还元注射液对脑出血大鼠脑组织结构的影响

目的　研究还元注射液对脑出血大鼠脑组织的保护作用。方法　将SD大鼠随机分为正常组、模型组和还元组。后两组于造模后 2h分别腹腔注射生理盐水和还元注射液。第 4天断头处死迅速取脑 ,制成光镜、电镜片 ,观察组织学变化。结果　①正常组 :光镜、电镜下脑组织结构正常。②模型组 :光镜下血肿范围大 ,充满变性红细胞 ,脑组织变性、坏死 ,毛细血管严重水肿 ;电镜下 ,神经细胞和胶质细胞明显肿胀 ,胞浆内大部分细胞器消失 ,染色质消失 ,神经细胞脱髓鞘、轴浆消失。③还元组 :光镜下血肿形成囊肿 ,与周围脑组织界限不十分明显 ,血肿内有大量的胶质细胞和巨噬细胞 ,血肿周围无明显变性神经细胞 ,毛细血管无明显水肿 ;电镜下 ,神经细胞和胶质细胞无明显肿胀 ,胞浆内细胞器结构基本完整 ,神经纤维结构大致正常。结论　还元注射液对脑出血大鼠脑组织结构具有保护作用     

葛根素通过mTOR 信号通路抑制小胶质细胞活化治疗慢性术后痛实验研究

目的：基于mTOR信号通路探究葛根素对慢性术后痛的影响及其作用机制。方法：50只大鼠随机分成对照组、假手术组、模型组、葛根素组和抑制剂组,采用大鼠皮肤/肌肉切口牵拉（SMIR）的慢性疼痛模型,葛根素组连续7 d腹腔注射葛根素[100 mg/（kg·d）],抑制剂组连续7 d腹腔注射雷帕霉素[1 mg/（kg·d）],观察镇痛效果。采用机械性刺激缩爪阈值（MWT）作为痛阈检测指标检测各组大鼠痛阈变化。取各组大鼠第7天的脊髓标本,用Western blot方法检测脊髓组织mTOR、p-mTOR的蛋白水平。免疫荧光染色法探究mTOR在脊髓细胞的定位及观察脊髓背角小胶质细胞的激活情况。结果：葛根素、雷帕霉素可以缓解SMIR引起的痛觉过敏,葛根素对脊髓组织中mTOR的表达无影响,但降低了脊髓组织中p-mTOR的蛋白表达水平,mTOR在脊髓背角与小胶质细胞特异性标记物共定位,葛根素、雷帕霉素可以抑制脊髓小胶质细胞的激活。结论：葛根素可通过抑制mTOR的磷酸化减轻小胶质细胞的激活治疗慢性术后痛。     

葛根素对实验性脑出血大鼠偏瘫状态和脑组织NO含量的影响

目的:观察葛根素对脑出血急性期大鼠的影响,探讨葛根素对脑出血的治疗作用及其作用机制。方法:采用立体定向胶原酶尾状核注射法造模。观察葛根素对脑出血大鼠神经功能障碍程度的影响,并检测大鼠脑组织一氧化氮(NO)含量的变化。结果:葛根素组的偏瘫症状明显轻于模型组,而NO含量明显高于模型组,统计学分析有显著意义(P<0.01)。结论:葛根素对大鼠脑出血后的神经功能障碍有一定的改善作用,可能与其提高脑出血急性期脑组织NO含量有关。     

洋葱黄酮类提取物对大鼠脑出血后血肿周围活化小胶质细胞及炎症因子的抑制作用

目的研究洋葱黄酮类提取物对不同时间点脑出血模型大鼠血肿周围活化小胶质细胞数量及脑组织促炎性因子释放的影响,探讨洋葱黄酮类提取物治疗脑出血的可能机制。方法 100只Wistar大鼠用于制备脑出血动物模型,造模成功90只。其中脑出血组(40只)、洋葱黄酮类提取物干预组(简称干预组,40只)和假手术组(10只)。造模过程中脑出血组和干预组均向大鼠定位部位注射自体血100μL,同时干预组予洋葱黄酮类提取物(0.2 m L/10 g体重,每日2次)灌胃给药;脑出血组和假手术组未进行药物干预。造模后各组再以6、24、48、72 h和7 d为时间点分5个亚组,干预组和脑出血组每个亚组8只,共10组,假手术组每个亚组2只,共5组。采用Garcia JH评分法观察大鼠不同时间点的神经功能;采用HE染色观察各时间点大鼠脑组织的损伤程度;采用免疫组织化学染色法观察不同时间点大鼠血肿周围活化的小胶质细胞;采用ELISA法检测不同时间点大鼠血肿脑组织促炎因子TNF-α与IL-1β表达。结果脑出血组注入自体血后,血肿周围出现变性坏死区,细胞排列不整齐,核形态不整,部分核皱缩、髓质均片状间质水肿,且随着时间推移,变性坏死区域扩大外,细胞周围出现空白区,细胞分布不均匀,神经元细胞数减少,同时有淋巴细胞及中性粒细胞浸润;洋葱黄酮类提取物干预后,对应时间点的细胞坏死,细胞排列及核形态明显减轻,炎性细胞浸润减少。与假手术组比较,脑出血组5个时间点行为学评分均降低,活化的小胶质细胞数目增多,血肿脑组织中TNF-α及IL-1β表达升高,差异均有统计学意义(P0.01)。与脑出血组比较,干预组大鼠出血后48、72 h和7 d时间点行为学评分升高,小胶质细胞的活化数目减少,TNF-α及IL-1β表达降低,差异均有统计学意义(P0.01)。结论采用乙醇回流法从洋葱中提取的黄酮类物质可能通过抑制脑出血后血肿周围小胶质细胞的活化及促炎因子的释放,而改善脑出血模型大鼠的症状。     

电针对局灶性脑缺血大鼠少突胶质细胞及小胶质细胞的影响

目的:观察电针对局灶性脑缺血大鼠缺血灶周围区皮层不同时间段少突胶质细胞及小胶质细胞反应性变化的影响,进一步揭示针刺治疗脑缺血疾病的可能作用机制。方法:雄性SD大鼠90只,随机分为3组:假手术组、模型组和电针组,各组又分为术后1 h,1 d、3 d、7 d及21 d组5个时间段亚组,每个亚组6只。模型组和电针组采用改良线栓法阻塞大脑中动脉建立局灶性脑缺血模型,假手术组只暴露大鼠颈内动脉,不予阻塞。电针组取百会、大椎穴,选用疏密波,留针30 min,每天1次;其他2组不予针刺处理。分别于术后1 h,1 d,3 d,7 d和21 d后处死大鼠,进行取材。用透射电镜观察不同时间段各组大鼠缺血灶周围区皮层的少突胶质细胞的超微结构;用蛋白标记物A2B5,O4,CNPase分别标记前体少突胶质细胞、未成熟少突胶质细胞、成熟少突胶质细胞,用OX42标记小胶质细胞,观测各组大鼠缺血灶周围区皮层的A2B5,O4,CNPase,OX42蛋白表达变化。结果:少突胶质细胞及小胶质细胞在缺血性脑损伤后肿胀、增多,电针组的胶质细胞肿胀程度较模型组减轻,并能促进少突胶质细胞的增生而抑制小胶质细胞的增生;模型组A2B5,CNPase,OX42的表达在术后明显高于假手术组(P<0.05或P<0.01),而O4表达明显降低(P<0.01);电针组干预后A2B5,O4,CNPase均明显升高(P<0.05或P<0.01),而OX42明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:电针可减轻脑缺血引起的胶质细胞结构性损伤,促进少突胶质细胞的增生,抑制小胶质细胞过度增生。从而推测其可能下调了胶质细胞活化后的一系列损伤反应,更有利于发挥胶质细胞对神经元的保护效应。     

电针对脊髓损伤后星形胶质细胞增生的影响

目的:探讨电针治疗脊髓损伤的机理.方法:选用成年Wistar大鼠,Allen氏法制备脊髓损伤模型,分别应用督脉电针治疗3 d、1 w、2 w或4 w,以正常组和损伤组作对照.应用电镜、免疫组化、原位杂交显色观察星形胶质细胞的形态、数量的变化;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测损伤脊髓星形胶质细胞特异性标志蛋白胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)mRNA表达变化.结果:电镜观察,术后3 d,损伤组星形胶质细胞肿胀明显;1 w时见反应性增生,体积增大,数量增加;4 w时,形态基本正常.电针组胶质反应轻,线粒体、核糖体增多,常见吞噬现象.免疫组化见,同一动物星形胶质细胞数灰质多于白质,尾侧多于头侧;组间比较阳性细胞数损伤组明显多于电针组,且损伤范围大,胶质界膜明显.原位杂交结果与免疫组化结果类似.电泳结果表明损伤早期电针组GFAP mRNA表达明显低于损伤组.结论:电针治疗可抑制脊髓损伤后星形胶质细胞反应性增生,防止胶质瘢痕形成,创造有利于神经再生的微环境.     

补肾活血方对阿尔茨海默病模型大鼠脑内胶质细胞的影响

全楷体目的:观察补肾活血中药黄芪三仙汤对AD大鼠脑内海马区胶质细胞的影响,探讨补肾活血中药治疗阿尔茨海默病(AD)的中枢免疫调节机制.方法:大鼠随机分组,于大鼠右侧Meynert核注入β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)制成AD模型,4周后观察各组脑组织中神经胶质细胞超微结构变化.结果:模型组海马区可见神经胶质细胞增生,神经细胞变性.在变性神经细胞的周边和血管周围小胶质细胞增生活跃,脂褐素较多.治疗组和假手术组可见神经胶质细胞,数量较模型组明显减少.正常对照组可见少量脂褐素,其余超微结构基本正常.结论:黄芪三仙汤能明显抑制CNS的免疫炎性反应,抑制神经原变性、坏死,从而达到治疗AD的作用.     

葛根素对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨葛根素对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠缺血/再灌注模型,并给予葛根素药物干预,观察各组心肌细胞凋亡的情况,以了解细胞凋亡及葛根素在再灌注损伤中所起的作用。结果:假手术组及单纯缺血组凋亡细胞无明显增多,而缺血/再灌注组凋亡细胞明显增多(P<0.01);在再灌注前给予葛根素治疗可减少因再灌注引起的细胞凋亡(P<0.05)。结论:缺血/再灌注后可见心肌细胞凋亡发生,再灌注可加速细胞凋亡的发生;葛根素可抑制心肌细胞凋亡。     

葛根素对大鼠脑出血后脑水肿、C3和C9的影响

目的:探讨葛根素对大鼠脑出血后脑水肿、C3和C9的影响.方法:采用立体定向自体血注入尾壳核法制备脑出血大鼠模型.将大鼠随机分为假手术组、脑出血组、生理盐水组、葛根素组,于术后12 h、24 h、3 d和7 d进行神经功能评分,处死后取脑组织观察脑含水量的变化,脑切片行HE染色观察组织病理学改变,免疫组织化学方法测定补体C3和C9.结果:与脑出血和生理盐水组比较,葛根素组大鼠神经功能改善,脑水肿明显减轻(P＜0.01),病理损伤减轻,补体C3的表达显著减少(P＜0.05).结论:葛根素可能通过降低脑出血后脑内补体的表达,减轻脑水肿,以保护大鼠脑组织.     

川芎嗪黄芪复方注射液对大鼠急性期脑出血不同时段作用的实验研究

目的:探讨川芎嗪黄芪复方注射液对大鼠急性期脑出血的影响及应用时机.方法:实验采用立体定位仪大鼠尾状核胶原酶注射法造模.分假手术组、模型组、6、12、24、36小时治疗组,观察大鼠神经功能障碍程度,检测各组脑出血大鼠血肿体积、水通道蛋白(AQP4)灰度的变化.结果:与模型组相比,川芎嗪黄芪复方注射液12、24、36小时治疗组脑出血大鼠神经功能障碍程度明显减轻,其中以12小时治疗组减轻最明显;而6小时治疗组有加重大鼠神经功能障碍程度可能.12、24、36小时治疗组急性脑出血大鼠血肿体积明显减小,尤以12小时治疗组效果最佳,而6小时治疗组有扩大血肿体积,继发出血的可能.12、24、36小时治疗组急性脑出血大鼠AQP4表达明显降低,尤以12小时治疗组降低最明显,而6小时治疗组有提高AQP4表达的可能.结论:过早应用川芎嗪黄芪复方注射液(6小时)治疗急性期脑出血大鼠有继发出血、扩大血肿的可能.川芎嗪黄芪复方注射液治疗急性期脑出血大鼠的最佳时机在脑出血后12小时.川芎嗪黄芪复方注射液在一定时间窗(12小时或以后)对急性期脑出血大鼠有稳定血脑屏障,降低脑水肿程度及颅内压,使血肿变小的作用.川芎嗪黄芪复方注射液改善血脑屏障破坏的作用可能是通过抑制AQP4表达来实现的.     

电针对血管性痴呆模型大鼠海马神经胶质细胞及微血管的影响

目的 :观察电针对实验性血管性痴呆 (VD)大鼠海马神经胶质细胞和毛细血管的影响。方法 :实验用 4 血管阻断模型 ,用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力 ,并用电镜观察鼠脑海马神经胶质细胞和毛细血管的超微结构变化。结果 :模型组海马神经组织超微结构的形态损害明显 ,胶质细胞变性、水肿 ,毛细血管内皮细胞受损。电针能明显减轻或抑制缺血的大鼠海马神经胶质细胞及毛细血管的损害。结论 :电针明显改善痴呆大鼠的学习记忆能力 ,与其对脑组织神经元、神经胶质细胞及微血管的全脑保护作用密切相关     

电针对实验性脊髓损伤大鼠胶质纤维酸性蛋白影响的实验研究

目的:探讨电针对实验性脊髓损伤大鼠胶质纤维酸性蛋白的影响。方法:48只成年SD大鼠,雌雄各半,随机分为正常对照组、模型对照组、甲基强的松龙治疗组和电针治疗组。采用改良的Allen’s法建立SCI模型。应用免疫组织化学方法观察电针治疗对脊髓损伤段灰质中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。结果:模型对照组术后7d,损伤段脊髓中GFAP阳性细胞表达显著增多;电针治疗组GFAP阳性细胞数明显少于模型组(P<0.05)。结论:电针治疗可通过抑制损伤部位GFAP的表达,减少星形胶质细胞增生,从而有利于损伤后的神经再生。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠血清炎性因子的影响

目的:观察蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠脑组织病理形态及血清炎性因子的影响,探讨其防治脑出血的作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组、蛭龙活血通瘀组、盐酸法舒地尔组,每组10只。用大鼠脑立体定位仪将大鼠自体尾部血注入基底节区制备脑出血大鼠模型,药物干预3 d后,取大鼠脑组织行HE染色,在光学显微镜下观察血肿周围脑组织病理改变;经心脏采血,用ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)及白细胞介素6(IL-6)浓度水平。结果:①与假手术组比较,脑出血模型组血肿周围脑组织呈明显水肿,炎性细胞浸润及胶质细胞增生;与脑出血模型组比较,蛭龙活血通瘀组和盐酸法舒地尔组大鼠脑组织水肿程度明显减轻,病理形态得到明显改善;②与假手术组比较,脑出血模型组大鼠血清TNF-α、IL-1及IL-6浓度水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与脑出血模型组比较,蛭龙活血通瘀组、盐酸法舒地尔组大鼠血清TNF-α、IL-1及IL-6浓度水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);蛭龙活血通瘀组和盐酸法舒地尔组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:蛭龙活血通瘀胶囊能有效减轻脑出血后脑水肿,该作用可能与降低血清炎性因子水平有关。     

参麦注射液对脑出血后大鼠神经细胞保护作用的实验研究

目的:研究参麦注射液对脑出血大鼠神经细胞的保护作用及其机制。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、参麦组,模型组和参麦组组内分1 d3、d、5 d7、d四个时间点,立体定位仪定位注射胶原酶Ⅶ造大鼠脑出血模型,观察大鼠脑出血后神经病理体征、血肿周围区、术侧海马区和皮层区病理形态结构的改变,以及参麦注射液处理后对其的影响;将培养8 d后生长良好的神经细胞随机分为正常组、模型组、参麦组,正常组不做任何处理,其余两组均分别在缺氧后30min1、h、3 h6、h和12 h五个时间点造神经细胞缺氧损伤模型,参麦组在缺氧前24 h及缺氧后加入参麦注射液(1∶50),相差显微镜下观察神经细胞形态学的变化,并测定DNA裂解率。结果:与模型组比较,参麦组大鼠神经病理体征减轻明显,血肿吸收更完全,术侧海马区、皮层区和血肿周围区细胞受损较轻,细胞结构完整,参麦组培养神经细胞在缺氧损伤后形态学改变明显比模型组轻,DNA裂解率少,二者有显著性差异(P<0.05)。结论:参麦注射液可能通过促进血肿吸收、抑制细胞凋亡而对脑出血后大鼠神经细胞发挥保护作用。     

电针对缺血再灌注大鼠脑内小胶质细胞活化的影响

目的:探讨电针治疗脑缺血性疾病的机理.方法:阻塞大鼠右侧大脑中动脉30 min再灌流6～24 h,制备大脑中动脉缺血再灌注模型.将80只Wistar实验大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、正常对照组.电针取穴"水沟"和"百会",以疏密波刺激.切片组织采用免疫组化SABC法以蓖麻凝集素标记小胶质细胞.结果:正常组和假手术组小胶质细胞未见显色.各模型组在缺血灶边缘可见大量小胶质细胞活化,数量增加.经电针治疗后,各治疗组的小胶质细胞数量较模型组减低.结论:电针治疗可减少小胶质细胞活化,尤其是在小胶质细胞活化的高峰,从而对神经元发挥保护作用.     

复方水蛭口服液对大鼠实验性脑血肿的影响

目的 :观察复方水蛭口服液对脑出血大鼠脑血肿的影响。方法 :在大鼠脑实质部位注入自体血液 ,造成脑血肿模型 ,病理切片可见 ,在血肿周围出现组织坏死 ,炎症细胞浸润。于造模第 2天灌胃给予复方水蛭口服液每日 1 2 g/kg、6 0 g/kg(相当生药量 )。 7天后处死 ,取脑切片观察病变部位 ,采用组织学数格求积法比较模型组与给药组血肿面积和炎性面积的差异。结果 :复方水蛭口服液各组均能明显扩张脑部血管 ,增加脑血流量 ,明显减少了脑出血大鼠的血肿和炎症面积 ,促进血肿的吸收。大剂量组的血肿腔内形成血管树 ,各组的血肿面积和炎症面积较模型组均有显著差异。结论 :复方水蛭口服液能明显扩张脑部血管 ,促进脑出血大鼠脑血肿的吸收 ,促进脑组织的修复 ,有利于脑出血患者的治疗。     

活血化瘀法治疗急性高血压性脑出血64例

目的:研究活血化瘀法治疗急性高血压性脑出血的临床疗效。方法:对照组常规内科治疗,治疗组加用活血化瘀药物(丹参注射液)。结果:治疗组在治疗后第3d、14d对比发现血肿吸收量明显大于对照组,而且神经功能恢复较对照组改善明显。提示:活血化瘀药物可改善脑出血血肿周围缺血半暗带,有利于血肿的吸收及促进神经功能恢复。     

葛根素对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠神经元凋亡的影响

目的:研究葛根素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经元凋亡的影响及其神经保护机制。方法:96只新生7d龄SD大鼠随机分为3组:葛根素治疗组、缺氧缺血性脑损伤组(HIBD组)和假手术对照组。按经典方法制作新生大鼠H IBD模型,并于脑缺氧缺血后6h,24h,48h,72h留取脑组织标本。观察各组新生大鼠海马CA 1区神经细胞形态学变化及葛根素对HIBD后海马CA1区神经细胞凋亡的影响。结果:HIBD后6h海马CA1区凋亡细胞增多,24h达高峰,48h阳性细胞开始减少,凋亡细胞多位于病变较重的皮质的边缘内带和海马CA 1区;而假手术对照组仅偶见到阳性细胞;葛根素治疗组细胞凋亡的时程与HIBD组一致,分布极其相似,但海马CA1区的凋亡细胞数在24h后各时间点较HIBD组均明显减少。结论:葛根素可通过抑制神经细胞凋亡而对HIBD后的脑组织起到保护作用。     

血栓通注射液在高血压脑出血术后应用的临床观察

目的:观察开颅血肿清除术后应用血栓通注射液治疗高血压脑出血的疗效。方法:选择高血压脑出血患者112例,随机分为2组,均行开颅血肿清除术,对照组手术后常规治疗56例,治疗组在对照组基础上术后第3d配合注射用血栓通治疗56例。结果:两组患者治疗总有效率分别90%和75.0%,治疗组显效率明显高于对照组(P0.05)。结论:脑出血开颅血肿清除术后应用注射液血栓通是安全有效的;其作用机制与改善微循环、减轻脑水肿和中枢神经保护与修复有关。     

毛冬青甲素对高血压性大鼠脑内血肿及脑微血管超微结构的影响

肉眼及光镜下观察了毛冬青甲素对肾血管性高血压大鼠脑内血肿的影响。电镜下观察了毛冬青甲素对肾血管性高血压大鼠脑血肿病理模型术后脑微血管超微结构的影响。发现毛冬青甲素治疗组血肿吸收快，毛细血管增生活跃，组织修复好。治疗后其脑微血管内皮光滑，内皮细胞核及线粒体肿胀减轻，管腔无狭窄，内无血栓形成及血小板聚集。对照组治疗后毛细血管增生较少，组织修复不理想。其脑微血管内皮毛糙，微绒毛增多，内皮细胞核及线粒体肿胀，管腔明显受压变窄，并有微血栓形成及血小板聚集，管用水肿，提示毛冬青甲素治疗高血压性脑出血是可行的、有效的，并说明毛冬青甲素确有疏通血管，改善微循环，增加脑血流量，促进血肿吸收及脑组织修复的作用。