登革病毒对人血管内皮细胞分泌ET-1及PGI2的影响

目的　研究登革病毒感染对人血管内皮细胞分泌重要的血管活性物质ＥＴ１ 及ＰＧＩ２ 的影响,以了解登革出血热及登革休克综合征（ＤＨＦＤＳＳ）的发病机制。方法　用登革病毒Ⅱ型,感染人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ） ,于感染后４ 、２４ 、４８ 、７２ 及９６ 小时,分别收集病毒感染上清液,用放射免疫检测法测定ＥＴ１ 及ＰＧＩ２ 的含量。结果　登革病毒感染可使ＨＵＶＥＣ分泌ＥＴ１ 及ＰＧＩ２ 的能力受到明显抑制。在病毒感染早期（４ 小时）,ＨＵＶＥＣ分泌ＥＴ１ 及ＰＧＩ２ 的能力即受到明显抑制。登革病毒对ＨＵＶＥＣ分泌ＥＴ１ 抑制作用强烈而持久,至感染后９６ 小时,ＨＵＶＥＣ分泌ＥＴ１ 的能力与未受感染的阴性对照组比较,差异仍有显著性。然而,登革病毒对ＨＵＶＥＣ 分泌ＰＧＩ２ 的抑制作用,可随时间的推移而减弱,至感染后９６ 小时,ＨＵＶＥＣ分泌ＰＧＩ２ 的能力已达正常水平。结论　登革病毒感染可影响血管内皮细胞分泌血管活性物质ＥＴ１ 及ＰＧＩ２ 的功能,导致血管通透性增加和凝血、止血功能障碍。因此,登革病毒所致的血管内皮细胞功能障碍,可能是ＤＨＦＤＳＳ重要的发病机制     

胃肠癌及其转移淋巴结血管内皮细胞免疫细胞化学观察

胃肠癌及其转移淋巴结血管内皮细胞免疫细胞化学观察许凤莲，李玉林Ｎａｇｕｒａ等［１］利用表示免疫功能和凝血功能的诸指标把全身各种组织内的血管内皮细胞（ＥＣ）分为参与血液凝固过程和承担免疫机能的两大类。李玉林等［２］对正常肺及肺癌血管ＥＣ进行了研究，结果...     

ICAM-1和VCAM-1对活化淋巴细胞粘附血管内皮细胞的影响

某些研究结果表明，单核细胞可通过其表面的配体与细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）及血管间细胞粘附分子－１（ＶＣＡＭ－１）相互作用粘附于血管内皮细胞的表面。本研究采用体外培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵ－ＶＥＣ），研究了ＩＣＡＭ－１和ＶＣＡＭ－１对ＩＬ－２...     

血管内皮细胞功能障碍与心血管疾病治疗学关系

介于血流和血管平滑肌细胞之间特定战略位置的血管内皮细胞（ＥＣ）,在维持血管张力、调节组织器官血流、防止血小板聚集和血栓形成等方面有特殊临床意义〔１〕。血管内皮细胞功能障碍（ＥＤ）既可能是心脑血管疾病发病的始动环节,又可作为病情观察指标和治疗学手段改进的突破口。１　血管ＥＣ生理学功能及其标志物质１．１　ＥＣ的主要功能　ＥＣ代谢极为活跃,功能十分复杂。ＥＣ作为简单的血管内壁衬托组织和被动屏障的概念已经过时。ＥＣ总数约为１．２×１０１８,总面积大约４００Ｍ２,成人总重量１．５ｋｇ。与血管、心脏共同组成…     

香烟烟雾抽提物对肺动脉内皮细胞环氧合酶，血栓素合成酶mRNA水平及PGI_2，TXA_2生成的影响

本实验应用放免测定及分子杂交技术观察了香烟烟雾抽提物（ＣＳＥ）对培养的猪肺动脉内皮细胞环氧合酶，血栓素合成酶基因表达和ＰＧＩ＿２，ＴＸＡ＿２生成的影响，进一步从分子水平探讨由内皮细胞产生的前列腺素在ＣＳＥ影响肺血管张力和ＨＰＶ中的作用。结果发现：在常氧或缺氧下，ＣＳＥ可促使内皮细胞环氧合酶—１ｍＲＮＡ水平升高于对照组的１．５倍，而环氧合酶—２ｍＲＮＡ则分别比对照组高２倍和１倍。同时在常氧或缺氧时，ＣＳＥ使内皮细胞条件培养基中６—ｋｅｔｏ—ｐＧＦｌａ．明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。然而，不论常氧或缺氧时，ＣＳＥ不影响血栓素合成酶基因表达和ＴＸＡ２的生成。提示在常氧和缺氧时，ＣＳＥ所致的环氧合酶ｍＲＮＡ水平升高及ＰＧＩ２增加介导了猪吸烟时肺血管张力和ＨＰＶ的降低。     

循环内皮细胞的基本形态学特性研究

近年来，国外开展的循环内皮细胞（ＣＥＣ）检测能结合临床研究血管内皮细胞（ＶＥＣ）的变化，具有较高的临床应用价值，但对其基本形态学特性尚待阐明。本文采用细胞培养、免疫组化及扫描电镜等手段，对ＣＥＣ的数量、形态、ⅧＲ：Ａｇ分布及ＣＥＣ的形成过程进行了研究。结果表明：（１）我国健康人群的外周血中存在ＣＥＣ，其值为１．３±０．７／０．９μｌ；（２）ＣＥＣ具有独特的形态特点（与循环血中其它正常血细胞相比），如体大、无核、细胞呈皱缩、拆叠或扭曲状；（３）在脐静脉和ＥＣ培养片中均存在与ＣＥＣ形态极为相似的脱落ＥＣ，提示健康人群外周血中的ＣＥＣ可能来源于正常代谢过程中衰老的ＶＥＣ；（４）从ＶＥＣ向ＣＥＣ过渡是一个渐变的过程，其形态变化主要有细胞肿大、胞膜破坏和胞核脱落等。     

内皮素与外伤后迟发性缺血性脑损害

内皮素是一种由２１个氨基酸组成的血管活性多肽，包括ＥＴ－１、ＥＴ－２和ＥＴ－３三种类型，其中ＥＴ－１由血管内皮细胞产生。多种化学或物理因素对ＥＴ的合成和分泌起调节作用，血管平滑肌中有ＥＴ－Ａ和ＥＴ－Ｂ两种受体，ＥＴ－１选择性作用于ＥＴ－Ａ受体引起血管收缩。在蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）后的脑血管痉挛中，ＥＴ－Ａ受体介导的血管收缩起了重要作用。ＥＴ－１和ＥＴ－Ａ受体结合后通过激活平滑肌细胞膜上的ＰＩＰ２系统、Ｌ型Ｃａ２＋通道和Ｎａ＋／Ｈ＋交换等一系列信号系统而发挥作用。脑外伤后，机体的应激反应、血管内皮细胞损伤、出血、缺血、缺氧均可使ＥＴ的合成和释放增加，进而导致脑血管痉挛，发生迟发性缺血性脑损害。     

前列环素对内皮素生物学效应的拮抗作用

为探讨内皮素与前列环素间相互作用关系及生理意义，本工作在整体动物，离体血管条及培养的血管平滑肌细胞上发发现：ＰＧＩ２有效拮抗ＥＴ１引起的大鼠升压作用；剂量依赖地逆转ＥＴ１对小鼠的致死作用；抑制ＥＴ１促培养的大鼠ＶＳＭＣ增殖效应；减少大鼠离体系膜上动脉ＥＴ１的基础释放及凝血酶刺激的ＥＴ１释放。结果表明：ＰＧＩ２能有效拮抗ＥＴ的生物学效应，并提示血管内皮细胞所释放的ＰＧＩ２和ＥＴ间存在反馈调节。     

血管内皮生长因子受体研究进展

血管内皮生长因子受体ＫＤＲ和ｆｌｔ－１表达于血管内皮细胞（ＥＣ）和造血干细胞，ＫＤＲ似乎与ＥＣ增殖、分化有关，ｆｌｔ－１主要与ＥＣ的粘附、维持血管通透性有关，ＫＤＲ和ｆｌｔ－１表达有助于造血干细胞抗凋亡。     

蜕皮甾酮对肿瘤坏死因子致人脐静脉内皮细胞损伤的影响

目的和方法：实验以培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）为研究对象，应用大剂量肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）造成ＨＵＶＥＣ损伤，观察培养上清液血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）及ＨＵＶＥＣ的超微结构变化，研究蜕皮甾酮（ＥＤＳ）对内皮细胞损伤的影响。结果：大剂量ＴＮＦ作用于ＨＵＶＥＣ时，其培养上清液的ＡＣＥ非常明显增高，超微结构破坏；应用ＥＤＳ，则培养上清液的ＡＣＥ有所减少、超微结构的损害程度有所减轻。结论：ＥＤＳ能够减轻人血管内皮细胞的损伤，揭示了ＥＤＳ在抗血管内皮细胞损伤方面的价值。     

脑缺血再灌流家兔血液中循环内皮细胞变化及针刺对其的影响

利用缺血再灌流家兔模型研究变化规律，并探讨了脂质过氧化物与循环内皮细胞之间的关系，以期了解缺血再灌流损伤血管内皮细胞的受损情况及发生机理。实验共用家兔３３只，缺血组９只，其循环内皮细胞比假手术组增多（Ｐ＜０．０５）。再灌流组９只，其循环内皮细胞显著增多（与假手术组、缺血组比较，Ｐ均＜０．００１），结果显示了再灌流血管内皮细胞损伤程度较缺血组明显，同时可看到脂质过氧化物变化与循环内皮细胞数量变化有一致性。实验同时观察到针刺对再灌流出现的上述异常改变大多有明显的改善作用     

模拟失重兔在背─胸向超重作用后的脏器形态学的变化

失重飞行后航天员的超重耐力是下降的，为了探讨超重耐力下降的机理，因而观察了正常兔（ｎ＝１０）和模拟失重兔（ｎ２１４）在－４Ｇｘ离心机上作用３ｍｉｎ后脑、心、肺、肾四个脏器微血管和组织形态学的变化。结果是正常兔在－４Ｇｘ作用后四个脏器的微血管和小静脉充血，肺动脉充血，出现肺不张和肺扩张。模拟失重兔－４Ｇｘ作用后，以上变化较正常组明显加重，肺、心部位有明显出血症状。结果提示失重后超重耐力下降与失重所引起的组织形态学变化有关。     

微血栓大鼠循环内皮细胞,血浆内皮素和一氧化氮测定的结果分析

目的：对微血栓动物模型行普通肝素和低分子量肝素的治疗，通过内皮细胞计数（CEC）、内皮素（ET）、一氧化氮（NO）三项指标观察分析其血管内皮细胞损害及肝素的治疗效果。方法：对18只wistar大鼠行尾静脉注射高分子右旋糖苷（高右），制成微血栓动物模型。其中12只在高右基础上分别予普通肝素（普肝组，n＝6）和低分子量肝素（低肝组，n＝6）治疗。其余6只不治疗。另以5只wistar大鼠行尾静脉注射生理盐水为正常对照组（对照组，n＝5）。对上述各组作循环内皮细胞计数（CEC）、血浆内皮素（ET）及一氧化氮（NO）测定。结果：高右组CEC、ET高于对照组和治疗组（P＜0．05），NO则低于对照组和治疗组（P＜0．05）。治疗组的上述结果均有明显恢复至对照组的趋势。结论：微血栓大鼠有血管内皮损伤，普通肝素及低分子量肝素不仅能抗微血栓形成，且可促进血管内皮细胞功能恢复，其中以低分子量肝素为优。     

A novel flow cytometric approach to distinguish circulating endothelial cells from endothelial microparticles: relevance for the evaluation of endothelial dysfunction

Circulating endothelial cells (CEC) and endothelial microparticles (EMP) are emerging as markers of endothelial repair and activation/apoptosis. Although significant changes in the number of CEC and EMP in pathological conditions have been reported, their reliable identification and quantification still remain a technical challenge. Here, we present a novel methodology for the identification and quantitation of CEC and EMP based on multicolor flow cytometry. Using a lyse/no wash protocol, we observed that in 50 μl of peripheral blood, the large majority of events expressing an endothelial phenotype (CD45-/CD146+/CD34+) are due to non-nucleated particles (DRAQ5-) carrying mitochondrial activity (MitoTracker+) and, therefore, classified as EMP. We enumerated circulating EMP by single platform absolute count in a lyse/no wash four-color flow-cytometric procedure, which allowed the distinction, within the whole endothelial compartment, of EMP derived from endothelial progenitors (CD45-/CD146+/CD34+/CD117+) and from mature endothelial cells (CD45-/CD146+/CD34+/CD117-). A significant increase in both subsets was observed in patients with diabetes mellitus. Thus, this simple and highly reproducible method may be useful for monitoring endothelial dysfunction in clinical settings.     

胚胎血管发育早期PDGF-BB对血管平滑肌细胞趋化的影响

目的：建立胚胎血管发育早期血管平滑肌细胞（VSMCs）趋化模型，并观察胚胎血管发育早期血小板源性生长因子-BB（PDGF-BB）对VSMCs趋化的影响。方法：采用转染平滑肌特异性蛋白SM22α启动子控制下表达增强型绿色荧光蛋白（GFP）报告基因载体的胚胎干细胞制备拟胚体，然后接种于under-agarose凝胶作为平滑肌细胞趋化模型。用慢速视频显微摄像技术观察拟胚体分化后表达GFP的VSMCs，分析比较不同浓度PDGF-BB对VSMCs分化和移行的影响。结果：在under-agarose凝胶中，拟胚体在无外源性生长因子存在的条件下可自发向心肌细胞、内皮细胞和VSMCs分化。拟胚体贴壁分化20 d时，对照组及4 种浓度PDGF-BB（5 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L）组VSMCs的平均迁移速率分别为（94.07±23.80）μm/h、（118.08±31.63）μm/h、（173.53±24.58）μm/h、（380.74±39.56）μm/h和（335.62±32.16）μm/h，峰值浓度为20 μg/L。经浓度大于10 μg/L PDGF-BB处理后，VSMCs向PDGF-BB孔方向移行，对照组、低浓度PDGF-BB组VSMCs呈不规则性迁移。结论：该模型能够模拟胚胎血管发育早期全过程，可用于研究不同生长因子对VSMCs趋化的影响。外源性PDGF-BB能定向诱导胚胎血管发育早期VSMCs迁移，其定向趋化作用在一定浓度范围内呈量效关系。     

急性心肌梗塞患者外周血中循环内皮细胞含量的改变及凋亡的检测

目的应用我所新建立的循环内皮细胞（Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ Ｃｅｌｌｓ，ＣＥＣ）的分离计数方法计数急性心肌梗塞患者外周血中循环内皮细胞含量的改变并检测其凋亡。方法Ｐｅｒｃｏｌｌ密度梯度离心后，将其先后标记以鼠抗人ＣＤ３１抗体，ＦＩＴＣ－羊抗鼠ＩｇＧ及碘化丙啶。应用流式细胞伙计数ＣＤ３１阳性细胞的百分比，并通过检测ＣＥＣ的ＤＮＡ倍体含量检测其凋亡状态。结果急性心肌梗塞组（ｎ＝１６）与正常对照组（ｎ＝１６）的 ＣＥＣ分别为 ６２．９±２４．５／ｍｌ及 ２９． ９±９．１／ｍｌ全血，两者有非常显著性差异（Ｐ<０．０００１）。两组均为双倍体ＤＮＡ，无亚二倍体峰的出现，说明无细胞凋亡的发生。结论此方法克服了以往ＣＥＣ研究方法的缺点，提高了特异性及回收率，使ＣＥＣ真正成为来自活体的特异的且直接反映血管损伤的量化指示物。     

ATP content in platelets at various stages of ontogeny

The intracellular content of ATP was determined by a bioluminescence method in the platelets of rabbits of two age groups. The results showed that platelets of rabbits aged 7–8 days contain 5.8±0.7 μmoles and platelets of adult rabbits 8.9±0.9 μmoles ATP per 10¹¹ cells. The difference discovered is not due to the procedure used to isolate platelets from the blood.     

Reduced hypoxic ventilatory response with preserved blood oxygenation in yoga trainees and Himalayan Buddhist monks at altitude: evidence of a different adaptive strategy?

Yoga induces long-term changes in respiratory function and control. We tested whether it represents a successful strategy for high-altitude adaptation. We compared ventilatory, cardiovascular and hematological parameters in: 12 Caucasian yoga trainees and 12 control sea-level residents, at baseline and after 2-week exposure to high altitude (Pyramid Laboratory, Nepal, 5,050 m), 38 active lifestyle high-altitude natives (Sherpas) and 13 contemplative lifestyle high-altitude natives with practice of yoga-like respiratory exercises (Buddhist monks) studied at 5,050 m. At baseline, hypoxic ventilatory response (HVR), red blood cell count and hematocrit were lower in Caucasian yoga trainees than in controls. After 14 days at altitude, yoga trainees showed similar oxygen saturation, blood pressure, RR interval compared to controls, but lower HVR (−0.44 ± 0.08 vs. −0.98 ± 0.21 l/min/m/%SaO₂, P < 0.05), minute ventilation (8.3 ± 0.9 vs. 10.8 ± 1.6 l/min, P < 0.05), breathing rate (indicating higher ventilatory efficiency), and lower red blood cell count, hemoglobin, hematocrit, albumin, erythropoietin and soluble transferrin receptors. Hypoxic ventilatory response in monks was lower than in Sherpas (−0.23 ± 0.05 vs. −0.63 ± 0.09 l/min/m/%SaO₂, P < 0.05); values were similar to baseline data of yoga trainees and Caucasian controls, respectively. Red blood cell count and hematocrit were lower in monks as compared to Sherpas. In conclusion, Caucasian subjects practicing yoga maintain a satisfactory oxygen transport at high altitude, with minimal increase in ventilation and with reduced hematological changes, resembling Himalayan natives. Respiratory adaptations induced by the practice of yoga may represent an efficient strategy to cope with altitude-induced hypoxia.     

阿托伐他汀钙对高血压大鼠血管内皮细胞的保护作用

目的:观察高血压状态下阿托伐他汀钙对SD大鼠胸主动脉血管内皮细胞的保护作用。方法:构建两肾一夹SD大鼠肾性高血压模型。研究动物随机分为高血压组、他汀治疗组和假手术组,每组8只,术后第4周他汀治疗组给予阿托伐他汀钙20mg·kg-1.d-1灌胃8周。术后第4、12周测血压、血脂,第12周通过扫描电镜方法观察胸主动脉内皮细胞层的完整性,检测血液中循环内皮细胞数量,并测定循环内皮祖细胞(CEPCs)的数量及增殖能力、黏附能力及凋亡情况。结果:他汀治疗组大鼠胸主动脉内皮细胞受损轻于高血压组,但重于假手术组,高血压组、他汀治疗组和假手术组大鼠循环内皮细胞数量(5.9×106、3.9×106、2.0×106)与CEPCs凋亡率(22.1%±2.1%、13.4%±1.6%、7.4%±1.3%)依次降低(均P0.01);而CEPCs数量(21.63±2.33、40.38±6.00、65.38±2.97)、CEPCs增殖能力(0.13±0.01、0.17±0.01、0.29±0.03)与CEPCs黏附能力(12.25±2.49、21.50±2.20、28.88±2.85)依次增高(均P0.01)。结论:(1)高血压状态可导致大鼠血管内皮细胞严重受损,CEPCs数量增加,而CEPCs数量与功能降低,凋亡率增高,继而引起CEPCs对血管内皮细胞的修复能力降低。(2)阿托伐他汀钙对血管内皮细胞具有直接保护作用,并可能通过提高CEPCs数量及功能、降低CEPCs凋亡、增强CEPCs对血管内皮细胞的修复能力而发挥作用。     

应用内皮细胞平铺技术观察多器官衰竭内皮细胞的形态

应用内皮细胞平铺技术观察家兔多器官衰竭血管内皮细胞的形态变化。结果，平铺切片显示多器官衰竭时内皮细胞受到明显损伤，表现为明显的变性、坏死和脱落。证实内皮细胞损伤在多器官衰竭发病过程中是一个重要因素