钾离子通道基因与耳蜗听觉功能

钾离子通道与多种疾病有关,钾离子通道基因突变可以造成综合征型和非综合征型听力下降,表明在耳蜗听觉生理过程中,钾离子发挥着重要作用。耳蜗内淋巴液中富含钾离子,维持内淋巴内的高电位,转运大多数正电荷,机械电转导时在细胞顶部发生去极化。毛细胞的基底外侧(basolateral)通道中有KCNQ4、KCNN2和KCNMA1钾离子通道,顶端(apical)钾离子通道有KCNQ1/KCNE1,另外位于血管纹中间细胞的KCNJ10(Kir4.1)钾离子通道产生内淋巴电位。目前已经发现的与人类耳聋有关的钾离子通道有KCNQ4和KCNQ1/KCNE1。     

耳蜗血管纹产生耳蜗内电位的机理

耳蜗内淋巴具有独特的离子成分,以及相对于外淋巴＋80mv＋90mv的耳蜗内电位。血管纹对维持耳蜗内环境的稳定有重要作用,它在向内淋巴转运钾离子的过程中产生耳蜗内电位。本文对血管纹产生耳蜗内电位的各种相关机理的研究进展进行综述。     

KCNQ1基因缺失致小鼠听觉丧失和耳蜗形态异常

由KCNQ1基因编码的KCNQ1蛋白分布于内耳血管纹边缘细胞的顶膜，KCNQ1是参与维持耳蜗钾离子代谢的重要通道。我们应用听性脑干反应（auditory brainstem response，ABR）和耳蜗内电位（endococldear potential，EP）检测KCNQ1^＋/＋、KCNQ1^＋/- KCNQ1^-/- 3种小鼠的听觉生理功能，并观察其耳蜗形态变化，以了解KCNQ1基因和离子通道在维持耳蜗钾循环及听觉生理中的作用。     

肾上腺素β受体和胆碱能M受体对边缘细胞钾离子转运的调控

耳蜗血管纹边缘细胞向内淋巴转运钾离子对耳蜗内淋巴的生成,电化学特征的维持起到直接作用.钾离子经边缘细胞转运的过程除了受细胞内外离子浓度、膜电压的调控外还受细胞膜受体及细胞内信号转导系统调节.目前研究发现肾上腺素β受体促进边缘细胞的钾离子转运;胆碱能M受体则抑制边缘细胞的钾离子转运.肾上腺素β受体和胆碱能M受体对边缘细胞钾离子转运的调控作用具有重要的临床意义.     

豚鼠耳蜗血管纹边缘细胞钾离子通道特性的研究

目的 研究单个豚鼠耳蜗血管纹边缘细胞的基本电生理特性。方法 应用耳蜗血管纹组织块培养技术和全细胞膜片钳技术，观察单个培养的豚鼠血管纹边缘细胞在电压钳模式下的电流特性。结果 边缘细胞上记录到钾离子电流，该钾通道有以下特性：①具有电压依赖性；②通道的活动可被4-氨基吡啶（4-aminopyridine，4-AP）和四乙铵（tetraethylammonium，TEA）在相对高浓度下阻滞；③细胞外钙离子浓度的减少可导致该钾通道电流的降低。结论 豚鼠耳蜗血管纹边缘细胞钾离子通道电流包括钙离子依赖性钾电流、外向延迟整流钾电流和A型钾电流。     

耳蜗缘细胞中三磷酸腺苷囊泡的研究现状

耳蜗外侧壁包括螺旋韧带和血管纹。国内外研究发现耳蜗血管纹缘细胞中存在大量的各种形状的囊泡结构，这些囊泡由单层或双层膜包被，并常含有绒毛状电子致密物，此囊泡可能与离子的转运、三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）的释放密切相关。有人证实囊泡中的ATP不是来源干线粒体。有学者观察到了囊泡明显的胞吐活动，但是不能确定ATP是否通过胞吐作用分泌至内淋巴。缘细胞中的ATP囊泡是否就是溶酶体，还有待更深入的研究证实。现结合国内外文献，就耳蜗缘细胞中ATP囊泡的研究现状做一综述。     

耳蜗血管纹产生耳蜗内电位的机理

耳蜗内淋巴具有独特的离子成分,以及相对于外淋巴 80mv~ 90mv的耳蜗内电位。血管纹对维持耳蜗内环境的稳定有重要作用,它在向内淋巴转运钾离子的过程中产生耳蜗内电位。本文对血管纹产生耳蜗内电位的各种相关机理的研究进展进行综述。     

头面部常规~（60）钴照射及顺铂应用对豚鼠耳蜗的影响

将实验豚鼠分成￣（６０）钴７０Ｇｙ照射组，￣（６０）钴５０Ｇｙ照射组，顺铂治疗组，￣（６０）钴５０Ｇｙ照射加顺铂治疗组，对照组，共５组每组９耳。顺铂腹腔注射２ｍｇ／ｋｇ／次，共１０次。用电反应测听仪分别在实验前、￣（６０）钴照射后或应用顺铂后１０周测定ＡＢＲ阈值。对全耳蜗铺片基底膜上的内、外毛细胞及柱细胞缺损数进行定量观察计数。结果各组实验耳在ＡＢＲ阈值测定上均无显著性差异。在基底膜内、外毛细胞及柱细胞缺损方面，提示随着放射剂量的增大，耳蜗毛细胞的损伤也随之增加。应用顺铂后可加重放射对耳蜗的损害，但按临床常规应用顺铂的剂量则对耳蜗是安全的。     

豚鼠耳蜗灌注的流速安全阈

行全耳蜗人工外淋巴灌注，观察不同灌注速度对蜗内电位的影响，并作耳蜗连续切片，观察内耳结构的形态变化。灌注速度分别为：５μｌ／ｍｉｎ，５０μｌ／ｍｉｎ，１００μｌ／ｍｉｎ，２５０μｌ／ｍｉｎ，５００μｌ／ｍｉｎ。当灌注速度为１００μｌ／ｍｉｎ时可使蜗内电位下降，但停灌后电位可恢复。而灌注速度进一步提高为２５０μｌ／ｍｉｎ以上后，蜗内电位即出现不可逆的下降。在灌注速度分别为５μｌ／ｍｉｎ，５０μｌ／ｍｉｎ和１００μｌ／ｍｉｎ时，连续切片观察未发现异常。在２５０μｌ／ｍｉｎ组中有１耳发现有前庭膜塌陷。在５００μｌ／ｍｉｎ组中发现３耳有前庭膜塌陷或破裂。人工外淋巴灌注速度不宜过快，在豚鼠耳所作试验提示，流速以不超过１００μｌ／ｍｉｎ为宜。     

卡那霉素对豚鼠耳蜗碳酸酐酶活性的影响

本实验对豚鼠在卡那霉素（ＫＭ）致聋后和对照组进行了碳酸酐酶（ＣＡＨ）组织化学活性研究，结合图象分析技术和听觉脑干反应（ＡＢＲ）测试，观察豚鼠用ＫＭ后听力发生变化时耳蜗ＣＡＨ的变化。探讨了耳蜗内、外毛细胞区及血管纹ＣＡＨ的变化及其与听功能的关系。结果指示，ＫＭ所致听力损伤与耳蜗ＣＡＨ的变化有关。     

突发性聋与内淋巴积水

内淋巴积水一直被看作梅尼埃病的病理基础，但目前的有关研究表明某些突发性聋患者中也存在内淋巴积水，且所占比例不容忽视。本文从特发性突聋的病因、病理、耳蜗电图改变、积水的比率和意义以及突聋的治疗等方面来综述突发性聋与内淋巴积水关系的研究进展。     

碳酸酐酶在豚鼠耳蜗的分布及其意义

本文应用组织化学和超微细胞化学方法显示碳酸酐酶（ＣＡＨ）在豚鼠血管纹（ＳＶ）和Ｃｏｒｔｉ器中的分布。光镜观察到ＳＶ和Ｃｏｒｔｉ器均含有丰富的ＣＡＨ，电镜观察到ＳＶ的边缘细胞和外毛细胞（ＯＨＣ）呈强阳性反应，ＳＶ的中间细胞和基底细胞、内毛细胞（ＩＨＣ）见到少量反应产物。结果表明耳蜗ＣＡＨ的分布与其功能有密切关系。     

硝普钠耳毒作用的内耳靶组织

作为细胞内及细胞间的一种信息传递分子，一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，Ｎ０）成为近年来医学界的一个研究热点。而硝普钠（ｓｏｄｉｕｍｎｉｔｒｏｐｒｕｓｓｉｄｅ，ＳＮＰ）作为ＮＯ的供体亦被广泛应用于动物及临床实验。晚近报道，ＳＮＰ可抑制听神经复合动作电位（ｃｏｍｐｏｕｄａｃｔｉｏｎｐｏｔｅｎｔｉａｌ，ＣＡＰ），其耳毒作用机制尚不清楚。本实验旨在结合各种电生理学方法及病理学检查，探讨ＳＮＰ耳毒作用的靶组织，并间接观察ＮＯ对耳蜗各结构功能的影响。结果发现：圆窗膜上或鼓阶内给予不同浓度ＳＮＰ１μｌ后，豚鼠耳蜗血流量增加，而蜗内电位（ｅｎｄｏｃｏｃｈｌｅａｒｐｏｔｅｎｔｉａｌ，ＥＰ）迅速下降，ＣＡＰ反应阈明显提高，耳蜗微音电位（ｃｏｃｈｌｅａｒｍｉｃｒｏｐｈｏｎｉｃ，ＣＭ）及耳声发射畸变产物（Ｆ２－Ｆ１）之耳蜗微音电位（ｃｏｃｈｌｅａｒｍｉｃｒｏ－ｐｈｏｎｉｃｑｕａｄｔａｔｉｃｄｉｓｔｏｒｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｔ，ｃｍＱＤＴ）下降；基底膜振动速度反应（ｖｅｌｏｓｉｔｙｒｅｓｐｏｎｓｅｏｆｂａｓｉｌａｒｍｅｍｂｒａｎｅｖｉｂｒａｔｉｏｎ，ＶＲＢＭＶ）下降；内放射纤维水肿。实验揭示，ＳＮＰ急性耳毒作用具有浓度及时间相关性，     

Smad4 基因缺陷小鼠耳形态学改变的初步研究

目的研究Smad4基因缺陷小鼠中耳及内耳的病理形态学改变，探讨Smad4基因对中耳及内耳发育的影响。方法利用建立的Smad4基因敲除嵌合体小鼠模型，通过火棉胶包埋HE染色观察Smad4（＋/＋）与Smad4（＋／-）小鼠的情况；通过耳蜗基底膜铺片琥珀酸脱氢酶染色观察Smad4（＋／＋）与Smad4（＋／-）小鼠的耳蜗内、外毛细胞数量；应用扫描电镜观察Smad4（＋／＋）与Smad4（＋／-）小鼠的内耳超微结构。结果火棉胶包埋HE染色显示：Smad4（＋／＋）与Smad4（＋／-）小鼠耳蜗大小、耳蜗转数均未见异常，中耳鼓膜正常，听小骨锤骨、砧骨、镫骨及关节结构正常，骨细胞排列紧密，Smad4（＋／＋）与Smad4（＋／-）之间没有差异。Smad4（＋／＋）小鼠耳蜗Corti器结构完整，未圯异常，血管纹厚薄均匀，血管腔腔径大小均匀。内、外毛细胞及内外柱细胞、支持细胞无异常，螺旋神经节细胞未见缺失；Smad4（＋／-）小鼠耳蜗钩端至-回外毛细胞轮廓不清，呈均质化，细胞核消失。Deiter细胞核下沉或消失，相应的螺旋神经节细胞大量缺失。耳蜗基底膜铺片琥珀酸脱氢酶染色显示：Smad4（＋／-）和Smad4（＋／＋）小鼠均有明显的局限于Corti’S器底同的外毛细胞缺失，其中Smad4（＋／-）小鼠外毛细胞的缺失，比Smad4（＋／＋）小鼠更明显（P〈0．01），两个基因型小鼠的内毛细胞均未见缺失。扫描电镜显示：Smad4（＋／＋）小鼠未见明显病理变化，Smad4（＋／-）小鼠耳蜗钩端外毛细胞静纤毛广泛散在性缺失，外毛细胞的表皮板穿孔、自溶，其周边与指状突小皮板断离。两个基因型小鼠耳蜗内毛细胞纤毛均未见明显改变。结论Smad4基因敲除后内耳形态发生明显改变，表明Smad4基因缺陷导致小鼠内耳细胞损害。     

KCNQ1在小鼠耳蜗血管纹的表达及在听觉中的意义

目的探讨KCNQ1在耳蜗侧壁血管纹的表达及其在听觉中的作用。方法以不同基因型小鼠KC-NQ1-/-(突变纯合子)、KCNQ1 /-(杂合子)和KCNQ1 / (野生型)以及C57BL/6J小鼠为实验对象,采用免疫组织化学和ABR检测技术,检测KCNQ1在小鼠耳蜗血管纹的表达及其听力。结果KCNQ1蛋白阳性颗粒集中在小鼠耳蜗血管纹边缘细胞顶膜。KCNQ1 / 小鼠的听力正常,短声ABR的阈值为36.67±7.13dBSPL;KCNQ1 /-小鼠听力低于同窝KCNQ1 / 野生型鼠,短声ABR的阈值为38.25±9.35dB SPL;KCNQ1-/-小鼠呈现全聋,ABR在100dB SPL时仍无反应。结论KCNQ1是位于耳蜗侧壁血管纹边缘细胞的重要通道蛋白,在维系耳蜗听觉功能中有重要作用。KCNQ1通道蛋白的缺失或功能受限可以不同程度地影响耳蜗的听觉功能。     

神经营养素-3对豚鼠耳蜗传入神经元兴奋毒性损伤的保护作用

目的 观察谷氨酸（glutamate，Glu）致豚鼠耳蜗Ⅰ型螺旋神经节细胞兴奋毒性损伤后，耳蜗局部应用神经营养素-3（neurotrophin-3，NT-3）对Ⅰ型螺旋神经节细胞的保护作用及对复合动作电位（CAP）反应阈的影响。方法 28只豚鼠左耳安置圆窗电极检测CAP的变化。然后分为NT-3组（实验组5只）、Glu组（实验对照组8只）、Hank’s液组（HBSS组）（正常对照组5只）、Blank组（空白对照组10只），前三组分别在药物灌注术后1天及4周测CAP反应阈，术后4周处死，Blank组术后1天测CAP反应阈后处死，观察Ⅰ型螺旋神经节细胞和神经纤维的显微和超微结构变化。结果 NT-3组、Glu组术后1天CAP反应阈明显增高，NT-3组术后4周CAP反应阈明显降低，与HBSS组及Blank组比较均有显著性差异（P〈0．01）；术后4周NT-3组Ⅰ型螺旋神经节细胞数目的减少幅度明显小于Glu组（P〈0．01），NT-3组与HBSS组和Blank组相比细胞数有显著差异（P〈0．01）。HBSS组与Blank组相比，细胞数、CAP反应阈和组织学改变均无显著差异（P〉0．05）。结论 经外淋巴腔灌注谷氨酸能导致豚鼠耳蜗CAP反应阈提高和Ⅰ型螺旋神经节细胞死亡。耳蜗兴奋性损伤发生后60分钟，局部应用NT-3（15μg／ml）可减轻谷氨酸对耳蜗螺旋神经节细胞兴奋性毒性损伤，提示NT-3可用于神经性耳聋的治疗。     

瞬态诱发性耳声发射和蜗后病变

本文总结２８例４２耳蜗后病变的瞬态诱发性耳声发射（ＴＥＯＡＥｓ）表现，不同性质蜗后病变的ＴＥＯＡＥｓ出现率分别为：中枢性低频感音神经性聋２８／２８（１００％）；听神经瘤３／１１（２７．３％）；额骨骨折２／２；脑干肿瘤０／１。对蜗后病变的ＴＥＯＡＥｓ、听性脑干电反应（ＡＢＲ）、耳蜗电图（ＥＣｏｃｈＧ）和纯音听力之间的关系进行比较和讨论。ＴＥＯＡＥｓ结合其它听力学检查方法会有助于蜗性和蜗后病变的鉴别诊断。     

胎儿耳蜗外侧壁微循环的发育及形态学研究

采用心内灌注或蜗窗灌注固定法，对１６侧妊娠１６周至足月胎，儿耳蜗进行全耳蜗外侧壁软组织铺片观察。结果表明：①各胎龄胎儿耳蜗外侧壁微循环组成、分布、形态结构差别不大；②胎儿耳蜗外侧壁微循环分为两大相对独立的亚系，即与内、外淋巴相关的微循环亚系；③采用心内灌注固定法研究耳蜗微循环的形态结构优于其他固定法，可排除血管内血球，使微血管清晰易辨。讨论了胎儿耳蜗外侧壁微循环的发育、组成、分布及循环径路。     

自由基清除剂二甲基亚砜对庆大霉素耳蜗毒性的影响

观察豚鼠同时注射二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）与庆大霉素（ＧＭ）及单独注射ＧＭ等几组动物后，耳蜗听功能、扫描电镜所见及耳蜗和血清中脂质过氧化物（ＬＰＯ）丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化。结果表明ＧＭ＋ＤＭＳＯ组动物ＡＰ阈值较ＧＭ组明显降低，ＡＰ（Ｎ＿１）潜伏期ＧＭ组较ＧＭ＋ＤＭＳＯ组显著延长，耳蜗扫描电镜显示ＧＭ＋ＤＭＳＯ组毛细胞受损程度较ＧＭ组明显为轻。耳蜗中ＭＤＡ检测表明，ＧＭ组耳蜗中ＭＤＡ含量较ＧＭ＋ＤＭＳＯ组明显增高（Ｐ＜０．０１）。提示自由基引起耳蜗ＬＰＯ可能是ＧＭ耳毒性机制之一；ＤＭＳＯ可减轻ＧＭ的耳毒性。     

离体豚鼠耳蜗灌流一氧化氮供体对耳蜗组织中环磷酸鸟苷含量的影响

目的 通过对离体的豚鼠耳蜗即刻灌流一氧化氮供体（DEA－NO）及可溶性鸟苷酸环化酶（sGC)抑制剂（ODQ），来改变耳蜗组织中环磷酸鸟苷（cGMP）含量，以便进一步研究一氧化氮／环磷酸鸟苷（NO／cGMP)途径在耳蜗中的调节作用。方法 24只纯种白色雄性豚鼠完全随机分为三组，分别灌流人工外淋巴基础液、DEA－NO／人工外淋巴基础溶液、ODQ＋DEA－NO／人工外淋巴基础溶液，收集耳蜗组织标本；用放射免疫的方法测定耳蜗组织中cGMP的含量。结果 向离体耳蜗中灌注1mM DEA-NO溶液可以引起耳蜗组织中cGMP含量的显著增加，先灌注ODQ，后灌注1mM DEA-NO，耳蜗组织中cGMP合成量明显少于单独灌注1mM DEA-NO，但仍高于对照组。结论 对离体的豚鼠耳蜗即刻灌流一氧化氮供体（DEA－NO）及可溶性鸟苷酸环化酶（sGC)抑制剂（ODQ），可以作用于NO／cGMP途径，改变耳蜗组织中cGMP含量，同时用放射免疫测定耳蜗组织中cGMP含量的方法是可行的。