋白为内参、以各期虫cDNA为模板的实时荧光定量PCR,研究该基因在各虫期的表达水平。结果获得纯化的重组蛋白,相对分子质量约为43000,与生物信息学分析预测结果一致。qRT-PCR显示该基因在三期幼虫中表达丰度最高,四/五期幼虫、成虫雄虫、雌虫依次降低。结论 Asp-1基因的表达丰度在三期幼虫中最高的实验数据与三期幼虫感染性最强的事实相符,提示天冬氨酰蛋白酶有可能是幼虫入侵宿主的关键酶,为后续广州管圆线虫虫体侵入宿主的机制以及宿主保护机制研究打下基础。     

云南省传播广州管圆线虫病的螺类调查研究

目的了解云南省传播广州管圆线虫病的中间宿主螺类。方法野外调查采集贝类标本,分类鉴定,寄生虫检测。结果发现传播广州管圆线虫病的中间宿主螺类共12种。结论为广州管圆线虫病在云南省的防治提供科学依据。     

Eosinophilic meningitis: A case series and review of literature of Angiostrongylus cantonensis and Gnathostoma spinigerum

Eosinophilic meningitis is defined as the presence of >10 eosinophils/μL in cerebrospinal fluid (CSF) or at least 10% eosinophils in the total CSF leukocyte count. Eosinophilic meningitis has been reported in two case series and two case reports in India till date and has not been reported in children below 15 years of age. We present two children with eosinophilic meningitis with peripheral eosinophilia and the proposed etiologic agents based on the clinical setting and their response to antihelminthic agents.