呼吸道合胞病毒对致敏小鼠气道炎症和CD8+ T细胞功能的影响

目的观察呼吸道合胞病毒（RSV）对致敏小鼠气道炎症和CD8^＋T细胞功能的影响.方法BALB/c小鼠40只,随机分成4组,分别为磷酸盐缓冲液（PBS）对照组、鸡卵白蛋白（OVA）组、RSV组、OVA/RSV组;应用OVA腹腔注射致敏、OVA气道雾化结合RSV滴鼻激发哮喘;支气管肺泡灌洗液（BALF）作细胞分类计数;酶联免疫吸附试验（ELISA）测定BALF上清中白细胞介素（IL）-4、IL-5、干扰素（IFN）-γ含量;苏木精-依红（HE）染色观察肺病理变化;采用三色光流式细胞分析法测定气管旁淋巴结（PBLN）中CD4^＋、CD8^＋T细胞及细胞内细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-5表达与TH2/TH1、Tc2/Tc1比值变化.结果（1）BALF中细胞总数及分类：与OVA组比较,OVA/RSV组细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞均明显增加（分别P＜0.01）;与RSV组比较,OVA/RSV组细胞总数、嗜酸性粒细胞明显增加（分别P＜0.01）.（2）BALF上清中细胞因子含量：与OVA组比较,OVA/RSV组IFN-γ、IL-4、IL-5含量均明显升高（分别P＜0.01）;与RSV组比较,OVA/RSV组IFN-γ无明显变化,而IL-4、IL-5显著上升（分别P＜0.01）.（3）肺组织病理：OVA/RSV组与其他各组比较气道黏膜增厚,管腔狭窄、收缩,上皮破坏,管壁周围炎症细胞浸润明显加重.（4）PBLN中CD4^＋（WN-γ^＋、IL-4^＋、IL-5^＋）、CD8^＋（IFN-γ^＋、IL-4^＋、IL-5^＋）T细胞各占CD3^＋T细胞百分比及TH2/TH1、Tc2/Tc1比值变化：与OVA组比较,OVA/RSV组CD8^＋（IFN-γ^＋、IL-4^＋、IL-05^＋）T细胞百分比、Tc2/Tc1比值增加（分别P＜0.01）,TH2/TH1比值无明显变化.与RSV组比较,OVA/RSV组CD4^＋（IL-4^＋、IL-5^＋）T细胞、TH2/TH1比值、CD8^＋（IL-4^＋、IL-5^＋）T细胞、Tc2/Tc1比值均明显上升（分别P＜0.01）.结论（1）OVA致敏小鼠RSV感染后可明显加重气道炎症,TH2、TH1型炎症均加强,且以TH2型炎症加重为主.（2）OVA致敏小鼠RSV感染后可引起CD8^＋T细胞数量及功能改变,即由产生IFN-γ^＋为特征的Tc1细胞向产生IL-4^＋、IL-5^＋为特征Tc2细胞转化,并可能与气道内IL-4、IL-5升高及嗜酸性粒细胞的大量募集有关.     

雷公藤单体T4对胰岛β细胞免疫保护作用的机制探讨

目的探讨雷公藤单体T4对胰岛β细胞的免疫保护作用,为胰岛β细胞的免疫保护治疗提供实验依据。方法培养胰岛β细胞株NIT细胞及正常对照外周血单个核细胞,分别与以下6组作用：①IL-1β＋IFN-γ组;②IL-1β＋IFN-γ＋DXM组;③IL-1β＋IFN-γ＋T4组;④T4组;⑤DXM组;⑥对照组（DMEM）。ELISA法检测培养上清IL-4、IFN-γ水平,硝酸还原酶法检测上清一氧化氮水平,化学发光法检测上清胰岛素水平。结果①IL-1β＋IFN-γ刺激的NIT-1细胞分泌IL-4水平较其他各组减少（P〈0.01）,IFN-γ分泌比其他各组增多（P〈0.01）,IL-4/IFN-γ比其他各组降低（P〈0.01）。②T4＋IL-1β＋IFN-γ刺激的NIT-1细胞与IL-1β＋IFN-γ刺激组相比,分泌IL-4水平增高（P〈0.01）,IFN-γ减少（P〈0.01）,IL-4/IFN-γ增高（P〈0.01）。③IL-1β＋IFN-γ刺激的NIT-1细胞分泌NO较其他各组增高（P〈0.01）,胰岛素分泌减少（vsIL-1β＋IFN-γ＋T4组、IL-1β＋IFN-γ＋DXM组,P〈0.05;vsT4组、DXM组、对照组,P〈0.01）。④T4＋IL-1β＋IFN-γ刺激的NIT-1细胞与IL-1β＋IFN-γ组相比,分泌NO水平减少（P〈0.01）,Ins增加（P〈0.05）;与IL-1β＋IFN-γ＋DXM组相比,NO分泌减少（P〈0.05）。结论 T4可减轻IL-1β＋IFN-γ对NIT细胞的损伤作用,保护NIT细胞的胰岛素分泌功能。     

CD40配基化的肿瘤特异性树突状细胞介导Th1细胞分化的研究

目的：探讨CD40配基化的肿瘤特异性DCs在介导Th1细胞分化中的作用。方法：采用GM-CSF和IL-4联合方案体外诱导小鼠髓系DCs，并利用mCD40L-CHO和TNF-α分别刺激凋亡肿瘤细胞负载的DCs制备DCs瘤莆；^3H-TdR掺入试验检测DCs对T淋巴细胞的促增殖效应；ELISA测定细胞培养上清中IL-10、IFN-1、IL-12的含量；胞内染色和流式细胞术检测经成熟DCs活化的T细胞中CD4^＋IFN-γ^＋T和CD4^＋IL-4^＋T的比例。结果：体外刺激T细胞增殖能力在CD40配基化DCs组最高（P〈0．05），CD40配基化DCs能更有效地促进活化T细胞分泌IFN-γ和介导CD4^＋IFN-γ^＋T细胞的分化（P〈0．05）。同时，CD40配基化DCs分泌IL-12的量也明显高于TNF-α组（P〈0．05）。结论：CD40配基化的肿瘤特异性DCs体外能有效介导Th1细胞的分化。     

C57BL/6小鼠不同组织器官中NKT细胞的比较

目的比较C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结中NKT细胞的含量、亚型和功能的特点。方法分离正常C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结的淋巴细胞,利用细胞表面分子染色的方法,观察不同组织器官中CD3+NK1.1+NKT细胞及其亚型的含量;淋巴细胞经过PMA和离子霉素刺激后,应用细胞内细胞因子染色的方法,通过流式细胞仪观察NKT细胞IFN-γ、IL-4、IL-9和IL-17的产生情况。结果肝脏中NKT细胞的含量为(25.2±12)%,显著高于肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结。肝脏、脾脏和肠系膜淋巴结中NKT细胞以CD4+细胞亚群为主,而肺脏中NKT细胞以CD4-CD8-亚群为主,同时肠系膜淋巴结的NKT细胞中存在CD4+CD8+亚群。不同组织器官中NKT细胞IFN-γ、IL-4、IL-9和IL-17产生的能力有差别。结论 C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结的NKT细胞在含量、表型和功能方面可能存在明显的差异。     

HBV转基因小鼠肝脏NKT细胞功能与PD1、CD28表达分析

目的研究HBV转基因小鼠肝脏中NKT细胞的功能与表面PD1、CD28表达的关系。方法分离小鼠肝脏、脾脏、胸腺和腹膜淋巴结单个核细胞,利用流式细胞检测技术,分别检测其淋巴细胞中NKT细胞的频率,同时检测肝脏NKT细胞PD1、CD28的表达及IFN-γ、IL-4的分泌功能,比较肝脏、脾脏、胸腺和腹膜淋巴结这几个主要免疫组织淋巴细胞中NKT细胞所占的比例,并分析肝脏NKT细胞PD1、CD28的表达与细胞功能的关系。结果与正常同品系小鼠比较,HBV转基因小鼠肝脏、脾脏、胸腺和腹膜淋巴结NKT细胞数量明显减少(P<0.05),与脾脏、胸腺和腹膜淋巴结相比,肝脏淋巴细胞中含有大量的NKT细胞;与正常同品系小鼠比较,HBV转基因小鼠肝脏NKT细胞PD1的表达明显增多(P<0.05),CD28的表达明显减少(P<0.05),肝脏NKT细胞IFN-γ、IL-4的分泌功能明显降低(P<0.05)。结论肝脏中含有大量的NKT细胞,HBV转基因小鼠肝脏NKT细胞的功能存在明显的缺陷,并提示PD1的增加和CD28的降低可能与NKT细胞功能的下调密切相关。     

1,25-二羟维生素D_3对胰岛β细胞免疫保护作用

目的研究1,25-二羟维生素D3对胰岛β细胞的免疫保护作用,为胰岛β细胞的免疫保护治疗提供实验依据。方法培养胰岛β细胞株NIT细胞及正常对照外周血单个核细胞,分别与以下4组作用：①（IL-1β＋IFN-γ）组,②（IL-1β＋IFN-γ＋D3）组,③D3组,④对照组（DMEM）。采用酶联免疫吸附分析（ELISA）检测培养上清液中IL-4、IFN-γ水平,用硝酸还原酶法检测上清液NO水平,用化学发光法检测上清液胰岛素水平。结果①IL-1β＋IFN-γ＋D3刺激的NIT-1细胞与IL-1β＋IFN-γ刺激组相比,分泌IL-4水平增高（P〈0.01）、IFN-γ减少（P〈0.01）,IL-4/IFN-γ增高（P〈0.01）;②IL-1β＋IFN-γ＋D3刺激的NIT-1细胞与IL-1β＋IFN-γ刺激组相比,分泌NO水平减少（P〈0.01）;③IL-1β＋IFN-γ＋D3刺激的NIT-1细胞与IL-1β＋IFN-γ刺激组相比,胰岛素分泌增加（P〈0.05）。结论 1,25-二羟维生素D3可减轻IL-1β＋IFN-γ对NIT细胞的损伤作用,保护NIT细胞的胰岛素分泌功能。     

SARS-CoV S DNA疫苗诱导特异性T细胞及相关细胞因子的特性研究

目的 小鼠经皮下SARS-CoV S DNA疫苗免疫后，研究其特异性T细胞及相关细胞因子的特性。方法SARS-CoV S DNA疫苗免疫BALB／c小鼠后，获取淋巴细胞悬液。经S抗原多肽刺激后，采用ELISA检测细胞培养上清液中IFN-γ／的水平，利用流式细胞仪在单个细胞水平上检测IFN-γ和IL-2的表达及其关系。结果 当S混合多肽刺激后，DNA疫苗免疫小鼠的淋巴细胞产生大量的IFN-γ，与对照鼠相比差异有统计学意义（P〈0．01）。细胞亚群分析的结果表明，IFN-γ^＋和IL-2^＋的CD4^＋T细胞百分率明显高于CD8^＋T细胞。单独产生IL-2的细胞占大多数，其次为IFN-γ和IL-2双阳性细胞，只产生IFN-γ的细胞很少。结论 SARS-CoV S DNA疫苗免疫小鼠后可以诱导抗原特异性CD4^＋和CD8^＋T细胞的产生。     

微小RNA-7敲减对小鼠脾脏中T淋巴细胞体外功能的影响

观察微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)敲减(Knock down,KD)对小鼠脾脏T淋巴细胞体外功能的影响并探讨其意义。常规分离野生型(wild type,WT)小鼠脾脏T淋巴细胞,经CD3和CD28抗体刺激后,Real-time PCR检测不同时间点(0h;24h;48h)细胞中miR-7的表达变化;进一步用Con A、CD3和CD28抗体刺激miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞,CCK8检测细胞增殖率;Real-time PCR检测miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞IL-12、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ和IL-10表达的变化;FACS检测CD4+T和CD8+T细胞的数量变化及CD4+T细胞膜分子CD44、CD62L和IL-4、IFN-γ的表达变化。结果显示,WT小鼠脾脏T淋巴细胞活化后,miR-7的表达水平显著上调(P0.05);与WT小鼠相比,在Con A、CD3和CD28抗体作用下miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显增加(P0.05);miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞IL-12、IL-4、IL-6、TNF-α和IFN-γ水平均明显上调(P0.05),而IL-10表达显著下调(P0.05);FACS检测结果显示CD4+T细胞比例明显上调(P0.05),而CD8+T细胞的比例变化不显著(P0.05);CD4+T细胞膜分子CD62L水平显著下降,CD69及IL-4、IFN-γ的表达水平均显著上调(P0.05)。结果表明,miR-7敲减以后可显著影响小鼠脾脏T淋巴细胞的功能,本实验为后续深入探讨其在T淋巴细胞功能调控中的作用提供实验依据。     

硫酸脑苷酯活化Ⅱ型NKT细胞对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的:观察硫酸脑苷酯活化Ⅱ型NKT细胞对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法:32只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、硫酸脑苷酯治疗组和过继转移组,每组8只。对照组和哮喘组分别采用PBS和卵清白蛋白(OVA)致敏和激发,硫酸脑苷酯治疗组和过继转移组采用OVA致敏,分别在激发前给予硫酸脑苷酯腹腔注射和硫酸脑苷酯活化的Ⅱ型NKT细胞尾静脉注射。分别采用HE和PAS染色检测肺组织学和气道杯状细胞;姬姆萨染色检测支气管肺泡灌洗液(BALF)各细胞分类计数;ELISA法检测血清OVA特异性IgE和BALF中IL-4、IL-5水平;流式细胞仪检测肺Ⅱ型NKT细胞、IL-4+和IFN-γ+Ⅱ型NKT细胞的数量。结果:硫酸脑苷酯治疗组和过继转移组小鼠肺组织炎性细胞和气道基底膜杯状细胞减少。硫酸脑苷酯治疗组和过继转移组小鼠BALF中嗜酸细胞百分比、血清OVA特异性IgE和BALF中IL-4、IL-5水平明显低于哮喘组(均P<0.05)。硫酸脑苷酯治疗组小鼠肺IL-4+和IFN-γ+Ⅱ型NKT细胞的数量明显高于哮喘组(均P<0.01)。结论:硫酸脑苷酯可能通过活化Ⅱ型NKT细胞抑制哮喘小鼠气道炎症。     

STZ诱导小鼠糖尿病模型中T、B淋巴细胞功能的变化

目的：探讨多次小剂量注射链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病模型小鼠中T、B淋巴细胞功能的变化及可能的机制，为小鼠糖尿病模型的应用提供实验依据。方法：①采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导昆明小鼠糖尿病作为动物模型。⑤用ConA和Insulin分别刺激脾和胸腺T细胞，采用MTT法检测成熟与未成熟T细胞对于丝裂原和特异性抗原的增殖转化能力。③采用ELISA间接法测定血清中Insulin自身抗体（IAA）的水平。④采用ELISA夹心法测定小鼠脾细胞及胸腺细胞培养上清的IL-4与IFN-γ的含量。结果：①糖尿病模型组血清中Insulin自身抗体（IAA）含量明显高于正常组（P〈0．05）。②模型组成熟T细胞（脾脏细胞）对于ConA刺激的增殖能力较弱（P〈0．05），对于Insulin刺激的增殖能力与正常组没有显著差别（P〉0．05）；模型组未成熟T细胞（胸腺细胞）对于ConA刺激的增殖能力与正常组没有显著差别（P〉0．05），而对于Insulin刺激的增殖能力较高（P〈0．05）。③模型组脾细胞培养上清的IFN-γ的含量明显高于对照组（P〈0．05），而胸腺细胞培养上清中IFN-1的含量在模型组与对照组之间无明显差异，IL-4在实验组和对照组均未检出。结论：多次小剂量注射STZ诱导糖尿病小鼠模型是自身免疫应答所导致；自身免疫性T、B细胞的功能及自身抗体均有增强；Th1介导的细胞免疫在STZ诱导的糖尿病中发挥着重要作用。     

不同佐剂的复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染的保护作用

目的比较IFN-γ和蜂胶作为佐剂鼻内免疫小鼠抗弓形虫攻击的能力,探索两种佐剂联合应用的效果。方法将5-6周龄雌性BALB／c小鼠60只随机分为4个组,每组15只,分别用20雌可溶性速殖子抗原（STAg）、20μg STAg＋40μg蜂胶、20μgSTAg＋1000U IFN-γ或20μgSTAg＋40μg蜂胶＋1000UIFN-γ鼻内免疫小鼠2次．间隔14d。末次免疫后第10天,用RH株弓形虫速殖子4×10^4个／只灌胃攻击,逐日观察小鼠存活情况。攻击后第43天处死全部存活小鼠,计算胸腺、脾指数,计数脑、肝组织速殖子。结果STAg＋IFN-γ组、STAg＋蜂胶＋IFN-γ组胸腺、脾指数显著高于STAg组（P〈0．05）;组织内速殖子虫荷显著降低（P〈0．01）,STAg＋IFN-γ组小鼠脑、肝组织减虫率分别为57．00％和79．06％;STAg＋蜂胶＋IFN-γ组小鼠脑、肝减虫率分别为68．30％和79．06％。STAg＋蜂胶组小鼠胸腺、脾指数有升高趋势,组织内速殖子虫荷降低,但与STAg组比较差异无统计学意义。结论在抗弓形虫感染中,IFN-γ、蜂胶＋IFN-γ的佐剂效果优于蜂胶,IFN-γ、蜂胶＋IFN-γ辅助STAg显著提高小鼠胸腺、脾比重,增强机体免疫能力,有效抵抗弓形虫的感染攻击,脑、肝组织速殖子虫荷显著减少。     

Immune effector cells induced by complete Freund's adjuvant exert an inhibitory effect on antigen-specific type 2 T helper responses

Background II has hecn well documented that environmental factors such as antigenpresenting cells and related cytokines could affect the development of T helper cells. Objective The purpose of this study is to investigate the effect of different adjuvants on T cell development. Methods Ovalbumin (OVA) combined with aluminum hydroxide (Alum) plus pertussis toxin (PT) or complete Freund's adjuvant (CFA) were used to sensitize mice; the production of IgG and IgE anli-OVA antibodies was then followed. In addition, OVA-specific proliferative responses and cytokine production by spleen cells were also investigated. Results The data showed that the adjuvants themselves could modify the pattern of immune response: (1) IgG_2a > anti-OVA antibody was higher in mice sensitized with OVA + CFA compared to that of mice sensitized with OVA + Alum + PT; (2) the ratio of IFN-γ/IL-4 produced by OVA-stimutated spleen cells was higher in mice sensitized with OVA + CFA than that of mice sensitized with OVA + Alum + PT; (3) increased percentage of γδ T cells was noted in the peritoneal exudate cells of OVA + CFA immunized mice; and (4) the immune response of mice sensitized wilh OVA + Alum+ PT was inhibited by the adoptively transferred ascitic cells from OVA + CFA immunized mice. Conclusion In general, the data suggested higher IgG2a and the ratio of IFN-γ/IL-4 was noted In mice sensitized with OVA + CFA. Further elucidation of the regulatory mechanism of allergen-specific T helper cells development and exploration of possible agents for inmiunotherapy might shed light on the management of atopic diseases.     

Adjuvant effects of salidroside from Rhodiola rosea L. on the immune responses to ovalbumin in mice

Salidroside, a major component of Rhodiola rosea L., was evaluated for its adjuvant effects on the immune responses in mice by ovalbumin (OVA) stimulation. BALB/c mice were immunized subcutaneously with OVA 100 μg or OVA 100 μg dissolved in saline containing alum (100 μg) or salidroside (12.5, 25, or 50 μg) on Days 1 and 15. Two weeks later (Day 28), blood samples were collected to analyze OVA-specific IgG, IgG1, and IgG2b antibodies. Meanwhile, splenocytes were harvested to assess lymphocyte proliferation, cytokines (IL-2, IL-4, and IFN-γ) production, and CD4(+), CD8(+) lymphocyte subsets. The results indicated that co-administration of salidroside with OVA significantly enhanced the ConA-, LPS-, and OVA-induced splenocyte proliferation, produced more IL-2, IL-4, IFN-γ, and IgG, IgG1, and IgG2b antibody levels, and increased the percentage of CD4(+), CD8(+) lymphocyte subsets than OVA alone. Thus, salidroside possess immunological adjuvant activity by regulating humoral and cellular immune responses in mice.     

淋巴细胞主动免疫联合丙种球蛋白治疗复发性流产的研究

目的 探讨单纯静脉注射免疫球蛋白(IVIG)被动免疫治疗及淋巴细胞主动免疫(LIT)联合静脉注射免疫球蛋白(IVIG)被动免疫治疗对复发性流产患者的治疗效果及对其免疫状态的影响.方法 临床确诊为封闭抗体阴性复发性流产患者124例,随机平均分为两组:A组仅接受IVIG,B组接受LIT及IVIG联合治疗,比较两组患者封闭抗体转阳率,临床妊娠率,患者血清淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平、CD4 +/CD8+比率及细胞因子IFN-γ、IL-10水平和NK细胞含量的变化.结果 免疫治疗后,A组封闭抗体转为阳性者45例(72.58％)、B组封闭抗体转为阳性者58例(93.55％),两组之间差异有统计学意义(X2 =9.688,P＜0.05);两组成功妊娠率为A组妊娠39例(62.90％),B组妊娠51例(82.26％),两组之间差异有统计学意义(X2 =5.835,P＜0.05).接受免疫治疗后B组与A组比较,CD3+细胞百分比较治疗前升高,有统计学意义(t=2.497,P＜0.05);CD4+细胞百分比降低(t=4.514,P＜0.05);CD8+细胞百分比升高(t=21.697,P＜0.05);CD4+/CD8+比率降低(t=2.146,P＜0.05),IFN-γ水平降低(t=4.514,P＜0.05),IL-10则升高(t=21.697,P＜0.05);外周血NK细胞百分比下降(t=2.146,P＜0.05),B组变化幅度均高于A组,差异具有统计学意义.结论 封闭抗体阴性复发性流产患者接受免疫治疗能改善体内细胞免疫状态,具有较好的疗效,LIT联合IVIG治疗较单独应用IVIG效果更好.     

同种反应性自然杀伤细胞对小鼠单倍体骨髓移植后T细胞重建的影响

目的探讨同种反应性自然杀伤（NK）细胞对小鼠单倍体骨髓移植（BMT）后T细胞重建的可能影响。方法以（C57BL/6×BALB/c）BCF1（H-2d/b）为供鼠,BALB/c（H-2d）为受鼠,鼠龄6～8周,体质量16～20 g。建立小鼠单倍体BMT模型。根据移植物不同将实验分为单纯BMT组、非同种反应性NK（non-alloNK）细胞组、同种反应性NK（allo-NK）细胞组,移植后不同时间点以外周血CD3e的表达、外周血血清白细胞介素4（IL-4）、干扰素（IFN-γ）浓度等指标评价同种反应性NK细胞对T细胞重建的可能影响。结果移植后＋10 d受鼠外周血CD3e的表达allo-NK组较non-alloNK组显著增高,分别为（16.58±5.77）%、（8.64±3.60）%,差异具有统计学意义（P〈0.05）。＋30 d时allo-NK组IL-4的浓度显著低于单纯BMT组,分别为（9.73±2.08）pg/mL、（12.44±1.57）pg/mL,差异具有统计学意义（P〈0.05）。non-alloNK组IFN-γ的浓度显著高于单纯BMT组,分别为（98.78±33.07）pg/mL、（52.15±18.87）pg/mL,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论同种反应性NK细胞用于单倍体BMT小鼠,可能促进T细胞的重建,体内诱导Th1免疫反应的偏移。     

Adjuvant effects of salidroside from Rhodiola rosea L. on the immune responses to ovalbumin in mice

Salidroside, a major component of Rhodiola rosea L., was evaluated for its adjuvant effects on the immune responses in mice by ovalbumin (OVA) stimulation. BALB/c mice were immunized subcutaneously with OVA 100 μg or OVA 100 μg dissolved in saline containing alum (100 μg) or salidroside (12.5, 25, or 50 μg) on Days 1 and 15. Two weeks later (Day 28), blood samples were collected to analyze OVA-specific IgG, IgG1, and IgG2b antibodies. Meanwhile, splenocytes were harvested to assess lymphocyte proliferation, cytokines (IL-2, IL-4, and IFN-γ) production, and CD4⁺, CD8⁺ lymphocyte subsets. The results indicated that co-administration of salidroside with OVA significantly enhanced the ConA-, LPS-, and OVA-induced splenocyte proliferation, produced more IL-2, IL-4, IFN-γ, and IgG, IgG1, and IgG2b antibody levels, and increased the percentage of CD4⁺, CD8⁺ lymphocyte subsets than OVA alone. Thus, salidroside possess immunological adjuvant activity by regulating humoral and cellular immune responses in mice.     

NKT细胞在CFA促进的Th1型免疫应答中的作用

为探索CFA促进小鼠对蛋白质抗原产生Th1介导的特异性免疫应答的机制 ,我们用OVA +CFA和OVA +IFA免疫C5 7BL/6小鼠 ,并于第 3天、第 8天后用MACS +FACS法分离引流淋巴结中NKT细胞 ,在体外经CD3单抗刺激 2d后测定其分泌的细胞因子数量及格局。同时于免疫后第 8天分离引流淋巴结抗原特异性T细胞 ,测定其分泌细胞因子的格局 ;并于再次免疫后 2周检测小鼠血清抗体类型。ELISA结果显示 ,与OVA +IFA组相比 ,OVA +CFA免疫小鼠引流淋巴结NKT细胞和抗原特异性T细胞分泌IFN γ的能力均显著升高 (P <0 0 5 ) ,且血清抗体类型以IgG2a为主。表明CFA促进抗原特异性Th0细胞极化为Th1细胞可能是通过激活NKT细胞使之在免疫应答局部产生大量的IFN γ而实现的     

微波消融对小鼠黑色素瘤动物模型中T淋巴细胞亚群比例和功能的影响

目的研究微波消融（MA）对小鼠黑色素瘤动物模型中T淋巴细胞亚群的比例和功能的影响。方法建立C57BL／6J小鼠B16．BL6黑色素瘤皮下移植模型;流式细胞术、免疫荧光法分别检测微波消融后荷瘤小鼠瘤内浸润T淋巴细胞比例变化和主要组织相容性复合体-I（MHC-I）的表达;ELISA法检测微波消融对肿瘤内T细胞细胞因子干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、肿瘤环死因子-α（TNF-α）分泌的影响。结果微波消融组小鼠肿瘤内辅助性T细胞（Th）、杀伤性T细胞（CTL）比例显著增高,且肿瘤内细胞因子IFN-γ、IL．2、TNF-α、MHC—1分泌显著上调。结论微波消融有效增加CTL比例,并增强局部淋巴细胞抗肿瘤效应。